南醫(yī)大藥物分析第06章-芳酸類非甾體抗炎藥物的分析-2015

1、芳酸類非甾體抗炎藥物的分析芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第六章第六章學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求 1 1、掌握：芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)；、掌握：芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)；典型藥物的鑒別、含量測(cè)定方法與原理；典型藥物的鑒別、含量測(cè)定方法與原理； 2 2、熟悉、熟悉 ：典型藥物的雜質(zhì)種類、檢查方法與含：典型藥物的雜質(zhì)種類、檢查方法與含量限度；量限度； 3 3、了解：影響本類藥物穩(wěn)定性的因素。、了解：影響本類藥物穩(wěn)定性的因素。結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)2特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查3 含量測(cè)定含量測(cè)定4本章內(nèi)容本章內(nèi)容芳酸芳酸COOH芳酸，芳酸，既有芳環(huán)又有羧酸既有芳環(huán)又有羧酸, 絕大多數(shù)

2、直接與苯環(huán)相連絕大多數(shù)直接與苯環(huán)相連第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)COOHHOCH3ORRNROHCH3ORSNOOOHNHROCH3OROOHRHNROOHHNRORO水楊酸類水楊酸類鄰氨基苯甲酸類鄰氨基苯甲酸類苯并噻嗪甲酸類苯并噻嗪甲酸類鄰氨基苯乙酸類鄰氨基苯乙酸類芳基丙酸類芳基丙酸類吲哚乙酸類吲哚乙酸類一、一、典典型型藥藥物物的的結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)特特點(diǎn)點(diǎn)OROOHR1、水楊酸類、水楊酸類阿司匹林阿司匹林COOHOCOCH3OHCOOH水楊酸水楊酸OOHOOOHFFOHOOH雙水揚(yáng)酯雙水揚(yáng)酯二氟尼柳二氟尼柳HNROOH2、鄰氨基苯甲酸類、鄰氨基苯甲酸類HNRORO3、鄰氨基苯乙酸類、鄰氨基苯乙

3、酸類HNOOHCH3CH3HNONaOOClCl甲酚那酸甲酚那酸雙氯芬酸鈉雙氯芬酸鈉HOCH3ORR4、芳基丙酸類、芳基丙酸類HOCH3OCH3CH3HOCH3OOHOCH3OOCH3布洛芬布洛芬酮洛芬酮洛芬萘普生萘普生NROHCH3ORSNOOOHNHROCH35、吲哚乙酸類、吲哚乙酸類6、苯并噻嗪甲酸類、苯并噻嗪甲酸類NOHCH3OOOClH3CSNOOOHNHOCH3NSNOOOHNHOCH3SNCH3吲哚美辛吲哚美辛吡羅昔康吡羅昔康美洛昔康美洛昔康其他非甾體抗炎藥其他非甾體抗炎藥HNOCH3CH3SCH3OONO2HOHNCH3O尼美舒利尼美舒利對(duì)乙酰氨基酚對(duì)乙酰氨基酚 結(jié)構(gòu)分析：結(jié)構(gòu)

4、分析： 包括：芳酸、芳酸酯、芳酸鹽、酰胺包括：芳酸、芳酸酯、芳酸鹽、酰胺 共同點(diǎn)：苯環(huán)、羧基（或成酯、酰胺）共同點(diǎn)：苯環(huán)、羧基（或成酯、酰胺） 不同點(diǎn)：不同的取代基（如酚羥基、芳氨基，苯基不同點(diǎn)：不同的取代基（如酚羥基、芳氨基，苯基等）等） 二、理化性質(zhì)二、理化性質(zhì)（一）物理性質(zhì)（一）物理性質(zhì) 均為固體，具有一定的熔點(diǎn)。除芳酸堿金屬鹽易溶于水外，均為固體，具有一定的熔點(diǎn)。除芳酸堿金屬鹽易溶于水外，多數(shù)藥物在水中多數(shù)藥物在水中微溶微溶或或不溶不溶，能溶于沸水、有機(jī)溶劑如乙醇、，能溶于沸水、有機(jī)溶劑如乙醇、乙醚和氯仿等。乙醚和氯仿等。 （二）、化學(xué)性質(zhì)（二）、化學(xué)性質(zhì)1、酸性、酸性 芳酸具游離羧基

