動(dòng)物血液學(xué)檢查

1、1,1,血液學(xué)檢查,dxx,.,2,2,血液學(xué)（hematology）是以血液和造血組織為主要研究對(duì)象的醫(yī)學(xué)科學(xué)的一個(gè)獨(dú)立分支學(xué)科。 祖國(guó)醫(yī)學(xué)早在黃帝內(nèi)經(jīng)一書中有關(guān)于血液的記載，國(guó)外在公元前34世紀(jì)時(shí)已有人提到血液的名字。然而對(duì)于血液組成和功能的認(rèn)識(shí)長(zhǎng)期以來(lái)是唯心的和不完全的，有些概念是從點(diǎn)滴的現(xiàn)象和不完整的觀察中推測(cè)出來(lái)的。系統(tǒng)地和科學(xué)地研究血液開始于顯微鏡的問(wèn)世以后，用顯微鏡觀察血液中的紅細(xì)胞（1673年）、白細(xì)胞（1749年）和血小板（1842年），稱為血液中的有形部分，是血液學(xué)家研究的重點(diǎn)對(duì)象。血液中的體液部分，亦稱為血液無(wú)形成分（或血漿），許多年來(lái)由生物化學(xué)家和免疫學(xué)家所研究。,.,

2、3,3,目錄,1，血液的采取方法 2，抗凝血的制備 3，血漿、血清的制備 4，血紅蛋白的測(cè)定 5，紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù) 6，紅細(xì)胞壓積(PCV)測(cè)定方法 7，紅細(xì)胞沉降率(ESR)的測(cè)定 8，白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù) 9，白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 10，血小板(PC)計(jì)數(shù),.,4,4,血液的組成,血液是由液態(tài)的血漿和懸浮在血漿中的血細(xì)胞組成。 全血45血細(xì)胞55血漿 血細(xì)胞：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板； 血漿：（9092）水（810）溶質(zhì),.,5,5,溶質(zhì)：血漿蛋白（白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原）、無(wú)機(jī)鹽、非蛋白氮、不含氮的有機(jī)物。 血液流出血管后，如不經(jīng)抗凝處理，很快會(huì)凝集成血塊，隨著血塊逐漸縮緊還會(huì)析出的淡黃

3、色清亮液體，叫血清。 血清中沒(méi)有纖維蛋白 血清中缺乏血漿中參與凝血反應(yīng)的一些成分。出血時(shí)，輸血清沒(méi)用，要輸血紅蛋白。 血清是不含纖維蛋白原的血漿。,血液的組成,.,6,6,血液的理化特性,1. 顏色：紅色 動(dòng)脈血：鮮紅 （血紅蛋白含氧多） 靜脈血：暗紅 （血紅蛋白含氧少） 2.密度：畜禽全血的相對(duì)密度1.040-1.075 3.氣味： 血液中由于存在揮發(fā)性脂肪酸而有腥味，又因其中含有氯化鈉而稍帶咸味。,.,7,7,血液樣品采集,1.保定 2.消毒 3.采樣,血液的采取方法,.,8,8,血液的采取方法,1，采血部位和方法 犬采血部位在前肢的前臂頭靜脈和后肢的隱靜脈。采血時(shí)，犬側(cè)臥保定，局部剪毛消

4、毒，助手或犬主人用手握住采血部的向心端，或用橡皮條扎緊，使靜脈怒張，用消毒干燥的注射器采血。 2，注意事項(xiàng) （1）血樣必須在進(jìn)行任何藥物治療前采集，如果已經(jīng)進(jìn)行了治療，須在采血記錄上予以注明，否則動(dòng)物接受了某些藥物治療，一些檢查方法就無(wú)法得到準(zhǔn)確的治療。 （2）保定過(guò)程中盡量減少動(dòng)物應(yīng)激，否則會(huì)造成樣品結(jié)果誤差。,.,9,9,抗凝血的制備,1，抗凝劑及其應(yīng)用 血液檢查多用抗凝血液，為防止血液凝固，通常在血液中加一下抗凝劑，而制備抗凝血。,.,10,10,2，抗凝血的制備方法 根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目選擇特定的抗凝劑。采集血樣后，將其裝入含有適當(dāng)抗凝劑的容器內(nèi)，輕輕搖動(dòng)，使其與抗凝劑混合。 3，注意事項(xiàng) （

