組織胺H2受體拮抗劑的分析

1、第十三章組織胺H2受體拮抗劑的分析 消化道潰瘍疾病是一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，直接原因是胃酸、胃蛋白酶分泌過(guò) 多，超過(guò)了胃自身分泌的粘液對(duì)胃的保護(hù)能力，含有胃酸、胃蛋白酶的胃液使胃 壁消溶損傷而引起潰瘍。在1964年H受體拮抗劑出現(xiàn)以前，對(duì)消化道潰瘍很少 有滿意的治療方法，所用的藥物大多是中和胃酸的無(wú)機(jī)物和保護(hù)胃粘膜的凝膠 劑。H受體拮抗劑能特異性地阻斷胃壁細(xì)胞的H2受體，拮抗組胺或組胺受體激動(dòng) 劑所致的胃酸分泌，緩解或在一定程度上治愈消化道潰瘍疾病。H2受體拮抗劑的 化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是以甲硫乙胺的側(cè)鏈取代H1受體拮抗劑的乙基胺鏈，常用的藥物 可分為咪唑類、呋喃類、噻唑類和哌啶甲苯類。咪唑類如西咪替丁(

2、Cimetidine )、 依烴替丁( Etintidine )、奧美替丁( Oxmetidine),呋喃類如雷尼替丁 (Ranitidine )，噻唑類如法莫替丁( Famotidine )、尼扎替丁( Nizatidine )， 哌啶甲苯類如羅沙替丁( Roxatidine )等。本章以西咪替丁、雷尼替丁、法莫替 丁為例，介紹H2受體拮抗劑的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)、體內(nèi)過(guò)程和測(cè)定方法。 第一節(jié)代表藥物 一、西咪替丁 西咪替丁分子式CoHeZS,分子量252.34，為白色或類白色結(jié)晶性粉末；幾 乎無(wú)臭，味苦。在甲醇中易溶，乙醇中溶解，異丙醇中略溶，水中微溶，稀鹽酸 中易溶。其鹽酸溶液(0.9 1000)

3、在218nm處的吸收系數(shù)(E1%1cm)為751-797 熔點(diǎn)：139C 144C。 西咪替丁的化學(xué)穩(wěn)定性良好。在室溫干燥密閉狀態(tài)下，5年內(nèi)未見(jiàn)分解；加 熱至100C持續(xù)48小時(shí)仍是穩(wěn)定狀態(tài)。紫外線對(duì)西咪替丁無(wú)催化分解作用。用 3%勺過(guò)氧化氫處理西咪替丁，可生成西咪替丁的硫氧化物。 N CH2SCH2CH2NCNHCH 3 NH 、雷尼替丁 雷尼替丁分子式C3H22N4QS,分子量314.4，游離堿很難結(jié)晶，常用其鹽酸鹽, 為類白色至淡黃色結(jié)晶性粉末；有異臭，味微苦帶澀；極易潮解，吸潮后顏色變 深。在水和甲醇中易溶，乙醇中略溶，在丙酮中幾乎不溶。本品水溶液的紫外吸 收入 max在 228nm與

4、 314nm 熔點(diǎn)：137C 143C。 雷尼替丁的穩(wěn)定性受溫度影響較大。把雷尼替丁的鹽酸鹽在溫度40 C、 50%r60%勺相對(duì)濕度的條件下放置 5天，僅有5%筆解；若在溫度60C、100%勺相 對(duì)濕度的條件下放置5天，則有11.5%的降解。在室溫、干燥條件下，保存3 年, 含量不下降。 g ,NCH2CH2SCH2CH2NH-CNHCH 3 H3CO CH一NO2 三、法莫替丁 法莫替丁分子式C8H52QS,分子量337.45,為白色或類白色結(jié)晶粉末，無(wú)臭、 味略苦，遇光后顏色變深。易溶于二甲基甲酰胺和冰醋酸，微溶于甲醇，極微溶 于丙酮，不溶于水、氯仿和乙醚。本品磷酸鹽緩沖液（pH4.5）

