微生物學(xué)：第六章微生物的生長(zhǎng)與控制

1、1 微生物學(xué)微生物學(xué) 袁袁 美美 妗妗 有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 研究方向：桿狀病毒基因工程研究方向：桿狀病毒基因工程 辦公室地址：曾憲梓北樓辦公室地址：曾憲梓北樓513 Email： 第六章第六章 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制 2 概概 述述 一個(gè)微生物細(xì)胞一個(gè)微生物細(xì)胞 合適的外界條件，吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝合適的外界條件，吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝 個(gè)體的生長(zhǎng)個(gè)體的生長(zhǎng) 原生質(zhì)的總量（重量、體積、大?。┎粩嘣黾釉|(zhì)的總量（重量、體積、大小）不斷增加 繁殖繁殖 引起個(gè)體數(shù)目的增加引起個(gè)體數(shù)目的增加 群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)群體內(nèi)各

2、個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng) 群體的生長(zhǎng)群體的生長(zhǎng) 如果合成代謝的速度超過(guò)了分解代謝如果合成代謝的速度超過(guò)了分解代謝 如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)，則達(dá)如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)，則達(dá) 到一定程度后到一定程度后 3 生長(zhǎng)生長(zhǎng)：生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地增加，導(dǎo)致生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地增加，導(dǎo)致個(gè)體原生質(zhì)的總個(gè)體原生質(zhì)的總 量量（重量、體積、大?。ㄖ亓俊Ⅲw積、大?。┎粩嘣黾硬粩嘣黾拥纳飳W(xué)過(guò)程。的生物學(xué)過(guò)程。 繁殖繁殖：生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段，通過(guò)特定方式產(chǎn)生新的生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段，通過(guò)特定方式產(chǎn)生新的 生命個(gè)體，即引起生命生命個(gè)體，即引起生命個(gè)體數(shù)量增加個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過(guò)程。的生物學(xué)過(guò)程。

3、在高等生物里這兩個(gè)過(guò)程可以明顯分開，但在低等特別是在高等生物里這兩個(gè)過(guò)程可以明顯分開，但在低等特別是 在單細(xì)胞的生物里，由于細(xì)胞小，這兩個(gè)過(guò)程是緊密聯(lián)系在單細(xì)胞的生物里，由于細(xì)胞小，這兩個(gè)過(guò)程是緊密聯(lián)系 又很難劃分的過(guò)程。又很難劃分的過(guò)程。 4 群體生長(zhǎng)群體生長(zhǎng) = = 個(gè)體生長(zhǎng)個(gè)體生長(zhǎng) + + 個(gè)體繁殖個(gè)體繁殖 在微生物學(xué)中提到的在微生物學(xué)中提到的“生長(zhǎng)生長(zhǎng)”，一般均指，一般均指群體生長(zhǎng)群體生長(zhǎng)， 這一點(diǎn)與研究大生物時(shí)有所不同。這一點(diǎn)與研究大生物時(shí)有所不同。 個(gè)體生長(zhǎng)個(gè)體生長(zhǎng) 個(gè)體繁殖個(gè)體繁殖 群體生長(zhǎng)群體生長(zhǎng) 5 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)

4、的主要因素 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 微生物的微生物的 新陳代謝新陳代謝 有害微生物的控制有害微生物的控制 6 第一節(jié)第一節(jié) 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 微生物的生長(zhǎng)繁殖：?jiǎn)挝粫r(shí)間里微生物數(shù)量微生物的生長(zhǎng)繁殖：?jiǎn)挝粫r(shí)間里微生物數(shù)量 或生物量（或生物量（Biomass）的變化，通過(guò)此類指）的變化，通過(guò)此類指 標(biāo)可以反映微生物的生長(zhǎng)狀況，如：標(biāo)可以反映微生物的生長(zhǎng)狀況，如： 評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響； 評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制（或殺死

5、）評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制（或殺死） 作用的效果；作用的效果； 客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律。客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律。 研究意義（見(jiàn)研究意義（見(jiàn)P151） 7 依據(jù)依據(jù)：生長(zhǎng)：生長(zhǎng) 原生質(zhì)含量的增加原生質(zhì)含量的增加 方法方法：直接法、間接法：直接法、間接法 一、測(cè)生長(zhǎng)量一、測(cè)生長(zhǎng)量 （一）直接法（一）直接法 1. 測(cè)體積法（粗放）：測(cè)體積法（粗放）： 用刻度離心管將微生物離心，測(cè)沉降量用刻度離心管將微生物離心，測(cè)沉降量 8 2. 稱重量法（精確）稱重量法（精確） 微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞 （單細(xì)胞、多細(xì)胞及絲狀菌體）（單細(xì)胞、多細(xì)胞及絲狀菌體） 固固/液體培養(yǎng)液體培養(yǎng) 收集濕菌體收集濕

6、菌體 烘干至恒重烘干至恒重 干細(xì)胞干細(xì)胞 （10%-20%） 離心、過(guò)濾、洗滌離心、過(guò)濾、洗滌 105 高溫烘干高溫烘干 低溫真空干燥低溫真空干燥 紅外線快速烘干紅外線快速烘干 細(xì)胞干重細(xì)胞干重 細(xì)胞濕重細(xì)胞濕重 1 E.coli2.810-13g 9 （二）間接法（二）間接法 用分光光度計(jì)（用分光光度計(jì)（450-650波段）波段） 測(cè)定微生物懸浮液的光密度測(cè)定微生物懸浮液的光密度 (optical density, 即O.D.) ，以，以 O.D.值表示菌量值表示菌量 1. 比濁法比濁法 10 （二）間接法（二）間接法 2. 生理指標(biāo)法生理指標(biāo)法 微生物的很多生理指標(biāo)與微生物生長(zhǎng)量相平行。微

7、生物的很多生理指標(biāo)與微生物生長(zhǎng)量相平行。 應(yīng)用于生長(zhǎng)量測(cè)定的常用指標(biāo)有：應(yīng)用于生長(zhǎng)量測(cè)定的常用指標(biāo)有： 測(cè)含氮量法：測(cè)含氮量法： 細(xì)菌含氮量為干重的細(xì)菌含氮量為干重的12.5%，酵母為，酵母為 7.5%，霉菌為，霉菌為6.5% 測(cè)碳、磷、測(cè)碳、磷、DNA、RNA、ATP、DAP、幾丁質(zhì)、幾丁質(zhì)、N- 乙酰胞壁酸含量乙酰胞壁酸含量 測(cè)產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、耗氧、黏度和產(chǎn)熱等指標(biāo)測(cè)產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、耗氧、黏度和產(chǎn)熱等指標(biāo) 11 依據(jù)依據(jù)：繁殖：繁殖 個(gè)體數(shù)目的增加個(gè)體數(shù)目的增加 方法方法：直接法、間接法：直接法、間接法 二、計(jì)繁殖數(shù)二、計(jì)繁殖數(shù) 用途：用途：通常用來(lái)測(cè)定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生通常用來(lái)測(cè)定細(xì)菌、酵

8、母菌等單細(xì)胞微生 物的生長(zhǎng)情況或樣品中所含微生物個(gè)體的數(shù)量物的生長(zhǎng)情況或樣品中所含微生物個(gè)體的數(shù)量 （細(xì)菌、酵母菌、以及放線菌或酵母菌的孢子）（細(xì)菌、酵母菌、以及放線菌或酵母菌的孢子） 12 二、計(jì)繁殖數(shù)二、計(jì)繁殖數(shù) （一）直接法（一）直接法 用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下直用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下直 接觀察并計(jì)數(shù)接觀察并計(jì)數(shù) 13 傳統(tǒng)直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn)傳統(tǒng)直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：快速簡(jiǎn)便，還可知細(xì)胞的形態(tài)特征快速簡(jiǎn)便，還可知細(xì)胞的形態(tài)特征 缺點(diǎn)：缺點(diǎn)： 不能區(qū)分死菌與活菌不能區(qū)分死菌與活菌 不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù) 個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難

