分析化學(xué)--平面色譜法

1、2021-8-31第十九章第十九章 平面色譜法平面色譜法Plane chromatograph 薄層色譜薄層色譜紙色譜紙色譜2021-8-31第一節(jié)第一節(jié)平面色譜法的分類和原理平面色譜法的分類和原理 分類分類薄層色譜法：薄層色譜法：吸附薄層色譜法吸附薄層色譜法分配薄層色譜法分配薄層色譜法分子排阻薄層色譜法分子排阻薄層色譜法 紙色譜法紙色譜法:分配分配薄層電泳法薄層電泳法2021-8-31平面色譜法參數(shù)平面色譜法參數(shù) 定性參數(shù)定性參數(shù) 相平衡參數(shù)相平衡參數(shù) 面效參數(shù)面效參數(shù) 分離參數(shù)分離參數(shù)2021-8-312021-8-31紙層析紙層析2021-8-31L0L1L22021-8-31定性參數(shù)定

2、性參數(shù)1. 比移值比移值Rf在展開劑中出現(xiàn)的幾率為單位時(shí)間內(nèi)一個(gè)分子設(shè)R在固定相中出現(xiàn)的幾率為單位時(shí)間內(nèi)一個(gè)分子設(shè)R101010LLtLtLuuRR) 1(R01LLRf原點(diǎn)到溶劑前沿的距離心的距離原點(diǎn)到組分斑點(diǎn)質(zhì)量中mSVVKR11又110LLLVVKmS定時(shí)展開保留比2021-8-31討論討論 R Rf f與與K K有關(guān)，即與組分性質(zhì)（溶解度）以及薄有關(guān)，即與組分性質(zhì)（溶解度）以及薄層板和展開劑的性質(zhì)有關(guān)層板和展開劑的性質(zhì)有關(guān) 色譜條件一定，色譜條件一定，R Rf f只與組分性質(zhì)有關(guān)，是薄層只與組分性質(zhì)有關(guān)，是薄層色譜基本定性參數(shù)，說明組分的色譜保留行為色譜基本定性參數(shù)，說明組分的色譜保留

3、行為smmmSfVKVVVVKRR11fRK2021-8-31 1 1）KK大，大，R Rf f小小 2 2）薄層板一定，對于極性組分）薄層板一定，對于極性組分 展開劑極性展開劑極性大，大，R Rf f大（容易洗脫）大（容易洗脫） 展開劑極性展開劑極性小，小，R Rf f小小 （不容易洗脫）（不容易洗脫） 3 3）R Rf f范圍：范圍：0 R0 Rf f 1束縛型束縛型游離型游離型 2）吸水）吸水失活失活 105110 烘干烘干30分鐘分鐘(可逆失水可逆失水)吸附力最大吸附力最大 500烘干烘干(不可逆失水不可逆失水)活性喪失，無吸附力活性喪失，無吸附力適用：分析酸性或中性物質(zhì)適用：分析酸性

4、或中性物質(zhì) 2021-8-312. 氧化鋁氧化鋁 堿性氧化鋁堿性氧化鋁 pH 910 適于分析堿性、中性物質(zhì)適于分析堿性、中性物質(zhì) 中性氧化鋁中性氧化鋁 pH7.5 適于分析酸性堿性和中性物質(zhì)適于分析酸性堿性和中性物質(zhì) 酸性氧化鋁酸性氧化鋁 pH 45 適于分析酸性、中性物質(zhì)適于分析酸性、中性物質(zhì)3. 聚酰胺聚酰胺 氫鍵作用氫鍵作用 氫鍵能力氫鍵能力強(qiáng)，組分越后出柱強(qiáng)，組分越后出柱 2021-8-31吸附劑和流動相的選擇：吸附劑和流動相的選擇： 依據(jù)被測組分、吸附劑和流動相的性質(zhì)1. 被測組分性質(zhì)（極性大?。罕粶y組分性質(zhì)（極性大?。?烴烴 - - - - - - - - 羧酸，醇羧酸，醇

5、2. 吸附劑的活性：吸附劑的活性： 吸附劑的活性吸附劑的活性大，對被測組分的吸附能力大，對被測組分的吸附能力強(qiáng)強(qiáng) 強(qiáng)極性物質(zhì)強(qiáng)極性物質(zhì)選擇弱吸附劑選擇弱吸附劑 弱極性物質(zhì)弱極性物質(zhì)選擇強(qiáng)吸附劑選擇強(qiáng)吸附劑3. 流動相的極性：流動相的極性： 流動相極性流動相極性大，對被測組分的洗脫能力大，對被測組分的洗脫能力大大 “相似相溶相似相溶”原則原則 ：根據(jù)組分性質(zhì)、吸附劑的活：根據(jù)組分性質(zhì)、吸附劑的活性，選擇適當(dāng)極性的流動相性，選擇適當(dāng)極性的流動相2021-8-314. 三者關(guān)系圖示：三者關(guān)系圖示： 組分組分 吸附劑吸附劑 流動相流動相 極性極性 活性小活性小 極性極性 非非(弱弱)極性極性 活性大活