5、1）血液采集后要盡快與適當(dāng)?shù)目鼓齽┗旌?，搖動(dòng)手法應(yīng)輕柔，劇烈晃動(dòng)可造成溶血，紅細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)釋放入血漿，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。 （2）采血后1h內(nèi)不進(jìn)行檢測(cè)的樣品應(yīng)冷藏，檢測(cè)前應(yīng)先取出恢復(fù)到室溫，并輕輕搖勻。,抗凝血的制備,.,11,11,血漿、血清的制備,血液流出血管后，如不經(jīng)抗凝處理，很快會(huì)凝集成血塊，隨著血塊逐漸縮緊還會(huì)析出的淡黃色清亮液體，叫血清。 血清與血漿的區(qū)別： （1）血清中不含纖維蛋白原，血漿中含有纖維蛋白原。 （2）血清中缺乏凝血因子，血漿中含有凝血因子。,.,12,12,.,13,13,血漿的制備方法： （1）采集血液樣品，置于含有適量抗凝劑的試管內(nèi)。 （2）緩慢搖動(dòng)

6、試管，使抗凝劑與血液混勻。 （3）2000-3000 r/min離心5-10min，上層即為血漿。 （4）小心地用毛細(xì)移液管將血漿層移出至空白試管內(nèi)。 （5）標(biāo)記日期、采集時(shí)間、動(dòng)物名稱和病歷號(hào)，冷藏或冷凍保存。,血漿、血清的制備,.,14,14,血清的制備方法： （1）采集血液樣品，并將其放置于不含有抗凝劑的試管內(nèi)。 （2）室溫下或25-37溫水中斜置，自然凝集20-30min 。 （3）密封試管，2000-3000 r/min離心10min，析出淡黃澄清的液體即為血清。 （4）用毛細(xì)移液管將血清移出至空白試管內(nèi)。 （5）標(biāo)記日期、采集時(shí)間、動(dòng)物名稱和病歷號(hào)，冷藏或冷凍保存。,血漿、血清的制

7、備,.,15,15,.,16,16,血紅蛋白的測(cè)定,血紅蛋白測(cè)定通常是指測(cè)定血液中各種血紅蛋白的總濃度，用 g/L 表示。 1，器材與試劑 （1）沙利氏血紅蛋白計(jì)。在測(cè)定管上有兩種刻度，一側(cè)表示血紅蛋白在每百毫升血液內(nèi)的克數(shù)，另一側(cè)表示百分?jǐn)?shù)。國(guó)產(chǎn)的血紅蛋白計(jì)是以每百毫升血液含14.5g血紅蛋白做為100%而設(shè)制。 （2）0.1mol/L 鹽酸,.,17,17,2，原理 血紅蛋白本身的色澤常隨結(jié)合的氧量而改變，不便于比色。在定量鹽酸中加入少量稀鹽酸，Hb被酸化后變?yōu)楦哞FHb，呈現(xiàn)穩(wěn)定的褐色，與標(biāo)準(zhǔn)柱相比，求出每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)或百分?jǐn)?shù)。,血紅蛋白的測(cè)定,.,18,18,3，操作步驟

8、（1）向沙利氏比色管內(nèi)加入1%鹽酸5滴。 （2）用沙利氏吸血管吸血至20l刻度處，用干脫脂棉擦去吸管外沾附的血液。 （3）徐徐吹入沙利氏比色管內(nèi)，不要產(chǎn)生氣泡，再反復(fù)吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏吸血管中的血液。輕輕振動(dòng)比色管，使血液與鹽酸充分混合。 （4）靜置10min，待血液變成褐色后，緩緩滴加蒸餾水，每加1滴，用細(xì)玻璃棒攪動(dòng)一次，直到顏色與標(biāo)準(zhǔn)色柱完全相同為止。液柱凹面所指的刻度數(shù)，即為每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)。,血紅蛋白的測(cè)定,.,19,19,.,20,20,4，正常值 犬的血紅蛋白為120-194 g/L ，貓為110 g/L 5，臨床意義 （1）血紅蛋白增多：主要是見(jiàn)于脫水而血液濃縮

