藥物檢測技術 第4章 藥物的雜質(zhì)檢查技術

1、一、藥物的純度一、藥物的純度 、定義：、定義：藥物的純凈程度，又稱藥用藥物的純凈程度，又稱藥用規(guī)格規(guī)格( (最高雜質(zhì)限量最高雜質(zhì)限量) )，因藥品的純度檢，因藥品的純度檢查主要針對雜質(zhì)檢查，因此雜質(zhì)檢查又查主要針對雜質(zhì)檢查，因此雜質(zhì)檢查又稱純度檢查。稱純度檢查。純度檢查純度檢查制劑檢查制劑檢查有效性有效性安全性安全性性性 質(zhì)質(zhì)改變原料改變原料改變工藝改變工藝新藥研究新藥研究需需檢檢查查雜雜 質(zhì)質(zhì)（forin、impurities）有毒副作用的物質(zhì)有毒副作用的物質(zhì)無毒副作用無毒副作用影響藥物的穩(wěn)定性和療效影響藥物的穩(wěn)定性和療效無毒副作用無毒副作用不影響藥物的穩(wěn)定性和療效不影響藥物的穩(wěn)定性和療效影

2、響藥物的科學管理的物質(zhì)影響藥物的科學管理的物質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源二、藥物中雜質(zhì)的來源雜質(zhì)來源雜質(zhì)來源生產(chǎn)引入生產(chǎn)引入貯藏引入貯藏引入原原 料料反應物反應物試試 劑劑催化劑催化劑生產(chǎn)生產(chǎn)器皿器皿水解水解氧化氧化異構化異構化消旋化消旋化霉變霉變潮解潮解 在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為 A. 原料不純或部分未反應完全的原料造成原料不純或部分未反應完全的原料造成 B. 合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成凈造成 C. 需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成混晶等造成 D. 所用金屬

3、器皿及裝置等引入雜質(zhì)所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì) E. 由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì)解引入的雜質(zhì) 例例三、雜質(zhì)的分類三、雜質(zhì)的分類 按來源分按來源分一般雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：自然界是中分布較廣，容易引入的物自然界是中分布較廣，容易引入的物 質(zhì)。其方法收載在中國藥典的質(zhì)。其方法收載在中國藥典的附錄附錄 中。中。 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)：指某一個或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏指某一個或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏 過程中引入的雜質(zhì)。雜質(zhì)檢查方法收過程中引入的雜質(zhì)。雜質(zhì)檢查方法收 載在中國藥典載在中國藥典正文正文各藥品的質(zhì)量標準各藥品的質(zhì)量標準 中。中。水楊酸水楊酸C

4、OOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH+CH3COONaCHCH3 3COOH+COOH+水解一步水解一步臭味臭味例例阿司匹林阿司匹林 水楊酸水楊酸按危害性分按危害性分ClCl- -、SOSO2-2-、FeFe3+3+、H H+ +、OHOH- -、H H2 2O O劇毒劇毒重金屬、砷鹽重金屬、砷鹽 中國藥典（中國藥典（20152015年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì) 檢查中不包括的項目是檢查中不包括的項目是 A. 硫酸鹽檢查 B. 氯化物檢查 C. 溶出度檢查 D. 重金屬檢查 E. 砷鹽檢查 例例（一）雜質(zhì)限量（一）雜質(zhì)限量 指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大指藥物中允許雜質(zhì)存

5、在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppmppm）來表示來表示四、四、 藥物的雜質(zhì)限量與檢查法藥物的雜質(zhì)限量與檢查法雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 （二）藥物的雜質(zhì)檢查法二）藥物的雜質(zhì)檢查法 雜雜 質(zhì)質(zhì)檢查法檢查法靈敏度靈敏度對照法對照法比較法比較法 1. 1. 對照法對照法 需對照物質(zhì)需對照物質(zhì) 限量檢查法限量檢查法 （Limit TestLimit Test） 特點：不需知道雜質(zhì)的準確含量。特點：不需知道雜質(zhì)的準確含量。選擇待檢雜質(zhì)作對照選擇待檢雜質(zhì)作對照供供試試品品稀稀釋釋對對照照 2. 2. 靈敏度法靈敏度法 系指在供試品溶液中加入試劑，系指在供試品溶液中加入試劑，

