愛玉乳汁中提取CSN

1、Characterization of a Chitosanase from Jelly Fig (Ficus awkeotsang Makino) Latex and Its Application in the Production of Water-Soluble Low Molecular Weight Chitosans PLOS ONE 報告人：李燕伶 2016.10 研究背景 萜類 生物堿 幾丁質(zhì)酶 橡膠 強心甾 -1,3-葡 聚糖酶 橡膠蛋白 脫乙酰幾 丁質(zhì)酶酶 -N-乙酰 葡糖苷酶 蛋白酶 研究背景 脫乙酰幾丁質(zhì) （HMWCs） 低分子量脫乙酰 幾丁質(zhì)（LMWCs） 殼寡糖（

2、COS） 研究背景 脫乙酰幾丁質(zhì)具有抗腫瘤和抗氧化活性，并脫乙酰幾丁質(zhì)具有抗腫瘤和抗氧化活性，并 且具有能夠激發(fā)機體免疫反應，減少膽固醇的作且具有能夠激發(fā)機體免疫反應，減少膽固醇的作 用。但是高分子量活性作用受到限制，而低分子用。但是高分子量活性作用受到限制，而低分子 量殼聚糖和殼寡糖能夠增加抗腫瘤活性和有效地量殼聚糖和殼寡糖能夠增加抗腫瘤活性和有效地 治療腎衰竭。治療腎衰竭。 脫乙酰幾丁質(zhì)的抗氧化活性可廣泛的應用于脫乙酰幾丁質(zhì)的抗氧化活性可廣泛的應用于 食品，比如說防止脂類氧化、肉類儲存，低分子食品，比如說防止脂類氧化、肉類儲存，低分子 量脫乙酰幾丁質(zhì)（量脫乙酰幾丁質(zhì)（LMWCLMWC）用于

3、螃蟹的保存，食用）用于螃蟹的保存，食用 膜的制備。膜的制備。 研究背景 研究內(nèi)容 從愛玉乳汁中分離純化出脫乙酰幾丁質(zhì)酶從愛玉乳汁中分離純化出脫乙酰幾丁質(zhì)酶。 檢測脫乙酰幾丁質(zhì)酶的檢測脫乙酰幾丁質(zhì)酶的pIpI、最適、最適pHpH、最適、最適 溫度、溫度、KmKm、VmaxVmax、底物特異性等基本特性。、底物特異性等基本特性。 檢測脫乙酰幾丁質(zhì)酶降解底物的產(chǎn)物檢測脫乙酰幾丁質(zhì)酶降解底物的產(chǎn)物水水 溶性低分子量殼聚糖的抗氧化性及其應用。溶性低分子量殼聚糖的抗氧化性及其應用。 01 02 03 研究結(jié)果 純化后的脫乙酰幾丁質(zhì)純化后的脫乙酰幾丁質(zhì) 酶活性達到原來的酶活性達到原來的7.67.6 倍，最終

4、產(chǎn)率為倍，最終產(chǎn)率為9.5%9.5%。 最大反應速度 0.69umol min-1 mg-1 最適pH 4.5 最適溫度 55 米氏常數(shù)Km 0.089mg mL-1 EG-LMWCs CM-LMWCs AE-LMWCs 討論 1.1.在果實成熟期間酶活會發(fā)生改變，作者想如果在脫在果實成熟期間酶活會發(fā)生改變，作者想如果在脫 乙酰幾丁質(zhì)酶酶活最高的時候收集乳汁脫乙酰幾丁質(zhì)乙酰幾丁質(zhì)酶酶活最高的時候收集乳汁脫乙酰幾丁質(zhì) 酶的產(chǎn)率會更高。酶的產(chǎn)率會更高。 2.2.清除不同自由基的能力的不同可能是由于取代基團清除不同自由基的能力的不同可能是由于取代基團 的電子云密度的差異和接近各種自由基的能力不同的的

5、電子云密度的差異和接近各種自由基的能力不同的 組合效應。組合效應。 結(jié)論 1. .愛玉乳汁中分離純化出的脫乙酰幾丁質(zhì)酶分子量為愛玉乳汁中分離純化出的脫乙酰幾丁質(zhì)酶分子量為 20.5kDa20.5kDa；pI3.5pI3.5，最適，最適pHpH為為4.54.5，最適溫度為，最適溫度為4545；米；米 氏常數(shù)氏常數(shù)KmKm為為0.089mg mL0.089mg mL-1 -1， ，VmaxVmax為為0.69umol min0.69umol min-1 -1 mg mg-1 -1。 。 該脫乙酰幾丁質(zhì)酶對脫乙酰度為該脫乙酰幾丁質(zhì)酶對脫乙酰度為21%-94%21%-94%的脫乙酰幾丁質(zhì)的脫乙酰幾丁質(zhì) 聚合物均有催化活性，其中對脫乙酰度為聚合物均有催化活性，其中對脫乙酰度為70%-84%70%-84%的脫乙的脫乙 酰幾丁質(zhì)更有效。酰幾丁質(zhì)更有效。 2.2.該脫乙酰幾丁質(zhì)酶能夠裂解幾丁質(zhì)、脫乙酰幾丁質(zhì)以該脫乙酰幾丁質(zhì)酶能夠裂解幾丁質(zhì)、脫乙酰幾丁質(zhì)以 及它們的衍生物。且具有幾丁質(zhì)酶和脫乙酰幾丁質(zhì)酶兩及它們的衍生物。且具有幾丁質(zhì)酶和脫乙酰幾丁質(zhì)酶兩 種不同活性。種不同活性。 3.3.該酶可以被用來制備水溶性的低分子量脫乙酰幾丁質(zhì)。該酶可以被用來制備水溶性的低分子量脫