5、，呈酸芳酸具游離羧基，呈酸性，其性，其pKa在在36之間，屬之間，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸。中等強(qiáng)度的酸或弱酸。COOHRCOO-R + H+、CH3、NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱等斥電子取代基存在使酸性減弱; 、X、NO2、OH等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng)等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng);、鄰位取代、鄰位取代間位、對(duì)位取代，尤其是鄰位間位、對(duì)位取代，尤其是鄰位取代酚羥基取代酚羥基，由，由于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)于形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng) OHOCOH水楊酸水楊酸酸性順序：酸性順序：OHOCOHOOCOHCOOCOH水楊酸水楊酸阿司匹林阿司匹林苯甲酸苯甲酸3.吸收光譜特性吸收光譜特性

6、本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)苯環(huán)和和特征取代基特征取代基，均具有紫外，均具有紫外和紅外特征光譜，應(yīng)用于鑒別，制劑均勻度，溶出度或釋放度和紅外特征光譜，應(yīng)用于鑒別，制劑均勻度，溶出度或釋放度的檢查，和含量測(cè)定。的檢查，和含量測(cè)定。2.水解性水解性 存在存在酯鍵，酰胺鍵酯鍵，酰胺鍵均可發(fā)生水解。芳酸酯可水解，利用均可發(fā)生水解。芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別；利用芳酸酯水解定量其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別；利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測(cè)定含量；芳酸酯類藥物還應(yīng)檢查

7、因水解而引入的特殊雜質(zhì)。測(cè)定含量；芳酸酯類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)。4. 基團(tuán)或元素特性基團(tuán)或元素特性 取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進(jìn)行鑒別和含量取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定。如具有酚羥基的藥物可用測(cè)定。如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應(yīng)鑒別；具芳伯氨基反應(yīng)鑒別；具芳伯氨基的藥物可用重氮化的藥物可用重氮化偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量；酮洛芬的二苯甲酮可與苯肼縮合顯色等量；酮洛芬的二苯甲酮可與苯肼縮合顯色等.第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)1、FeCl3反應(yīng)反應(yīng)、水楊酸反應(yīng)水楊酸反應(yīng) + FeCl3+ 3 HCl

8、OHOOHOOOFeOHpH=4-6紫堇色配合物紫堇色配合物適用于：水楊酸或水解后產(chǎn)生水楊酸適用于：水楊酸或水解后產(chǎn)生水楊酸如：阿司匹林、雙水楊酯、二氟尼柳如：阿司匹林、雙水楊酯、二氟尼柳直接直接：水楊酸、二氟尼柳：水楊酸、二氟尼柳水楊酸（水楊酸（Ch.P 2010）鑒別鑒別 （1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即滴，即顯紫堇色。顯紫堇色。間接間接：阿司匹林、雙水楊酯：阿司匹林、雙水楊酯阿司匹林（阿司匹林（Ch.P 2010）鑒別鑒別 （1）取本品約）取本品約0.1g，加水，加水10ml，煮沸，放冷，加，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇

9、色。滴，即顯紫堇色。 阿司匹林水楊酸、酚羥基反應(yīng)酚羥基反應(yīng)適用于：具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物適用于：具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物藍(lán)紫色配位化合物 FeClOHAr3OHRNHCOCH3OH3+ FeCl3NHCOCH3O- Fe + 3HCl3吡羅昔康吡羅昔康美洛昔康美洛昔康烯醇式羥基烯醇式羥基HOCH3OONHNO2NO2NH2+HOCH3ON NHO2NNO2H2SO42、縮合反應(yīng)、縮合反應(yīng)酮洛芬鑒別（酮洛芬鑒別（Ch.P 2010）二苯甲酮與二硝基苯肼縮合二苯甲酮與二硝基苯肼縮合橙色沉淀橙色沉淀3、重氮化、重氮化偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)芳香第一胺芳香第一胺類鑒別反應(yīng)：具芳伯氨基或潛