5、的紫外吸收入max 在 266nm 熔點(diǎn)：160C 165C。 法莫替丁的穩(wěn)定性較好。以2mg/mL的濃度溶于5%勺葡萄糖溶液或0.9%的生 理鹽水中，4C下放置14天，保持穩(wěn)定不變。在室溫條件下，存在于氨基酸、葡 萄糖、脂肪、電解質(zhì)、維生素和微量元素的營(yíng)養(yǎng)液系統(tǒng)中，72h穩(wěn)定不變。 h2n X=N H2N CH 2SCH 2CH 2-C NH2 Nf SO2NH2 第二節(jié) 體內(nèi)過(guò)程 H2 受體拮抗劑大多口服吸收良好，部分藥物有首過(guò)效應(yīng)，在體內(nèi)代謝生成 S-氧化物、N-氧化物等，大部分以原形經(jīng)腎臟排出。 一、西咪替丁 西咪替丁是第一個(gè)用于臨床的 H2 受體拮抗劑，它能明顯抑制食物、組胺或 五肽

6、胃泌素等刺激引起的胃酸分泌， 使胃中酸度降低， 對(duì)因化學(xué)刺激引起的腐蝕 性胃炎有預(yù)防和保護(hù)作用， 對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍和上消化道出血也有一定療效。 口服 300mg后，迅速由小腸吸收，半小時(shí)即達(dá)有效血藥濃度（0.5卩g/mL）,達(dá)峰時(shí)間 4590min,平均Cmax為1.44卩g/mL,有效血藥濃度可保持 4h。西咪替丁口服 生物利用度約為 70%，年輕人對(duì)本品的吸收情況往往較老年人為好；肌注與靜脈 注射生物利用度基本相同。血漿蛋白結(jié)合率為15%r20% ti/2為22.5h （慢性腎 功能不全病人ti/2明顯延長(zhǎng)，約為4.9h ）, Vd為2.1土 1L/kg，腎清除率為12 3ml/kg/min

7、 。藥物進(jìn)入體內(nèi)后， 一部分代謝為無(wú)活性的亞砜， 另一部分以原形從 尿中排出，12h可排出口服量的80%r90%。 西咪替丁副作用較多，可致便秘、腹瀉、腹脹、頭痛、頭暈、心動(dòng)過(guò)緩、面 部潮紅等，長(zhǎng)期應(yīng)用可致男性陽(yáng)痿、乳房腫大，可能是其與雄性激素受體結(jié)合， 妨礙二氫睪丸素對(duì)雄性激素受體的激動(dòng)作用以及增加血液中雌二醇的濃度有關(guān)。 西咪替丁可抑制肝藥酶，通過(guò)其咪唑環(huán)與細(xì)胞色素P450結(jié)合而降低藥酶活性， 所以與西咪替丁同時(shí)使用的其它藥物將會(huì)出現(xiàn)代謝緩慢、毒性上升的現(xiàn)象。 二、雷尼替丁 雷尼替丁為一種選擇性的 H2受體拮抗劑，能有效地抑制組胺、五肽胃泌素 及食物刺激后引起的胃酸分泌， 降低胃酸和胃蛋白

8、酶的活性， 但對(duì)胃泌素及性激 素的分泌無(wú)影響。雷尼替丁口服吸收迅速， 12h 可達(dá)血藥濃度高峰，不受食物 和抗酸藥物的影響，生物利用度約為50%。藥物進(jìn)入體內(nèi)后分布廣泛，11/2約為 22.7h,較西咪替丁稍長(zhǎng)。雷尼替丁口服后30%經(jīng)肝臟代謝為S-氧化物、N-氧 化物和N-去甲基物，至少有50%以原形由腎臟經(jīng)尿排泄。 雷尼替丁作用比西咪替丁強(qiáng) 58倍，對(duì)胃及十二指腸潰瘍的療效高， 具有速 效和長(zhǎng)效的特點(diǎn)；副作用小而且安全；無(wú)抗雄激素作用，對(duì)內(nèi)分泌的影響小，也 沒(méi)有西咪替丁那樣的中樞副作用。 三、法莫替丁 法莫替丁是繼西咪替丁和雷尼替丁后出現(xiàn)的又一種H2 受體拮抗劑，其作用 強(qiáng)度比西咪替丁大 3

