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文檔簡介
1、第六章第六章 轉基因小鼠概述轉基因小鼠概述 轉基因轉基因鼠是除了固有的基因組外,小鼠體鼠是除了固有的基因組外,小鼠體 內還有一個或以上外來轉入基因,它能表內還有一個或以上外來轉入基因,它能表 達和體現(xiàn)轉入基因的功能,實現(xiàn)特定目的。達和體現(xiàn)轉入基因的功能,實現(xiàn)特定目的。 轉人轉人IgIg基因技術的一個基因技術的一個難點難點是需要相對大是需要相對大 的基因片段至整個基因座。的基因片段至整個基因座。 酵母人工染色體技術可以克隆和修飾數(shù)酵母人工染色體技術可以克隆和修飾數(shù) 千千kbkb的的DNADNA 轉基因技術可以將大片段轉基因技術可以將大片段DNADNA轉入相應的轉入相應的 哺乳動物細胞哺乳動物細胞
2、 制備基因敲除小鼠的主要步驟制備基因敲除小鼠的主要步驟 1 1、獲得外源目的基因、獲得外源目的基因 2 2、靶向載體、靶向載體 3 3、構建同源打靶重組子、構建同源打靶重組子 4 4、小鼠、小鼠ESES細胞的準備細胞的準備 5 5、打靶重組子導入、打靶重組子導入ESES細胞及藥物選擇細胞及藥物選擇 6 6、靶向基因、靶向基因-ES-ES細胞轉入胚泡細胞轉入胚泡 7 7、ES-ES-胚胎移入假性懷孕的雌性受體鼠胚胎移入假性懷孕的雌性受體鼠 及發(fā)育及發(fā)育 8 8、嵌合小鼠的近親交配、嵌合小鼠的近親交配 基本流程 轉基因小鼠的應用轉基因小鼠的應用 基因表達基因表達 基因調節(jié)基因調節(jié) 胚胎發(fā)育胚胎發(fā)育 人類疾病的動物模型人類疾病的動物模型 檢驗基因治療藥物檢驗基因治療藥物 從轉化的特殊細胞類型在體內建立細胞系從轉化的特殊細胞類型在體內建立細胞系 組織特異性誘導基因的表達組織特異性誘導基因的表達 組織特異性基因刪除組織特異性基因刪除 研究毒性基因特異性細胞消除的作用研究
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