蘭索拉唑脂質(zhì)體的制備及影響因素考察

1、蘭索拉唑脂質(zhì)體的制備及影響因素考察 摘要目的：進(jìn)行新型藥物蘭索拉唑的脂質(zhì)體制備研究，以期得到具有較高包封率的制備方法。方法：考查了不同方法制備脂質(zhì)體，篩選出最佳的制備蘭索拉唑脂質(zhì)體的方法，并考察了不同的影響因素對(duì)制備過(guò)程的影響。結(jié)果：采用乙醇注入法制備蘭索拉唑脂質(zhì)體，采用正交設(shè)計(jì)篩選處方，可以獲得具有較高包封率的脂質(zhì)體。結(jié)論：采用乙醇注入法可制得具有較高包封率的蘭索拉唑脂質(zhì)體，其中磷脂的組成和濃度、藥脂比、膽固醇的量是影響包封率的主要因素。 關(guān)鍵詞蘭索拉唑；脂質(zhì)體；包封率；乙醇注入法 中圖分類(lèi)號(hào)r94 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼a 文章編號(hào)1673-7210（2007）07（a）-144-02 蘭索拉唑（la

2、nsoprazole，lap）是一種新型的抑制胃酸分泌的藥物，對(duì)幽門(mén)螺桿菌也有抑制作用，在保護(hù)和促進(jìn)胃黏膜潰瘍愈合，降低潰瘍復(fù)發(fā)率等方面具有良好作用1,2，臨床上廣泛用于十二指腸潰瘍、胃潰瘍、返流性食管炎等的治療，療效顯著。脂質(zhì)體作為一種新的藥物載體，能減少藥物在體內(nèi)與血漿蛋白的結(jié)合，使藥物靶向于特定組織，提高藥物治療指數(shù)，減少藥物不良反應(yīng)。把蘭索拉唑做成注射用脂質(zhì)體后，既可滿足不能口服給藥的患者，又能提高療效，減少不良反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)乙醇注入法制備了蘭索拉唑脂質(zhì)體，通過(guò)正交設(shè)計(jì)篩選了最佳處方，制得了包封率較高的蘭索拉唑脂質(zhì)體。 1 儀器與試藥 集熱式恒溫磁力攪拌器（浙江省樂(lè)成電器廠），hpl

3、c泵（lc-10at），hplc檢測(cè)器(spd-10a，日本島津公司），shz-d型循環(huán)水真空泵（河南鞏義市英峪儀器廠），amicon 8010 攪拌超濾器（美國(guó)millipore公司），超濾膜（上海亞?wèn)|核極樹(shù)脂有限公司）。 蘭索拉唑（汕頭經(jīng)濟(jì)特區(qū)濱制藥廠），注射用大豆磷脂（epikuron 200，170，145，德國(guó)degussa公司），膽固醇（天津博迪化工有限公司），維生素e（浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠），曲拉通x-100（北京化學(xué)試劑公司），其他試劑均為市售分析純。 2 方法與結(jié)果 2.1 制備方法的選擇 嘗試了多種制備方法，如薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、乙醇注入法等，由于薄膜分散法和

4、反相蒸發(fā)法都需要使用氯仿，且制備時(shí)間都較長(zhǎng)，制備出的蘭索拉唑脂質(zhì)體包封率與乙醇注入法沒(méi)有顯著差別（圖1）。乙醇注入法簡(jiǎn)單快速，無(wú)不良溶劑的加入，因此選擇乙醇注入法制備蘭索拉唑脂質(zhì)體。 2.2 包封率的測(cè)定 取蘭索拉唑脂質(zhì)體混懸液6.0 ml至超濾器內(nèi)，用超濾膜氮?dú)饧訅撼瑸V，收集續(xù)濾液。精密量取該濾液適量，用流動(dòng)相稀釋定容至適當(dāng)濃度進(jìn)樣分析，計(jì)算游離藥物含量wfree；精密量取蘭索拉唑脂質(zhì)體溶液0.1 ml，用triton x-100破壞后，用流動(dòng)相稀釋定容至適當(dāng)濃度進(jìn)樣分析，計(jì)算脂質(zhì)體中藥物總含量wtot，并計(jì)算包封率en(%)，其中en(%)=(wtot-wfree)/wtot100%。 2

5、.3 處方篩選 2.3.1 單因素考察本文采用乙醇注入法制備蘭索拉唑脂質(zhì)體，以脂質(zhì)體包封率為主要指標(biāo)考察了磷脂種類(lèi)、磷脂濃度、藥脂比、膽固醇與磷脂的比、ve用量的影響。 2.3.1.1 磷脂種類(lèi)對(duì)包封率的影響：考察了不同種類(lèi)的磷脂，如大豆磷脂spc(epikuron200)、pc170、pc145，使其濃度都為20 mg/ml，固定其他因素不變，考察磷脂種類(lèi)對(duì)包封率的影響，結(jié)果見(jiàn)圖2。結(jié)果顯示，pc145制備的脂質(zhì)體包封率較低，而pc200與pc170兩者制備的脂拉唑的包封率無(wú)顯著差別。 2.3.1.2 磷脂濃度對(duì)包封率的影響：固定其他因素不變，只改變磷脂濃度，使所得脂質(zhì)體磷脂的濃度分別為20