6、在一定反應條件下在一定反應條件下, ,不得有正反應出現(xiàn)不得有正反應出現(xiàn) 不需對照物質(zhì)不需對照物質(zhì)50ml H50ml H2 2O + 5O + 5滴滴HNOHNO3 3 不渾濁不渾濁純水中純水中ClCl- -合格合格 3. 3. 比較法比較法 含量測定法：測定雜質(zhì)的絕對含量測定法：測定雜質(zhì)的絕對含量，如測定吸收度、含量，如測定吸收度、pHpH值等。值等。 特點：特點：準確測定雜質(zhì)的量。準確測定雜質(zhì)的量。不需對照物質(zhì)不需對照物質(zhì)（三）（三） 雜質(zhì)限量的計算雜質(zhì)限量的計算%100供試品量允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量供試品量標準溶液濃度標準溶液體積雜質(zhì)限量L=C標V標/ms 100% 檢查某藥物中的

7、砷鹽，取標準砷溶液2ml（每1ml相當于1g的As）制備標準砷斑，砷鹽限量為0.00004，應取供試品的量為 A. 0.50g B. 5.0g C0.050g D. 2.50g E. 0.250g一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則 藥品檢驗操作標準藥品檢驗操作標準規(guī)定：規(guī)定：1. 1. 遵循平行操作原則遵循平行操作原則 (1)(1)儀器的配對性：儀器的配對性： 如納氏比色管應如納氏比色管應配對配對, ,刻度線高低相差不超過刻度線高低相差不超過2mm2mm，砷鹽，砷鹽檢查時導氣管長度及孔的大小要一致檢查時導氣管長度及孔的大小要一致 (2)(2)對照品與供試品的同步操作對照品與供試品的同步操

8、作 2. 2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍正確的取樣及供試品的稱量范圍 1g1g不超過不超過2%2%，1g1g不超過不超過1% 1% 3. 3. 正確的比色、比濁方法正確的比色、比濁方法 4. 4. 檢查結果不符合規(guī)定或在限度邊檢查結果不符合規(guī)定或在限度邊緣緣 時應對供試管和對照管各復查二份時應對供試管和對照管各復查二份 二、氯化物檢查法二、氯化物檢查法（一）原理 對照法 白色渾濁藥物：AgClAgNOCl3HNO3 白色渾濁）（對照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc（二）檢查方法（二）檢查方法 藥典附錄藥典附錄 1.1.除另有規(guī)定外，取各藥品項下除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的

9、供試品，加水溶解使成規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸性），再加稀硝酸10m110m1；溶液如不澄；溶液如不澄清，應濾過；置清，應濾過；置50ml50ml納氏比色管中，納氏比色管中，加水使成約加水使成約40m140m1，搖勻，即得供試溶，搖勻，即得供試溶液。液。 2. 2.另取各藥品項下規(guī)定量的標準另取各藥品項下規(guī)定量的標準氯化鈉溶液，置氯化鈉溶液，置50ml50ml納氏比色管中，納氏比色管中，加稀硝酸加稀硝酸10m110m1，加水使成，加水使成40m140m1，搖勻，搖勻，即得對照液。即得對照液。 3.

10、 3.于供試溶液與對照溶液中，分于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液別加入硝酸銀試液1.0m11.0m1，用水稀釋，用水稀釋使成使成50m150m1，搖勻，在暗處放置，搖勻，在暗處放置5 5分鐘，分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得觀察，比較，即得（三）測定條件（三）測定條件 1. 1. 標準標準NaClNaCl溶液溶液 1010 gClgCl /ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含50508080 g g的的ClCl 所顯渾濁所顯渾濁梯度明顯，相當于標準梯度明顯，相當于標準NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。 2. 2.

11、 反應需在硝酸酸性條件下進行，反應需在硝酸酸性條件下進行，且以且以50ml50ml供試溶液中含稀硝酸供試溶液中含稀硝酸10ml10ml為為宜。宜。 （1）加速AgCl渾濁的形成； （2）產(chǎn)生較好的乳濁； （3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。3. 3. 試劑：硝酸銀試劑：硝酸銀4. 4. 供試液和對照液稀釋后，再加硝酸供試液和對照液稀釋后，再加硝酸 銀溶液，使生成白色渾濁而不是白銀溶液，使生成白色渾濁而不是白 色沉淀色沉淀 5. 5. 避光、暗處放置避光、暗處放置5 5分鐘后比濁，因氯分鐘后比濁，因氯 化銀見光易分解?；y見光易分解。6. 6. 比濁方法：同置于黑色背景上，自