9、以觀察個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察 需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度 改改 進(jìn)進(jìn) 用特定的染色計(jì)數(shù)用特定的染色計(jì)數(shù) 加入甲醛等物質(zhì)破壞運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性加入甲醛等物質(zhì)破壞運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性 用細(xì)菌計(jì)數(shù)板比血球計(jì)數(shù)板更合適用細(xì)菌計(jì)數(shù)板比血球計(jì)數(shù)板更合適 當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以用濾膜法計(jì)數(shù)當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以用濾膜法計(jì)數(shù) （一）直接法（一）直接法 14 濾膜法濾膜法 當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲 用水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器。然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng)用水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器。然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng) 處理使膜透明，再在

10、顯微鏡下計(jì)算膜上處理使膜透明，再在顯微鏡下計(jì)算膜上(或一定面積中或一定面積中)的的 細(xì)菌數(shù)。細(xì)菌數(shù)。 15 二、計(jì)繁殖數(shù)二、計(jì)繁殖數(shù) （二）間接法（二）間接法活菌計(jì)數(shù)法活菌計(jì)數(shù)法 原理：原理：每一個(gè)單個(gè)的微生物在合適的培養(yǎng)基和生長(zhǎng)每一個(gè)單個(gè)的微生物在合適的培養(yǎng)基和生長(zhǎng) 條件下，可以在平板上（內(nèi)）通過(guò)生長(zhǎng)形成菌落。條件下，可以在平板上（內(nèi)）通過(guò)生長(zhǎng)形成菌落。 通過(guò)計(jì)算菌落的數(shù)量，可以計(jì)算樣品中的活菌數(shù)。通過(guò)計(jì)算菌落的數(shù)量，可以計(jì)算樣品中的活菌數(shù)。 1. 平板菌落計(jì)數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法 澆注平板法澆注平板法（pour plate） 涂布平板法涂布平板法（spread plate） 16 17 采用培

11、養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求：采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求： 操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以 得到正確的結(jié)果，注意事項(xiàng)得到正確的結(jié)果，注意事項(xiàng)： 樣品充分混勻樣品充分混勻 每支移液管及涂棒只能接每支移液管及涂棒只能接 觸一個(gè)稀釋度的菌液觸一個(gè)稀釋度的菌液 同一稀釋度要三個(gè)以上重同一稀釋度要三個(gè)以上重 復(fù)復(fù),取平均值取平均值 每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合 適，一個(gè)適，一個(gè)9cm直徑平板上一直徑平板上一 般以般以50500個(gè)為宜，便于準(zhǔn)個(gè)為宜，便于準(zhǔn) 確計(jì)數(shù)確計(jì)數(shù) 18 在合適的稀釋度下，每在合適的稀釋度下，每 一個(gè)活細(xì)胞在固體平板一個(gè)活細(xì)胞在固體平板 上（內(nèi)）行成一個(gè)單菌上（內(nèi)）

12、行成一個(gè)單菌 落。實(shí)際上一個(gè)單菌落落。實(shí)際上一個(gè)單菌落 可能是多個(gè)細(xì)胞一起形可能是多個(gè)細(xì)胞一起形 成，所以在科研中一般成，所以在科研中一般 用菌落形成單位（用菌落形成單位（colony forming units， CFU） 來(lái)表示（來(lái)表示（CFU/ml），而），而 不是直接表示為細(xì)胞數(shù)不是直接表示為細(xì)胞數(shù) （cell/ml）。）。 19 當(dāng)樣品的菌數(shù)很低時(shí)，怎么辦？當(dāng)樣品的菌數(shù)很低時(shí)，怎么辦？ 膜過(guò)濾培養(yǎng)法膜過(guò)濾培養(yǎng)法 當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲 用水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基用水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器

13、，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基 上進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。上進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 20 21 （二）間接法（活菌計(jì)數(shù)）（二）間接法（活菌計(jì)數(shù)） 2. 厭氧菌的菌落計(jì)數(shù)厭氧菌的菌落計(jì)數(shù) 滾管培養(yǎng)法（見(jiàn)教材滾管培養(yǎng)法（見(jiàn)教材P167 ） 22 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)的主要因素 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 微生物的微生物的 新陳代謝新陳代謝 有害微生物的控制有害微生物的控制 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制 23 第二節(jié)第二節(jié) 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)

14、和同步生長(zhǎng)一、微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng) 個(gè)體微小個(gè)體微小 肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬(wàn)個(gè)肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬(wàn)個(gè) 單個(gè)的微生物組成的群體單個(gè)的微生物組成的群體 只能用電子顯微鏡觀察只能用電子顯微鏡觀察 細(xì)胞的超薄切片，研究細(xì)胞的超薄切片，研究 單個(gè)細(xì)胞的單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞學(xué)變化細(xì)胞學(xué)變化 利用利用同步培養(yǎng)技術(shù)同步培養(yǎng)技術(shù)（synchronous culture），使某一群體），使某一群體 中的所有個(gè)體細(xì)胞盡可能都處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期中的所有個(gè)體細(xì)胞盡可能都處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期 中，然后通過(guò)分析此群體在各個(gè)階段的生物化學(xué)特性變化，中，然后通過(guò)分析此群體在各個(gè)階段的生物

15、化學(xué)特性變化， 間接了解單個(gè)細(xì)胞的間接了解單個(gè)細(xì)胞的生物化學(xué)變化生物化學(xué)變化 很難研究其生物化學(xué)很難研究其生物化學(xué) 變化和細(xì)胞學(xué)變化變化和細(xì)胞學(xué)變化 24 同步生長(zhǎng)：同步生長(zhǎng)：通過(guò)同步培養(yǎng)的手段而使細(xì)胞群通過(guò)同步培養(yǎng)的手段而使細(xì)胞群 體中各個(gè)體處于分裂步調(diào)一致的生長(zhǎng)狀態(tài)體中各個(gè)體處于分裂步調(diào)一致的生長(zhǎng)狀態(tài) 獲得微生物同步生長(zhǎng)的方法獲得微生物同步生長(zhǎng)的方法 環(huán)境條件誘導(dǎo)法環(huán)境條件誘導(dǎo)法 氯霉素抑制蛋白質(zhì)合成氯霉素抑制蛋白質(zhì)合成 細(xì)菌芽孢誘導(dǎo)發(fā)芽細(xì)菌芽孢誘導(dǎo)發(fā)芽 藻類細(xì)胞的光照、黑暗控制藻類細(xì)胞的光照、黑暗控制 EDTA或離子載體處理酵母菌或離子載體處理酵母菌 短期熱休克法（原生動(dòng)物）短期熱休克法

16、（原生動(dòng)物） 機(jī)械篩選法機(jī)械篩選法利用處于同一生長(zhǎng)階段細(xì)胞的體積、利用處于同一生長(zhǎng)階段細(xì)胞的體積、 大小的相同性大小的相同性 過(guò)濾法、密度梯度離心法、過(guò)濾法、密度梯度離心法、膜洗脫法（膜洗脫法（Helmstetter- Cummings） 25 二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線二、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線 個(gè)體微小個(gè)體微小 肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬(wàn)個(gè)肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬(wàn)個(gè) 單個(gè)的微生物組成的群體。單個(gè)的微生物組成的群體。 微生物接種是群體接種，接種后的生長(zhǎng)是微生物群體繁殖生長(zhǎng)。微生物接種是群體接種，接種后的生長(zhǎng)是微生物群體繁殖生長(zhǎng)。 對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的了解是對(duì)其進(jìn)行研

