豬場(chǎng)及外圍洗消非洲豬瘟采樣方法

1、豬場(chǎng)及外圍洗消非洲豬瘟釆樣方法鼻腔是豬群感染病毒或排毒的主要途徑之一，無(wú)論在口然感染或者人工造病的條 件下，豬群都可以通過(guò)鼻腔帶毒和排毒。病毒感染的早期診斷對(duì)F豬群疫病的控制至關(guān)重要， 因此開(kāi)展科學(xué)、準(zhǔn)確及可執(zhí)行的監(jiān)測(cè)方案勢(shì)在必行。ASF病毒感染途徑的研究發(fā)現(xiàn)，鼻腔拭子的檢測(cè)比血液或其他采樣方法更早出現(xiàn)， 同時(shí)也具有易采集、可操作性強(qiáng)、對(duì)豬群應(yīng)激較小等優(yōu)點(diǎn)，從而成為臨床首選。本文參考文獻(xiàn) 報(bào)道結(jié)合臨床實(shí)際情況，對(duì)鼻腔拭子采樣做一介紹：第一步準(zhǔn)備鼻拭子采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無(wú)菌拭子、記號(hào)筆。第二步保定豬只，將無(wú)菌棉拭子深插入豬只鼻腔內(nèi)，旋轉(zhuǎn)三次，將拭子放入保存 管中

2、，記錄豬只信息。第三步用無(wú)菌注射器注入2nd拭子保存緩沖液，封口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。豬場(chǎng)內(nèi)環(huán)境的樣品采集涉及到固體和液體環(huán)境,結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況，對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)壞境 樣本采集做一介紹：一. 固體環(huán)境釆樣教程步驟一、準(zhǔn)備采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無(wú)菌軾子、記號(hào)筆。步驟二、用無(wú)菌注射器向拭管注入2nd保存緩沖液，先浸潤(rùn)無(wú)菌棉拭子。步驟三.固體環(huán)境采樣點(diǎn)表面呈井字采樣（詳見(jiàn)視頻），將拭子放入拭管屮，記錄采樣信息；封 口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。二、液體環(huán)境采樣教程步驟、準(zhǔn)備采樣材料：無(wú)菌離心管、一次性無(wú)菌吸頭、保存緩沖液、 封口膠帶、一次Fir-&

3、quot;性注射器、記號(hào)筆。L_l步驟二、用無(wú)菌注射器向離心管注入4ml保存緩沖液。步驟三、用無(wú)菌吸頭吸取采樣點(diǎn)液體lml置r離心管中（詳見(jiàn)視頻）。封口，記錄釆樣信息, 冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。三豬場(chǎng)內(nèi)環(huán)境建議采樣點(diǎn)豬場(chǎng)內(nèi)環(huán)境涉及的點(diǎn)和面非常多，以下建議采樣點(diǎn)涉及的主耍是常見(jiàn)污染區(qū)域或者需關(guān)注 的采樣點(diǎn)，供養(yǎng)殖場(chǎng)參考。1、物資消毒間：物資消毒架、物資進(jìn)口區(qū)域門把手、腳踏區(qū)域：2、人員消毒通道：門把手、入口處腳踏區(qū)域；3、獸藥房：藥房門把手、藥房冰箱門把；4、工作服：刮取污染的工作服上污染物；5、雨鞋：刮取雨鞋側(cè)面及鞋底的污染物；6、內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)車輛：輪胎、貨倉(cāng)、司機(jī)室、腳踏、方向盤、油門及剎車