12、比濁方法：同置于黑色背景上，自 上向下觀察。上向下觀察。 7. 7. 平行操作原則平行操作原則 （四）干擾及排除 1 1. . 若供試品有色若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。，需經(jīng)處理后方可檢查。 （1 1）內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨）內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。中氯化物的檢查。在對照液中加一定量供在對照液中加一定量供試液。試液。 （2 2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。再依法檢查。 2. 2. 不溶于水的有機藥物不溶于水的有機藥物 （1 1）加水振搖，過濾

13、，取濾液進行）加水振搖，過濾，取濾液進行檢查。檢查。 （2 2）加熱，放冷，過濾，取濾液進）加熱，放冷，過濾，取濾液進行檢查。行檢查。 （3 3）溶于有機溶劑如稀乙醇、丙酮，）溶于有機溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進行檢查。可加稀乙醇或丙酮溶解后進行檢查。 例一. 藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（B）A. 硫酸 B. 硝酸 C. 鹽酸 D. 醋酸 E. 磷酸 例2. 中國藥典 （2015年版） 規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時，一般取用標準氯化鈉溶液（10gCl/ml）58ml的原因是（D）A. 使檢查反應完全B. 藥物中含氯化物的量均在

14、此范圍C. 加速反應D. 所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E. 避免干擾 例3. 采用硝酸銀試液檢查氯化物時，加 入 硝 酸 使 溶 液 酸 化 的 目 的 是（ABCDE）A加速生成氯化銀渾濁反應B消除某些弱酸鹽的干擾C消除碳酸鹽干擾D消除磷酸鹽干擾E避免氧化銀沉淀生成例4. 當采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應該選用的處理方法為（AB）A內(nèi)消色法B外消色法C比色法D差示比濁法 E差示可見分光法 例5. 下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件（ABC）A. 所用比色管需配套B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C. 避光放置5分鐘D. 用硝酸銀標準溶液做對照E. 在白色背

15、景下觀察 三、硫酸鹽檢查法三、硫酸鹽檢查法（一）原理 對照法白色渾濁藥物：4HCl224BaSOBaClSO白色渾濁）、（對照：4HCl242BaSOBaClSOKVc（二）測定條件 1. 1. 標準標準K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶溶液中含液中含0.10.10.5mg0.5mg的所顯渾濁梯度明顯，的所顯渾濁梯度明顯，相當于標準相當于標準K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。 2.2.反應需在鹽酸酸性條件下進行，且反應需在鹽酸酸性條件下進行，且以以50ml50ml供試溶液中含稀鹽酸供試溶液中含稀鹽酸2ml2ml為宜。為宜。

16、 3. 3. 試劑：氯化鋇試劑：氯化鋇 4. 4. 供試液和對照液稀釋后，再加供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀白色沉淀 5. 5. 比濁方法：同置于黑色背景上比濁方法：同置于黑色背景上自上向下觀察。自上向下觀察。 若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。 （三）干擾及排除（三）干擾及排除例：藥物中硫酸鹽檢查時，所用的標準對照液是（D）A. 標準氯化鋇B. 標準醋酸鉛溶液C. 標準硝酸銀溶液D. 標準硫酸鉀溶液 E. 以上都不對 四、鐵鹽檢查法四、鐵鹽檢查法1. 原理 對照法 紅色藥物： 36SCNFeHCl6SCNFeFeFe

17、3o23紅色、對照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc（一）硫氰酸鹽法 ChP(2005)、USP(24) 2. 2. 檢查方法檢查方法 藥典附錄藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成定量的供試品，加水溶解使成25ml25ml，移置移置50ml50ml納氏比色管中，加稀鹽酸納氏比色管中，加稀鹽酸4ml4ml與過硫酸銨與過硫酸銨50mg,50mg,用水稀釋使成用水稀釋使成 35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液3ml3ml，再，再加水適量稀釋成加水適量稀釋成50ml50ml，搖勻；，搖勻；如顯色，立即與標準鐵溶液

18、一定量制如顯色，立即與標準鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項下規(guī)定量成的對照溶液（取各藥品項下規(guī)定量的標準鐵溶液的標準鐵溶液, ,置置50ml50ml納氏比色管中納氏比色管中, ,加水使成加水使成25ml25ml，加稀鹽酸，加稀鹽酸4ml4ml與過硫與過硫酸銨酸銨50mg50mg，用水稀釋使成，用水稀釋使成35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液3ml3ml，再加水適量稀，再加水適量稀釋成釋成50ml50ml，搖勻）比較，即得，搖勻）比較，即得 3. 3. 測定條件測定條件 （1 1）用）用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2 2O O

