FRD上皮組織染色液-魏麗惠教授ppt課件

1、葉酸受體介導(dǎo)葉酸受體介導(dǎo)（FRD)的的腫瘤檢測腫瘤檢測新技術(shù)新技術(shù) -FRD上皮組織特殊染色液上皮組織特殊染色液 檢測宮頸異常病變（檢測宮頸異常病變（CIN2+）主講人：魏麗惠主講人：魏麗惠時時 間間 ：2015.12.051；.主要內(nèi)容主要內(nèi)容 現(xiàn)有宮頸癌篩查技術(shù)現(xiàn)有宮頸癌篩查技術(shù) FRD FRD上皮組織特殊染色液作用原理上皮組織特殊染色液作用原理 FRD FRD特殊染色操作規(guī)范及注意事項特殊染色操作規(guī)范及注意事項 臨床研究結(jié)論臨床研究結(jié)論2；.背景背景宮頸癌流行病學(xué)宮頸癌流行病學(xué) 宮頸癌是宮頸癌是危及婦女生命健康的第二大殺手，僅次于乳腺癌危及婦女生命健康的第二大殺手，僅次于乳腺癌； 全世界

2、每年新增病例數(shù)全世界每年新增病例數(shù)超過超過5050萬，萬， 2525萬人因其死亡。發(fā)展萬人因其死亡。發(fā)展 中國家每年有中國家每年有2020萬人因此死亡，占全球死亡人數(shù)的萬人因此死亡，占全球死亡人數(shù)的8080； 我國每年新增病例數(shù)超過我國每年新增病例數(shù)超過1313萬人萬人，超過全球總數(shù)的超過全球總數(shù)的1/41/4， 死亡人數(shù)約為死亡人數(shù)約為3 3萬人。萬人。3；.背景背景-宮頸癌篩查的必要性宮頸癌篩查的必要性死亡的主要原因：很少篩查或從不篩查；死亡的主要原因：很少篩查或從不篩查； 美國美國 50宮頸癌發(fā)生于從不篩查宮頸癌發(fā)生于從不篩查 10宮頸癌發(fā)生于近宮頸癌發(fā)生于近5年未接受篩查年未接受篩查有

3、明確的癌前病變階段，發(fā)展緩慢，有足有明確的癌前病變階段，發(fā)展緩慢，有足夠的時機來重復(fù)進行篩查；夠的時機來重復(fù)進行篩查；癌前病變的治療效果較好。癌前病變的治療效果較好。4；. 宮頸細胞學(xué)檢查宮頸細胞學(xué)檢查 HPV-DNA檢測檢測 醋白試驗醋白試驗/碘試驗碘試驗 FRD上皮組織特殊染色上皮組織特殊染色 技術(shù)技術(shù)目前用于宮頸癌檢查的技術(shù)目前用于宮頸癌檢查的技術(shù)5；.細胞學(xué)檢查細胞學(xué)檢查液基細胞學(xué)巴氏涂片樣本采集及制片：樣本采集及制片： 細胞采集細胞采集 （是否完整）（是否完整） 脫落細胞脫落細胞 （是否脫落）（是否脫落） 腺體病變（是否敏感）腺體病變（是否敏感）閱片：閱片： 觀察細胞形態(tài)的改變（是否

4、特異）觀察細胞形態(tài)的改變（是否特異） 專業(yè)閱片醫(yī)生（是否足夠）專業(yè)閱片醫(yī)生（是否足夠）6；.HPV-DNA檢測檢測臨床指導(dǎo)意義：臨床指導(dǎo)意義： 可進行性消退；可進行性消退； 單次單次HPV感染有多大風險；感染有多大風險； 持續(xù)高危型感染導(dǎo)致風險增加；持續(xù)高危型感染導(dǎo)致風險增加；高標準實驗室、專業(yè)人員高標準實驗室、專業(yè)人員檢查費用檢查費用7；.肉眼檢查肉眼檢查(VIA/VILI)陽性預(yù)測值低陽性預(yù)測值低;絕經(jīng)后及宮頸萎縮婦女能否絕經(jīng)后及宮頸萎縮婦女能否 使用；使用； 8；. 及時診斷，科學(xué)分流；及時診斷，科學(xué)分流； 診斷頸管病變；診斷頸管病變； 降低漏診率，提高診斷符合率；降低漏診率，提高診斷符

