空氣微生物監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程[專業(yè)教學(xué)]

1、空氣微生物監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的：正確進(jìn)行空氣微生物監(jiān)測一、采集指征：1. 醫(yī)院感染監(jiān)控重點科室，每月常規(guī)監(jiān)測。2. 發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行時。2、 采集方法：平板暴露法1. 采樣時間：在消毒處理后、操作前進(jìn)行采樣。2. 采樣高度：與地面垂直高度80150cm。3. 布點方法：室內(nèi)面積30，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3點，內(nèi)、外點布點部位距墻壁1m處；室內(nèi)面積30，設(shè)4角及中央5點，4角的布點部位距墻壁1m處。4. 采樣方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平板（直徑9cm）放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度為距地面1.5m采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5min，蓋好立即送檢。3、 平板暴露法結(jié)果計算公式：將平板置

2、37溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h計數(shù)菌落。 空氣細(xì)菌菌落總數(shù)（CFU/m3）=50000N/(AT)式中 A為平板面積（cm2)； T為平板暴露時間（min）； N為平均菌落數(shù)（cfu）。4、 結(jié)果判定類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)10cfu/m3(或0.2cfu/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)200cfu/m3(或4cfu/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)500cfu/m3(或10cfu/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；5、 注意事項1. 采樣前，關(guān)好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min進(jìn)行采樣。2. 平皿應(yīng)新鮮

3、透亮，在保質(zhì)期內(nèi)。2.目的：正確進(jìn)行物體表面微生物監(jiān)測1、 采集指征1. 醫(yī)院感染監(jiān)控重點科室，每月常規(guī)監(jiān)測。2. 發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行時。2、 采集方法1. 采樣時間：在消毒處理后4h內(nèi)進(jìn)行采樣。2. 采樣面積：被采表面100cm2,取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。3. 采樣方法：用5cm5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，采樣面積100cm2，連續(xù)采樣4個，用浸有蒸餾水的無菌棉拭子1支（最好用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子），在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入5ml含蒸餾水的試管中（最好是含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試

4、管內(nèi)），立即送檢。4. 門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。3、 結(jié)果計算方式：物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)檢查：0.5ml采樣液放入滅菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作傾注培養(yǎng)，放35溫箱內(nèi)培養(yǎng)2448h計數(shù)菌落。（cfu/cm2）=平板菌落數(shù)采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積（cm2）4、 結(jié)果判斷：、類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)10cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門菌為消毒合格。3.目的：正確進(jìn)行醫(yī)務(wù)人員手的微生物監(jiān)

5、測一、采集指征1. 醫(yī)院感染監(jiān)控重點科室，每月常規(guī)監(jiān)測。2. 發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行時。2、 采集方法1. 采樣時間：在接觸患者或從事醫(yī)療活動前進(jìn)行采樣。2. 采樣面積及方法：被檢人五指并攏，將浸有蒸餾水的無菌棉拭子1支在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有5ml采樣液的試管內(nèi)送檢。采樣面積按平方厘米cm2計算。3、 結(jié)果計算方式：0.5ml采樣液放入滅菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作傾注培養(yǎng)，放35溫箱內(nèi)培養(yǎng)2448h計數(shù)菌落。手細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)采樣液稀釋倍數(shù)3024、 結(jié)果判斷、類區(qū)域工

6、作人員：細(xì)菌總數(shù)5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)10cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的醫(yī)護人員手不得檢出沙門菌為消毒合格。4.目的：正確進(jìn)行醫(yī)療用品的微生物監(jiān)測一、采集指征1. 醫(yī)院感染監(jiān)控重點科室，每月常規(guī)監(jiān)測。2. 發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行時。二、采集方法1. 采樣時間：在消毒或滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。2. 采樣量及采樣方法：可用破壞性方法取樣的醫(yī)療用品，如輸液（血）器、注射器和注射針等均參照中華人民共和國藥典2000年版二部附錄中“無菌檢查法”

7、規(guī)定執(zhí)行。對不能用破壞性方法取樣的特殊醫(yī)療用品，可用浸有無菌9g/L氯化鈉溶液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面100 cm2，取全部表面；被采表面100 cm2，取100 cm2。3. 無菌檢查：參照中華人民共和國藥典2000年版二部附錄中“無菌檢查法”。三、結(jié)果計算方式：1ml采樣液放入滅菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作傾注培養(yǎng)，放37溫箱內(nèi)培養(yǎng)2448 h計數(shù)菌落。物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/ cm2）= 平板上菌落數(shù)采樣液稀釋倍數(shù)采樣面積（cm2）4、 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：進(jìn)入人體無菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫(yī)療用品必須無菌。接觸粘膜的醫(yī)療用品細(xì)菌菌落總數(shù)20 cfu/g或100 cm2, 不得檢出病原微生物。5.目的：正確進(jìn)行血液和腹膜透析所用的水及透析液的微生物學(xué)監(jiān)測一、采集指征1. 醫(yī)院感染監(jiān)控重點科室，每月常規(guī)監(jiān)測。2. 發(fā)生醫(yī)院感染暴發(fā)流行時。2、 采集方法采樣點：透析用水出口（ 自來水經(jīng)過過濾、軟化、活性炭吸附、去離子逆滲透等步驟處理后的出口）、透析液出口 （即透析結(jié)束時透析液離開透析器的出口）。如疑有透析液污染或嚴(yán)重感染病例，應(yīng)增加采樣點，如原水口、透析液配比機、反滲水出口、貯水罐出口、透析液進(jìn)口等。三、培養(yǎng)結(jié)果計算方式：取透析用水或透析液1ml放入滅菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作傾注培養(yǎng)，放37溫箱內(nèi)培養(yǎng)2