17、究與利用的基礎(chǔ)對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的了解是對(duì)其進(jìn)行研究與利用的基礎(chǔ) 26 生長(zhǎng)曲線生長(zhǎng)曲線（growth curve）：定量描述液體定量描述液體 培養(yǎng)基中微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線培養(yǎng)基中微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線 分批式培養(yǎng)（分批式培養(yǎng)（batch culture） 是微生物培養(yǎng)的一種方式。指的是在三角瓶或是微生物培養(yǎng)的一種方式。指的是在三角瓶或 者發(fā)酵罐等培養(yǎng)容器中，放入一定量的培養(yǎng)基，者發(fā)酵罐等培養(yǎng)容器中，放入一定量的培養(yǎng)基， 接種微生物細(xì)胞，置于合適的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。接種微生物細(xì)胞，置于合適的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。 在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中，既沒(méi)有新鮮培養(yǎng)基的加入，在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中，既沒(méi)有新鮮培養(yǎng)

18、基的加入， 也沒(méi)用內(nèi)部培養(yǎng)物的移出，最后也沒(méi)用內(nèi)部培養(yǎng)物的移出，最后一次性收獲細(xì)一次性收獲細(xì) 胞或者代謝產(chǎn)物胞或者代謝產(chǎn)物的培養(yǎng)過(guò)程。的培養(yǎng)過(guò)程。 27 單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線 將少量純種單細(xì)胞微生物接種到定量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分將少量純種單細(xì)胞微生物接種到定量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行分 批式培養(yǎng)，在適宜的溫度、通氣等條件下，該群體就會(huì)由小批式培養(yǎng)，在適宜的溫度、通氣等條件下，該群體就會(huì)由小 到大，發(fā)生有規(guī)律的增長(zhǎng)。定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量，以培養(yǎng)到大，發(fā)生有規(guī)律的增長(zhǎng)。定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量，以培養(yǎng) 時(shí)間為橫座標(biāo)，以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值為縱座標(biāo)作圖，得到的時(shí)間為橫座標(biāo)，以細(xì)胞數(shù)

19、目的對(duì)數(shù)值為縱座標(biāo)作圖，得到的 一條由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期一條由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期4 4個(gè)階段組成的曲個(gè)階段組成的曲 線。線。 28 單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線 將少量純種單細(xì)胞微生物接種到定量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行將少量純種單細(xì)胞微生物接種到定量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行 分批式培養(yǎng)，在適宜的溫度、通氣等條件下，該群體就會(huì)分批式培養(yǎng)，在適宜的溫度、通氣等條件下，該群體就會(huì) 由小到大，發(fā)生有規(guī)律的增長(zhǎng)。定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量，由小到大，發(fā)生有規(guī)律的增長(zhǎng)。定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量， 以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo)，以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值為縱座標(biāo)作圖以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo)，以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)

20、數(shù)值為縱座標(biāo)作圖 ，得到的一條由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期，得到的一條由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期4 4個(gè)階段個(gè)階段 組成的曲線。組成的曲線。 接種、培養(yǎng)、定時(shí)取樣接種、培養(yǎng)、定時(shí)取樣 稀稀 釋、釋、 涂涂 平平 板、板、 計(jì)計(jì) 數(shù)、數(shù)、 作作 圖圖 計(jì)數(shù)方法：計(jì)總菌數(shù)或活菌數(shù)計(jì)數(shù)方法：計(jì)總菌數(shù)或活菌數(shù) 29 由于采用活菌計(jì)數(shù)比較麻煩，由于采用活菌計(jì)數(shù)比較麻煩， 并要求嚴(yán)格進(jìn)行操作，否則不易并要求嚴(yán)格進(jìn)行操作，否則不易 得到準(zhǔn)確的結(jié)果，重復(fù)性也差，得到準(zhǔn)確的結(jié)果，重復(fù)性也差， 因此在實(shí)際工作中多采用分光光因此在實(shí)際工作中多采用分光光 度計(jì)測(cè)定度計(jì)測(cè)定OD值的方法繪制細(xì)菌值的方法繪制細(xì)菌

21、 的生長(zhǎng)曲線。的生長(zhǎng)曲線。 30 根據(jù)微生物的生長(zhǎng)速率常數(shù)根據(jù)微生物的生長(zhǎng)速率常數(shù)（每小時(shí)的分裂代數(shù)，（每小時(shí)的分裂代數(shù)， 表示為表示為R） 的不同，一般把典型的生長(zhǎng)曲線分為的不同，一般把典型的生長(zhǎng)曲線分為: : 延滯期延滯期（遲緩期），（遲緩期），指數(shù)期指數(shù)期（對(duì)數(shù)期），（對(duì)數(shù)期），穩(wěn)定期穩(wěn)定期和和 衰亡期衰亡期等等4 4個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期 延滯期延滯期 指數(shù)期指數(shù)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期 31 延滯期延滯期指數(shù)期指數(shù)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期 （一）（一）延滯期延滯期（lag phase） 將少量單細(xì)胞微生物接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時(shí)將少量單細(xì)胞微生物接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時(shí)

22、 間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長(zhǎng)速度接近于零。間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長(zhǎng)速度接近于零。 也稱也稱停滯期停滯期、調(diào)整期調(diào)整期或或適應(yīng)期適應(yīng)期。 32 （一）（一）延滯期延滯期（lag phase） 延滯期的特點(diǎn)延滯期的特點(diǎn)：分裂遲緩、代謝活躍分裂遲緩、代謝活躍 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R為零為零 細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)，許多桿菌長(zhǎng)成絲狀，例如巨大芽孢桿菌，在延許多桿菌長(zhǎng)成絲狀，例如巨大芽孢桿菌，在延 滯期末，細(xì)胞的平均長(zhǎng)度比剛接種時(shí)長(zhǎng)滯期末，細(xì)胞的平均長(zhǎng)度比剛接種時(shí)長(zhǎng)6倍。一般來(lái)說(shuō)處于延滯期的細(xì)菌細(xì)倍。一般來(lái)說(shuō)處于延滯期的細(xì)菌細(xì) 胞體積最大胞體積最大 細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)

23、RNA尤其是尤其是rRNA含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性 合成代謝活躍，核糖體、合成代謝活躍，核糖體、 酶類和酶類和ATP的合成加速，易產(chǎn)生誘的合成加速，易產(chǎn)生誘 導(dǎo)酶導(dǎo)酶 對(duì)外界不良條件反應(yīng)敏感對(duì)外界不良條件反應(yīng)敏感 細(xì)胞處于活躍生長(zhǎng)中，只是分裂遲緩細(xì)胞處于活躍生長(zhǎng)中，只是分裂遲緩 在此階段后期，少數(shù)細(xì)胞開始分裂，曲線略有上升。在此階段后期，少數(shù)細(xì)胞開始分裂，曲線略有上升。 33 （一）（一）延滯期延滯期（lag phase） 遲緩期出現(xiàn)的原因遲緩期出現(xiàn)的原因 微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫時(shí)缺乏分解或催化有關(guān)微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫時(shí)缺乏分解或催化有關(guān) 底物的酶，或是缺

24、乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘底物的酶，或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘 導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。 34 （一）（一）延滯期延滯期（lag phase） 影響延滯期長(zhǎng)短的主要因素及在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短延影響延滯期長(zhǎng)短的主要因素及在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短延 滯期的常用手段滯期的常用手段 （1）菌種（生長(zhǎng)快的菌比生長(zhǎng)緩慢的菌延滯期短）菌種（生長(zhǎng)快的菌比生長(zhǎng)緩慢的菌延滯期短） 通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使延滯期縮短通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使延滯期縮短 （2）接種齡（接種物或種子的生長(zhǎng)年齡）接種齡（接種物或種子的生長(zhǎng)年齡） 采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)

