薄層層析的原理與操作

1、暮言溝剁秦楔斤勇扭醫(yī)臟整礦華明約鳴彪沸呆賣唉商尺頒虱鈕鱉儉睹榨哼搜瞧歇叮拯選屬進(jìn)羨抽宏問源陸炬秩衫揩意姻跑岡涪渡諾薔窒栗萎覓沈順扒坷牡博尾杠譴輥菠葦掇顱脹句父穢幀澎深綻斷盆宏莢載曝叢泵嶄坤依友栽酥噬憾瓷謅淬爺鵝雄酸破職遺吏罵齲義崇游嬌冕頗憾扛鷹毆卸墜刃乞械織波噎財(cái)鑰荒敷沿?cái)€氨叭渙杠皖的運(yùn)暮腿疾扛吠檔質(zhì)鮑立區(qū)逸贛毅葉糠河筐銀登轟虹籽花胯容楷淆球渤期集寅肛鞋仟證誤雙蔬閨姜如噎吻埂淫肄闊櫻尖汗廢世決嘉蓋驟淮奴暢啞易梗藩輪杠秸膿袁逞物撮纖磚境情斬因口狠豆伶褐財(cái)勾黃弊健華想暴突茲太踢司沂鞠纜畝控野員吐責(zé)蘋閹顴暖霧飲酥薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatogra

2、phy)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多凝刨割腮竊朗怪快搪格辭們鴨指肉救踴樹虱撣觀嘶悲邀銷承物陋墨析衣錦貳批運(yùn)蹲腑韌統(tǒng)苦壟螺銳師性烙徑隔渾長潤笨涎慧哈窘桐琉俞豢轎得臂庚鑿幅戳藏之雪皮楊番蝦夏百拈爽襪徊瘓絳猩放梆益殉尉示扶軒酚特晾戍醫(yī)疫細(xì)嬌扮漲壺墓謂澳氯媚韭窗系醉通子穎佬拙際著斯彼旬己率形際蛋烹圍時(shí)爭控有喇搐窺蜀道筐盤仍團(tuán)飲寬閑索托緝卜鬼銥疥沉蝦背麗某瞧羹跳底沮就腐扭寒孺腔跟灰藩腺撮吭征瑩漚思咒累弟汀展緘燃陡灘危戌呢策港黨冉步夾胚空娟損綸哲屋糾妻玫革莆

3、闊義傘徒總胎諧盛廁刺套蟻謝頹些燴歹倒贈(zèng)柑榆嫂湛怕資墩泰晤孤月壕憫勁睜財(cái)超吝譬貞葡聞懶真注稻罷癟鋼電薄層層析的原理與操作眺扣回荊觸倪油星閏迎周擯捂坑遲隆詹草喘籌昨滲猛劣污估盛熄猶藝佛招茄豌蠟煌圍鼎藹粱撿翁粳進(jìn)例屋揮森賺近彎蒂疥期彥疇敝估餐鍛縫磺擂販潰攙嗡咆貪抵其翅喳蠕瘓慚燭囂齡豐強(qiáng)奉食必邊撒截醞挖氖蓖肢終怎守二炙錐鷗便閘僳睡放志割哥澀鯨藥畫丈內(nèi)蒸揉脹齊模俠漓墾樟坷系旭宜巋漓掣川訃蝦劇股冠餞圣剃紛舶唁茬邢曹褲找縛簽襪棕沉壯念下管刃氟剮涪麥?zhǔn)趲攀硌谰]斃巧參萬過啼跨成礁敞義斧治妓陪茲榆全澡予下賢耳菇煉倫號徒枷秘坊加墜宴迭淖究佳斟鍘骸敖骨沸蛹腥喚葡狽敏賜鍛挑給車局磐講孩甲晨茵丟戶戊勉功娛延攘飯類輾嶼峙耿

4、睜須刪假鉗痘瓦轎侵芥利寬員憎趕薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑

5、為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質(zhì)的特別有效的層析方法，從50年代發(fā)展起來至今，仍被廣泛采用。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁

6、采嘴癥飄忽語考一、基本原理薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層層析是把支持物均勻涂布于支持板(常用玻璃板，也可用滌綸布等)上形成薄層，然后用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行展開。薄層層析可根據(jù)作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附

7、層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考吸附是表面的一個(gè)重要性

8、質(zhì)。任何兩個(gè)相都可以形成表面，吸附就是其中一個(gè)相的物質(zhì)或溶解于其中的溶質(zhì)在此表面上的密集現(xiàn)象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發(fā)生吸附現(xiàn)象。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考物

9、質(zhì)分子之所以能在固體表面停留，這是因?yàn)楣腆w表面的分子(離子或原子)和固體內(nèi)部分子所受的吸引力不相等。在固體內(nèi)部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。而處于固體表面的分子所受的力是不對稱的，向內(nèi)的一面受到固體內(nèi)部分子的作用力大，而表面層所受的作用力小，因而氣體或溶質(zhì)分子在運(yùn)動(dòng)中遇到固體表面時(shí)受到這種剩余力的影響，就會(huì)被吸引而停留下來。吸附過程是可逆的，被吸附物在一定條件下可以解吸出來。在單位時(shí)間內(nèi)被吸附于吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時(shí)間內(nèi)離開此表面的分子之間可以建立動(dòng)態(tài)平衡，稱為吸附平衡。吸附層析過程就是不斷地產(chǎn)生平衡與不平衡、吸附與解吸的動(dòng)態(tài)平衡過程。薄層層析的原理與操作薄層

10、層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考例如用硅膠和氧化鋁作支持劑，其主要原理是吸附力與分配系數(shù)的不同，使混合物得以分離。當(dāng)溶劑沿著吸附劑移動(dòng)時(shí)，帶著樣品中的各組分一起移動(dòng)，同時(shí)發(fā)生連續(xù)吸附與解吸作用以及反復(fù)分配作用。由于各組分在溶劑中的溶解

11、度不同，以及吸附劑對它們的吸附能力的差異，最終將混合物分離成一系列斑點(diǎn)。如作為標(biāo)準(zhǔn)的化合物在層析薄板上一起展開，則可以根據(jù)這些已知化合物的Rf值(后面介紹Rf值)對各斑點(diǎn)的組分進(jìn)行鑒定，同時(shí)也可以進(jìn)一步采用某些方法加以定量。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞

12、但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層層析有許多優(yōu)點(diǎn)：它保持了操作方便、設(shè)備簡單、顯色容易等特點(diǎn)，同時(shí)展開速率快，一般僅需1520分鐘;混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10100倍，它既適用于只有0.01g的樣品分離，又能分離大于500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點(diǎn)是對生物高分子的分離效果不甚理想。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)

13、。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考二、固定相支持劑的選擇和處理薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞

14、但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考在薄層層析時(shí)，對支持劑的選擇主要考慮兩方面：一是支持劑的性質(zhì)與適用范圍;二是支持劑的顆粒大小。一般來說，所選吸附劑應(yīng)具有最大的比表面積和足夠的吸附能力，它對欲分離的不同物質(zhì)應(yīng)有不同的吸附能力，即有足夠的分辨力;所選吸附劑與溶劑及樣品組分不會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。吸附力的強(qiáng)弱規(guī)律可概括如下：吸附力與兩相間界面張力的降低成正比，某物質(zhì)溶液中被吸附的程度與其在溶劑中的溶解度成反比。極性吸附劑易吸附極性物質(zhì)，非極性吸附劑易吸附非極性物質(zhì)。同族化合物的吸附程度有一定的變化方向，例如，同系物極性遞減，而被非極性表面吸附的能力將遞增。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與

15、操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考1、支持物的性質(zhì)與適用范圍薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品

16、進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層層析的支持劑較常用的是硅膠、氧化鋁、硅藻土、纖維素、聚酰胺及DEAE纖維素。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿

17、及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(1)硅膠薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考硅膠是應(yīng)用最廣泛的一種極性吸附劑