9、的各種疾病，如腹瀉、嘔吐、大出汗、多尿等，也見(jiàn)于腸便秘及某些中毒??；血也見(jiàn)于真性紅細(xì)胞增多癥，是一種原因不明的骨髓增生性疾病，目前認(rèn)為是多能干細(xì)胞受累所致。其特點(diǎn)是紅細(xì)胞持續(xù)性顯著增多，全身總血量也增加，見(jiàn)于馬、牛、犬和貓。 （2）血紅蛋白量減少：主要見(jiàn)于各種貧血。,血紅蛋白的測(cè)定,.,21,21,紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù),紅細(xì)胞計(jì)數(shù)即測(cè)量單位體積（L）血液中紅細(xì)胞的數(shù)量，用1012個(gè)/ L表示。,顯微鏡計(jì)數(shù)法,紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板,.,22,22,1，器材與試劑 （1）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。 （2）血蓋片。 （3）沙利氏吸管、小試管、試管架等。 （4）赫姆氏稀釋液、生理鹽水。,紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù),.,23,2

10、3,紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù),.,24,24,.,25,25,.,26,26,.,27,27,.,28,28,2，操作步驟,（1）稀釋血液：用5mL刻度吸管吸取紅細(xì)胞稀釋液4.0ml。 用沙利氏吸管準(zhǔn)確吸取供檢血液至10l 或20l 刻度處，用棉球擦去管尖外部余血，將吸管插入盛有紅細(xì)胞稀釋液的試管底部，輕輕將血放出，并吸取上清液洗吸管3次，使血液與 稀釋液充分混合。 （2）充液：將計(jì)數(shù)板和蓋玻片擦凈，玻棒蘸取1滴混懸液充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)，靜置2-3分鐘，待紅細(xì)胞下沉，開始鏡檢計(jì)數(shù)。 計(jì)數(shù)時(shí)，先用低倍鏡后轉(zhuǎn)高倍鏡，依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中五個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。對(duì)于壓線的紅細(xì)胞，應(yīng)采取數(shù)上不數(shù)

11、下，數(shù)左不數(shù)右的原則，保證計(jì)數(shù)域的一致性，使計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。,.,29,29,充液 計(jì)數(shù)方法,.,30,30,3,計(jì)算,紅細(xì)胞數(shù)（個(gè)/L）= 5個(gè)中方格內(nèi)的RBC數(shù)510106血液稀釋倍數(shù)（400或200） 式中：5 表示5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)折算為1個(gè)大方格紅細(xì)胞數(shù) 10 因一個(gè)大格容積為0.1立方毫米 ，換算為1立方毫米 200 血液稀釋倍數(shù) 106 將1立方毫米換算為1L,.,31,31,4，臨床意義 （1）紅細(xì)胞數(shù)增多： 相對(duì)性紅細(xì)胞增多：多為血液濃縮而引起，常見(jiàn)于腹瀉、嘔吐、大出汗、急性胃炎、腸阻塞、腸變位、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎及發(fā)熱性疾病等。 絕對(duì)性紅細(xì)胞增多：較為少見(jiàn)，多由于紅細(xì)胞

12、增生所致。 （2）紅細(xì)胞數(shù)減少：見(jiàn)于各種類型的貧血，如失血、溶血等。,紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù),.,32,32,5，注意事項(xiàng) （1）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)關(guān)鍵是防凝、防溶，取樣準(zhǔn)確。 （2）稀釋液充入計(jì)數(shù)室的量不可過(guò)多或過(guò)少。 （3）顯微鏡載物臺(tái)應(yīng)保持水平，否則，計(jì)數(shù)室的液體流向一側(cè)而使計(jì)數(shù)不準(zhǔn)。,紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù),.,33,33,紅細(xì)胞壓積(PCV)測(cè)定方法,紅細(xì)胞壓積：壓緊的紅細(xì)胞在全血中所占的容積百分比，稱為紅細(xì)胞比容。,.,34,34,紅細(xì)胞壓積(PCV)測(cè)定方法,操作方法 1，將雙草酸混合液0.5mla（或10%EDTA，2滴）放入小瓶中，將小瓶置于烤箱中烤干。 2，用注射器抽血5ml，注入小瓶