10、在芳伯氨基的藥物類鑒別反應(yīng)：具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物HONH2.HClHON+N.HClNOHNOHHClNaNO2OHHONHCOCH3對(duì)乙酰氨基酚鑒別（對(duì)乙酰氨基酚鑒別（Ch.P 2010）紅色偶氮化物紅色偶氮化物4、氧化反應(yīng)、氧化反應(yīng)甲酚那酸（甲酚那酸（Ch.P2010）吲哚美辛（吲哚美辛（Ch.P2010）5、水解反應(yīng)、水解反應(yīng)23Na CO 硫酸阿司匹林水楊酸鈉醋酸鈉水楊酸（白色） 醋酸臭氣COOHOCOCH3COONaOHCOOHOH阿司匹林（阿司匹林（Ch.P2010）可溶于醋酸銨（測(cè)定熔點(diǎn)），水楊酸白色雙水楊酯稀鹽酸 NaOH6、特征元素反應(yīng)、特征元素反應(yīng)1、氯元素、氯元

11、素2、硫元素、硫元素美洛昔康（美洛昔康（Ch.P2010）雙氯芬酸鈉（雙氯芬酸鈉（Ch.P2010）7、光譜方法、光譜方法1. 最大吸收波長(zhǎng)最大吸收波長(zhǎng) 雙氯芬酸鈉雙氯芬酸鈉 276 nm2.最大與最小吸收波長(zhǎng)最大與最小吸收波長(zhǎng)布洛芬：最大：布洛芬：最大：265nm，273nm最小：最?。?45nm，271nm3.吸光度法吸光度法甲芬那酸甲芬那酸4.吸光度比值法吸光度比值法二氟尼柳二氟尼柳（1）、紫外）、紫外（2）、紅外）、紅外(自學(xué)自學(xué))阿司匹林阿司匹林布洛芬布洛芬8、色譜法、色譜法、薄層色譜、薄層色譜二氟尼柳膠囊（二氟尼柳膠囊（Ch.P2010）8、色譜法、色譜法、高效液相色譜、高效液相色

12、譜阿司匹林片（阿司匹林片（Ch.P2010）大量用于制劑分析的含量測(cè)定項(xiàng)大量用于制劑分析的含量測(cè)定項(xiàng)阿司匹林、甲芬那酸、雙氯芬酸鈉、布洛芬、萘普生、阿司匹林、甲芬那酸、雙氯芬酸鈉、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、對(duì)乙酰氨基酚等制劑才用含量測(cè)定項(xiàng)下色譜吲哚美辛、對(duì)乙酰氨基酚等制劑才用含量測(cè)定項(xiàng)下色譜圖與對(duì)照品比較保留時(shí)間。圖與對(duì)照品比較保留時(shí)間。第三節(jié)、特殊雜質(zhì)檢查第三節(jié)、特殊雜質(zhì)檢查一、一、Aspirin 及雙水楊酯中及雙水楊酯中水楊酸與有關(guān)雜質(zhì)的檢查水楊酸與有關(guān)雜質(zhì)的檢查*1.水楊酸的檢查水楊酸的檢查: 來(lái)源來(lái)源 : 原料殘存（生產(chǎn)過程中乙酰化不完全）原料殘存（生產(chǎn)過程中乙?；煌耆?水解產(chǎn)生（

13、貯存過程中水解產(chǎn)生）水解產(chǎn)生（貯存過程中水解產(chǎn)生）ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+生產(chǎn)工藝：生產(chǎn)工藝：COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。(CH3CO)2OOCOCH3貯藏水解：貯藏水解：COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。OCOCH3ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+OOCOOHOHH2OOO1、游離水楊酸、游離水楊酸紅棕到深棕色紅棕到深棕色一、阿司匹林的特殊雜質(zhì)檢查一、阿司匹林的特殊雜質(zhì)檢查 2、其他有關(guān)物質(zhì)、其他有關(guān)物質(zhì)原料原料 阿司匹林無(wú)游離酚羥基