9、0100倍，比雷尼替丁大 610 倍。健康人及消化性潰瘍患者 口服本品20mg對(duì)基礎(chǔ)分泌和因給予各種刺激而引起的胃酸及胃蛋白酶分泌增加 有抑制作用。靜脈注射20mg能抑制基礎(chǔ)分泌和因五肽胃泌素等刺激所致的分泌； 口服20mg對(duì)夜間7h內(nèi)胃酸和胃蛋白酶分泌量的抑制率分別為 91.8%和71.8%。 本品作用時(shí)間較西咪替丁和雷尼替丁長(zhǎng)約30% 口服20mg對(duì)胃酸分泌量的抑制 作用能持續(xù)12h以上。本品對(duì)失血及給予組胺所致的大鼠胃出血具有抑制作用， 上消化道出血的雙盲比較試驗(yàn)也證明本品有止血效果。 法莫替丁口服后血藥濃度在給藥 24h 后達(dá)高峰，生物利用度為 40%50%， ti/2約為34h，體內(nèi)

10、無(wú)蓄積傾向。本品在體內(nèi)分布廣泛，消化道、胃、肝、頜下 腺及胰腺有高濃度分布；但不透過(guò)胎盤屏障。其代謝產(chǎn)物僅見(jiàn)S-氧化物，主要 自腎臟排泄，24h原形尿排泄率為35%41%，膽汁排泄量少，也可自乳汁排出。 法莫替丁副作用小， 不改變胃排空速率， 不干擾胰腺功能， 對(duì)心血管系統(tǒng)和 腎臟系統(tǒng)也無(wú)不良影響， 不抑制肝藥酶。 本品不同于西咪替丁， 但與雷尼替丁有 相似之處， 即長(zhǎng)程大劑量治療時(shí)無(wú)并發(fā)雄激素拮抗的副作用和男性乳房發(fā)育、 陽(yáng) 痿、性欲缺乏及女性乳房腫痛，溢乳等副作用。 第三節(jié) 體內(nèi)測(cè)定方法 H2受體拮抗劑是堿性藥物，極性較強(qiáng)。該類藥物人體內(nèi)的血藥濃度較低，變 化范圍小， 測(cè)定所選用的生物樣品

11、一般為血漿， 也可用尿樣。 通常在堿性條件下 用有機(jī)溶劑萃取， 提取溶劑有醋酸乙酯、 氯仿、二氯甲烷和異丙醇 -醋酸乙酯等。 體內(nèi)測(cè)定方法一般采用高效液相色譜法。 、血樣的處理 取待測(cè)血樣， 肝素抗凝， 經(jīng)離心后分離出血漿， 在堿性條件下用適合的有機(jī) 溶劑萃取，萃取出的有機(jī)相經(jīng)揮干，用流動(dòng)相溶解后即可進(jìn)樣分析 二、體內(nèi)測(cè)定方法 1. 西咪替丁 西咪替丁為咪唑類 H受體拮抗劑，通常在堿性條件下用有機(jī) 溶劑提取。提取溶劑有醋酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、異丙醇 - 醋酸乙酯等。加熱 濃縮時(shí)，西咪替丁易轉(zhuǎn)化為亞砜，因此多在氮?dú)饬飨赂稍?。用C18 固相萃取小柱 處理樣品，藥物幾乎不損失。西咪替丁體內(nèi)測(cè)定方法

12、多數(shù)采用反相色譜法，用 C18、C8柱作固定相，乙腈-磷酸鹽緩沖液或乙腈-醋酸鹽緩沖液作流動(dòng)相，流動(dòng)相 pH值一般在7左右。常用的檢測(cè)方法為紫外檢測(cè)。 例1. RP-HPLC測(cè)定血漿中的西咪替丁 樣品制備 取待測(cè)血漿1ml,置于具塞離心試管中，加入內(nèi)標(biāo)液（25卩g/mL, 甲硝唑的水溶液）0.1ml、2mol/L NaOH液0.1ml、醋酸乙酯4ml,渦旋混合15min, 離心 10min（3000r/min ），取上層有機(jī)相置于另一試管中。水相再用醋酸乙酯提 取一次，合并兩次提取液，空氣流吹干，殘?jiān)苡?0.1ml 甲醇中，離心通過(guò) 0.5 卩m濾膜，取15卩l(xiāng)濾液進(jìn)樣。 色譜條件 色譜柱為