6、性大 非極性或弱極性非極性或弱極性2021-8-31（三）吸附劑的選擇（三）吸附劑的選擇 根據(jù)被測物極性和吸附劑的吸附能力根據(jù)被測物極性和吸附劑的吸附能力 被測物極性強(qiáng)被測物極性強(qiáng)弱極性吸附劑弱極性吸附劑 被測物極性弱被測物極性弱強(qiáng)極性吸附劑強(qiáng)極性吸附劑（四）展開劑的選擇（同液固吸附色譜流動相的選擇）（四）展開劑的選擇（同液固吸附色譜流動相的選擇） 根據(jù)被測組分、吸附劑和展開劑本身的極性根據(jù)被測組分、吸附劑和展開劑本身的極性2021-8-31 展開劑展開劑 混合溶劑混合溶劑先用單一溶劑展開，先用單一溶劑展開，若若R Rf f值太小，則加入一定量極性強(qiáng)的溶劑，如乙醇、值太小，則加入一定量極性強(qiáng)的

7、溶劑，如乙醇、丙酮等，丙酮等，如果如果R Rf f值太大，則加入適量極性弱的溶劑值太大，則加入適量極性弱的溶劑( (如環(huán)己烷、如環(huán)己烷、石油醚等石油醚等) )，以降低極性。，以降低極性。可加入一定比例的酸或堿可加入一定比例的酸或堿, ,使斑點(diǎn)集中。使斑點(diǎn)集中。2021-8-31（五）薄層板的制備（五）薄層板的制備定性分析定性分析窄條窄條定量分析定量分析101020cm20cm （六）定性與定量分析（六）定性與定量分析 定性分析定性分析日光，紫外光，顯色日光，紫外光，顯色 定量分析定量分析洗脫法，薄層掃描法洗脫法，薄層掃描法硅膠硅膠G自含粘和劑自含粘和劑硅膠硅膠H不含粘和劑，鋪板時(shí)另加入不含粘和

8、劑，鋪板時(shí)另加入CMC硅膠硅膠FH254含熒光劑，含熒光劑，254nm紫外光照發(fā)綠光紫外光照發(fā)綠光硅膠硅膠FH365含熒光劑，含熒光劑，365nm紫外光照發(fā)光紫外光照發(fā)光2021-8-31 定性分析定性分析 比較比較Rf值或值或Rr值值 、斑點(diǎn)顏色或熒光斑點(diǎn)顏色或熒光 常采用已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照（同一板上展開）常采用已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照（同一板上展開） 多種展開系統(tǒng)的多種展開系統(tǒng)的Rf值與對照品一致值與對照品一致。 定量分析定量分析 洗脫法洗脫法 直接定量法直接定量法1.1.目視比較法（如雜質(zhì)限度檢查方法）目視比較法（如雜質(zhì)限度檢查方法）2.2.薄層掃描法薄層掃描法2021-8-31第三節(jié)第三節(jié) 紙色

9、譜法紙色譜法 將固定相放在紙上，以紙做載體進(jìn)行點(diǎn)樣、展開、將固定相放在紙上，以紙做載體進(jìn)行點(diǎn)樣、展開、定性、和定量的液定性、和定量的液-液分配色譜法液分配色譜法固定相：紙纖維吸附的水固定相：紙纖維吸附的水流動相：與水不互溶的有機(jī)溶劑（飽和正丁醇）流動相：與水不互溶的有機(jī)溶劑（飽和正丁醇）分離機(jī)制：同液分離機(jī)制：同液-液分配色譜液分配色譜定性參數(shù)：定性參數(shù)：mSfVVKR11討論討論：Rf與組分性質(zhì)、流動相及溶解度有關(guān)與組分性質(zhì)、流動相及溶解度有關(guān) 極性組分極性組分易保留，易保留，Rf ?。鲃酉鄻O性小（流動相極性， Rf ） 非極性組分非極性組分易流出，易流出，Rf大（流動相極性大（流動相極性

10、，Rf ）2021-8-31二、紙色譜法的實(shí)驗(yàn)條件二、紙色譜法的實(shí)驗(yàn)條件 色譜紙的選擇色譜紙的選擇 對對Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速濾紙值相差很小的化合物，宜采用慢速濾紙 對對Rf值相差較大的化合物，則可用快速濾紙值相差較大的化合物，則可用快速濾紙 固定相固定相 水或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或緩水或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或緩沖溶液。（酸、堿）沖溶液。（酸、堿） 2021-8-31紙色譜法的實(shí)驗(yàn)條件紙色譜法的實(shí)驗(yàn)條件 展開劑的選擇展開劑的選擇增加展開劑中極性溶劑的比例量，可增加展開劑中極性溶劑的比例量，可以增大以增大Rf值；增加展開劑中非極性溶劑的比例量，可值；增加展開劑中非極性溶劑的比例量，可以減少以減少Rf值。值。 常用的展開劑常用的展開劑水飽和的有機(jī)溶劑，如水飽和的正丁水飽和的有機(jī)溶劑，如水飽和的正丁醇、正戊醇、酚等