5、合率； 宮頸的腫瘤屬性的客觀信息。宮頸的腫瘤屬性的客觀信息。臨床需要什么？臨床需要什么？9；.葉酸受體介導(dǎo)的腫瘤細胞葉酸受體介導(dǎo)的腫瘤細胞靶向檢測技術(shù)靶向檢測技術(shù)一種新技術(shù)一種新技術(shù) 10；.一個新產(chǎn)品一個新產(chǎn)品FRD上皮組織特殊染色液上皮組織特殊染色液成分：葉酸衍生物、亞甲藍等。成分：葉酸衍生物、亞甲藍等。陜西高源醫(yī)療器械服務(wù)有限公司出品陜西高源醫(yī)療器械服務(wù)有限公司出品11；.臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用用于婦科內(nèi)診常規(guī)檢查用于婦科內(nèi)診常規(guī)檢查 提供宮頸提供宮頸異常病變異常病變的客觀信息，的客觀信息，及時檢測及時檢測, ,科學(xué)科學(xué)分流分流病病人，提高病人的依從性，降低假陰性，提高診斷符合率。人，提高病人

6、的依從性，降低假陰性，提高診斷符合率。 （1 1）FRDFRD染色染色陰性，陰性，提示宮頸無異常病變提示宮頸無異常病變，建議患者定建議患者定期檢查或細胞學(xué)、期檢查或細胞學(xué)、HPVHPV檢查；檢查； （2 2）FRDFRD染色染色陽性，陽性，提示宮頸異常病變，提示宮頸異常病變，建議陰道鏡檢建議陰道鏡檢查查。12；.使用操作流程使用操作流程 宮頸：用蘸取宮頸：用蘸取FRDFRD上皮組織特殊染色液上皮組織特殊染色液的的婦科大棉簽，婦科大棉簽，在在宮宮頸表面頸表面用力涂抹用力涂抹5 5圈圈，再在，再在宮頸外口宮頸外口用力按壓用力按壓1010秒秒，取出觀察，取出觀察顏色顏色。 宮頸管：用蘸取宮頸管：用蘸

7、取FRDFRD上皮組織特殊染色液的小棉簽上皮組織特殊染色液的小棉簽插入宮頸插入宮頸管管（1.5 cm-1.5 cm-3 3.0 cm.0 cm），沿頸管內(nèi)壁），沿頸管內(nèi)壁旋轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)5 5圈圈逐步下拉棉簽逐步下拉棉簽 ，進行頸管內(nèi)特殊染色。進行頸管內(nèi)特殊染色。13；. 陰性：棉簽陰性：棉簽棕黃色棕黃色，提示上皮組織無病變；，提示上皮組織無病變； 陰性：棉簽陰性：棉簽綠色綠色，提示上皮組織無異常病變；，提示上皮組織無異常病變； 陽性：棉簽陽性：棉簽藍色藍色、藍黑色藍黑色、黑色，提示上皮組、黑色，提示上皮組織異常病變（織異常病變（CIN2+CIN2+）。）。14；.FRD作用機理作用機理FRD上皮組織

8、特殊染色液中的上皮組織特殊染色液中的葉葉酸衍生物（葉酸二氫呋喃）酸衍生物（葉酸二氫呋喃）與腫與腫瘤細胞表面的瘤細胞表面的葉酸受體葉酸受體結(jié)合，內(nèi)結(jié)合，內(nèi)吞胞漿后，將共價連接的吞胞漿后，將共價連接的還原態(tài)還原態(tài)亞甲藍亞甲藍帶入細胞，亞甲藍在腫瘤帶入細胞，亞甲藍在腫瘤細胞內(nèi)細胞內(nèi)Fe2+的催化下，快速與細的催化下，快速與細胞內(nèi)胞內(nèi)活性氧活性氧發(fā)生氧化反應(yīng)，使黃發(fā)生氧化反應(yīng)，使黃色的底物變色，從而判斷是否具色的底物變色，從而判斷是否具有腫瘤組織。有腫瘤組織。15；.FRD的主要特點的主要特點特點一特點一 : 靈敏靈敏 已有的研究顯示已有的研究顯示FRD檢測檢測CIN2+的敏感性大的敏感性大于于75%