25、期的菌作為接種菌可縮短延滯期。采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌作為接種菌可縮短延滯期。 （3）接種量）接種量 適當(dāng)提高接種量可縮短延滯期（種子適當(dāng)提高接種量可縮短延滯期（種子/發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基=1:10）。）。 （4）培養(yǎng)基成分）培養(yǎng)基成分 營(yíng)養(yǎng)豐富，與種子培養(yǎng)條件接近的培養(yǎng)基可縮短延滯期。營(yíng)養(yǎng)豐富，與種子培養(yǎng)條件接近的培養(yǎng)基可縮短延滯期。 （5）種子損傷度）種子損傷度 35 延滯期延滯期指數(shù)期指數(shù)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期 （二）（二）指數(shù)期指數(shù)期（exponential phase） 指在生長(zhǎng)曲線中，緊接著延滯期的一段細(xì)胞數(shù)以幾何級(jí)指在生長(zhǎng)曲線中，緊接著延滯期的一段細(xì)胞數(shù)以幾何級(jí) 數(shù)增長(zhǎng)的時(shí)期。也稱

26、數(shù)增長(zhǎng)的時(shí)期。也稱對(duì)數(shù)期對(duì)數(shù)期（log phase）。）。 36 （二）（二）指數(shù)期指數(shù)期（exponential phase） 指數(shù)期的特點(diǎn)指數(shù)期的特點(diǎn)：代謝旺盛，生長(zhǎng)迅速、生理特性一致代謝旺盛，生長(zhǎng)迅速、生理特性一致 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大，因而最大，因而代時(shí)代時(shí)（ generation time，G，又稱，又稱 世代時(shí)間或增代時(shí)間）或世代時(shí)間或增代時(shí)間）或倍增時(shí)間倍增時(shí)間（doubling time）最短）最短 細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng)，故菌體各部分的成分十分均勻細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng)，故菌體各部分的成分十分均勻 酶系活躍，代謝旺盛酶系活躍，代謝旺盛 指數(shù)期尤其是指數(shù)中期的微生物因具有整個(gè)群體

27、的生理特指數(shù)期尤其是指數(shù)中期的微生物因具有整個(gè)群體的生理特 性較一致、細(xì)胞各成分平衡增長(zhǎng)和生長(zhǎng)速率恒定等優(yōu)點(diǎn)，性較一致、細(xì)胞各成分平衡增長(zhǎng)和生長(zhǎng)速率恒定等優(yōu)點(diǎn)， 所以是代謝、生理和酶學(xué)等研究的良好材料，是增殖噬菌所以是代謝、生理和酶學(xué)等研究的良好材料，是增殖噬菌 體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。 指細(xì)胞每分裂一次所需的時(shí)間指細(xì)胞每分裂一次所需的時(shí)間 原生質(zhì)增加一倍所需的時(shí)間原生質(zhì)增加一倍所需的時(shí)間 37 （二）（二）指數(shù)期指數(shù)期（exponential phase） 影響指數(shù)期代時(shí)長(zhǎng)短的主要因素影響指數(shù)期代時(shí)長(zhǎng)短的主要因素 （1）

28、菌種）菌種 納米細(xì)菌（納米細(xì)菌（nanobacteria) 三天才分裂一次；三天才分裂一次； 九十年代初期從地下數(shù)公九十年代初期從地下數(shù)公 里發(fā)現(xiàn)的超微型細(xì)菌，用里發(fā)現(xiàn)的超微型細(xì)菌，用 代謝產(chǎn)生的代謝產(chǎn)生的CO2作指標(biāo)，計(jì)作指標(biāo)，計(jì) 算出這些超微菌的代謝速算出這些超微菌的代謝速 率僅為地上正常細(xì)菌的率僅為地上正常細(xì)菌的10- 15，有人認(rèn)為它們需要 ，有人認(rèn)為它們需要100 年才能分裂一次。年才能分裂一次。 38 （二）（二）指數(shù)期指數(shù)期（exponential phase） 影響指數(shù)期代時(shí)長(zhǎng)短的主要因素影響指數(shù)期代時(shí)長(zhǎng)短的主要因素 （1）菌種）菌種 （2）營(yíng)養(yǎng)成分（營(yíng)養(yǎng)豐富，代時(shí)短）營(yíng)養(yǎng)成分

29、（營(yíng)養(yǎng)豐富，代時(shí)短） （3）營(yíng)養(yǎng)物濃度）營(yíng)養(yǎng)物濃度 （4）培養(yǎng)溫度（在一定范圍內(nèi)，生長(zhǎng)速率與培養(yǎng)溫度成）培養(yǎng)溫度（在一定范圍內(nèi)，生長(zhǎng)速率與培養(yǎng)溫度成 正比，教材正比，教材P155表表6-1） 凡是處于較低濃度范圍內(nèi)可影凡是處于較低濃度范圍內(nèi)可影 響生長(zhǎng)速率和菌體產(chǎn)量的某營(yíng)響生長(zhǎng)速率和菌體產(chǎn)量的某營(yíng) 養(yǎng)物，就稱為養(yǎng)物，就稱為生長(zhǎng)限制因子生長(zhǎng)限制因子 （growth-limted factor）。）。 39 延滯期延滯期 指數(shù)期指數(shù)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期 （三）（三）穩(wěn)定期穩(wěn)定期（stationary phase） 穩(wěn)定期又稱恒定期或最高生產(chǎn)期穩(wěn)定期又稱恒定期或最高生產(chǎn)期 40 （三）（三）穩(wěn)

30、定期穩(wěn)定期（ stationary phase ） 穩(wěn)定期的特點(diǎn)穩(wěn)定期的特點(diǎn) 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R等于零，即處于新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡等于零，即處于新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡 的細(xì)胞數(shù)相等，或正生長(zhǎng)與負(fù)生長(zhǎng)相等的動(dòng)態(tài)平衡之中的細(xì)胞數(shù)相等，或正生長(zhǎng)與負(fù)生長(zhǎng)相等的動(dòng)態(tài)平衡之中 菌體產(chǎn)量達(dá)到最高菌體產(chǎn)量達(dá)到最高 細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段：積聚糖原等細(xì)胞內(nèi)含物；形細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段：積聚糖原等細(xì)胞內(nèi)含物；形 成芽孢；合成成芽孢；合成次生代謝物次生代謝物。 是收獲菌體或與菌體生長(zhǎng)相平行的代謝產(chǎn)物的最佳時(shí)期是收獲菌體或與菌體生長(zhǎng)相平行的代謝產(chǎn)物的最佳時(shí)期 是對(duì)維生素、堿基、氨基酸等物質(zhì)進(jìn)行生物測(cè)定的最佳時(shí)

31、期是對(duì)維生素、堿基、氨基酸等物質(zhì)進(jìn)行生物測(cè)定的最佳時(shí)期 研究穩(wěn)定期到來(lái)的原因促進(jìn)連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝的創(chuàng)建研究穩(wěn)定期到來(lái)的原因促進(jìn)連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝的創(chuàng)建 因在穩(wěn)定期形成，因在穩(wěn)定期形成， 又稱穩(wěn)定期產(chǎn)物又稱穩(wěn)定期產(chǎn)物 41 穩(wěn)定期到來(lái)的原因穩(wěn)定期到來(lái)的原因 （1）營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)因子的耗盡）營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)因子的耗盡 （2）營(yíng)養(yǎng)物比例失調(diào)）營(yíng)養(yǎng)物比例失調(diào) （3）有害代謝產(chǎn)物（酸、醇、毒素、）有害代謝產(chǎn)物（酸、醇、毒素、H2O2等）的積累等）的積累 （4）pH、氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件越來(lái)越不適宜、氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件越來(lái)越不適宜 （三）（三）穩(wěn)定期穩(wěn)定期（ stationa