19、（硫酸鐵（硫酸鐵銨）配制標準鐵貯備液（加入硫酸防止銨）配制標準鐵貯備液（加入硫酸防止FeFe3+3+的水解），標準鐵溶液臨用前稀釋的水解），標準鐵溶液臨用前稀釋而成，標準鐵溶液而成，標準鐵溶液1010 g Feg Fe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+顯色梯度明顯，顯色梯度明顯，一般取標準鐵溶液一般取標準鐵溶液1.01.05.0ml 5.0ml （2 2）反應需在鹽酸酸性條件下進行，）反應需在鹽酸酸性條件下進行，且以且以50ml50ml供試溶液中含稀鹽酸供試溶液中含稀鹽酸4ml4ml為宜。為宜。 （3 3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫

20、）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應向正反應方向進行氰酸銨，使反應向正反應方向進行 （4 4）檢查）檢查FeFe2+2+和和FeFe3+3+ （5 5）鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化）鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化FeFe2+2+為為FeFe3+3+。加過硫酸銨可氧化。加過硫酸銨可氧化FeFe2+2+為為FeFe3+3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。原或分解褪色。 加硝酸后加熱也可氧化加硝酸后加熱也可氧化FeFe2+2+為為FeFe3+3+ （6 6）比色方法：同置于白色背景）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。上，自上向下觀察。 4. 干擾及排除干擾及排

21、除 (1) (1)為了提高靈敏度或供試管與對照為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。分取正丁醇層比色。 (2)(2)具環(huán)狀結構的有機藥物，需經(jīng)具環(huán)狀結構的有機藥物，需經(jīng)700700800800熾灼破壞處理后再依法檢查。熾灼破壞處理后再依法檢查。 （二）巰基醋酸法 對照法本法靈敏度較高，但試劑較貴 紅色藥物：巰基醋酸巰基醋酸枸櫞酸OHNH22%20FeFe2332Feml紅色對照：巰基醋酸巰基醋酸枸櫞酸OHNH22%20323FeFeml例1. 中國藥典（2015年版）規(guī)定鐵鹽的檢查方法為（A）A. 硫氰酸鹽法B. 巰基

22、醋酸法C. 普魯士藍法D 鄰二氮菲法E. 水楊酸顯色法例2. 中國藥典（2015年版）規(guī)定，硫氰酸銨法檢查鐵鹽時，加入過硫酸按的目的是（AB） A. 使藥物中鐵鹽都轉變?yōu)镕e3+ B. 防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色 C. 使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深 D防止干擾 E便于觀察、比較 例3. 中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（D）A. FeB. Fe2+C. Fe3+D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不對 五、重金屬檢查法五、重金屬檢查法 以鉛為代表以鉛為代表中國藥典（中國藥典（20152015年版）共收載四法。年版）共收載四法。 第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法第二法第二法 熾灼殘渣

23、法熾灼殘渣法第三法第三法 硫化鈉法硫化鈉法第四法第四法 微孔濾膜法微孔濾膜法 （一）第一法 硫代乙酰胺法1. 原理 對照法 SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黃色棕黑色藥物：PbSSHPbpH3.522 黃色棕黑色、對照：PbSSH)Pb(NOpH3.5223 Vc 適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。 2. 測定條件 （1 1）用硝酸鉛配制標準鉛貯備液）用硝酸鉛配制標準鉛貯備液（加硝酸防止（加硝酸防止PbPb2+2+水解），標準鉛溶液水解），標準鉛溶液臨用前稀釋而成，標準硝酸鉛標準溶液臨用前稀釋而成，標準硝酸鉛標準溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，適宜比色

24、范圍為，適宜比色范圍為27ml27ml溶溶液中含液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。 （2 2）本法用）本法用2ml pH3.52ml pH3.5的醋酸鹽的醋酸鹽緩沖液控制溶液緩沖液控制溶液pHpH值為值為3 33.53.5。 （3 3）顯色劑：從）顯色劑：從ChPChP（19901990）開）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑始改用硫代乙酰胺做顯色劑 (1)(1)供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。其他無干擾的有色溶液。 3. 3. 干擾及排除干擾及排除（2 2）若供