13、YWG-C柱，25cmx 4.6mm 10卩m 流動(dòng)相為甲醇-水- 二乙胺-磷酸（36:64:0.1:0.06）調(diào)節(jié)pH值7.0，流速1ml/min ;檢測(cè)器為紫外 檢測(cè)器， 225nm。 結(jié)果 色譜圖見(jiàn)圖 13-1 。保留時(shí)間：內(nèi)標(biāo)物， 4.2min ，西咪替丁， 7.1min ; 圖 13-1 血漿中西咪替丁的高效液相色譜圖 方法 平均 回收 率： 97.1% 102.7%（ RSD 為 2.3%3.5%， n=3 ）；日內(nèi) RSD2.0%3.7%（ n=5）,日間 RSD3.1%4.01%（ n=5）;線性范圍：1258000ng/mL; 檢測(cè)限（ S/N=3）： 50ng/mL。 例

14、2 RP-HPLC 測(cè)定血漿中的西咪替丁 2 樣品制備 取血漿100卩l(xiāng)，加入內(nèi)標(biāo)液（50卩g/mL,雷尼替丁的甲醇液） 10卩l(xiāng)，6mol/L NaOH溶液15卩l(xiāng)，混合。加入異丙醇-醋酸乙酯（4:96 ） 500卩l(xiāng) , 渦旋混合1min,離心，取有機(jī)層置另一試管中，80E氮?dú)饬鞔蹈桑瑲堅(jiān)?0卩l(xiāng) 甲醇溶解后，取40卩l(xiāng)進(jìn)樣。 色譜條件色譜柱為 卩Bondapak C18柱（10cmX 8mm 10卩m）。流動(dòng)相： 5.0mmol/L 磷酸鹽緩沖液（ pH5.1） -乙腈（92:8），流速 3.0ml/min 。檢測(cè)器：紫 外檢測(cè)器， 225nm。 結(jié)果 保留時(shí)間：西咪替丁 6min，內(nèi)

15、標(biāo)物8min。回收率：西咪替丁和內(nèi)標(biāo) 物 85%r95%0 日內(nèi) RSDW 6%，日間 RSD5%。線性范圍 0.23.0 卩 g/mL。 2. 雷尼替丁 雷尼替丁為呋喃類 H2 受體拮抗劑，其生物樣品的提取方法是 在堿性條件下用有機(jī)溶劑萃取， 為進(jìn)一步純化， 也可用酸性水溶液反萃取。 常用 的提取溶劑有醋酸乙酯、二氯甲烷、異丙醇 -醋酸乙酯等。使用氰基固相萃取小 柱進(jìn)行提取，提取效率高，可實(shí)現(xiàn)操作自動(dòng)化。反相C8、苯基和氰基固定相都 可用于雷尼替丁的測(cè)定。也可調(diào)節(jié)流動(dòng)相 pH值在酸性范圍內(nèi)，使雷尼替丁及其 代謝產(chǎn)物和質(zhì)子結(jié)合， 生成陽(yáng)離子， 用離子交換色譜法將其分離。 常用的檢測(cè)方 法為紫外

16、檢測(cè)。 例 1 RP-HPLC 測(cè)定血漿中的雷尼替丁 3 樣品制備 取待測(cè)血漿1.0ml，加入內(nèi)標(biāo)液（10mg/L，普魯卡因酰胺的甲醇 溶液）25卩l(xiāng)，6mol/L NaOH溶液15卩l(xiāng)，異丙醇-醋酸乙酯（4:96） 2.0ml，振搖 20min，離心10min, 3000r/min，取有機(jī)層至另一離心管中，于40C氮?dú)饬鞔蹈桑?殘?jiān)?00卩l(xiāng)甲醇溶解后，取75卩l(xiāng)進(jìn)樣。 色譜條件 色譜柱為卩Bondapak 6 柱（15cmX 3.9mm， 10卩n） 流動(dòng)相: 10mol/L磷酸二氫鉀（pH5.1）-乙腈（92:8），流速2.5ml/min。紫外檢測(cè)器，330nm 結(jié)果 保留時(shí)間：雷尼替