13、中，搖勻，勿使其凝固。 3.用長(zhǎng)針頭吸滿抗凝血,插入溫氏管底部,輕捏膠皮乳頭,自下而上擠入血液至刻度10處。 4.置離心機(jī)中,以3000轉(zhuǎn)/min的速度離心30-45min,取出觀察,記錄紅細(xì)胞層高度,再離45min,如與第一離心的高度一致,此時(shí)紅細(xì)胞柱層所占的刻度數(shù),即為PCV數(shù)值,用%表示。如無(wú)離心機(jī),靜置24小時(shí)后,讀取數(shù)值。,.,35,35,紅細(xì)胞沉降率(ESR)的測(cè)定,1，紅細(xì)胞沉降率是指將抗凝血裝入特制的玻璃管內(nèi)，在一定的時(shí)間內(nèi)觀察紅細(xì)胞下降的毫米數(shù)，采用魏氏法測(cè)定。 2，原理 紅細(xì)胞沉降速度主要與紅細(xì)胞串錢狀的形成、紅細(xì)胞數(shù)目的多少、血漿蛋白的組成有關(guān)。 通常血漿中球蛋白、纖維蛋

14、白原和膽固醇含量增多時(shí)，可加速紅細(xì)胞疊連、沉降。 血漿中白蛋白和卵磷脂含量增多時(shí)，則紅細(xì)胞疊連、沉降減慢。,.,36,36,3，臨床意義 血沉測(cè)定是一種非特異性試驗(yàn)，它只能說(shuō)明體內(nèi)存在有某種病理過(guò)程，不能單獨(dú)用于疾病診斷。 發(fā)現(xiàn)貧血時(shí)，血沉顯著加快。 脫水時(shí)，血沉顯著變慢。,紅細(xì)胞沉降率(ESR)的測(cè)定,.,37,37,白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù),白細(xì)胞計(jì)數(shù)是測(cè)定每升血液中各種白細(xì)胞總數(shù)，以109個(gè)/ L表示。 白細(xì)胞稀釋液：3%（V/V）冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液，混合后加2滴10%結(jié)晶紫或1%美蘭染液，使呈淡紫色，以便與紅細(xì)胞稀釋液相區(qū)別。 原理：一定量的血液用冰醋酸溶液稀釋后，可將紅細(xì)胞破壞，然

15、后在細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)計(jì)數(shù)一定容積的白細(xì)胞，以此推算出每升血液內(nèi)白細(xì)胞數(shù)。,.,38,38,白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)是將血液制成涂片，經(jīng)瑞氏或姬姆薩氏染色后在油鏡下按白細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分類，求出各類型白細(xì)胞比值。,白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),.,39,39,血小板：是從骨髓成熟的巨核細(xì)胞裂解脫落下來(lái)的活細(xì)胞，無(wú)色、無(wú)細(xì)胞核，呈橢圓形、桿形或不規(guī)則形。 常用復(fù)方尿素稀釋液。 原理：尿素能溶解紅細(xì)胞和白細(xì)胞而保存完整形態(tài)的血小板，血液經(jīng)此稀釋后在血細(xì)胞計(jì)數(shù)室內(nèi)直接計(jì)數(shù)，以求每升血液中的血小板數(shù)，以109個(gè)/ L表示。,血小板(PC)計(jì)數(shù),.,40,40,血小板具有重要的保護(hù)機(jī)能，參與血液凝固。血小板計(jì)數(shù)對(duì)于評(píng)價(jià)血