14、，不與阿司匹林無(wú)游離酚羥基，不與Fe3+作用，而水楊酸則可與之反應(yīng)生成紫堇作用，而水楊酸則可與之反應(yīng)生成紫堇色，可檢出色，可檢出1g的游離水楊酸。的游離水楊酸。水楊酸對(duì)照液水楊酸對(duì)照液阿司匹林阿司匹林硫酸鐵銨硫酸鐵銨對(duì)照液顏色對(duì)照液顏色 供試液顏色供試液顏色比色法：比色法：合格合格+Fe3+H2OFeOH紫堇色紫堇色2005版藥典版藥典游離水楊酸檢查游離水楊酸檢查 限量限量: 原料：原料：0.1%； 阿司匹林片：阿司匹林片： 0.3%； 阿司匹林腸溶片：阿司匹林腸溶片：1.5%； 阿司匹林栓：阿司匹林栓： 3.0%（HPLC法）法） 阿司匹林泡騰片：阿司匹林泡騰片：3.0%（HPLC法）法）色

15、譜柱色譜柱: C18 流動(dòng)相：流動(dòng)相：乙腈乙腈-四氫呋喃四氫呋喃-冰醋酸冰醋酸-水水（20:5:5:70） 檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)波長(zhǎng)： 303nm供試液供試液：10mg/ml水楊酸對(duì)照水楊酸對(duì)照：10g/ml定量方法定量方法：外標(biāo)法：外標(biāo)法游離水楊酸游離水楊酸和和有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)色譜條件檢測(cè)色譜條件色譜柱色譜柱: C18 流動(dòng)相：流動(dòng)相：A: 乙腈乙腈-四氫呋喃四氫呋喃-冰醋酸冰醋酸-水水（20:5:5:70） B：乙腈：乙腈 梯度洗脫梯度洗脫檢測(cè)波長(zhǎng)檢測(cè)波長(zhǎng)： 276nm供試液供試液：10 mg/ml 對(duì)照液對(duì)照液：供試液：供試液200倍稀釋倍稀釋靈敏度試驗(yàn)靈敏度試驗(yàn)：2000倍稀釋倍稀釋定量

16、方法定量方法：自身稀釋對(duì)照法：自身稀釋對(duì)照法2010版藥典采用版藥典采用高效液相色譜法高效液相色譜法 主成分自身對(duì)照法主成分自身對(duì)照法樣品液稀釋樣品液稀釋 對(duì)照液對(duì)照液樣品液樣品液溶劑峰溶劑峰樣品峰樣品峰(CV)L(%)=100S(CV)=100(CV)C=100AACk,KCL=C對(duì)照樣品對(duì)照樣品對(duì)照對(duì)照品樣品樣品對(duì)照樣品（進(jìn)樣量一樣，）若樣品雜質(zhì)峰面積為對(duì)照品的峰面積的倍數(shù) 則：CL(%)=100C0.05100100.5對(duì)照樣品供試液供試液：10 mg/ml 對(duì)照液：對(duì)照液： 50 g/ml 二、甲芬那酸中的二、甲芬那酸中的2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺原料的原料的2,3-二甲基苯胺容易發(fā)

17、生殘留，藥典要二甲基苯胺容易發(fā)生殘留，藥典要求采用求采用GC法檢查，限度要求為法檢查，限度要求為GC法法 柱：毛細(xì)管柱，固定液：聚乙二醇（柱：毛細(xì)管柱，固定液：聚乙二醇（PEG-20M) 供試液：供試液：25mg/ml 對(duì)照品：對(duì)照品：2.5 g/ml 雜質(zhì)峰雜質(zhì)峰A不得大于對(duì)照品的峰不得大于對(duì)照品的峰A 限量：？限量：？ 0.01%！合成過程中可能產(chǎn)生合成過程中可能產(chǎn)生多種苯或聯(lián)苯類中間多種苯或聯(lián)苯類中間體及副產(chǎn)物，以及其體及副產(chǎn)物，以及其他有關(guān)物質(zhì)。他有關(guān)物質(zhì)。 Ch.P2010采用采用TLC和和HPLC法法 對(duì)照溶液一定量供試品溶液供試品溶液稀釋溶劑溶解S三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查三、