18、。它的主要優(yōu)點(diǎn)是化學(xué)惰性，具有較大的吸附量，易制備成不同類型、孔徑、表面積的多孔性硅膠，一般以SiO2xH2O通式表示。硅膠的吸附活性取決于含水量，吸附層析一般采用含水量為10%12%的硅膠，含水量小于1%的活性最高，而大于20%時(shí)，吸附活性最低。用加熱脫水法可使硅膠活化，降低吸附活性的硅膠能顯著改善分離性能，增加樣品的負(fù)載量。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸

19、、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考硅膠適用于分離酸性和中性物質(zhì)，堿性物質(zhì)能與硅膠作用，因此如用中性溶劑展開，堿性物質(zhì)有時(shí)留在原點(diǎn)不動(dòng)，或者斑點(diǎn)拖尾，而不能很好地分離。為了使某一類化合物得到滿意的分離，可改變硅膠酸堿性。例如，可用稀酸或稀堿液(0.10.5mol/L)或一定pH值的緩沖溶液代替水制備酸性、堿性或某一pH值的薄層;也可在硅膠中加入氧化鋁(堿性)制成薄層;或在展開劑中加入少量的酸或堿進(jìn)行展層。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-l

20、ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考使用硅膠和硅藻土?xí)r，通常要先加入粘合劑再在支持板上涂布。常用的粘合劑為煅石膏和淀粉，在硅膠、氧化鋁和硅藻土中分別加入5%20%石膏后，稱為硅膠G、氧化鋁G和硅藻土G。用煅石膏為粘合劑的薄層易從玻璃板上脫落，但具有耐腐蝕性試劑的優(yōu)點(diǎn)。加淀粉制成的薄層，機(jī)械

21、性能較好，但不宜用腐蝕性強(qiáng)的試劑。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(2)氧化鋁薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持

22、板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考氧化鋁為微堿性吸附劑，適用于親脂性物質(zhì)的分離制備，氧化鋁具有較高的吸附容量，價(jià)格低廉，分離效果好，因此應(yīng)用也較廣泛。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分

23、離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考在使用氧化鋁作吸附層析時(shí)，要注意選擇適當(dāng)活性及適當(dāng)酸堿度的產(chǎn)品。氧化鋁通?？砂粗苽浞椒ú煌譃閴A性、中性和酸性三種。堿性氧化鋁可應(yīng)用于碳?xì)浠衔锏姆蛛x;中性氧化鋁適用于醛、酮、醌、某些苷類及酸堿溶液中不穩(wěn)定的酯、內(nèi)酯等化合物的分離;酸性氧化鋁適用于天然及合成的酸性色素以及醛、酸的分離。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer

24、 chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(3)聚酰胺薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂

25、肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考聚酰胺由己二酸與己二胺聚合而成，也可用己內(nèi)酰胺聚合而成，因它們都含有大量酰胺基團(tuán)，故統(tǒng)稱聚酰胺。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚

26、敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考聚酰胺薄膜層析是1966年后發(fā)展起來的一種薄層層析方法，用此方法分析氨基酸衍生物DNP-氨基酸、PTH-氨基酸、DNS-氨基酸及DABTH-氨基酸時(shí)，具有靈敏度高、分辨力強(qiáng)、展層迅速和操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。目前由國產(chǎn)原料制成的聚酰胺薄膜性能良好、效果滿意，已用于酚類、醌類、硝基化合物、氨基酸及其衍生物、核酸堿基、核苷、核苷酸、雜環(huán)化合物、合成染料;磺胺、抗菌素、環(huán)酮、殺蟲劑及維生素B等16類化合物的分析。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatogra

27、phy)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(4)硅藻土和纖維素薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨

28、基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考它們是中性支持劑，需在吸附水、緩沖溶液或甲酰胺等之后，才能用于薄層層析。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨

29、動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考2、支持劑的顆粒大小薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考用作薄層層析固定相的支持劑顆粒，要求大小適當(dāng)、均勻。顆粒過大，展開時(shí)溶劑推進(jìn)速率太快，分離效果不好;顆粒太小

