樣品的制備、保存

1、課程名稱食品理化檢測技術(shù)授課班級(jí)營養(yǎng)1431 授課時(shí)間2016.3.2、4授課時(shí)數(shù)4 本次內(nèi)容樣品采集、制備、保存教具多媒體 教學(xué)目標(biāo) 能力（技能）目標(biāo)知識(shí)目標(biāo) 能根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)對 象進(jìn)行正確采樣。 能進(jìn)行溶液配制計(jì) 算。 掌握采樣步驟、四分法定義； 掌握樣品常見預(yù)處理方式； 了解超臨界、微波、超聲波 萃取技術(shù)。 重點(diǎn)溶液配制、采樣步驟、四分法 難點(diǎn) 超臨界萃取、超聲萃取、微波萃取 能力訓(xùn)練方式方法講解、問答、互動(dòng) 教學(xué)環(huán)節(jié)時(shí)間安排 復(fù)習(xí)：5min 講解、互動(dòng)：75min 小結(jié)：5min 看書鞏固知識(shí)點(diǎn)：5min 課外作業(yè) 查資料了解超聲的應(yīng)用 范圍 課堂考勤47 參考資料食品理化檢測技術(shù) 預(yù)備

2、知識(shí)預(yù)備知識(shí) 樣品采集、制備、保存樣品采集、制備、保存 一、樣品的采集一、樣品的采集 采樣采樣 從大量的分析對象中抽取有代表性代表性的一部 分樣品作為分析材料的工作。 1.1.采樣的原則采樣的原則 采樣的原則采樣的原則 代表性原則代表性原則 真實(shí)性原則真實(shí)性原則 準(zhǔn)確性原則準(zhǔn)確性原則 及時(shí)性原則及時(shí)性原則 程序性原則程序性原則 2.2.采樣的目的采樣的目的 衛(wèi)生監(jiān)督及質(zhì)量監(jiān)測 監(jiān)測評(píng)價(jià)人群食品營養(yǎng)水平 制訂食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的程度 特殊需要特殊需要：食物中毒、變質(zhì)、偽造、摻假食品 提供新食品資源是否有開發(fā)價(jià)值的數(shù)據(jù) 金花茶金花茶 二、采樣步驟二、采樣步驟 檢檢 樣樣 原始樣品原始樣

3、品 平均樣品平均樣品 復(fù)檢復(fù)檢 檢驗(yàn)檢驗(yàn) 仲裁仲裁/ /備查備查 由組批或貨批中由組批或貨批中 所抽取的樣品所抽取的樣品 將許多份檢樣綜合將許多份檢樣綜合 在一起的樣品在一起的樣品原始樣品經(jīng)過混原始樣品經(jīng)過混 合平均，再抽取合平均，再抽取 其中一部分作為其中一部分作為 分析檢驗(yàn)的樣品分析檢驗(yàn)的樣品 檢驗(yàn)、復(fù)檢、備查樣檢驗(yàn)、復(fù)檢、備查樣 品，每份品，每份0.5Kg 需保留（通常需保留（通常 一個(gè)月）一個(gè)月） 產(chǎn)品樣品采樣記錄產(chǎn)品樣品采樣記錄 （格式樣板）（格式樣板） 樣品樣品 編號(hào)編號(hào) （1 1） 采樣采樣 單位單位 （2 2） 采樣采樣 地點(diǎn)地點(diǎn) 類型類型 （3 3） 樣品樣品 名稱名稱 （4

4、 4） 樣品樣品 類別類別 （5 5） 采樣采樣 時(shí)間時(shí)間 （6 6） 采樣采樣 數(shù)量數(shù)量 （7 7） 樣品樣品 產(chǎn)地產(chǎn)地 （8 8） 包裝形式包裝形式 （9 9）生產(chǎn)生產(chǎn) 批號(hào)批號(hào) （1010） 生產(chǎn)企生產(chǎn)企 業(yè)名稱業(yè)名稱 （1111） 儲(chǔ)存儲(chǔ)存 條件條件 （1212） 定型定型 包裝包裝 散散 裝裝 三、采樣方法三、采樣方法 1.1.隨機(jī)抽樣（完全不分組、排隊(duì)、劃類等）隨機(jī)抽樣（完全不分組、排隊(duì)、劃類等） 簡單隨機(jī)抽樣 系統(tǒng)隨機(jī)抽樣：樣品隨時(shí)間、空間變化 分層隨機(jī) 分段隨機(jī) 2.2.代表性抽樣代表性抽樣 例題例題：某酒廠需生產(chǎn)一批木瓜酒，需對木瓜中所含蛋白 分解酵素進(jìn)行測定?，F(xiàn)采用隨機(jī)抽樣

