載脂蛋白PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1 載脂蛋白載脂蛋白 的多態(tài)性，這些載脂蛋白可以 以分子大小/電荷互不相同的多 種形式存在。彼此互稱異構(gòu)體異構(gòu)體 （isoform） 第1頁(yè)/共84頁(yè) 第2頁(yè)/共84頁(yè) 第3頁(yè)/共84頁(yè) Kringle-4 致，在不同個(gè)體中重復(fù)1040次 不 等 第4頁(yè)/共84頁(yè) 第5頁(yè)/共84頁(yè) n檢測(cè)Apo（a）多態(tài)性表型在不同 人群中的分布對(duì)CCVD的預(yù)測(cè)及 防治具有重要意義 第6頁(yè)/共84頁(yè) 第7頁(yè)/共84頁(yè) 第8頁(yè)/共84頁(yè) 第9頁(yè)/共84頁(yè) 第10頁(yè)/共84頁(yè) 第11頁(yè)/共84頁(yè) 第12頁(yè)/共84頁(yè) 第13頁(yè)/共84頁(yè) 第14頁(yè)/共84頁(yè) 酚藍(lán)溶液200l混合液。 第15頁(yè)/共84頁(yè) DAB

2、 第16頁(yè)/共84頁(yè) 第17頁(yè)/共84頁(yè) 移電泳緩沖液的電泳槽中。120V 電泳6h（30以下）或430V轉(zhuǎn) 移過(guò)夜 第18頁(yè)/共84頁(yè) 第19頁(yè)/共84頁(yè) 第20頁(yè)/共84頁(yè) 第21頁(yè)/共84頁(yè) n 第22頁(yè)/共84頁(yè) 第23頁(yè)/共84頁(yè) n將生物素標(biāo)記的抗體作為二抗， 通過(guò)生物素-親和素系統(tǒng)放大 信號(hào)，可大大提高檢測(cè)敏感性 第24頁(yè)/共84頁(yè) 移帶（即標(biāo)準(zhǔn)部分）用低濃度 CBBG-250或氨基黑10B染色法 染色，并記下標(biāo)準(zhǔn)的位置。 第25頁(yè)/共84頁(yè) 第26頁(yè)/共84頁(yè) a、 S3、S2、B、S1少見(jiàn)；F罕見(jiàn)。亞 洲人群S4較歐美人群頻率明顯增 高，說(shuō)明Apo（a）多態(tài)性可能存 在一定種

3、族差異性。 第27頁(yè)/共84頁(yè) 第28頁(yè)/共84頁(yè) 第29頁(yè)/共84頁(yè) 第30頁(yè)/共84頁(yè) Lp（a 一些非遺傳因素（如環(huán)境、性 激素水平等）和/或其他遺傳 因素對(duì)Lp（a）水平也有影響 第31頁(yè)/共84頁(yè) 第32頁(yè)/共84頁(yè) 已建立了幾種快速準(zhǔn)確測(cè)定 ApoE表型的方法。 第33頁(yè)/共84頁(yè) 第34頁(yè)/共84頁(yè) 需要血清量較多，昂貴、費(fèi)時(shí)， 又需要大型設(shè)備，不適合大規(guī) 模研究。ApoE異構(gòu)體之間染色 程度之間差異及電泳過(guò)程中泳 動(dòng)距離的變異性也造成結(jié)果的 不穩(wěn)定性。 第35頁(yè)/共84頁(yè) 第36頁(yè)/共84頁(yè) 用量少，是國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) ApoE表型常用的方法之一。 第37頁(yè)/共84頁(yè) 本昂貴而

4、且費(fèi)時(shí)，有時(shí)也難以 清晰地分辨表型，故臨床上應(yīng) 用較少。 第38頁(yè)/共84頁(yè) 第39頁(yè)/共84頁(yè) 第40頁(yè)/共84頁(yè) 第41頁(yè)/共84頁(yè) 表型 IEF凝膠電泳區(qū)帶吸光度 E4/4E4（+），E4E3，E2 E3/3E4（-），E2/E31 E2/2E4（-），E2/E31 E4/3E4（+），E2/E31 E4/2E4（+），E2/E31 E3/2E4（-），E2/E31 第42頁(yè)/共84頁(yè) 于表型的判定 第43頁(yè)/共84頁(yè) 第44頁(yè)/共84頁(yè) ： 第45頁(yè)/共84頁(yè) n 第46頁(yè)/共84頁(yè) 第47頁(yè)/共84頁(yè) 性。另外，如選用pH48范 圍的梯度作IEF電泳，則幾乎 能檢測(cè)出至今為止所發(fā)現(xiàn)的

5、所 有異構(gòu)體表型 第48頁(yè)/共84頁(yè) 第49頁(yè)/共84頁(yè) 第50頁(yè)/共84頁(yè) 292bp。 第51頁(yè)/共84頁(yè) 第52頁(yè)/共84頁(yè) 第53頁(yè)/共84頁(yè) 第54頁(yè)/共84頁(yè) 第55頁(yè)/共84頁(yè) （91bp,83bp,72bp,61bp，48bp,35bp） n4/4出現(xiàn)4條帶 （72bp,61bp,48bp,35bp） 第56頁(yè)/共84頁(yè) 第57頁(yè)/共84頁(yè) 組 別 例 數(shù) ApoE基因型頻率 ApoE等位基因頻 率 E2/2 E3/2 E4/2 E3/3 E4/3 E4/4 E2E3E4 對(duì) 照 組 113 016.8 1.869.0 11.5 0.99.383.2 7.5 ABI 50 01

6、6.0 2.050.0 30.0 * 9.073.0 * 18.0 * 第58頁(yè)/共84頁(yè) 第59頁(yè)/共84頁(yè) 4 30%、36.8%） 第60頁(yè)/共84頁(yè) 密切相關(guān)，可能是高膽固醇血 癥和CHD的遺傳易患因子。 第61頁(yè)/共84頁(yè) 2 是ICVD的危險(xiǎn)因素。這些結(jié) 論之間的差異可能與研究方法、 所選病例及研究人群之間差異 有關(guān) 第62頁(yè)/共84頁(yè) 老人攜帶2數(shù)量是年輕人的2倍。 因此，2基因似乎不僅可保護(hù) 人們免患AD，而且還與長(zhǎng)壽 有關(guān)。 第63頁(yè)/共84頁(yè) 第64頁(yè)/共84頁(yè) 第65頁(yè)/共84頁(yè) 第66頁(yè)/共84頁(yè) 第67頁(yè)/共84頁(yè) 第68頁(yè)/共84頁(yè) 第69頁(yè)/共84頁(yè) 第70頁(yè)/共84頁(yè) 第71頁(yè)/共84頁(yè) nMsp- 5TCTCGGGAATATTCAGGAACTAT TG nMsp- 3CTAAGGATCCTACAATGTCAAGG T 第72頁(yè)/共84頁(yè) 第73頁(yè)/共84頁(yè) 第74頁(yè)/共84頁(yè) 第75頁(yè)/共84頁(yè) 第76頁(yè)/共84頁(yè) 經(jīng)PCR擴(kuò)增后直接電泳分析產(chǎn) 物，片段之間的差異在于AT 重復(fù)次數(shù)不同，重復(fù)3