32、ry phase ） 生產(chǎn)上延長(zhǎng)穩(wěn)定期的措施生產(chǎn)上延長(zhǎng)穩(wěn)定期的措施 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料） 取走代謝產(chǎn)物取走代謝產(chǎn)物 調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH、溫度、對(duì)好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩、溫度、對(duì)好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩 42 延滯期延滯期 指數(shù)期指數(shù)期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期 （四）（四）衰亡期衰亡期（decline phase） 整個(gè)群體生長(zhǎng)速率整個(gè)群體生長(zhǎng)速率R為負(fù)值的時(shí)期為負(fù)值的時(shí)期 43 （四）（四）衰亡期衰亡期（decline phase ） 衰亡期的特點(diǎn)衰亡期的特點(diǎn) 個(gè)體死亡速度超過(guò)新生速度，個(gè)體死亡速度超過(guò)新生速度，R為負(fù)值為負(fù)值 細(xì)胞形態(tài)發(fā)生多形化細(xì)胞形態(tài)發(fā)生多形化 細(xì)胞開始

33、自溶細(xì)胞開始自溶 進(jìn)一步合成或釋放次生代謝物進(jìn)一步合成或釋放次生代謝物 芽孢桿菌釋放芽孢芽孢桿菌釋放芽孢 產(chǎn)生衰亡期的主要原因產(chǎn)生衰亡期的主要原因 環(huán)境對(duì)繼續(xù)生長(zhǎng)越來(lái)越不利，分解代謝明顯超過(guò)合成代謝環(huán)境對(duì)繼續(xù)生長(zhǎng)越來(lái)越不利，分解代謝明顯超過(guò)合成代謝 44 三、微生物的連續(xù)培養(yǎng)三、微生物的連續(xù)培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)（continuous culture）：又稱）：又稱開放培養(yǎng)開放培養(yǎng)(open culture)，是指向培養(yǎng)容器中，是指向培養(yǎng)容器中連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液，使微生，使微生 物的液體培養(yǎng)物長(zhǎng)期維持穩(wěn)定、高速生長(zhǎng)狀態(tài)的一種溢流培物的液體培養(yǎng)物長(zhǎng)期維持穩(wěn)定、高速生長(zhǎng)狀態(tài)的一種

34、溢流培 養(yǎng)技術(shù)。養(yǎng)技術(shù)。 典型生長(zhǎng)曲線反映的是典型生長(zhǎng)曲線反映的是分批式培養(yǎng)分批式培養(yǎng)（batch culture）或）或密閉密閉 培養(yǎng)培養(yǎng)（closed culture）時(shí)的生長(zhǎng)規(guī)律：）時(shí)的生長(zhǎng)規(guī)律： 培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換，導(dǎo)致培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換，導(dǎo)致穩(wěn)定期穩(wěn)定期和和衰亡衰亡 期期的出現(xiàn)的出現(xiàn) 我們的期望：長(zhǎng)時(shí)間保持微生物的我們的期望：長(zhǎng)時(shí)間保持微生物的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)以提高經(jīng)濟(jì)以提高經(jīng)濟(jì) 效益效益 45 三、微生物的連續(xù)培養(yǎng)三、微生物的連續(xù)培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng)的原則連續(xù)培養(yǎng)的原則 當(dāng)微生物以分批式培養(yǎng)到當(dāng)微生物以分批式培養(yǎng)到指數(shù)期后期指數(shù)期后期時(shí)時(shí)： 以一定

35、速度連續(xù)流入新鮮培養(yǎng)基和通入無(wú)菌空氣（厭氧菌以一定速度連續(xù)流入新鮮培養(yǎng)基和通入無(wú)菌空氣（厭氧菌 例外）例外） 采用溢流的方式，以同樣的流速不斷流出培養(yǎng)物采用溢流的方式，以同樣的流速不斷流出培養(yǎng)物 目的是使容器內(nèi)的培養(yǎng)物達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，其中的微生物可目的是使容器內(nèi)的培養(yǎng)物達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，其中的微生物可 長(zhǎng)期保持在指數(shù)期的平衡生長(zhǎng)狀態(tài)和恒定的生長(zhǎng)速率上，形長(zhǎng)期保持在指數(shù)期的平衡生長(zhǎng)狀態(tài)和恒定的生長(zhǎng)速率上，形 成成連續(xù)生長(zhǎng)（連續(xù)生長(zhǎng)（continuous growth） 46 三、微生物的連續(xù)培養(yǎng)三、微生物的連續(xù)培養(yǎng) （一）連續(xù)培養(yǎng)的類型（一）連續(xù)培養(yǎng)的類型 按控制按控制 方式分方式分 恒濁連續(xù)培養(yǎng)：內(nèi)

36、控制（控制菌體密度）恒濁連續(xù)培養(yǎng)：內(nèi)控制（控制菌體密度） 恒化連續(xù)培養(yǎng)：外控制（控制培養(yǎng)液流速及恒化連續(xù)培養(yǎng)：外控制（控制培養(yǎng)液流速及R） 按培養(yǎng)按培養(yǎng) 器串聯(lián)器串聯(lián) 級(jí)數(shù)分級(jí)數(shù)分 單級(jí)連續(xù)培養(yǎng)單級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 多級(jí)連續(xù)培養(yǎng)多級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 47 測(cè)定所培養(yǎng)微生物的光密度值測(cè)定所培養(yǎng)微生物的光密度值 自動(dòng)調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入和培養(yǎng)物流出培養(yǎng)室的流速自動(dòng)調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入和培養(yǎng)物流出培養(yǎng)室的流速 使培養(yǎng)物維持在某一恒定濁度使培養(yǎng)物維持在某一恒定濁度 當(dāng)濁度超過(guò)預(yù)期數(shù)值時(shí)，培養(yǎng)液流速加快，使?jié)岫冉档?；?dāng)濁度超過(guò)預(yù)期數(shù)值時(shí)，培養(yǎng)液流速加快，使?jié)岫冉档停?當(dāng)濁度低于預(yù)期數(shù)值時(shí)，培養(yǎng)液流速減慢，使?jié)岫壬?；?dāng)濁度

37、低于預(yù)期數(shù)值時(shí)，培養(yǎng)液流速減慢，使?jié)岫壬撸?恒濁培養(yǎng)器的工作精度是由光電控制系統(tǒng)的靈敏度來(lái)決定的恒濁培養(yǎng)器的工作精度是由光電控制系統(tǒng)的靈敏度來(lái)決定的 （1）恒濁連續(xù)培養(yǎng)）恒濁連續(xù)培養(yǎng) 48 （1）恒濁連續(xù)培養(yǎng)）恒濁連續(xù)培養(yǎng) 使微生物維持最高的生長(zhǎng)速率使微生物維持最高的生長(zhǎng)速率 生產(chǎn)實(shí)踐上，一般用于為了獲得大量菌體以及與生產(chǎn)實(shí)踐上，一般用于為了獲得大量菌體以及與 菌體生長(zhǎng)平行的某些代謝產(chǎn)物的發(fā)酵工業(yè)菌體生長(zhǎng)平行的某些代謝產(chǎn)物的發(fā)酵工業(yè) 連續(xù)發(fā)酵連續(xù)發(fā)酵 49 （2）恒化連續(xù)培養(yǎng)）恒化連續(xù)培養(yǎng) 使培養(yǎng)液流速保持不變，并使使培養(yǎng)液流速保持不變，并使 微生物始終在低于其最高生長(zhǎng)微生物始終在低于其最高

38、生長(zhǎng) 速率的條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖速率的條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖 50 恒化連續(xù)培養(yǎng)中，通過(guò)控制某一營(yíng)養(yǎng)物的濃度，使其恒化連續(xù)培養(yǎng)中，通過(guò)控制某一營(yíng)養(yǎng)物的濃度，使其 始終成為生長(zhǎng)限制因子，而其他營(yíng)養(yǎng)物均過(guò)量始終成為生長(zhǎng)限制因子，而其他營(yíng)養(yǎng)物均過(guò)量 （2）恒化連續(xù)培養(yǎng)）恒化連續(xù)培養(yǎng) 恒化器中微生物生長(zhǎng)與稀釋率的關(guān)系恒化器中微生物生長(zhǎng)與稀釋率的關(guān)系 微生物的生長(zhǎng)速率取決于限制性因子的濃度，并低于最高生長(zhǎng)速率微生物的生長(zhǎng)速率取決于限制性因子的濃度，并低于最高生長(zhǎng)速率 恒化器中，營(yíng)養(yǎng)物的更新速度以恒化器中，營(yíng)養(yǎng)物的更新速度以 稀釋率（稀釋率（dilution rate, D）表示）表示 D = 流速（流速（ml

