病毒感染的診斷與防治

1、常用的病毒學(xué)診斷方法包括：常用的病毒學(xué)診斷方法包括：病毒的分離鑒定病毒的分離鑒定病毒的血清學(xué)檢查病毒的血清學(xué)檢查病毒蛋白和核酸的檢測(cè)病毒蛋白和核酸的檢測(cè)第一節(jié) 病毒感染的診斷二、病毒的分離與鑒定二、病毒的分離與鑒定(一) 病毒的分離1.動(dòng)物接種動(dòng)物接種 是最原始的病毒培養(yǎng)方法，根據(jù)病毒種是最原始的病毒培養(yǎng)方法，根據(jù)病毒種類不同，選擇敏感動(dòng)物及適宜接種部位，類不同，選擇敏感動(dòng)物及適宜接種部位，如嗜如嗜 神經(jīng)性病毒（狂犬病毒）可接種神經(jīng)性病毒（狂犬病毒）可接種于小鼠腦內(nèi)，痘病毒可接種于家兔角膜于小鼠腦內(nèi)，痘病毒可接種于家兔角膜或皮內(nèi)?；蚱?nèi)。2.雞胚培養(yǎng)雞胚培養(yǎng) 雞胚對(duì)多種病毒敏感。一般采用孵化雞

2、胚對(duì)多種病毒敏感。一般采用孵化914天的雞胚，根據(jù)病毒種類不同，天的雞胚，根據(jù)病毒種類不同，將病毒標(biāo)本將病毒標(biāo)本 接種于雞胚的不同部位，接種于雞胚的不同部位，最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。3.組織培養(yǎng)法組織培養(yǎng)法 (tissueculture) 或細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng) (cellculture)法法 是將離體活組織塊或分散的組織細(xì)胞加是將離體活組織塊或分散的組織細(xì)胞加以培養(yǎng)的技術(shù)總稱，為病毒分離鑒定中以培養(yǎng)的技術(shù)總稱，為病毒分離鑒定中的最常用的基本方法。的最常用的基本方法。1. 細(xì)胞的變化細(xì)胞的變化 有

3、些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)可引起特有的細(xì)胞病變，稱為細(xì)胞病變效應(yīng) (cpe)。常見的變化有細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。 有些病毒如麻疹病毒、cmv、rsv等 作用于細(xì)胞膜，可使鄰近的細(xì)胞相互融合，形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞。 有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培養(yǎng)細(xì)胞中形成胞漿或核內(nèi)的包涵體。 病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的cpe1.中和試驗(yàn)中和試驗(yàn)(neutralizing test,nt test) 是病毒在活體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗(yàn)。 中和抗體(netralizing antibodies,ntab)是作用于

4、病毒表面抗原 (衣殼或包膜) 的抗體，同種不同型病毒間一般無(wú)交叉，特異性高，而且抗體在體內(nèi)維持時(shí)間長(zhǎng)。中和抗體陽(yáng)性不一定表示正在感染中，也可能因以前有過(guò)隱性感染所致。因此，中和試驗(yàn)適用于人群免疫情況的調(diào)查，在臨床診斷上較少使用。2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) (complement fixation test,cf test) 用已知病毒可溶性(cf)抗原來(lái)檢測(cè)病人血清中相應(yīng)(cf)抗體。cf抗原是病毒的內(nèi)部抗原，同種異型間常有交叉，故特異性較中和試驗(yàn)低。但cf抗體出現(xiàn)較早，消失較快，故cf陽(yáng)性可作為近期感染的指標(biāo)。減毒活疫苗與死疫苗優(yōu)缺點(diǎn)比較特點(diǎn)減毒活疫苗死疫苗制備方法通過(guò)非正常培養(yǎng)減毒株通過(guò)

5、化學(xué)物理方法使感染失活免疫接種一般為一次性多次免疫疫苗的穩(wěn)定性相對(duì)不穩(wěn)定相對(duì)穩(wěn)定免疫的類型體液免疫和細(xì)胞免疫體液免疫毒力回升有可能不可能安全性對(duì)免疫缺陷者有危險(xiǎn)安全性好生產(chǎn)和成本生產(chǎn)較復(fù)雜、成本高生產(chǎn)簡(jiǎn)單、成本低一、抗病化學(xué)制劑一、抗病化學(xué)制劑（一）核苷類藥物 核苷類藥物的作用機(jī)制有主要是抑制病毒基因復(fù)制模擬核苷成分摻入病毒基因組：合成的異常嘧啶取代病毒dna前體的胸腺嘧啶，病毒在復(fù)制過(guò)程中，這種異常的嘧啶分子摻入子代dna中使子代病毒結(jié)構(gòu)基因的合成和表達(dá)無(wú)法進(jìn)行，從而抑制病毒的復(fù)制，或復(fù)制出的病毒為缺陷病毒。 競(jìng)爭(zhēng)病毒復(fù)制酶1.無(wú)環(huán)鳥苷 (acyclovir,acv，阿昔洛韋)和丙氧鳥苷（g

6、anciclovir gcv，庚昔洛韋）為鳥嘌呤或脫氧鳥嘌呤核苷類似物。 該藥細(xì)胞毒性很小，是目前最有效的抗皰疹病毒藥物之一。廣泛用于皰疹病毒感染引起的單純皰疹、生殖器皰疹及帶狀皰疹。2.疊氮胸苷 (azidothymidine,azt) 胸腺嘧啶核苷類似物，通過(guò)阻斷前病毒dna的合成而抑制hiv的復(fù)制，azt對(duì)病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制比對(duì)細(xì)胞dna多聚酶敏感100倍以上?？梢杂行У亟档蚢ids的發(fā)病率與病死率。耐藥株的出現(xiàn)系由基因突變導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄酶具有耐藥性。因有抑制骨髓作用和形成病毒的耐藥而面臨被淘汰。3.病毒唑 對(duì)多種rna和dna病毒的復(fù)制都有抑制作用，但主要用于rna病毒感染的治療，對(duì)細(xì)胞的

7、核酸也有抑制作用。目前臨床主要用于流感病毒和呼吸道合胞病毒的治療。1賽科納瓦(saquinavir) 1995年批準(zhǔn)的第1個(gè)蛋白酶抑制劑。 2英迪納瓦（indinavir）、瑞托納瓦（ritonavir）是1996年批準(zhǔn)的新一代蛋白酶抑制劑，用于hiv。 （五）其他抗病毒藥物（五）其他抗病毒藥物1.金剛烷胺和甲基金剛烷胺 金剛烷胺為合成胺類，甲基金剛烷胺是其衍生物，兩者有相同的抗病毒譜和副作用，能阻止脫殼，主要用于治療甲型流感。2.甲酸磷霉素 無(wú)機(jī)焦磷酸鹽的有機(jī)類似物，抑制多種皰疹病毒，包括cmv、hsv、vzv、ebv、hhv6，可能還對(duì)hbv和逆轉(zhuǎn)錄病毒有作用。選擇性抑制病毒dna多聚酶和逆轉(zhuǎn)錄酶，而對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)影響。 二、干擾素和干擾素誘生劑的應(yīng)用二、干擾素和干擾素誘生劑的應(yīng)用1. 干擾素(ifn) 具有廣譜抗病毒作用，毒性小，使用同種ifn無(wú)抗原性，主要用于甲、乙、丙型肝炎，hsv，乳頭瘤病毒和鼻病毒等感染的治療。反復(fù)應(yīng)用也會(huì)引起耐藥性。2. ifn誘生劑 如： poly i c、甘草甜素、蕓芝多糖 。 三、中草藥防治病毒感染三