17、丁 5.8min，內(nèi)標(biāo)物3.8min。平均提取回收率為90%。 日內(nèi) RSD4.095.81%,日間 RSD7.5%9.51%。線性范圍 0.051.0mg/L。 例 2. 離子交換色譜法測(cè)定血漿和尿中雷尼替丁及其代謝產(chǎn)物 4 樣品制備 血漿：取血漿1ml置于具塞玻璃試管中（試管塞用鋁箔包好）， 加入內(nèi)標(biāo)液（ phenylpyramidol hydrochloride 溶于乙腈） 1ml， 10mol/L NaOH 溶液40卩l(xiāng)，乙腈-醋酸乙酯（1:1 ） 4ml，渦旋混合70s，離心10min。取約4.7ml 有機(jī)相，于45C減壓蒸發(fā)溶劑，殘?jiān)?60卩l(xiāng)流動(dòng)相溶解，渦旋混合10s，取 20

18、卩l(xiāng)進(jìn)樣。尿樣：取尿樣 0.2ml，加入內(nèi)標(biāo)液（同上）0.2ml，渦旋混合，取 1020卩l(xiāng)進(jìn)樣。 色譜條件 色譜柱：強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 Partisil SCX 柱（25cmx 4.6mm， 10卩n）o流動(dòng)相：0.1mol/L醋酸鹽緩沖液（用冰醋酸調(diào)節(jié) pH至5 ）-乙腈-四氫 呋喃（ 56.5:36:7.5 ）。流速： 1.9ml/min 。紫外檢測(cè)器波長(zhǎng) :320nm。 結(jié)果 對(duì)照品溶液和口服雷尼替丁后人血漿的色譜圖見(jiàn)圖 13-2。保留時(shí)間： 內(nèi)標(biāo)2.8min，雷尼替丁 N-氧化物3.6min，去甲基雷尼替丁 4.5min，雷尼替丁 5.3min，雷尼替丁 S-氧化物7.5min。 圖

19、13-2 人血漿中雷尼替丁及其代謝物的高效液相色譜圖 對(duì)照品溶液（ a） 口服 300mg 雷尼替丁 6h 后樣品血漿（ b）; 1. 內(nèi)標(biāo)， 2. 雷尼替丁 N- 氧化物， 3. 去甲基雷尼替丁， 4. 雷尼替丁， 5. 雷尼替丁 S- 氧化物 方法準(zhǔn)確度和精密度 提取回收率（血漿） ：雷尼替丁， 99.32%100.36%； 雷尼替丁 N-氧化物，29.76%31.05%;雷尼替丁 S-氧化物，73.41%74.95%;去 甲基雷尼替丁，79.70%80.70%;內(nèi)標(biāo)物，98.20%。日內(nèi)RSD （血漿，n=6）:雷 尼替丁，1.76%3.46%;雷尼替丁 N-氧化物，2.70%5.65%

20、;雷尼替丁 S-氧化物， 3.32%9.21%;去甲基雷尼替丁，3.66%8.85%0日間RSD （血漿，n=5）:雷尼 替丁，5.02%7.41%;雷尼替丁 N-氧化物，4.30%6.91%;雷尼替丁 S-氧化物， 5.42%6.82%;去甲基雷尼替丁，5.98%6.05%。日內(nèi)RSD （尿樣，n=6）:雷尼 替丁及其代謝產(chǎn)物，4.70%。日間RSD （尿樣，n=5）:雷尼替丁及其代謝產(chǎn)物， 4.70%。 線性范圍和檢測(cè)限 線性范圍：血漿中雷尼替丁， 404000ng/mL;血漿中 代謝物，201250ng/mL;尿中雷尼替丁上限：350卩g/mL;尿中雷尼替丁 N-氧化 物上限：100卩g

21、/mL;尿中雷尼替丁 S-氧化物和去甲基雷尼替丁上限：60卩g/mL。 檢測(cè)限（S/N=3）:血漿中雷尼替丁，5ng/mL;血漿中雷尼替丁 N-氧化物，15ng/mL; 血漿中雷尼替丁 S-氧化物，10ng/mL;血漿中去甲基雷尼替丁， 4ng/mL;尿中雷 尼替丁、雷尼替丁 N-氧化物和去甲基雷尼替丁， 0.15卩g/mL;尿中雷尼替丁 S- 氧化物，0.2卩g/mLo 3. 法莫替丁 法莫替丁為噻唑類H受體拮抗劑，其生物樣品在-15 C可貯存 幾個(gè)月。血樣、尿樣堿化后用醋酸乙酯、乙醚、乙腈等有機(jī)溶劑提取。由于法莫 替丁在有機(jī)溶劑中溶解度太小（如在氯仿、醋酸乙酯中小于0.01%），所以提取