39、/h） 培養(yǎng)器容積（培養(yǎng)器容積（ml） 遺傳學(xué)：突變株分離；遺傳學(xué)：突變株分離； 生理學(xué)：不同條件下的代謝變化；生理學(xué)：不同條件下的代謝變化； 生態(tài)學(xué)：模擬自然營(yíng)養(yǎng)條件建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?；生態(tài)學(xué)：模擬自然營(yíng)養(yǎng)條件建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停?多用于科研，尤其是與生長(zhǎng)速率相關(guān)的理論研究多用于科研，尤其是與生長(zhǎng)速率相關(guān)的理論研究 51 單級(jí)連續(xù)培養(yǎng)單級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 多級(jí)連續(xù)培養(yǎng)多級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 微生物的代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生速率微生物的代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生速率 與菌體生長(zhǎng)速率相平行與菌體生長(zhǎng)速率相平行 生產(chǎn)的產(chǎn)物與菌體生長(zhǎng)不平行生產(chǎn)的產(chǎn)物與菌體生長(zhǎng)不平行 詳見(jiàn)詳見(jiàn)P158 （二）連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)（二）連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn) 連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)（詳

40、見(jiàn)連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)（詳見(jiàn)P159） 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：高效節(jié)約，自控，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定：高效節(jié)約，自控，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定 缺點(diǎn)缺點(diǎn)：菌種易退化，易污染，營(yíng)養(yǎng)物利用率低：菌種易退化，易污染，營(yíng)養(yǎng)物利用率低 52 四、微生物的高密度培養(yǎng)四、微生物的高密度培養(yǎng) 自學(xué)自學(xué)P159-160 53 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)的主要因素 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 微生物的微生物的 新陳代謝新陳代謝 有害微生物的控制有害微生物的控制 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制 54 第三節(jié)第三節(jié) 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)的

41、主要因素 影響微生物生長(zhǎng)的外界因素很多，最主要的物影響微生物生長(zhǎng)的外界因素很多，最主要的物 理因素有理因素有3個(gè)：個(gè)：溫度溫度、氧氣氧氣和和pH值。值。 55 一、溫度一、溫度 1. 微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度常數(shù)微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度常數(shù)生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn) 最適生長(zhǎng)溫度最適生長(zhǎng)溫度（optimum temperature） 最高生長(zhǎng)溫度最高生長(zhǎng)溫度（maximum temperature） 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度（minimum temperature） 簡(jiǎn)稱為簡(jiǎn)稱為“最適溫度最適溫度”，指某菌分裂代時(shí)最短或生長(zhǎng)速率，指某菌分裂代時(shí)最短或生長(zhǎng)速率 最高時(shí)的培養(yǎng)溫度最高時(shí)的培養(yǎng)溫度 同一種

42、微生物的最適生長(zhǎng)溫度并非是其一切生理過(guò)程的最適溫度同一種微生物的最適生長(zhǎng)溫度并非是其一切生理過(guò)程的最適溫度 56 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度：在此溫度：在此溫度 下，生長(zhǎng)不會(huì)發(fā)生。細(xì)胞下，生長(zhǎng)不會(huì)發(fā)生。細(xì)胞 膜凝固，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的膜凝固，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的 運(yùn)輸和質(zhì)子動(dòng)力的形成。運(yùn)輸和質(zhì)子動(dòng)力的形成。 最高生長(zhǎng)溫度最高生長(zhǎng)溫度：蛋白質(zhì)變：蛋白質(zhì)變 性，細(xì)胞膜破裂性，細(xì)胞膜破裂 最適生長(zhǎng)溫度最適生長(zhǎng)溫度：酶活性最：酶活性最 大，細(xì)胞生長(zhǎng)速率最高大，細(xì)胞生長(zhǎng)速率最高 57 根據(jù)微生物的最適溫度可將它們劃分為根據(jù)微生物的最適溫度可將它們劃分為4大群：大群： （1）嗜冷菌（）嗜冷菌（psychrophile

43、s） Topt15 永久寒冷的地區(qū)。永久寒冷的地區(qū)。 （2）嗜溫菌（）嗜溫菌（mesophiles） Topt 45 溫血?jiǎng)游?，熱帶與溫帶土壤、水域。溫血?jiǎng)游?，熱帶與溫帶土壤、水域。 （3）嗜熱菌（）嗜熱菌（thermophiles） Topt 45 很熱的環(huán)境中：堆肥。很熱的環(huán)境中：堆肥。 （4）超嗜熱菌（）超嗜熱菌（hyperthermophiles） Topt80 極端熱的環(huán)境：火山口，硫磺熱泉，自燃煤堆極端熱的環(huán)境：火山口，硫磺熱泉，自燃煤堆 2. 微生物生長(zhǎng)的溫度范圍微生物生長(zhǎng)的溫度范圍 58 Growth rate 微生物可生長(zhǎng)溫度范圍的廣泛性（微生物可生長(zhǎng)溫度范圍的廣泛性（P16

44、0，表，表6-4） 59 二、氧氣二、氧氣 好氧菌好氧菌 (aerobes) 微微 生生 物物 與與 氧氧 的的 關(guān)關(guān) 系系 厭氧菌厭氧菌 (anaerobes) 專性好氧菌專性好氧菌（obligate or strict aerobes） 呼吸產(chǎn)能。需氧，必須在較高濃度（呼吸產(chǎn)能。需氧，必須在較高濃度（20.2 kPa） 分子氧的條件下才能生長(zhǎng)分子氧的條件下才能生長(zhǎng) 兼性厭氧菌兼性厭氧菌（facultative anaerobes） 呼吸產(chǎn)能為主，兼營(yíng)發(fā)酵或無(wú)氧呼吸產(chǎn)能。在以呼吸產(chǎn)能為主，兼營(yíng)發(fā)酵或無(wú)氧呼吸產(chǎn)能。在以 有氧條件下的生長(zhǎng)為主也可兼在厭氧條件下生長(zhǎng)有氧條件下的生長(zhǎng)為主也可兼在厭氧

45、條件下生長(zhǎng) 微好氧菌微好氧菌（microaerobes） 呼吸產(chǎn)能。較低的氧分壓呼吸產(chǎn)能。較低的氧分壓 (1.01-3.04 kPa) 下生長(zhǎng)下生長(zhǎng) 耐氧菌耐氧菌（aerotolerant anaerobes） 發(fā)酵產(chǎn)能，不需氧，但氧無(wú)毒害作用發(fā)酵產(chǎn)能，不需氧，但氧無(wú)毒害作用 專性厭氧菌專性厭氧菌（obligate anaerobes） 發(fā)酵、無(wú)氧呼吸或循環(huán)光合磷酸化產(chǎn)能。氧對(duì)其發(fā)酵、無(wú)氧呼吸或循環(huán)光合磷酸化產(chǎn)能。氧對(duì)其 有毒害或者致死效應(yīng)有毒害或者致死效應(yīng) 60 微生物與氧的關(guān)系微生物與氧的關(guān)系 61 二、氧氣二、氧氣 氧對(duì)微生物的毒害機(jī)制氧對(duì)微生物的毒害機(jī)制 J. M. McCord和和I