25、試品中有微量）若供試品中有微量FeFe3+3+存在存在, , 會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫, ,干干擾比色擾比色, ,加入抗壞血酸或鹽酸羥胺加入抗壞血酸或鹽酸羥胺(0.5(0.51.0g)1.0g)還原還原FeFe3+3+為為FeFe2+2+, ,可消除可消除干擾干擾（3 3）若供試品為鐵鹽，）若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+Fe3+在鹽酸中生成物用乙醚提在鹽酸中生成物用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加中，加KCNKCN掩蔽，然后用第三法檢查掩蔽，然后用第三法檢查 (4)(4)若藥物本身若藥物本身含有與含有與S2-反應的物質(zhì)反應的物質(zhì)時可加入掩蔽

26、劑消除干擾。如時可加入掩蔽劑消除干擾。如SbSb2+2+中中重金屬的檢查，要在堿性下加重金屬的檢查，要在堿性下加KCNKCN掩掩蔽蔽SbSb2+2+后，依第三法檢查后，依第三法檢查配位化合物藥物：-OH2KCNSb （二）第二法 熾灼殘渣法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機藥物。 1. 1. 原理原理 對照法對照法500500600600熾灼后的殘渣，熾灼后的殘渣，加硝酸處理后，依一法檢查。加硝酸處理后，依一法檢查。 依一法檢查氯化物殘渣置坩堝中樣品：緩沖液左右調(diào)節(jié)至、熾灼殘渣 mlS0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法檢查對

27、照：空坩堝緩沖液溶液）（標準、 ml0 . 25 . 3pHNOPbOHOHNHHClHNOSOH232233422. 操作方法 含鈉及氟的有機藥物應用鉑含鈉及氟的有機藥物應用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）重金屬） （三）第三法 硫化鈉法 適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。 1. 原理 對照法 黃色棕黑色藥物：PbSSNaPbNaOH22 黃色棕黑色、對照：PbSSNa)Pb(NONaOH223 V

28、c2. 2. 測定條件測定條件 （1 1）NaOHNaOH堿性條件下堿性條件下（2 2）顯色劑：硫化鈉）顯色劑：硫化鈉（四）第四法 微孔濾膜法 適用于含適用于含2 25 5 g g重金屬雜質(zhì)及有色重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。供試液的檢查。 依一法檢查，結果微孔濾膜過濾后依一法檢查，結果微孔濾膜過濾后比較色斑。比較色斑。 P66-67P66-67六、砷鹽檢查法六、砷鹽檢查法 （一）古蔡法 ChP（2005）3332AsHAsOHHClZn1. 原理 對照法 遇遇HgBrHgBr2 2試紙生成黃色棕色的砷試紙生成黃色棕色的砷斑，與斑，與2ml2ml標準砷溶液在相同條件下生標準砷溶液在相同條件下生

29、成的砷斑比較成的砷斑比較2. 2. 操作方法操作方法 （1 1）標準砷斑用）標準砷斑用2ml2ml標準砷溶液制備標準砷溶液制備（2 2）供試品需經(jīng)有機破壞，則標準砷）供試品需經(jīng)有機破壞，則標準砷溶液應平行操作溶液應平行操作3. 測定條件 (1)(1)標準砷溶液臨用新配，標準砷溶液臨用新配，1 1 gAs/mlgAs/ml。 (2)(2)酸為反應物，酸量應足夠，所以加酸為反應物，酸量應足夠，所以加 濃鹽酸濃鹽酸5ml5ml。 （3 3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是: : 還原還原As5+As5+為為As3+As3+，加快反應速度；，加快反應速度；A.A. 碘化鉀被氧

30、化生成的碘化鉀被氧化生成的I I2 2又可被氯化又可被氯化亞錫還原為亞錫還原為I I- -，I I- -與反應中生成的與反應中生成的ZnZn2+2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應不斷進行；于生成砷化氫的反應不斷進行；C.C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；D. D. 可抑制微量可抑制微量SbSb的干擾。的干擾。 （4 4）醋酸鉛棉花的作用）醋酸鉛棉花的作用: : 吸收硫化物，消除鋅粒及供試品吸收硫化物，消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花中少量硫化物的干

31、擾，醋酸鉛棉花60mg60mg裝管高度裝管高度606080mm80mm。（5 5）鋅粒應無砷）鋅粒應無砷（6 6）砷斑不穩(wěn)定，應立即觀察）砷斑不穩(wěn)定，應立即觀察4. 干擾及排除干擾及排除（1 1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時，加硫代硫酸鹽時，加HNOHNO3 3，使氧化成，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。砷鹽的檢查。 （2 2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將化亞錫試液，將FeFe3+3+還原為還原為FeFe2+2+。如枸櫞。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。酸鐵銨