5、法對四川及其周邊地 區(qū)境內(nèi)各地木瓜蛋白酵素含量進(jìn)行抽樣，抽樣中需注意哪 些環(huán)節(jié)？采用隨機(jī)抽樣法是否正確？ 隨機(jī)抽樣隨意抽樣，對于不均勻樣品必須結(jié)合 代表性取樣。 具體采樣方法具體采樣方法 1.1.均勻的固體樣品均勻的固體樣品 有完整包裝（袋、桶、 箱等）的樣品 無完整包裝（袋、桶、 箱等）的樣品 均均 勻勻 固固 體體 物物 料料 三層五點(diǎn)三層五點(diǎn)：劃分若 干等體積層，每層 的四角和中心點(diǎn)取 得檢樣 采樣件數(shù)：采樣件數(shù)： 原始樣品：原始樣品：雙套回轉(zhuǎn)取雙套回轉(zhuǎn)取 樣管樣管 平均樣品平均樣品:四分法四分法 2/Nn 四分法四分法 將樣品混合均勻并化成十字形，將樣品分為四 份，取對角的兩份混合均勻

6、，再用同樣的方法分四 份，直到獲得平均樣品。 無包裝散樣無包裝散樣 劃分若干等體積層 每層中心和四角各取少量 合并、均勻 平均樣 四分法濃縮 （檢樣） （原始樣品） 黃豆黃豆 2.2.液體樣品液體樣品 包裝體積不太大的 確定采樣數(shù)量 打開包裝混合 分取到所需數(shù)量 搖勻 抽樣 大桶及散裝樣大桶及散裝樣 分層虹吸法 每層500ml 分取到所需數(shù)量 四、檢驗(yàn)樣品的制備四、檢驗(yàn)樣品的制備 制備方法制備方法 粉碎：含水少或含油脂少 勻漿：含水多或含油多 預(yù)干燥：含水多，含油少 脫脂、糖等 五五、樣品預(yù)處理、樣品預(yù)處理 一、預(yù)處理目的一、預(yù)處理目的 二、預(yù)處理的要求二、預(yù)處理的要求 三、預(yù)處理方法三、預(yù)處

7、理方法 定義定義：利用化學(xué)或物理方法對樣品進(jìn)行分解、分解、 提取、濃縮提取、濃縮等操作過程 原則： 消除干擾因素 完整保留被測組分 預(yù)預(yù) 處處 理理 方方 法法 有有 機(jī)機(jī) 物物 破破 壞壞 法法 蒸蒸 餾餾 法法 溶溶 劑劑 提提 取取 法法 直直 接接 溶溶 解解 1、有機(jī)物破壞法、有機(jī)物破壞法 有機(jī)物破壞法有機(jī)物破壞法 使有機(jī)物在高溫或強(qiáng)氧化條件下破壞，有機(jī)物分解 成氣態(tài)逸散，被測元素以簡單的無機(jī)化合物形式釋放被測元素以簡單的無機(jī)化合物形式釋放 出來。出來。 應(yīng)用應(yīng)用：測定金屬元素、無機(jī)鹽（如：S、P、N等）的 預(yù)處理。 分類分類：干法灰化和濕法消化 概念概念：食品經(jīng)高溫灼燒后的殘留物就

8、叫做灰分。 灰分中的無機(jī)成分與食品中原有的無機(jī)成分在 數(shù)量和組成上是否完全相同？ 灰化灰化 1.易揮發(fā)元素逸散（氯、碘、鉛鉛）使灰分減少 2.金屬氧化物形成碳酸鹽使灰分增加 干法灰化的缺點(diǎn)干法灰化的缺點(diǎn) 缺缺 點(diǎn)點(diǎn) 坩堝有吸留作用，使測坩堝有吸留作用，使測 定結(jié)果和回收率降低。定結(jié)果和回收率降低。 灼燒溫度高，造成易揮灼燒溫度高，造成易揮 發(fā)元素（如：發(fā)元素（如：Hg、Pb）的）的 損失。損失。 所需時(shí)間長。所需時(shí)間長。 灰化助劑灰化助劑 雙氧水、硝酸雙氧水、硝酸：灼燒后完全消失，不增加殘灰重 量。 氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽等：使灰分增重，需做 空白試驗(yàn)空白試驗(yàn)。 濕法消化