4、部位；7、內(nèi)部運(yùn)輸斗車：輪胎、手推把手：8、飼料加丄成品倉(cāng)出料口：出料口、環(huán)境樣品、飼料袋：9、豬場(chǎng)內(nèi)門把手：豬舍及曽醫(yī)室等建筑門把手；10、道路：豬場(chǎng)內(nèi)道路、豬舍內(nèi)道路。以上監(jiān)測(cè)建議頻率為一周一次，各養(yǎng)殖場(chǎng)可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測(cè)頻率。豬場(chǎng)內(nèi)環(huán)境采樣出豬臺(tái)是豬場(chǎng)與外界車輛直接接觸的部位，如果外面售豬車輛洗消不到位，豬場(chǎng)員工裝豬時(shí)， 乂沒(méi)有嚴(yán)格遵循嚴(yán)格的臟凈分離原則，直接將場(chǎng)內(nèi)的豬趕到拉豬車上，就很容易將洗消不徹底 的拉豬車上的病毒（包括ASFv、FMDv. PEDv等）帶入生產(chǎn)區(qū)，從而使豬 場(chǎng)染上新的疫病，這 也是目前豬場(chǎng)最容易出現(xiàn)問(wèn)題的環(huán)節(jié)。據(jù)調(diào)査了解，ASFv通過(guò)離豬 場(chǎng)很近的裝豬臺(tái)感

5、染機(jī)率 有85%的機(jī)會(huì)。目前疫情緊張，在豬場(chǎng)外建獨(dú)立的售豬屮轉(zhuǎn)站（或轉(zhuǎn)運(yùn)屮心），來(lái)避免ASFv的感染是最 實(shí)用的辦法之一，可以有效的緩沖疫情的威脅。轉(zhuǎn)運(yùn)屮心可以很好避免場(chǎng)內(nèi)工作 人員與外界拉 豬車輛接觸，人員即使接觸也是場(chǎng)內(nèi)的周轉(zhuǎn)車，而場(chǎng)內(nèi)的周轉(zhuǎn)車輛是嚴(yán)格 按要求做好洗消烘干 工作再來(lái)裝豬的，相對(duì)來(lái)講全場(chǎng)的生物安全就有了保障，因此轉(zhuǎn)運(yùn)屮心現(xiàn)在變成了規(guī)模豬場(chǎng)的必耍設(shè)施。轉(zhuǎn)運(yùn)中心的建設(shè)，是豬場(chǎng)生物安全的璽耍一部分，而轉(zhuǎn)運(yùn)中心的環(huán)境是否安全關(guān)乎豬場(chǎng) 疫病是否發(fā)生，有案例報(bào)道，一養(yǎng)殖場(chǎng)在轉(zhuǎn)運(yùn)屮心監(jiān)測(cè)到相關(guān)的病原菌，因洗消工作執(zhí)行不到 位，20天后該病原菌傳播到豬場(chǎng)。可見(jiàn)轉(zhuǎn)運(yùn)屮心的洗消工作和環(huán)境安全預(yù)警

6、的重要性，洗消工 作可采用低圧沖洗、清潔劑打濕浸泡、熱水高圧清洗、晾干、消毒、烘干等步驟執(zhí)行，環(huán)境安 全預(yù)警可定期通過(guò)實(shí)驗(yàn)室（按照相關(guān)部門規(guī)定執(zhí)行）監(jiān)測(cè) 環(huán)境評(píng)估。轉(zhuǎn)運(yùn)屮心環(huán)境監(jiān)測(cè)包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)及內(nèi)部?jī)魠^(qū)三個(gè)部分，本文結(jié)合實(shí)際情 況，對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)中心環(huán)境采樣做如下預(yù)案：一、轉(zhuǎn)運(yùn)中心采樣建議一、采樣區(qū)域按劃分的三個(gè)區(qū)域進(jìn)行采樣，包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū).內(nèi)部?jī)魠^(qū)。二采樣示意圖1 外部污區(qū)選擇污區(qū)的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域1的左上角、右下角 采樣，選擇區(qū)域2的左下角、右上角采樣。2轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)選擇灰區(qū)的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選 擇區(qū)域3的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域4的左下角、右上角釆樣。3內(nèi)部