32、中砷鹽的檢查。（3 3）具環(huán)狀結構的有機藥物，要先行）具環(huán)狀結構的有機藥物，要先行 有機破壞后再進行檢查。有機破壞后再進行檢查。 常用的有機破壞方法：常用的有機破壞方法：堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查（4）供試品中有強氧化劑加）供試品中有強氧化劑加H2SO4先先 行分解。行分解。 （5 5）本法適用于不含）本法適用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于 100100 g g的供試品。的供試品。 （二）Ag-DDC法 （二乙基二硫代氨基甲酸銀二硫代氨基甲酸銀法）法）原理：對照法3332AsHAs

33、OHHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33紅色） 、操作： 砷化氫與砷化氫與Ag-DDCAg-DDC溶液作用，還原溶液作用，還原AgAgDDCDDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm510nm波長處測定吸收度，進行比較。波長處測定吸收度，進行比較。 用有機堿吸收反應產(chǎn)生的用有機堿吸收反應產(chǎn)生的HDDCHDDC有利于反有利于反應的進行。應的進行。USPUSP用吡啶用吡啶,ChP,ChP用三乙胺用三乙胺七、干燥失重測定法 干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也

34、包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法：測定方法： 、恒溫常壓干燥法、恒溫常壓干燥法 、恒溫減壓干燥法、恒溫減壓干燥法 、常溫減壓干燥法、常溫減壓干燥法（一）常壓恒溫干燥法（一）常壓恒溫干燥法 、定義、定義: :適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為燥溫度一般為105105。 干燥失重干燥失重% %失重失重/ /供試品重供試品重100100 、操作、操作: :第二次及以后各次稱重均應在第二次及以后各次稱重均應在 規(guī)定條件下繼續(xù)干燥規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h1h后進行后進行 直至直至MnMnMn-Mn-1 10.3mg0.3mg為恒重。為恒重。、注意、注意(

35、1)(1)供試品厚度：供試品厚度：A.A.一般一般5mm5mm； B.B.疏松疏松10mm10mm；C.C.大粒結晶粒度大粒結晶粒度2mm2mm。(2)(2)干燥溫度：干燥溫度：A.A.一般一般105105； B.B.含結晶水要提高溫度；含結晶水要提高溫度； C.C.含水量大且熔點低要先低溫后含水量大且熔點低要先低溫后105105(3)(3)特殊供試品：特殊供試品： 膏狀物粗砂粒及玻璃棒并均勻攪拌膏狀物粗砂粒及玻璃棒并均勻攪拌 （二）減壓干燥法（二）減壓干燥法 （真空干燥）（真空干燥） 適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。分難趕除的藥物。除另有規(guī)定外，壓力應

36、在除另有規(guī)定外，壓力應在2.67kPa2.67kPa（20mmHg20mmHg）以下。）以下。、測定方法、測定方法(1)(1)卡爾費休水分滴定法卡爾費休水分滴定法( (費休法費休法) )：適用于加熱易破壞，不適于氧化劑適用于加熱易破壞，不適于氧化劑/ /還原劑還原劑/ /水反應的物質(zhì)。水反應的物質(zhì)。(2)(2)甲苯法甲苯法: :適用顏色較深藥物適用顏色較深藥物/ /氧化劑氧化劑 還原劑還原劑/ /皂類皂類/ /油類等。油類等。(3)(3)甲醛法甲醛法: :不適于不適于(1)(2)(1)(2)用用(3)(3)法。法。八、水分八、水分測定測定法法、費、費 休休 法法(1)(1)原理原理: :非水溶

37、液中氧化還原滴定非水溶液中氧化還原滴定, ,標標 準滴定液即費休液準滴定液即費休液(I(I2 2+SO+SO2 2+ +吡啶吡啶+ +甲醇甲醇) )I I2 2+SO+SO2 2+H+H2 2O SOO SO3 3+HI+HISOSO3 3+HI+HI+無水吡啶氫碘酸吡啶無水吡啶氫碘酸吡啶+ + 硫酸酐吡啶硫酸酐吡啶( (不穩(wěn)定不穩(wěn)定) )硫酸酐吡啶硫酸酐吡啶+ +無水甲醇無水甲醇 甲基硫酸氫吡啶甲基硫酸氫吡啶( (穩(wěn)定穩(wěn)定) )總反應方程式總反應方程式: :I I2 2+SO+SO2 2+3C+3C2 2H H5 5N+CHN+CH3 3OH+HOH+H2 2O 2CO 2C2 2H H5

