佛山市高中生物 第二章 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 2.2 微生物的實驗室培養(yǎng)(二)學(xué)案 選修1

1、學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)（二)學(xué)習(xí)目標1。通過閱讀教材p1617“（一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基”，掌握配制培養(yǎng)基的步驟和倒平板操作的過程。2。結(jié)合教材p1819“（二）純化大腸桿菌,理解并掌握利用平板劃線法和稀釋涂布平板法來純化微生物的方法.重難點擊：1.掌握制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法。2.學(xué)會用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化微生物?！绢A(yù)習(xí)案】一制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基是細菌培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基,大腸桿菌的純化就是用的該培養(yǎng)基。1.牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的成分及各成分提供的營養(yǎng)培養(yǎng)基組分提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏5.0 g_蛋白胨1

2、0。0 g 和維生素nacl 5。0 g_蒸餾水定容至1 000 ml氫元素、 元素2.實驗過程（1）培養(yǎng)基的配制計算：根據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 的比例，計算配制100 ml培養(yǎng)基時 各成分的用量（2）（2）滅菌(3）倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時,在酒精燈火焰附近操作進行：在火焰旁 手拿錐形瓶， 手拔出棉塞(如圖1)。使錐形瓶的瓶口迅速通過 ，目的是進行 ,防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基（如圖2）。 手將培養(yǎng)皿打開 ， 手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上 （如圖3）。等待平板 后，將平板 放置（如圖4)。3.培養(yǎng)基的選擇:培養(yǎng)基配制好后，要放在 中保溫12 d，若 則說明制備的培養(yǎng)基是合格的。4.平

3、板冷凝后，要將平板倒置的原因：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基 ，又可以防止 。二純化大腸桿菌：純化大腸桿菌就是為了獲得大腸桿菌的純種菌落，這需在培養(yǎng)時,盡量使菌落中的菌體來自于一個大腸桿菌的分裂，即這個菌落的細菌群體由 繁殖而來，這就需要接種時盡量接種單個的大腸桿菌，最常用的是 法和 法.1.平板劃線法：結(jié)合示意圖,完成下面步驟:2。稀釋涂布平板法：(1)系列稀釋操作 （2)涂布平板操作3.菌種的保存將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是_ 。歸納提煉：1。平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的2.稀釋涂布平板法：應(yīng)特別注意：（1)酒精燈與培養(yǎng)皿

4、的距離要合適.（2）吸管頭不要接觸任何其他物體.(3）吸管要在酒精燈火焰周圍使用活學(xué)活用: 1。下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯誤的是(）a.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌b。將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯c。待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時進行倒平板d。待平板冷卻凝固約510 min后，將平板倒過來放置2.下列敘述錯誤的是（）a.右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞，為避免 污染需放在酒精燈火焰附近b.倒平板整個過程應(yīng)在酒精燈火焰旁進行c.打開培養(yǎng)皿蓋,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿， 左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋d。為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過來放置3.如圖為純化大

5、腸桿菌的一個操作環(huán)節(jié),下列相關(guān)敘述中,錯誤的是(）a。該操作步驟是接種，方法是平板劃線法b。除第一次劃線外，以后的每一次劃線的起點是上一 次劃線的末端c。圖中細菌密度最小的是5處 d。該接種方法適用于細菌的計數(shù)【小結(jié)提升】【典題訓(xùn)練】1。有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述，錯誤的是（）a.首先將菌液進行一系列的梯度稀釋b.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面c.在適宜條件下培養(yǎng)d。結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個菌落2.如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為12345。下列操作方法正確的是（）a.只在操作前將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌b.劃線操作須在火焰上進行c。在5區(qū)域中才可以得到所需菌落

6、d.在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌3.將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是（)a.對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用b.對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌c.沒必要放入未接種的培養(yǎng)基 d.為了下次接種時再使用4.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是（）a。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌b。接種純種細菌 c.適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) d。防止外來雜菌的入侵5。（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮 、 和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、 、 等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行 （消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進行清洗和 ；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能 .（3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值,除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的 。（4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細