22、效率低， 且回收率不穩(wěn)定。 由于法莫替丁分子中具有極性基團(tuán)， 在硅膠固定相上 可獲得保留，因此讓生物樣品通過(guò)硅膠萃取柱，水沖洗雜質(zhì)后用乙腈洗脫藥物， 提取效率能大大提高。反相C8、C8、氨基和氰基固定相都可用于法莫替丁的測(cè)定， 流動(dòng)相大都采用乙腈 -磷酸鹽緩沖液或甲醇 -磷酸鹽緩沖液。 常用的檢測(cè)方法為紫 外檢測(cè)。 例1.固相萃取-HPLC測(cè)定人血漿中的法莫替丁 樣品制備 取肝素抗凝的待測(cè)血漿1.0ml，加入乙腈2ml，渦旋混合3min， 以3500r/min離心15min，吸取上清液至另一試管中，于 50C水浴下氮?dú)獯蹈桑?加1ml蒸餾水溶解殘?jiān)⑼ㄟ^(guò)硅膠預(yù)處理小柱（小柱預(yù)先用 1ml甲醇

23、、1ml蒸 餾水潤(rùn)濕），5ml水洗后，用乙腈2ml洗脫，收集乙腈洗脫液，于 50C水浴下氮 氣吹干，殘?jiān)?.17mol/L的醋酸溶液50卩l(xiāng)溶解，吸取20卩l(xiāng)進(jìn)樣。 色譜條件 色譜柱：YWG-C柱，200mM 4.6mm, 10卩m 流動(dòng)相：乙腈 -0.019mol/L磷酸溶液（10:90 ）,用二乙胺調(diào)至pH3.5。流速：1ml/min。檢測(cè): 紫外，267nm 靈敏度：0.001AUFS外標(biāo)法定量。 結(jié)果 色譜圖見(jiàn)圖13-3。保留時(shí)間：法莫替丁，5.63min ;血漿內(nèi)源性雜質(zhì), 7.53min。 圖13-3人血漿中雷尼替丁及其代謝物的高效液相色譜圖 法莫替丁血漿（10卩g/L ）提取液

24、（a）空白血漿（b）; I.法莫替丁， II.血漿內(nèi)源性雜質(zhì) 方法回收率： 99.8%。萃取回收率：81.2%。血漿中藥物最低檢出濃度為 10 卩g/mL,在10200卩g/mL血藥濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。日內(nèi)和日間 RSD（ n=7） 均小于6% 例2.固相萃取-HPLC測(cè)定血漿、尿樣及胃液中的法莫替丁 樣品制備 血漿：肝素抗凝血漿離心后于-20 C冷凍，提取之前融化、攪拌 并離心30min。取1ml注入Bond-Elut硅膠萃取柱（預(yù)先依次用甲醇1ml、水2ml 處理），用水5ml沖洗，乙腈2ml洗脫。收集洗脫液，離心15min,經(jīng)0.45卩m 濾膜濾過(guò)，減壓用氮?dú)饬鞔蹈?，殘?jiān)苡?200卩

25、l流動(dòng)相中，渦旋混合，取100 卩l(xiāng)進(jìn)樣。尿樣：于-20 C貯存，測(cè)定前融化。取 5ml注入硅膠萃取柱（同上法 預(yù)處理），用水3ml沖洗，二甲基甲酰胺-水（1:1 ） 2ml洗脫，收集洗脫液，取 100卩l(xiāng)進(jìn)樣。胃液：處理方法與 血漿相似。 色譜條件 色譜柱：Supelcosyl LC-8 柱(25cm 4.6mm, 5卩m);保護(hù)柱： pelliguard 柱(40 卩 m)；流動(dòng)相：甲醇-乙腈-0.016mol/L 磷酸(10:10:80 ), 流速： 1.0ml/min ；紫外檢測(cè)檢測(cè)波長(zhǎng)： 254nm。 結(jié)果 方法準(zhǔn)確度和精密度 提取回收率： 血漿，80%87%；尿樣，85%90%。 日間和日內(nèi) RSD 血漿，2.2%3.75% (n=5);尿樣，2.5%4.3% ( n=5)。 線性范圍和檢測(cè)限線性范圍：血漿和唾液，0.12.0卩g