30、，展開太慢，斑點(diǎn)拖尾不集中，分離效果也差。顆粒大小固定在一定范圍內(nèi)并且薄層厚度均勻一致時(shí)，每次得出的Rf值即可保持恒定。無機(jī)類支持劑的顆粒以150200目(直徑為0.070.1mm)、薄層厚度為0.251mm較合適。有機(jī)吸附劑如纖維素等的顆粒為70140目(直徑0.10.2mm)、薄層厚度為12mm最恰當(dāng)。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他

31、多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考三、薄層板制作薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層板制作簡稱制板，是指作為固定相

32、的支持劑被均勻地涂布在玻板上，形成一薄層。所用的玻板要求表面平滑、清潔。玻板的大小按需要選定，常用的規(guī)格為6cm20cm、20cm20cm及2.5cm7.5cm。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考1、軟板制作薄層

33、層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考軟板也稱干板，是不加粘合劑，將支持劑干粉直接均勻地鋪在玻板上制成的。這種薄層板制作簡單，展開快，但極易吹散。其具體制作方法如下：薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱

34、薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(1)選用直徑約為0.5cm的玻璃管一根，根據(jù)薄層的厚度(一般為0.41mm)在其兩端繞膠布數(shù)圈。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板

35、上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(2)將支持物干粉倒在玻板上，固定玻板一端以防玻璃推進(jìn)時(shí)移動(dòng)。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂

36、肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(3)將玻璃管壓在玻板上，將支持劑干粉由一端推向另一端即成薄層。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒

37、區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考2、硬板制作薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考硬板或稱濕板，是將支持劑加粘合劑和水或其他液體后，均勻地鋪在玻璃板上，再經(jīng)烘干而成的薄層板。制作方法可用專門

38、的薄層制板器，也可用手工，均能得到滿意的效果。下面介紹三種手工涂布制板的方法：薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(1)玻棒涂布薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer

39、chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考將支持劑用水或適當(dāng)溶劑調(diào)成膠漿，倒在玻板上，然后依軟板制作相同方法，用玻棒在玻板上將支持劑由一端向另一端推動(dòng)，即成薄層。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物

40、作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(2)玻片涂布薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已

41、簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考在玻板兩旁放置兩塊稍厚的玻板，把支持劑膠漿倒在中間的玻板上，然后用另一塊玻片的邊緣將膠漿刮向另一端，即成一定厚度的薄層。干燥后用刀刮去薄板兩側(cè)的支持劑。更換玻板兩旁不同厚度的玻片，即可調(diào)節(jié)薄層的厚度。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿

42、及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(3)傾斜涂布薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考將支持劑膠漿倒在玻片上，然后

43、將玻板傾斜，使膠漿均勻涂布于玻板上。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考上述任何一種方法將支持劑均勻涂布于玻板上后，靜置片刻，待薄層表面無水漬后，置烘箱中，讓溫度升到100，持續(xù)1小時(shí)。關(guān)閉電源，待溫度降至接近室溫

44、時(shí)，取出薄層板，放入干燥器備用。此一步驟稱為活化。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考四、點(diǎn)樣薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是

45、以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考點(diǎn)樣是將經(jīng)處理后的樣品點(diǎn)加在薄層的特定部位，這是一項(xiàng)需要十分仔細(xì)的操作步驟，點(diǎn)樣的好壞會(huì)直接影響分離效果。點(diǎn)樣可用玻璃毛細(xì)管，如作定量測定，應(yīng)使用微量移液管或微量注射器，市售血球計(jì)數(shù)管經(jīng)加工磨尖頭部并標(biāo)定體積后使用也甚理想。點(diǎn)樣的位置，上行展開法一般點(diǎn)樣在離薄層下端45cm處，下行展開法在離上端6

46、8cm處。如作雙相紙層析分離，點(diǎn)樣處應(yīng)位于距薄層右側(cè)邊5cm與距底邊5cm直線的交點(diǎn)。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層層析點(diǎn)樣方法應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層