38、5N NHI+CHI+C2 2H H5 5N NHSOHSO4 4CHCH3 3 (2)(2)操操 作作 水分標定費休液：水分標定費休液： 干燥具塞玻璃瓶中重蒸餾水干燥具塞玻璃瓶中重蒸餾水30mg30mg 無水甲醇無水甲醇2 25ml5ml費休試液滴至終點費休試液滴至終點 并用空白校正，得：并用空白校正，得：F=W/(A-B)F=W/(A-B) * *(F=4.0(F=4.0為宜，為宜，F(xiàn)3.0F3.0不宜再用不宜再用) )F-F-滴定度滴定度( (相當水重量相當水重量/ml/ml費休液費休液) mg/ml) mg/ml W- W-重蒸餾水重量重蒸餾水重量(mg)(mg) A- A-滴定消耗費

39、休液容積滴定消耗費休液容積(ml)(ml) B- B-空白消耗費休液容積空白消耗費休液容積(ml)(ml)供試液測定：供試液測定： 將中重蒸餾水換上供試品，使將中重蒸餾水換上供試品，使終點由黃色至紅棕色終點由黃色至紅棕色/ /永停滴定法指示永停滴定法指示終點，得：終點，得：供試品中水分含量供試品中水分含量%=(A-B)F/W%=(A-B)F/W100%100%(3)(3)注注 意意 吡啶和甲醇即是反應物又是溶劑吡啶和甲醇即是反應物又是溶劑 終點指示法可：終點指示法可： . .2 2自身作指示劑自身作指示劑 . .永停滴定法指示：電流計突然偏轉且永停滴定法指示：電流計突然偏轉且數(shù)分鐘不退回數(shù)分鐘

40、不退回 費休試劑：要求純度高，含水量費休試劑：要求純度高，含水量0.1% 0.1% 其中的其中的I I2 2干燥器中干燥器中48hr48hr； SOSO2 2用濃用濃H H2 2SOSO4 4脫水后再配制脫水后再配制 供試品取量：以消耗費休液供試品取量：以消耗費休液1 15ml5ml為宜為宜 實驗條件：不宜在溫度高的環(huán)境中操作實驗條件：不宜在溫度高的環(huán)境中操作 檢查不含金屬的有機藥物或揮發(fā)性無檢查不含金屬的有機藥物或揮發(fā)性無機藥物中混入的無機雜質(zhì)機藥物中混入的無機雜質(zhì)( (金屬氧化物或無金屬氧化物或無機鹽類機鹽類) )。 1. 1. 原理原理 樣品炭化樣品炭化/ /分解后分解后+ H+ H2

41、2SOSO4 4濕潤濕潤700700800800熾灼至恒重熾灼至恒重熾灼殘渣（硫酸灰分）熾灼殘渣（硫酸灰分）限量一般為限量一般為0.1%0.1%0.2%0.2% 九、熾灼殘渣檢查法九、熾灼殘渣檢查法2. 操作方法殘渣（恒重）完全灰化蒸氣除盡至放冷至全部黑色、無煙霧，熾灼至恒重的坩堝樣品燒乾燥器放冷至室溫再灼高溫灼燒濕潤，直火加熱直火緩緩加熱8007004215 . 0SOHSOH42ml3. 3. 注意事項注意事項 （1 1）供試品的取樣量應根據(jù)熾灼殘渣）供試品的取樣量應根據(jù)熾灼殘渣限量和稱量誤差決定。限量和稱量誤差決定。（2 2）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應采）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應采

42、用鉑坩堝。用鉑坩堝。（3 3）若殘渣需留作重金屬檢查，則）若殘渣需留作重金屬檢查，則500500600600熾灼至恒重。熾灼至恒重。（4 4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉化為穩(wěn)定的）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機物炭化硫酸鹽，并幫助有機物炭化 十、溶液顏色檢查法十、溶液顏色檢查法控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法?？刂扑幬镏杏猩s質(zhì)限量的方法。 采用三種方法檢查：采用三種方法檢查： 第一法第一法 目視比色法目視比色法 即與標準比即與標準比色液比較的方法，色液比較的方法，標準比色液的配制標準比色液的配制 個色號標準比色液種色調(diào)種色調(diào)標準貯備液溶液、不同量水稀釋不同比例5055CuSOCoCl