46、. Fridovich的超氧化物歧化酶的超氧化物歧化酶 （SOD）學(xué)說(shuō)：）學(xué)說(shuō)： 嚴(yán)格厭氧菌無(wú)嚴(yán)格厭氧菌無(wú)SOD活力，一般也無(wú)過(guò)氧化氫酶活力活力，一般也無(wú)過(guò)氧化氫酶活力 所有具細(xì)胞色素系統(tǒng)的好氧菌都有所有具細(xì)胞色素系統(tǒng)的好氧菌都有SOD和過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化氫酶 耐氧性厭氧菌不含細(xì)胞色素系統(tǒng)，具有耐氧性厭氧菌不含細(xì)胞色素系統(tǒng)，具有SOD活力無(wú)過(guò)活力無(wú)過(guò) 氧化氫酶活力氧化氫酶活力 SOD的功能是保護(hù)好氧菌免受超氧化物陰離子自由基的功能是保護(hù)好氧菌免受超氧化物陰離子自由基 的毒害，缺乏的毒害，缺乏SOD的微生物只能進(jìn)行專性厭氧生活。的微生物只能進(jìn)行專性厭氧生活。 62 二、氧氣二、氧氣 氧對(duì)微生物的

47、毒害機(jī)制氧對(duì)微生物的毒害機(jī)制 氧在生物體內(nèi)可由酶促方式或非酶促方式形成超氧陰離子自氧在生物體內(nèi)可由酶促方式或非酶促方式形成超氧陰離子自 由基（由基（O2-）。）。O2-是活性氧的形式之一，帶負(fù)電，既有分子性是活性氧的形式之一，帶負(fù)電，既有分子性 質(zhì)，又有離子性質(zhì)，性質(zhì)極不穩(wěn)定，化學(xué)反應(yīng)力極強(qiáng)，在細(xì)質(zhì)，又有離子性質(zhì)，性質(zhì)極不穩(wěn)定，化學(xué)反應(yīng)力極強(qiáng)，在細(xì) 胞內(nèi)可破壞各種生物大分子和膜結(jié)構(gòu)，還可形成其他活性氧胞內(nèi)可破壞各種生物大分子和膜結(jié)構(gòu)，還可形成其他活性氧 化物，對(duì)生物體造成毒害?；?，對(duì)生物體造成毒害。 專性厭氧微生物缺乏超氧化物歧化酶專性厭氧微生物缺乏超氧化物歧化酶SOD和過(guò)氧化氫酶，所和過(guò)氧

48、化氫酶，所 以不能使以不能使O2-歧化成歧化成H2O2，因而細(xì)胞會(huì)受到，因而細(xì)胞會(huì)受到O2-毒害。毒害。 O2- + 2H+ SOD H2O2 + O2 過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶 過(guò)氧化物酶過(guò)氧化物酶 NADH2 NAD+ H2O+1/2O2 2 H2O （好氧及耐氧菌）（好氧及耐氧菌） （好氧菌）（好氧菌） （耐氧菌）（耐氧菌） 63 三、三、pH 某一個(gè)微生物的生長(zhǎng)某一個(gè)微生物的生長(zhǎng)pH存在存在“三基點(diǎn)三基點(diǎn)”（P164） 微生物作為一個(gè)整體，生長(zhǎng)的微生物作為一個(gè)整體，生長(zhǎng)的pH范圍極廣范圍極廣 大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)pH都在都在5 9之間之間 只有少數(shù)生物能在低于只有少數(shù)生物能

49、在低于2或高于或高于10的的pH中生長(zhǎng)中生長(zhǎng) 64 三、三、pH 嗜酸性嗜酸性 （pH 0 5.5） 嗜中性嗜中性 （pH 5.5 8.0） 嗜堿性嗜堿性 （pH 8.0） 65 三、三、pH pH對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響 同一種微生物在不同生長(zhǎng)階段和不同的生理、生化過(guò)程同一種微生物在不同生長(zhǎng)階段和不同的生理、生化過(guò)程 中，具有不同的最適中，具有不同的最適pH。如黑曲霉：。如黑曲霉：pH=2.02.5，利，利 于合成檸檬酸；于合成檸檬酸；pH=2.56.5 ，以菌體生長(zhǎng)為主；，以菌體生長(zhǎng)為主；pH=7 左右，大量合成草酸左右，大量合成草酸 微生物外環(huán)境的微生物外環(huán)境的pH變化較大，

50、但細(xì)胞內(nèi)變化較大，但細(xì)胞內(nèi)pH相對(duì)穩(wěn)定，相對(duì)穩(wěn)定， 接近中性，有利用保護(hù)生物大分子以及細(xì)胞器的功能接近中性，有利用保護(hù)生物大分子以及細(xì)胞器的功能 pH影響培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的離子化程度，從而影響微影響培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的離子化程度，從而影響微 生物對(duì)其的吸收生物對(duì)其的吸收 pH影響代謝反應(yīng)中各種酶的活性影響代謝反應(yīng)中各種酶的活性 pH影響環(huán)境中有害物質(zhì)對(duì)微生物的毒性影響環(huán)境中有害物質(zhì)對(duì)微生物的毒性 66 三、三、pH 微生物的生命活動(dòng)會(huì)改變外界環(huán)境的微生物的生命活動(dòng)會(huì)改變外界環(huán)境的pH pH的變化與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系：的變化與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系： 碳氮比高（如真菌培

51、養(yǎng)基）：碳氮比高（如真菌培養(yǎng)基）：pH下降下降 碳氮比低（如細(xì)菌培養(yǎng)基）：碳氮比低（如細(xì)菌培養(yǎng)基）：pH上升上升 微生物培養(yǎng)和發(fā)酵生產(chǎn)中調(diào)節(jié)微生物培養(yǎng)和發(fā)酵生產(chǎn)中調(diào)節(jié)pH的措施的措施 “治標(biāo)治標(biāo)”：用酸性溶液或堿性溶液調(diào)節(jié)：用酸性溶液或堿性溶液調(diào)節(jié) “治本治本”：添加碳源：添加碳源/氮源，調(diào)節(jié)改變通氣量氮源，調(diào)節(jié)改變通氣量 67 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)的主要因素 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 微生物的微生物的 新陳代謝新陳代謝 有害微生物的控制有害微生物的控制 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制

52、68 第四節(jié)第四節(jié) 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 良好的微生物培養(yǎng)裝置的基本條件良好的微生物培養(yǎng)裝置的基本條件 按照微生物的生長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行科學(xué)的設(shè)計(jì)按照微生物的生長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行科學(xué)的設(shè)計(jì) 能在提供豐富而均勻的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，保證微生能在提供豐富而均勻的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，保證微生 物獲得適宜的溫度和良好的通氣條件（厭氧菌例外）物獲得適宜的溫度和良好的通氣條件（厭氧菌例外） 為微生物提供一個(gè)適宜的物理化學(xué)條件為微生物提供一個(gè)適宜的物理化學(xué)條件 嚴(yán)防雜菌的污染嚴(yán)防雜菌的污染 目的：目的：保證微生物大量生長(zhǎng)繁殖以產(chǎn)生菌體和有益代謝產(chǎn)物保證微生物大量生長(zhǎng)繁殖以產(chǎn)生菌體和有益代謝產(chǎn)物 69 一、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

53、法一、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)法 （一）固體培養(yǎng)（一）固體培養(yǎng) 1、好氧菌的固體培養(yǎng)、好氧菌的固體培養(yǎng) 試管斜面，培養(yǎng)皿瓊脂平板，克氏扁瓶，茄子瓶試管斜面，培養(yǎng)皿瓊脂平板，克氏扁瓶，茄子瓶 70 （一）固體培養(yǎng)（一）固體培養(yǎng) 2、厭氧菌的固體培養(yǎng)、厭氧菌的固體培養(yǎng) 厭氧菌培養(yǎng)除需要厭氧菌培養(yǎng)除需要特殊的培養(yǎng)裝置或器皿特殊的培養(yǎng)裝置或器皿外，首先外，首先 應(yīng)配置應(yīng)配置特殊培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中得加合適的，培養(yǎng)基中得加合適的還原劑還原劑 （1）高層瓊脂柱）高層瓊脂柱 （4）厭氧罐）厭氧罐 （2）厭氧培養(yǎng)皿）厭氧培養(yǎng)皿 （5）厭氧手套箱）厭氧手套箱 （3）亨蓋特滾管技術(shù)）亨蓋特滾管技術(shù) 71 Brewer 皿