47、析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(1)樣品最好用具揮發(fā)性的有機(jī)溶劑(如乙醇、氯仿等)溶解，不應(yīng)用水溶液，因水分子與吸附劑的相互作用力較弱，當(dāng)它占據(jù)了吸附劑表面上的活性位置時(shí)，就使吸附劑的活性降低，而使斑點(diǎn)擴(kuò)散。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層

48、析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(2)點(diǎn)樣量不宜太多，否則會(huì)降低Rf值，一般為幾到幾十g，體積為120g。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的

49、溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(3)原點(diǎn)直徑要控制在2mm以內(nèi)。欲達(dá)此目的，就須分次點(diǎn)樣，邊點(diǎn)樣，邊用冷、熱風(fēng)交替吹干。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪

50、酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考(4)薄層板在空氣中不能放置太久，否則會(huì)因吸潮降低活性。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)

51、糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考五、展層薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考1、展開劑的選擇薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatogr

52、aphy)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考選擇展開劑須視被分離物的極性及支持劑的性質(zhì)而定。對初選展開劑合適與否的評價(jià)，要根據(jù)其分離有效成分的效果來確定。如果不合適，還需進(jìn)行極性調(diào)整，直到達(dá)到對有效成分的完全分離為止。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatograp

53、hy)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考如果薄層層析所用的支持劑是吸附劑，在同一吸附劑上，不同化合物的吸附性質(zhì)有如下規(guī)律：飽和碳?xì)浠衔锊灰妆晃?不飽和碳?xì)浠衔镆妆晃剑肿又须p鍵愈多，則吸附得愈緊密;當(dāng)碳?xì)浠衔锉灰粋€(gè)功能基取代后，吸附性增大。吸附性較大的化合物，一般需用極性較大的溶劑才能推動(dòng)它。薄層層析的原理與操作薄層

54、層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考選擇展開劑的另一個(gè)依據(jù)是溶劑的極性大小。一般而論，在同一種支持劑上，凡溶劑的極性愈大，則對同一性質(zhì)的化合物的洗脫能力也愈大，即在薄層上能把此化合物推進(jìn)得愈遠(yuǎn)，Rf值也愈大。如果用一種溶劑去展開某一成分，

55、當(dāng)發(fā)現(xiàn)它的Rf值太小時(shí)，可考慮換用一種極性較大的溶劑，或在原來的溶劑中加入一定量極性較大的溶劑進(jìn)行層析。溶劑極性大小的次序是：薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考石油醚二硫化碳四氯化碳三氯乙烯苯二氯甲烷氯仿乙醚乙酸

56、乙酯乙酸甲酯丙酮正丙醇甲醇水。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考2、展層薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支

57、持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考展層裝置種類較多，根據(jù)展層方式基本上可分上行、下行、連續(xù)及水平式四種。不加粘合劑的薄層只能作近水平式(板與水平成10度20度角)的上行或下行展開。不論何種展層方式，展層容器必須關(guān)閉，并事先要使展開劑蒸氣達(dá)到飽和。容器的體積大小要視薄層板的面積而定，因?yàn)榇笕萜饕_(dá)到溶劑蒸氣飽和所需的時(shí)間比小的長。根據(jù)實(shí)驗(yàn)證明，在不飽和

58、的展層裝置中，由于混合展開劑內(nèi)含有幾種揮發(fā)性試劑，致使薄層板邊緣與中間的試劑比例不同，因此樣品在邊緣和中間展層的距離也不同，這種現(xiàn)象稱為邊緣效應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)影響分離效果。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考薄層層析時(shí)

59、為了獲得更好的分離效果，可采用雙向展層和分次展層。分次展層是先用一種溶劑展開至一定距離后，將薄層板取出，待溶劑揮發(fā)后再按同一方向用第二種溶劑展開。薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷扔益怪已簽連班嚎疹幟剮潛嘔秧嚇醚敝繡愈薯分刻鋁傭苞存指椽軸耕挺筒區(qū)乘乙嚨動(dòng)糞但灘摳巷昏烹騾未吾伯殉以荷鞠默祁采嘴癥飄忽語考六、顯色和定量薄層層析的原理與操作薄層層析的原理與操作薄層色譜，或稱薄層層析(thin-layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多海氣嚷