9、濕法消化的優(yōu)、缺點(diǎn)的優(yōu)、缺點(diǎn) 缺缺 點(diǎn)點(diǎn) 試劑消耗較多，必須做空試劑消耗較多，必須做空 白試驗(yàn)。白試驗(yàn)。 消化初期易產(chǎn)生大量泡消化初期易產(chǎn)生大量泡 沫外溢。沫外溢。 產(chǎn)生大量有毒氣體，產(chǎn)生大量有毒氣體， 需在通風(fēng)廚中進(jìn)行。需在通風(fēng)廚中進(jìn)行。 微波消解技術(shù)微波消解技術(shù) 原理原理：利用微波的穿透性和激活反應(yīng)能力，加熱加熱密閉容器內(nèi) 的試劑和樣品，可使制樣容器內(nèi)壓力增加，反應(yīng)溫度提高壓力增加，反應(yīng)溫度提高， 從而大大提高了反應(yīng)速率。 特點(diǎn)特點(diǎn)：縮短制備時(shí)間，控制反應(yīng)條件，減少對環(huán)境的污染 方法方法：HNO3、HCl、HF、H2O2與H2O共熱，直至樣液透明。 適用適用：任何樣品，尤其是高油樣品。 注

10、意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1.加酸后觀察放置一段時(shí)間加酸后觀察放置一段時(shí)間 再放入消解爐；再放入消解爐； 2.使用高沸點(diǎn)酸時(shí)注意溫度； 3.樣品和試劑體積小于20ml較佳。 2 2、溶劑抽提法、溶劑抽提法 分類分類：浸提法和萃取法 振蕩浸提法振蕩浸提法 超聲提取法超聲提取法 索氏提取索氏提取 器器 萃取法萃取法 萃取法萃取法用適當(dāng)?shù)娜軇⒁后w樣品中的被測 組分（或雜質(zhì)）提取出來，即“液液萃取法”。 萃取劑的選擇萃取劑的選擇： 萃取劑與液體樣品的溶劑互不相溶且比重不同。 萃取劑對被測組分的溶解度 被測組分在原溶 劑中的溶解度，對其它組分溶解度很小。 經(jīng)蒸餾可使萃取劑與被測組分分開。 萃取次數(shù)萃取次數(shù) 4-

11、5次次 1.超臨界流體萃?。ǔR界流體萃取（SFE） 較低溫度下，增加氣體壓力，氣體轉(zhuǎn)化成液體；溫度增高 時(shí)，液體的體積增大，對于某一特定的物質(zhì)而言總存在一 個(gè)臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc），高于臨界溫度和臨 界壓力后，物質(zhì)不會(huì)成為液體或氣體，這一點(diǎn)就是臨界點(diǎn)。 在臨界點(diǎn)以上的范圍內(nèi)，物質(zhì)狀態(tài)處于氣體和液體之間，物質(zhì)狀態(tài)處于氣體和液體之間， 這個(gè)范圍之內(nèi)的流體成為超臨界流體（這個(gè)范圍之內(nèi)的流體成為超臨界流體（SFSF） 利用超臨界流體強(qiáng)溶解性萃取利用超臨界流體強(qiáng)溶解性萃取 常用萃取劑常用萃取劑 二氧化碳二氧化碳、一氧化亞氮、六氟化硫、乙烷、庚烷 、氨 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)： 臨界溫度和臨界壓力低(Tc

12、=31.1，Pc=7.38MPa) 試劑無毒、廉價(jià)； 穩(wěn)定性好、安全無毒、不燃燒、不污染環(huán)境，可避免產(chǎn)品 的氧化： CO2的萃取物中不含硝酸鹽和有害的重金量，無有害溶劑 的殘留 利用超聲波輻射壓強(qiáng)超聲波輻射壓強(qiáng)產(chǎn)生的強(qiáng)烈空化應(yīng)效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)、 擾動(dòng)效應(yīng)、高的加速度、乳化、擴(kuò)散、擊碎和攪拌作用等 多級(jí)效應(yīng)，增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透 力力，從而加速目標(biāo)成分進(jìn)入溶劑，促進(jìn)提取的進(jìn)行。 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：無需高溫、常壓萃取 2.超聲波萃取超聲波萃取 3.微波萃取微波萃取 3 3、蒸餾法（揮發(fā)分離法）、蒸餾法（揮發(fā)分離法） 蒸餾法蒸餾法利用物質(zhì)的揮發(fā)性的差

13、異（即混合物 中各組分揮發(fā)性不同）將物質(zhì)進(jìn)行分離的方法 蒸餾方法蒸餾方法 常壓蒸餾常壓蒸餾 減壓蒸餾減壓蒸餾 水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾 被測組分在常壓下被測組分在常壓下 受熱不分解或沸點(diǎn)受熱不分解或沸點(diǎn) 不太高的物質(zhì)。不太高的物質(zhì)。 常壓下受熱易分解常壓下受熱易分解 或沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或沸點(diǎn)太高的物質(zhì) 水和與水互不相溶水和與水互不相溶 液體一起蒸餾，水液體一起蒸餾，水 蒸氣起加熱作用蒸氣起加熱作用 水蒸氣蒸餾裝置圖水蒸氣蒸餾裝置圖 減壓蒸餾裝置圖減壓蒸餾裝置圖 4 4、色層分離法、色層分離法 又稱為層析分離法或色譜分離法，是一種在載 體上進(jìn)行物質(zhì)分離的一系列方法的總稱。 根據(jù)固定相狀態(tài)根據(jù)固定相狀態(tài)