54、皿 Spray皿皿 厭氧培養(yǎng)皿厭氧培養(yǎng)皿 特制皿蓋特制皿蓋 特制皿底特制皿底 72 亨蓋特滾管技術(shù)亨蓋特滾管技術(shù) 用途：用途：用于研究嚴(yán)格厭氧菌的技術(shù)用于研究嚴(yán)格厭氧菌的技術(shù) 和裝置和裝置 特點(diǎn)：特點(diǎn)：集制備高純氮、以氮驅(qū)氧和集制備高純氮、以氮驅(qū)氧和 全過(guò)程實(shí)現(xiàn)無(wú)氧操作、無(wú)氧全過(guò)程實(shí)現(xiàn)無(wú)氧操作、無(wú)氧 培養(yǎng)、無(wú)氧檢測(cè)于一體培養(yǎng)、無(wú)氧檢測(cè)于一體 用于用于Hungate 滾管技術(shù)中滾管技術(shù)中 的厭氧試管剖面圖的厭氧試管剖面圖 主要原理：利用除氧銅柱在主要原理：利用除氧銅柱在350下與氧反應(yīng)下與氧反應(yīng) 來(lái)制備高純度氮，再用此高純度氮去驅(qū)除培養(yǎng)來(lái)制備高純度氮，再用此高純度氮去驅(qū)除培養(yǎng) 基配制、分裝過(guò)程中

55、各種容器和小環(huán)境中的空基配制、分裝過(guò)程中各種容器和小環(huán)境中的空 氣，使培養(yǎng)基的配制、分裝、滅菌和貯存，以氣，使培養(yǎng)基的配制、分裝、滅菌和貯存，以 及接種、稀釋、培養(yǎng)、觀察、分離、移種和保及接種、稀釋、培養(yǎng)、觀察、分離、移種和保 藏等操作的全過(guò)程始終處于高度無(wú)氧的環(huán)境下，藏等操作的全過(guò)程始終處于高度無(wú)氧的環(huán)境下， 從而保證了嚴(yán)格厭氧菌的存活。從而保證了嚴(yán)格厭氧菌的存活。 73 厭氧罐厭氧罐 催化劑室催化劑室 內(nèi)含鈀粒內(nèi)含鈀粒 產(chǎn)氣袋產(chǎn)氣袋 加水能產(chǎn)生加水能產(chǎn)生 CO2和和H2 厭氧指示劑厭氧指示劑 無(wú)氧時(shí)美藍(lán)無(wú)氧時(shí)美藍(lán) 變無(wú)色變無(wú)色 74 厭氧手套箱厭氧手套箱 交換室交換室 外界物件外界物件 進(jìn)

56、出箱體進(jìn)出箱體 接種室和培養(yǎng)室接種室和培養(yǎng)室 結(jié)構(gòu)嚴(yán)密不透氣，充結(jié)構(gòu)嚴(yán)密不透氣，充 滿惰性氣體，并有鈀滿惰性氣體，并有鈀 催化劑保證箱內(nèi)處于催化劑保證箱內(nèi)處于 高度無(wú)氧狀態(tài)高度無(wú)氧狀態(tài) 用于無(wú)氧操作和培養(yǎng)嚴(yán)格厭氧菌用于無(wú)氧操作和培養(yǎng)嚴(yán)格厭氧菌 75 一、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)法一、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)法 （二）液體培養(yǎng)（二）液體培養(yǎng) 1、好氧菌的液體培養(yǎng)、好氧菌的液體培養(yǎng) 在液體培養(yǎng)中，氧的供應(yīng)始終是好氧菌生長(zhǎng)繁殖在液體培養(yǎng)中，氧的供應(yīng)始終是好氧菌生長(zhǎng)繁殖 的限制因子。提高溶液中氧濃度的措施有：的限制因子。提高溶液中氧濃度的措施有： （1）淺層液體靜止培養(yǎng)）淺層液體靜止培養(yǎng) （2）搖瓶培養(yǎng)）搖瓶培養(yǎng) （3）深層液體

57、底部通氣）深層液體底部通氣 （4）對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行機(jī)械攪拌）對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行機(jī)械攪拌 76 2、好氧菌液體培養(yǎng)法、好氧菌液體培養(yǎng)法 （1）試管液體培養(yǎng)）試管液體培養(yǎng) （2）三角瓶淺層液體培養(yǎng)）三角瓶淺層液體培養(yǎng) （3）搖瓶培養(yǎng)）搖瓶培養(yǎng) （4）臺(tái)式發(fā)酵罐）臺(tái)式發(fā)酵罐 3、厭氧菌的液體培養(yǎng)法、厭氧菌的液體培養(yǎng)法 （1）將培養(yǎng)物放入?yún)捬豕藁騾捬跏痔紫渲校⑴囵B(yǎng)物放入?yún)捬豕藁騾捬跏痔紫渲?（2）單獨(dú)在有氧環(huán)境下培養(yǎng)：）單獨(dú)在有氧環(huán)境下培養(yǎng)： 在培養(yǎng)液中加入巰基乙醇，半胱氨酸，在培養(yǎng)液中加入巰基乙醇，半胱氨酸，VC，皰肉等，皰肉等有機(jī)有機(jī) 還原劑還原劑，或鐵絲等，或鐵絲等無(wú)機(jī)還原劑無(wú)機(jī)還原劑 深層培養(yǎng)或在液面

58、深層培養(yǎng)或在液面封上石蠟油封上石蠟油、凡士林、凡士林-石蠟油石蠟油 （二）液體培養(yǎng)（二）液體培養(yǎng) 77 測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法 影響微生物生長(zhǎng)的主要因素影響微生物生長(zhǎng)的主要因素 微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物的生長(zhǎng)規(guī)律 微生物培養(yǎng)法概論微生物培養(yǎng)法概論 微生物的微生物的 新陳代謝新陳代謝 有害微生物的控制有害微生物的控制 微生物的生長(zhǎng)及其控制微生物的生長(zhǎng)及其控制 78 第五節(jié)第五節(jié) 有害微生物的控制有害微生物的控制 控制有害微生物的措施控制有害微生物的措施 殺滅法殺滅法抑制法抑制法 滅滅 菌菌 （徹底殺滅）（徹底殺滅） 消消 毒毒 （部分殺滅，僅（部分殺滅，僅 殺滅病原體）殺滅病原體）

59、化化 療療 （抑制宿主體（抑制宿主體 內(nèi)的病原菌）內(nèi)的病原菌） 防防 腐腐 （抑制霉腐（抑制霉腐 微生物）微生物） 殺殺 菌菌溶溶 菌菌 79 抑制抑制(Inhibition)：生長(zhǎng)停止，但不死亡；：生長(zhǎng)停止，但不死亡； 防腐防腐(Antisepsis)：完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖，即通過(guò)抑菌作：完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖，即通過(guò)抑菌作 用防止食品、生物制品等對(duì)象發(fā)生霉腐的措施用防止食品、生物制品等對(duì)象發(fā)生霉腐的措施 化療化療(Chemotherapy)：利用具有高度選擇毒力的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿：利用具有高度選擇毒力的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿 主體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖，借以達(dá)到治療該宿主傳染病的措

60、施主體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖，借以達(dá)到治療該宿主傳染病的措施 消毒消毒(Disinfection)：采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)：采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi) 部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌，而對(duì)被消毒的對(duì)象基本部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌，而對(duì)被消毒的對(duì)象基本 無(wú)害的措施無(wú)害的措施 滅菌滅菌(Sterilization)：采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切：采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切 微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施 一、幾個(gè)基本概念一、幾個(gè)基本概念 死亡死亡(Death)：生長(zhǎng)能力不可逆喪失；：生