7、凈區(qū)選擇灰區(qū) 的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域5的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域6的左下角、右上角采三. 采樣示對(duì)象及方法1. 采樣對(duì)彖：所選釆集區(qū)域的固體表面.或者環(huán)境液體。2. 采樣方法：采用專用動(dòng)物病毒采樣管套裝，按凈區(qū)灰區(qū)-污區(qū)順序釆樣。(1) 固體表面：使用棉拭子釆樣，采用“井”字形法采樣后放入保存管中。(2) 液體環(huán)境：吸取環(huán)境中的液體0. 5-lml,放入保存管中。3.現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)人員耍依照規(guī) 范 進(jìn)行操作，做好現(xiàn)場(chǎng)記錄。以上監(jiān)測(cè)頻率為一周一次，各轉(zhuǎn)運(yùn)中心可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測(cè)頻率。轉(zhuǎn)運(yùn)中心釆樣視頻在當(dāng)前非洲豬瘟疫情嚴(yán)峻形勢(shì)下，豬場(chǎng)需加強(qiáng)生物安全體系建設(shè)，切斷病原傳播鏈條。 運(yùn)豬車輛

8、在豬場(chǎng)與豬場(chǎng)Z間、豬場(chǎng)與屠宰場(chǎng)之間、豬場(chǎng)與飼料廠之間交義運(yùn)輸?shù)?情況很常見(jiàn)， 帶來(lái)病毒交義傳播風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)丁豬場(chǎng)來(lái)說(shuō)，豬只和飼料的進(jìn)出都是無(wú)法避免的，而負(fù)責(zé)運(yùn)輸?shù)妮d體一車輛，是當(dāng)前交義污染最突出的問(wèn)題。被外部污染的車輛與 豬場(chǎng)的接觸流通是病毒從豬場(chǎng)外部進(jìn)入內(nèi)部的主要途徑Z。因此，提高豬場(chǎng)的“運(yùn)輸安全 系數(shù)”，使用徹底清洗、消毒和烘干的車輛非常重要。洗消房是洗消屮心的第一道防線，車輛經(jīng)過(guò)徹底清潔后，車輛、洗消房?jī)?nèi)部區(qū)域環(huán)境及洗消污水 的污染與否，直接反映洗消屮心的安全系數(shù)。同時(shí)，當(dāng)前建立的洗消屮心多為區(qū)域性共用，洗 消中心的安全系數(shù)關(guān)乎是否造成運(yùn)輸車輛的二次污染，是否增加區(qū)域內(nèi)豬場(chǎng)的安全風(fēng)險(xiǎn)。洗消房

9、的環(huán)境監(jiān)測(cè)涉及到車輛.內(nèi)部區(qū)域環(huán)境及污水三個(gè)部分，根據(jù)文獻(xiàn)結(jié)合實(shí)際情況，對(duì) 洗消中心-洗消房采樣做一建議：一、車輛釆樣建議 一、采樣清單序號(hào)釆樣區(qū)城運(yùn)豬車飼料畤車頭、雙側(cè)門(手把)、車尾、車身VV車輪、擋泥板、底盤V43;駛室腳踏板、方向盤、檔位桿、 座位V車廂4V/0二.采樣示意圖(1)示意車頭雙側(cè)門(手把車尾車身(2)示意(3)示意pn?nTTTrrriII（4）示意j石卜角、洗消房-內(nèi)部區(qū)域環(huán)境采樣建議一、采樣區(qū)域選擇原則：所選擇的采樣區(qū)域要具有一定的覆蓋面，越大越好。建議：取前、中、后三個(gè)區(qū)域，具 有覆蓋面，并貼合實(shí)際。二、采樣示意圖建議選擇3個(gè)區(qū)域進(jìn)行采樣，如圖所示，包括：進(jìn)入洗消間區(qū)域A、汚水道衣而區(qū)域B、洗消間區(qū)域C。區(qū)域