6、、30、40、50 mg/ml，考察磷脂濃度對(duì)藥物包封率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖3。磷脂濃度對(duì)藥物的包封率影響較大。磷脂濃度增加，包封率上升，當(dāng)磷脂濃度達(dá)到40 mg/ml時(shí)，包封率變化不多，因此，選擇40 mg/ml的磷脂濃度進(jìn)行其他單因素考察。 2.3.1.3 藥脂比對(duì)包封率的影響：固定磷脂與膽固醇的比例為4:1，其他因素不變，變化藥物的濃度，使處方中藥物與磷脂的質(zhì)量比為1:20，1:30，1:40，結(jié)果見(jiàn)圖4。結(jié)果顯示隨著藥脂比的增加，包封率略有增加，但增幅不大。 2.3.1.4 膽固醇與磷脂的比例對(duì)包封率的影響：固定處方中藥脂比為1:30，改變膽固醇的濃度，使膽固醇與磷脂的比例為1:2，1:4

7、，1:8，結(jié)果見(jiàn)圖5。結(jié)果顯示隨著膽固醇濃度的增加，包封率也相應(yīng)的增加，但增幅不大。 2.3.1.5 抗氧化劑的加入對(duì)包封率的影響：固定藥脂比1:30,膽固醇與磷脂比1:2，其他因素不變，加入0.5，1.0，1.5的維生素e，與未加抗氧化劑的包封率進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)圖6。結(jié)果表明，抗氧化劑的加入使藥物的包封率略有增加，但隨著抗氧化劑的增加，包封率并沒(méi)有相應(yīng)增加，說(shuō)明抗氧化劑的量對(duì)藥物包封率影響不大，最后選擇0.5的維生素e。 2.4 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化處方 在以上單因素考察的基礎(chǔ)上，為了綜合考察一些因素對(duì)乙醇注入法制備蘭索拉唑脂質(zhì)體包封率的影響，采用正交試驗(yàn)篩選和優(yōu)化處方。選用4因素、3水平進(jìn)行試驗(yàn)。

8、4個(gè)因素分別為磷脂種類(lèi)（a）、磷脂濃度（b）、藥脂比（c）、膽固醇與磷脂比（d），以4個(gè)主要因素為變量，每個(gè)因素又設(shè)定3個(gè)水平，進(jìn)行正交設(shè)計(jì)，以包封率為考察指標(biāo)來(lái)篩選處方。結(jié)果見(jiàn)表1。 通過(guò)直觀分析可以看出，各因素重要程度依次為：abcd。其中磷脂種類(lèi)對(duì)包封率的影響最大，其次是磷脂的濃度，而膽固醇與磷脂比對(duì)包封率影響不大。綜合以上結(jié)果，可以確定乙醇注入法制備蘭索拉唑脂質(zhì)體的處方為：磷脂pc200濃度為45 mg/ml，磷脂與膽固醇比為2:1，藥脂比為1:30。 用以上處方制備蘭索拉唑脂質(zhì)體，重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次，所得蘭索拉唑脂質(zhì)體的平均包封率為83.20%。 3 討論 含藥脂質(zhì)體的制備方法有主動(dòng)載藥和

9、被動(dòng)載藥兩種，本文制備的蘭索拉唑脂質(zhì)體的乙醇注入法屬于被動(dòng)載藥法。對(duì)于被動(dòng)載藥法，一般來(lái)說(shuō)，藥物的包封率與脂溶性有關(guān)，脂溶性高的藥物可以獲得較高的包封率。而蘭索拉唑?qū)儆谥苄运幬?，通過(guò)處方的優(yōu)化，得到了包封率較高的蘭索拉唑脂質(zhì)體。本文采用的乙醇注入法3,4是目前可應(yīng)用于工業(yè)化大生產(chǎn)的脂質(zhì)體制備方法，相較于其他多種制備方法，乙醇注入法制備過(guò)程快速，操作簡(jiǎn)單，易于放大。 由正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出，磷脂種類(lèi)對(duì)最后藥物的包封率影響最大，其次是磷脂的濃度，而膽固醇與磷脂的比例對(duì)包封率的影響最小。由試驗(yàn)結(jié)果可知，磷脂濃度越大，脂質(zhì)體包封率越高，但這個(gè)趨勢(shì)不是很明顯，在單因素考察中，當(dāng)磷脂濃度增加到一定量時(shí)，

10、制備的脂質(zhì)體包封率并不顯著增加。 膽固醇屬于兩親性物質(zhì)，其親油性較親水性強(qiáng)。磷脂與膽固醇相互間隔定向排列，形成雙分子層，當(dāng)溫度在磷脂的相變溫度以上時(shí)，可以增加磷脂的流動(dòng)性，當(dāng)溫度在磷脂的相變溫度以下時(shí)，膽固醇又可以增加雙分子層的穩(wěn)定性，使其更加牢固。因此，膽固醇與磷脂是共同構(gòu)成細(xì)胞膜和脂質(zhì)體的基礎(chǔ)物質(zhì)，亦稱為“流動(dòng)性緩沖劑”（fluidity buffer）。本文經(jīng)過(guò)處方篩選，最佳處方中磷脂與膽固醇的比例為21。 參考文獻(xiàn) 1許華,俞勵(lì)平,文潔,等.蘭索拉唑抗實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍作用的研究j.中國(guó)病理生理雜志,2002,18(6):698-700. 2張蕾萍,白雪姣,翟燕琴.雷尼替丁、蘭索拉唑和氫氧化鎂鋁抗實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的比較研究 j. 臨床醫(yī)藥實(shí)踐雜志,2004,13(4):257-258. 3naeff r.feasibility of topical liposome drugs produced on an industrial scalej.adv deliv rev,1996,18:343-347. 4wagner a, vorauer-uhl k, kreismayr g, et al.the c