機(jī)能試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）課題名稱：新斯的明對(duì)筒箭毒和琥珀膽堿肌松作用的影響（二）選題目的和思路1實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)觀察新斯的明如何影響筒箭毒和琥珀膽堿對(duì)蟾賒離體腹直肌的肌松作用，分析藥物相互作用機(jī)制。2設(shè)計(jì)思路乙酰膽堿可以激動(dòng)骨骼肌上的N2膽堿受體，是骨骼肌收縮；筒箭 毒為非去極化型N2膽堿受體阻斷劑，通過(guò)與乙酰膽堿競(jìng)爭(zhēng)骨骼肌N2膽 堿受體，而引起肌松作用。琥珀酰膽堿為去極化型N2膽堿受體阻斷 劑，產(chǎn)生與乙酰膽堿相似的去極化作用，但不易被膽堿酯酶水解，妨礙 了復(fù)極化，而引起肌松作用。新斯的明主要可抑制乙酰膽堿酯酶的活性，減少乙酰膽堿的破壞， 使乙酰膽堿積累，與非去極化肌松藥在神經(jīng)肌肉接頭處競(jìng)爭(zhēng)受體，從而

2、恢復(fù)正常的神經(jīng)肌肉傳遞。新斯的明的抗膽堿酶活性使琥珀堿膽堿更難 水解，加重其肌松作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)新斯的明和琥珀酰膽堿，新斯的明和筒箭毒同時(shí)作用于蟾賒 腹直肌而產(chǎn)生的抗肌松作用，探究新斯的明對(duì)筒箭毒，琥珀酰膽堿的肌 松作用的影響。（三）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況，體型相當(dāng)?shù)捏纲d60只（來(lái)自動(dòng)物房）（四）實(shí)驗(yàn)材料1、試劑（由醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供） 10-3氯乙酰膽堿溶液，10-3氯化琥珀酰膽堿溶液，2X10-4氯化筒箭 毒 堿溶液，任氏液，022、器材（由醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供）生物信號(hào)處理系統(tǒng)，張力換能器，蛙類手術(shù)器械，蛙板，蛙釘，麥?zhǔn)显?槽，鐵支架，雙凹夾，培養(yǎng)皿，燒杯，絲線，注射器，滴管等。（五）觀察指標(biāo)蟾賒腹

3、直肌的活動(dòng)曲線。（六）實(shí)驗(yàn)步驟與方法1、動(dòng)物處理將60只蟾賒隨機(jī)分為6組，為甲A,甲B,甲C,乙A,乙B,乙Co每組10只。2、實(shí)驗(yàn)操作Q對(duì)6組蟾賒分別制備離體腹直肌標(biāo)本。b實(shí)驗(yàn)裝置將張力換能器與生物信號(hào)處理系統(tǒng)相連，并通過(guò)雙凹夾固定 在鐵支架上，麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)加入5 0ml常溫任氏液。C儀器準(zhǔn)備MSP- 0 0 7生物信號(hào)處理系統(tǒng)：信號(hào)選擇：張力；控制： 增益4、紙速lmn必濾波：50Hz。d標(biāo)本連接將張力換能器一段連接離體腹直肌標(biāo)本，另一端與通氧氣鉤 連接，使其置于5 Oml常溫任氏液麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)，打開(kāi)氧氣，調(diào)整氣流使 其不影響標(biāo)本。腹直肌標(biāo)本的前負(fù)荷為50g左右。C給藥順序(1)穩(wěn)定1 Oml

4、 n描記一段正常曲線。加入10 3氯乙酰膽堿溶液 0 .2ml,觀察腹直肌的曲線，作用明顯后立即用任氏液換洗3 次，待基線穩(wěn)定。 甲A組分別加入任氏液0 .4ml，甲E組加入10 3氯化琥珀酰 膽堿0 .2ml、任氏液0 .2ml，甲C組分 別加入氯化琥珀酰膽堿 0 .2ml、新斯的明0 .2ml。觀察腹直肌的活動(dòng)曲線，作用明顯 后，記錄各組肌張力。(3)乙A組分別加入任氏液0 ,4ml，乙E組加入10 3筒箭毒0 .2ml、任氏液0 .2ml，乙C組分別加入筒 箭毒0 .2ml、新斯的 明0 .2ml o觀察腹直肌的活動(dòng)曲線，作用明顯后，記錄各組肌 張力。(七) 實(shí)驗(yàn)記錄加入藥品后分別記錄每

5、組離體腹直肌標(biāo)本的肌張力。實(shí)驗(yàn)記錄列表如下:X12345678910甲A甲B甲C乙A乙B乙C（A）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理 分別計(jì)算甲A,甲B,甲C乙A,乙B,乙C六組數(shù)據(jù)的平均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差，標(biāo) 準(zhǔn)誤。用方差分析的方法分別處理甲B、甲C和甲A,乙B乙C和乙A數(shù) 據(jù)差異 有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從而驗(yàn)證新斯的明對(duì)筒箭毒和琥珀堿膽堿肌松作用有無(wú)影響。（九）實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1腹直肌標(biāo)本對(duì)藥物的敏感性有個(gè)體差異，蟾賒腹直肌對(duì)藥物較不敏 感，因此給藥量可以根據(jù)實(shí)際情況酌情增減。2. 懸掛腹直肌時(shí)，相連的線必須垂直。3. 加藥時(shí)不要將藥液滴在連線和麥?zhǔn)显〔郾谏希瑧?yīng)直接滴在液面上。4. 每支注射器只能用來(lái)抽取一種藥物，不要相互混淆。

6、5. 實(shí)驗(yàn)中不能隨便改變儀器設(shè)置參數(shù)及標(biāo)本的負(fù)荷量。6. 腹直肌在加藥前無(wú)自發(fā)的節(jié)律性收縮。（十）實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)期新斯的明可使筒箭毒對(duì)腹直肌的肌松作用減弱，其對(duì)筒箭毒的肌松作 用有拮抗作用。新斯的明對(duì)琥珀酰膽堿的肌松作用無(wú)顯著影響。（十一）實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論1. 筒箭毒堿能與ACh競(jìng)爭(zhēng)神經(jīng)肌肉接頭的N膽堿受體，但不激動(dòng)受 體，能競(jìng)爭(zhēng)性阻斷ACh的除極化作用使骨骼肌松弛。新斯的明可通過(guò)抑制膽堿酯酶使ACh聚集，與筒箭毒競(jìng)爭(zhēng)受體，產(chǎn)生拮抗肌松的作用。2.珀酰膽堿的分子結(jié)構(gòu)與ACh相似，能與神經(jīng)肌肉接頭后膜的膽堿受體有 較強(qiáng)的親和力，且在神經(jīng)肌肉接頭處不易被膽堿酯酶分解，因而產(chǎn)生與ACh相似但持久的除極化作用，使神經(jīng)肌肉接頭的N膽堿受 體 不能對(duì)ACh起反應(yīng)，此時(shí)神經(jīng)肌肉接頭的阻滯方式已由除極化轉(zhuǎn)變?yōu)榉?除極化，從而使骨骼肌松弛。新斯的明拮抗膽堿酯酶活性，使琥珀酰膽堿更難水解，加重其肌松作 用。（十二）參考文獻(xiàn)1、楊寶峰.藥理