18、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品自身稀釋對(duì)照法：供試品自身稀釋對(duì)照法： 1. TLC 高低濃度對(duì)比法高低濃度對(duì)比法 方法：方法： 對(duì)照溶液一定量供試品溶液供試品溶液稀釋溶劑溶解 S供試品溶液：供試品溶液：10 mg/ml對(duì)照品溶液：供試品溶液稀釋對(duì)照品溶液：供試品溶液稀釋50 g/ml供供試試品品對(duì)對(duì)照照品品 判斷：判斷： 供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對(duì)照溶供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度）液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度） 控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)2. HPLC有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)B 檢測(cè)檢測(cè) ：254nm 條件：條件：C18（250mm 4.6mm) 流動(dòng)相：流動(dòng)相：H

19、2 O-MeOH-乙腈乙腈-冰醋酸（冰醋酸（55：23：30：2） 供試品溶液：供試品溶液：10mg/ml 對(duì)照品溶液：對(duì)照品溶液：50 g/ml調(diào)靈敏度：對(duì)照品進(jìn)樣調(diào)靈敏度：對(duì)照品進(jìn)樣5l,主峰高為滿量程的主峰高為滿量程的25%測(cè)定：進(jìn)對(duì)照品和供試品各測(cè)定：進(jìn)對(duì)照品和供試品各5l，記錄譜圖的保留時(shí)，記錄譜圖的保留時(shí)間是主成分出峰時(shí)間的間是主成分出峰時(shí)間的3倍，供試品各雜質(zhì)峰的面積倍，供試品各雜質(zhì)峰的面積的和不得大于對(duì)照品溶液主峰的面積。的和不得大于對(duì)照品溶液主峰的面積。問題問題：如果存在雜質(zhì)對(duì)照品和其它有關(guān)物質(zhì)，不如果存在雜質(zhì)對(duì)照品和其它有關(guān)物質(zhì)，不僅需要控制單個(gè)雜質(zhì)的限量，又需要控制有關(guān)物

20、質(zhì)僅需要控制單個(gè)雜質(zhì)的限量，又需要控制有關(guān)物質(zhì)的總雜質(zhì)限量，該如何進(jìn)行特殊雜質(zhì)的測(cè)定？的總雜質(zhì)限量，該如何進(jìn)行特殊雜質(zhì)的測(cè)定？四、萘普生中四、萘普生中6-甲氧基甲氧基-2-萘乙酮等有關(guān)物質(zhì)檢查萘乙酮等有關(guān)物質(zhì)檢查供試液供試液：0.5mg/ml6-甲氧基甲氧基-2-萘乙酮對(duì)照萘乙酮對(duì)照：50g/ml對(duì)照溶液：對(duì)照溶液：2.5 g/ml萘萘+0.5 g/ml雜質(zhì)雜質(zhì)色譜柱色譜柱: C18流動(dòng)相：流動(dòng)相：甲醇甲醇-0.01mol/L磷酸二磷酸二氫鉀（氫鉀（75:25） 檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)波長(zhǎng)： 240nm五、對(duì)乙酰氨基酚中氨基酚和對(duì)氯苯乙酰胺的檢查五、對(duì)乙酰氨基酚中氨基酚和對(duì)氯苯乙酰胺的檢查條件：條件：

21、C8(辛烷基辛烷基)流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液-MeOH（90：10）檢測(cè)檢測(cè) ：245 nm供試品溶液：供試品溶液：20 mg/ml對(duì)照品溶液：對(duì)照品溶液：1g/ml對(duì)氨基酚，對(duì)氨基酚，20 g/ml對(duì)乙酰氨基酚的混合溶液對(duì)乙酰氨基酚的混合溶液條件：條件： C8(辛烷基辛烷基) 流動(dòng)相：磷酸鹽流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液緩沖液-MeOH（60：40）檢測(cè)檢測(cè) ：245 nm理論塔板數(shù)：不低于理論塔板數(shù)：不低于2000供試品溶液：供試品溶液：20 mg/ml對(duì)照品溶液：對(duì)照品溶液： 1 g/ml對(duì)氯乙酰胺對(duì)氯乙酰胺對(duì)照溶液，進(jìn)樣對(duì)照溶液，進(jìn)樣20 l,調(diào)節(jié)靈敏度，對(duì)氨基酚峰高為滿調(diào)節(jié)靈敏