43、OCrK42722第二法 分光光度法 單一波長定量第三法 色差計法 全波長范圍定量 本法是通過色差計直接測定溶液本法是通過色差計直接測定溶液的的透視三刺激值透視三刺激值，對其顏色進行定量，對其顏色進行定量表述和分析的方法。表述和分析的方法。 測色儀器一般為光電積分型色差計測色儀器一般為光電積分型色差計十三、澄清度檢查法十三、澄清度檢查法 檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應作此項用作注射劑的原料藥一般應作此項檢查。檢查。 1. 檢查方法 對照法 比較供試品溶液供試品規(guī)定級號的濁度標準液 2. 濁度標準液的配制 中國藥典規(guī)定用濁度標準液作為中國藥典規(guī)定

44、用濁度標準液作為澄清度檢查的標準。澄清度檢查的標準。 反應原理：烏洛托品在偏酸性條反應原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。操作：1.001.00硫酸肼溶液與硫酸肼溶液與1010烏洛烏洛托托品溶液等量混合配制濁度標準貯備液品溶液等量混合配制濁度標準貯備液 濁度標準原液濁度標準原液 濁度標準液（濁度標準液（5 5個級號）個級號）稀釋稀釋3. 3. 判斷：判斷：藥典中規(guī)定的藥典中規(guī)定的“澄清澄清”，系，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過劑

45、，或未超過0.50.5號濁度標準液。號濁度標準液。4. 4. 溶劑溶劑：水、酸、堿、有機溶劑：水、酸、堿、有機溶劑* * 有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用“新沸過的冷水新沸過的冷水”定義：定義： 藥物生產(chǎn)和貯存過程中，據(jù)藥物生產(chǎn)和貯存過程中，據(jù)藥藥物自身物自身性質(zhì)、生產(chǎn)方法、工藝條件性質(zhì)、生產(chǎn)方法、工藝條件可能引入的雜質(zhì)。可能引入的雜質(zhì)。第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查旋光法旋光法物理法物理法化學法化學法光譜法光譜法色譜法色譜法檢查方法檢查方法四、分光光度法：四、分光光度法： 利用雜質(zhì)與藥物利用雜質(zhì)與藥物對光選擇吸收差對光選擇吸收差異異，通常選藥物無吸收而雜質(zhì)有吸收

46、，通常選藥物無吸收而雜質(zhì)有吸收的波長測的波長測 規(guī)定值規(guī)定值 ( (一一) )紫外分光光度法紫外分光光度法、藥物無吸收而雜、藥物無吸收而雜質(zhì)質(zhì)有吸收：有吸收：腎上腺素腎上腺素(藥物藥物)腎上腺酮腎上腺酮（雜質(zhì)）（雜質(zhì)）310nm無吸收無吸收有吸收有吸收規(guī)定在規(guī)定在310nm處測處測0.05、藥物與雜、藥物與雜質(zhì)質(zhì)在某一波長有重疊在某一波長有重疊碘解磷定碘解磷定分解產(chǎn)物分解產(chǎn)物294nmmax無吸收無吸收262nmmin有吸收有吸收x不含分解產(chǎn)物不含分解產(chǎn)物A294/A262A294/A262Amax/AminAmax/Amin含分解產(chǎn)物含分解產(chǎn)物A294/A262A294/A262(Amax(

47、Amax0)/(Amin+Ax)0)/(Amin+Ax)A294/A2623.1A294/A2623.1合合 格格( (二二 ) )比色法：比色法：u 供試品試劑供試品試劑u 對照品試劑對照品試劑 比色比色 AF710-3AF710-3目視目視 比色計比色計 ( (三三) )紅外分光光度法：紅外分光光度法：l 常測藥物中無效常測藥物中無效/ /低效晶型。低效晶型。遵循朗伯比爾定律遵循朗伯比爾定律數(shù)學表達式：數(shù)學表達式：A Akbckbcl A A 吸光度；吸光度；l K K 比例常數(shù)；比例常數(shù)；l B B 基態(tài)原子層的厚度；基態(tài)原子層的厚度；l C C 蒸汽中基態(tài)原子的濃度。蒸汽中基態(tài)原子的濃度?；驹? (四四) )原子吸收分光光度法：原子吸收分光光度法： 分析方法分析方法-標準曲線法標準曲線法配制一組含有不同濃度被測配制一組含有不同濃度被測元素的標準溶液，在與試樣測元素的標準溶液，在與試樣測定完全相同的條件下，按濃度定完全相同的條件下，按濃度由低到高的順序測定吸光度值。由低到高的順序測定吸光度值。繪制吸光度對濃度的校準曲線。繪制吸光度對濃度的校準曲線。 測定試樣的吸光度，在校準測定試樣的吸光度，在校準曲線上求出被測元素的含量。曲線上求