9、。16；.陜西省兩癌篩查項目（陜西省兩癌篩查項目（9949例）例） 人群：人群：2012年年10月至月至2013年年12月在西安市高陵縣的子宮月在西安市高陵縣的子宮頸癌篩查門診和陜西省人民醫(yī)院婦科門診就診的頸癌篩查門診和陜西省人民醫(yī)院婦科門診就診的9949名名已婚女性患者。進入研究的對象均符合以下條件：年齡已婚女性患者。進入研究的對象均符合以下條件：年齡21歲以上，此前歲以上，此前6個月未接受過宮頸手術(shù)。未在經(jīng)期和孕期。個月未接受過宮頸手術(shù)。未在經(jīng)期和孕期。所有所有9949名受檢者年齡區(qū)間名受檢者年齡區(qū)間22-78歲。平均歲。平均49.51歲，歲，30-65歲占歲占98.5%。 方案：方案：F

10、RD染色檢查染色檢查TCT取樣取樣陰道鏡檢查陰道鏡檢查活檢活檢。17；.檢查方法檢查方法敏感性敏感性特異性特異性陽性陽性預(yù)測值預(yù)測值陰性陰性預(yù)測值預(yù)測值FRD特殊染色陽性特殊染色陽性75.0%81.6%48.6%93.3%細胞學(xué)（細胞學(xué)（ASC-H）56.0%87.9%52.8%89.2%FRD+細胞學(xué)（任一為陽細胞學(xué)（任一為陽性，檢查即為陽性）性，檢查即為陽性）78.0%70.7%39.0%93.0%FRD+細胞學(xué)（同時陽性，細胞學(xué)（同時陽性，檢查即為陽性）檢查即為陽性）50.0%98.6%89.3%89.1%結(jié)論結(jié)論18；.北京多中心研究北京多中心研究 項目基本情況：項目基本情況： 牽頭單

11、位牽頭單位-北京大學(xué)人民醫(yī)院北京大學(xué)人民醫(yī)院 聯(lián)合參研單位聯(lián)合參研單位-天壇醫(yī)院、天壇醫(yī)院、301醫(yī)院、北京安貞醫(yī)院、醫(yī)院、北京安貞醫(yī)院、 北京朝陽醫(yī)院、北京大學(xué)第三醫(yī)院、北京婦產(chǎn)醫(yī)院、北京朝陽醫(yī)院、北京大學(xué)第三醫(yī)院、北京婦產(chǎn)醫(yī)院、 北京復(fù)興醫(yī)院、北京世紀壇醫(yī)院、北京同仁醫(yī)院、北北京復(fù)興醫(yī)院、北京世紀壇醫(yī)院、北京同仁醫(yī)院、北 京宣武醫(yī)院、北京醫(yī)院、協(xié)和醫(yī)院。京宣武醫(yī)院、北京醫(yī)院、協(xié)和醫(yī)院。 研究方案：研究方案：TCT和和/或或HPV異常；有臨床指癥需要做陰道鏡異常；有臨床指癥需要做陰道鏡 檢查檢查FRD染色染色陰道鏡檢查陰道鏡檢查活檢活檢 共收集到有活檢結(jié)果的病例共收集到有活檢結(jié)果的病例192

12、6例。例。19；.人群背景信息人群背景信息年齡：平均年齡40.98(10.33) 項目項目 例數(shù)例數(shù)20-29 256( 13.39%)30-39 685( 35.83%)40-49 524( 27.41%)50-65 447( 23.38%)合計合計missing 191214研究人群的年齡分段情況研究人群的年齡分段情況20；.研究人群的孕次情況研究人群的孕次情況孕次孕次病例數(shù)病例數(shù)0 229( 13.15%)1 331( 19.00%)2 466( 26.75%)3 377( 21.64%)4 198( 11.37%)5 84( 4.82%)6 41( 2.35%)7 7( 0.40%)8

13、 7( 0.40%)9 2( 0.11%)合計合計Missing 174218421；.研究人群的產(chǎn)次情況研究人群的產(chǎn)次情況產(chǎn)次產(chǎn)次例數(shù)例數(shù)0 455( 26.12%)1 944( 54.19%)2 263( 15.10%)3 57( 3.27%)4 16( 0.92%)5 7( 0.40%)合計合計 1742Missing 18422；.總數(shù)據(jù)情況總數(shù)據(jù)情況病理診斷結(jié)果病理診斷結(jié)果已完成病例數(shù)已完成病例數(shù)計劃完成病例數(shù)計劃完成病例數(shù)炎癥炎癥750 ( 38.94%)500CIN1521 ( 27.05%)600CIN2289 ( 15.01%)600CIN3295 ( 15.32%)宮頸癌宮