22、度，對(duì)氨基酚峰高為滿量程的量程的10%測(cè)定：進(jìn)對(duì)照品和供試品各測(cè)定：進(jìn)對(duì)照品和供試品各20l，記錄譜圖的保留時(shí)，記錄譜圖的保留時(shí)間是主成分出峰時(shí)間的間是主成分出峰時(shí)間的4倍，按外標(biāo)法峰面積計(jì)算，對(duì)倍，按外標(biāo)法峰面積計(jì)算，對(duì)氨基酚不得大于氨基酚不得大于0.005%；其他雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)；其他雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照品溶液對(duì)乙酰氨基酚的峰面積（照品溶液對(duì)乙酰氨基酚的峰面積（0.1%）；）；雜質(zhì)總量雜質(zhì)總量不得過乙酰氨基酚面積的不得過乙酰氨基酚面積的5倍（倍（0.5%）。）。本類藥物含量測(cè)定：本類藥物含量測(cè)定：原料藥：主要用酸堿滴定法原料藥：主要用酸堿滴定法制劑：制劑：檢查性定性如溶出度、含量均一

23、度檢查性定性如溶出度、含量均一度-UV法法制劑含量的測(cè)定：制劑含量的測(cè)定：UV法、法、HPLC法法第四節(jié)、含量測(cè)定第四節(jié)、含量測(cè)定1、酸堿滴定法、酸堿滴定法（1）、）、 直接滴定法直接滴定法 pKa 36NaOH 中性乙醇滴定酚酞供試品溶液終點(diǎn)應(yīng)用：應(yīng)用： 阿司匹林、苯甲酸、丙磺舒、水楊酸、二氟尼柳、阿司匹林、苯甲酸、丙磺舒、水楊酸、二氟尼柳、雙水楊酯、尼美舒利、萘普生和布洛芬等雙水楊酯、尼美舒利、萘普生和布洛芬等COOHOCOCH3 NaOH COONaOCOCH3 例：阿司匹林例：阿司匹林+阿司匹林阿司匹林 ChP取本品約取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚

24、酞指示液顯中性對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液，溶解后，加酚酞指示液3滴，用滴，用0.1mo1/L氫氧化鈉滴定氫氧化鈉滴定液滴定。每液滴定。每l ml的氫氧化鈉滴定液（的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于18.02mg的的C9H8O4。 中性乙醇中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯鍵水解。溶解阿司匹林且防止酯鍵水解?！爸行灾行浴笔菍?duì)中和法所用的指是對(duì)中和法所用的指示劑而言示劑而言 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速 缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定） 酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸） 適用范圍：不能用于含水楊

25、酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測(cè)定含量測(cè)定【阿司匹林阿司匹林】 ChP（ 2010）取本品約取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液，溶解后，加酚酞指示液3滴，滴，用氫氧化鈉滴定液（用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定。每）滴定。每l ml的氫的氫氧化鈉滴定液（氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于18.02mg的的C9H8O4。2. 2. 剩余量滴定法剩余量滴定法返（回）滴定法：返（回）滴定法：應(yīng)用：美洛昔康具備烯

26、醇式羥基，顯一元酸性，應(yīng)用：美洛昔康具備烯醇式羥基，顯一元酸性，由于其甲醇、乙醇及水溶性欠佳，采用回滴法由于其甲醇、乙醇及水溶性欠佳，采用回滴法測(cè)定。測(cè)定。0SBBBAV -VFT% =100%W（）含量（ ） 本品約本品約0.4g加入過量、定量加入過量、定量的的NaOH（A)已知濃度的已知濃度的HCl (B) 回滴過量回滴過量NaOH溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán)變色范圍變色范圍 pH6.0 (黃黃)7.6 (藍(lán)藍(lán)) 溴麝香草酚藍(lán)：酸堿指示劑溴麝香草酚藍(lán)：酸堿指示劑 同法空白校正實(shí)驗(yàn)同法空白校正實(shí)驗(yàn)SNOHNHOOCH3ONSCH3NaOHOOCH3NSCH3SNNHONaO0SBBBAV -VF