14、 柱層析法 紙層析法 薄層層析法 層析缸需要蓋蓋層析缸需要蓋蓋 子么？子么？ 根據(jù)兩相狀態(tài) 根據(jù)分離原理 氣相色譜 液相色譜 超臨界流體 利用吸附劑對不同利用吸附劑對不同 組分的物理吸附性組分的物理吸附性 能的差異進(jìn)行分離能的差異進(jìn)行分離 利用不同組分在兩利用不同組分在兩 相中的不同分配系相中的不同分配系 數(shù)來進(jìn)行分離數(shù)來進(jìn)行分離 利用各組分與離子利用各組分與離子 交換樹脂的親和力交換樹脂的親和力 的不同來分離的不同來分離 5 5、化學(xué)分離法、化學(xué)分離法 （1）沉淀分離法）沉淀分離法 （2）皂化法和磺化）皂化法和磺化法法 目的：除去樣品中油脂或處理油脂中其它成分 （3）掩蔽法）掩蔽法 6 6、

15、濃縮法、濃縮法 四、四、 樣品的保存樣品的保存 1、保存目的、保存目的 防止樣品發(fā)生受潮、揮發(fā)、風(fēng)干、變質(zhì)等現(xiàn)象， 確保其成分不發(fā)生任何變化。 2、保存方法、保存方法 3、注意事項(xiàng)、注意事項(xiàng) 第二節(jié)第二節(jié) 檢驗(yàn)常識(shí)檢驗(yàn)常識(shí) 1.實(shí)驗(yàn)用水分類實(shí)驗(yàn)用水分類 2.2.實(shí)驗(yàn)試劑分類實(shí)驗(yàn)試劑分類 分類分類 優(yōu)級(jí)純、G.R 分析純，A.R 化學(xué)純C.P 實(shí)驗(yàn)試劑，L.R 3.3.器皿的要求器皿的要求 4.4.標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 4.1 4.1直接配制法（基準(zhǔn)物質(zhì)）直接配制法（基準(zhǔn)物質(zhì)） 純度99.9%； 物質(zhì)組成與化學(xué)式相符； 試劑分子量大； 試劑性質(zhì)穩(wěn)定 常用基準(zhǔn)試劑：常用基準(zhǔn)試劑：K K2 2C

16、rCr2 2O O7 7; NaC; NaC2 2O O4 4; H; H2 2C C2 2O O4 4.2H.2H2 2O O； NaNa2 2B B4 4O O7 7.10H.10H2 2O O；CaCOCaCO3 3；NaClNaCl；NaNa2 2COCO3 3 4.2 4.2 間接配制法間接配制法 標(biāo)定法：標(biāo)定法：利用基準(zhǔn)物質(zhì)確定溶液準(zhǔn)確濃度 比較法：比較法：用一種已知濃度的標(biāo)液來確定另一種溶 液的濃度方法。 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 基準(zhǔn)物0.2g，滴定消耗體積20ml為佳。 5.溶液濃度的表示方法溶液濃度的表示方法 （1）物質(zhì)的量濃度）物質(zhì)的量濃度 nB cB = V 單位：mol/

17、L mB = cBVMB （2）質(zhì)量濃度）質(zhì)量濃度 B = m V 單位：g/L mB = BV （3）分?jǐn)?shù)濃度：）分?jǐn)?shù)濃度： 質(zhì)量分?jǐn)?shù)： B = mB m mB =BV 體積分?jǐn)?shù)： B = VB V VB =BV （4 4）比例濃度：）比例濃度： 體積比濃度體積比濃度： （VA+VB）如：（1+3）H2SO4 （溶質(zhì)體積+溶劑體積） 質(zhì)量比濃度：質(zhì)量比濃度： （mA+mB） 如：（1+100）鉻黑T-氯化鈉 （溶質(zhì)質(zhì)量 + 溶劑質(zhì)量） （5）滴定度）滴定度 1mL滴定劑溶液（A）相當(dāng)于待測物質(zhì)（B）的質(zhì)量，用 T B / A 表示。單位：g/ml。 優(yōu)點(diǎn)：被測組分的質(zhì)量 = 滴定度滴定劑體積。即：mB = TB/AVA 例：例：直接法測定還原糖時(shí)堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定 習(xí)題練習(xí) 計(jì)算配制下列溶液所需的試劑質(zhì)量或體積。 配制（NaOH）= 4g/