16、液凝固機(jī)制提供一定的依據(jù)。,血小板(PC)計(jì)數(shù),.,41,41,寵物血液生化的意義,1.血糖【正常值】3.9-5.9mmol/L（約60-110mg/dl）?！九R床意義】對(duì)于胰島素，糖皮質(zhì)激素、腎上腺素等分泌不足或過(guò)多有鑒別意義；對(duì)于監(jiān)測(cè)糖尿病的治療效果有一定意 2.葡萄糖耐量【正常值】服糖后60分鐘血糖160mg/dl，（9mmol/L）120分鐘恢復(fù)到空腹水平；各次尿中無(wú)糖?！九R床意義】糖耐量曲線，對(duì)于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢等有診斷和鑒別診斷意義。3.二氧化碳結(jié)合力【正常值】23-31mmol/L?！九R床意義】對(duì)于判斷代謝性或呼吸性酸中毒、堿中毒有一定意義。4.尿素氮（BUN）【正常值】

17、3.2-7mmol/L?！九R床意義】判定腎功能。增高可見(jiàn)于各種原因的腎功能損害；肝功能嚴(yán)重?fù)p害時(shí)減低。,.,42,42,寵物血液生化的意義,5.肌酐 【正常值】88-177mol/L?！九R床意義】對(duì)急、慢性腎炎的診斷和預(yù)后有重要意義。6.肌酸【正常值】230-530mol/L?！九R床意義】肌肉嚴(yán)重?fù)p傷，腎臟重度損害或尿閉時(shí)增高。7.尿酸【正常值】119-238mol/L?！九R床意義】增高：臨床多見(jiàn)于痛風(fēng)、急性及慢性腎炎、白血病、多發(fā)性骨髓瘤等。8.鉀【正常值】3.5-5.3mmol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。,.,43,43,寵物血液生化的意義,9.鈉【正常值】136-145m

18、mol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。10.氯【正常值】100-106mmol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。11.鈣【正常值】2.2-2.7mmol/L?！九R床意義】判定甲狀旁腺機(jī)能，維生素缺乏癥，骨腫瘤，多發(fā)骨髓瘤有意義。12.無(wú)機(jī)磷【正常值】1.0-1.6mmol/L?！九R床意義】判定甲狀旁腺機(jī)能，維生素缺乏癥，骨腫瘤，多發(fā)骨髓瘤有意義。,.,44,44,寵物血液生化的意義,13.鎂【正常值】0.8-1.2mmol/L?！九R床意義】判定腎功能、脫水甲亢、洋地黃中毒等有一定意義。14.血清鐵 【正常值】11-27pmol/L。【臨床意義】鑒別各種貧血有意義。15.氨

19、氮【正常值】6-35mol/L?！九R床意義】判定肝昏迷有價(jià)值。16.總蛋白【正常值】65-85g/L?！九R床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一般情況：對(duì)肝腎損害，多發(fā)性骨髓瘤等有一定診斷、鑒別診斷意義。,.,45,45,寵物血液生化的意義,17.白蛋白【正常值】35-55g/L?！九R床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的一般情況：對(duì)肝腎損害，多發(fā)性骨髓瘤等有一定診斷、鑒別診斷意義。18.血清總膽紅質(zhì)【正常值】1.7-17.1mol/L?！九R床意義】診斷、鑒別診斷黃疸類型有重要意義。19.血清直接膽紅質(zhì)【正常值】0.3-3.4mol/L?！九R床意義】診斷、鑒別診斷黃疸類型有重要意義。20.丙谷轉(zhuǎn)氨酶（ALT

20、）【正常值】20-40?！九R床意義】對(duì)心肌梗塞、肝臟實(shí)質(zhì)病變的診斷及病情變化的觀察有重要意義。,.,46,46,寵物血液生化的意義,21.門谷轉(zhuǎn)氨酶（AST）【正常值】40?！九R床意義】急性心肌梗塞時(shí)升高，肝病及其它臟器炎癥時(shí)也常增高。22.r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶或轉(zhuǎn)酞酶（r-GT）【正常值】6-47/ml?！九R床意義】肝膽系統(tǒng)病變特別是肝癌時(shí)明顯增高。23.肌酸磷酸激酶（CK）【正常值】5.5-75IU/L?！九R床意義】骨胳肌疾病、甲狀腺功能減退、急性心肌梗塞時(shí)顯著升高。24.乳酸脫氫酶（LDH）【正常值】150-450?！九R床意義】心、肝、肺等組織急性損害時(shí)明顯增高。,.,47,47,25.堿性磷酸酶（AKP）【正常值】1.5-4.0?！九R