27、T% =100%W（）含量（）3. 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法阿司匹林阿司匹林酯類供試品酯類供試品加入過量、定量加入過量、定量的的NaOH已知濃度的酸回已知濃度的酸回滴過量滴過量NaOH2NaOH（過量）（過量）H2SO4Na2SO42H2OOCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa阿司匹林：阿司匹林：USP（32）方法）方法取本品約取本品約1.5g，精密稱定，精密稱定,加入氫氧化鈉滴定液（加入氫氧化鈉滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，緩緩煮沸，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（酸滴定液（0.25mo

28、1/L）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每用空白試驗(yàn)校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（的氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）相當(dāng)于）相當(dāng)于45.04mg的的C9H8O4。 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 2 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾消除了酯鍵水解的干擾 缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾酸性雜質(zhì)干擾反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1 2，F(xiàn)：硫酸濃度校正因數(shù)：硫酸濃度校正因數(shù)10.5180.1245.04(/)AaTmMbmg ml0SBBBAV -VFT% =100%W（）含量（ ）阿司匹林片和腸溶片（阿司匹林片和腸溶片（ChP 2005) 消除片劑中酸性降解

29、產(chǎn)物及穩(wěn)定劑對(duì)阿司匹林消除片劑中酸性降解產(chǎn)物及穩(wěn)定劑對(duì)阿司匹林片的測(cè)定干擾而采用兩步滴定法。片的測(cè)定干擾而采用兩步滴定法。4. 兩步滴定法兩步滴定法水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物水楊酸水楊酸SAHAcHOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸櫞酸Citric acidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataric acid為了避免這些酸類的干擾，采用兩步滴定法為了避免這些酸類的干擾，采用兩步滴定法COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步第一步 中和中和酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH鈉鹽+H2O第二步：第二步：COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2

30、NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O水解：水解：本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾 10.1180.1118.01(/)AaTmMbmg ml 片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算 0SBBBA0SBBBAV -VFT% =100%WV -VFTW% =100%WB（）含量（ ）（）標(biāo)示量（ ） 取本品取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿司匹林當(dāng)于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對(duì)），置錐形瓶中，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解

31、，酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至 溶 液 顯 粉 紅 色 ， 再 精 密 加 氫 氧 化 鈉 滴 定 液至 溶 液 顯 粉 紅 色 ， 再 精 密 加 氫 氧 化 鈉 滴 定 液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加熱，置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml的氫氧化鈉的氫氧化鈉滴定液（滴定液（0.1mo1/L）相

32、當(dāng)于）相當(dāng)于18.02mg的的C9H8O4。 二、紫外分光光度法二、紫外分光光度法1.直接直接UV法法 ChP2010 二氟尼柳、美洛昔康和對(duì)乙酰氨基酚制劑二氟尼柳、美洛昔康和對(duì)乙酰氨基酚制劑【二氟尼柳膠囊測(cè)定二氟尼柳膠囊測(cè)定】 精密稱取約精密稱取約0.1g0.1g本品，置本品，置100ml100ml量瓶中，量瓶中，溶解后溶解后定容，過濾，取續(xù)濾液定容，過濾，取續(xù)濾液5 ml,5 ml,置置100ml100ml量瓶，定溶。在量瓶，定溶。在315 nm315 nm處測(cè)定處測(cè)定Ax;Ax;同法測(cè)定同法測(cè)定50g/ml50g/ml對(duì)照品的對(duì)照品的AsAs 二氟尼柳：對(duì)照法二氟尼柳：對(duì)照法 對(duì)照品：對(duì)照品：50g/ml 檢測(cè)檢測(cè) ：315nm100D=100=2005)0(ml%10