14、頸癌71 ( 3.69%)300合計合計19262000總研究入組人群情況總研究入組人群情況23；.病理結(jié)果病理結(jié)果HPVHPV結(jié)果結(jié)果合計合計MissingMissing陰性陰性陽性陽性CIN2+ 28( 4.49%) 595( 95.51%)62332CIN1與炎癥與炎癥 178( 14.52%) 1048( 85.48%)122645合計合計 206( 11.14%) 1643( 88.86%)184977HPV檢測情況檢測情況-（未區(qū)分檢測方法）（未區(qū)分檢測方法）24；.HPV檢測能力評估檢測能力評估指標指標值值（95% CI CI）符合率符合率41.81%（39.56-44.05）K

15、APPA7.15%（5.25-9.04）靈敏度靈敏度95.51%（93.88-97.13）特異度特異度14.52%（12.55-16.49）陽性預(yù)測值陽性預(yù)測值36.21%（33.89-38.54）陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值86.41%（81.73-91.09）陽性似然比陽性似然比1.12（1.09-1.15）陰性似然比陰性似然比0.31（0.21-0.46）25；.病理結(jié)果病理結(jié)果細胞學(xué)結(jié)果細胞學(xué)結(jié)果合計合計MissingMissing陰性陰性（% %）陽性陽性(ASCUS)(ASCUS)（% %）CIN2+ 132( 20.66) 507( 79.34)63916CIN1與炎癥與炎癥 429(

16、34.24) 824( 65.76)125318合計合計 561( 29.65) 1331( 70.35)189234病理結(jié)果病理結(jié)果細胞學(xué)結(jié)果細胞學(xué)結(jié)果合計合計MissingMissing陰性陰性（% %）陽性陽性(ASC-H)(ASC-H)（% %）CIN2+ 271( 42.41) 368( 57.59)63916CIN1與炎癥與炎癥 833( 66.48) 420( 33.52)125318合計合計 1104( 58.35) 788( 41.65)189234細胞學(xué)檢測能力評估細胞學(xué)檢測能力評估26；.指標指標值（值（%）95%CI符合率符合率49.4747.22-51.72KAPPA

17、10.737.44-14.02靈敏度靈敏度79.3476.20-82.48特異度特異度34.2431.61-36.87陽性預(yù)測值陽性預(yù)測值38.0935.48-40.70陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值76.4772.96-79.98陽性似然比陽性似然比1.211.14-1.28陰性似然比陰性似然比0.600.51-0.72指標指標值（值（%）95%CI符合率符合率63.4861.31-65.65KAPPA22.7718.36-27.18靈敏度靈敏度57.5953.76-61.42特異度特異度66.4863.87-69.09陽性預(yù)測值陽性預(yù)測值46.7043.22-50.18陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值75.45

18、72.91-77.99陽性似然比陽性似然比1.721.55-1.90陰性似然比陰性似然比0.640.58-0.70細胞學(xué)分類細胞學(xué)分類1（ASCUS）細胞學(xué)分類細胞學(xué)分類2（ASC-H）細胞學(xué)檢測能力評估細胞學(xué)檢測能力評估27；.病理結(jié)果病理結(jié)果FRDFRD染色結(jié)果染色結(jié)果合計合計陰性陰性陽性陽性CIN2+145（22.14%）510（77.86%）655CIN1與炎癥與炎癥749（58.93）522（41.07%）1271合計合計894( 46.42%)1032( 53.58%)1926FRD檢測能力的評估檢測能力的評估28；.指標指標值值(%)95%CI符合率符合率65.3763.24-6

19、7.49KAPPA32.2928.43-36.15靈敏度靈敏度77.8674.68-81.04特異度特異度58.9356.23-61.63陽性預(yù)測值陽性預(yù)測值49.4246.37-52.47陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值83.7881.36-86.20陽性似然比陽性似然比1.901.75-2.05陰性似然比陰性似然比0.380.32-0.44FRD檢測能力的評估檢測能力的評估29；.指標指標FRD（95% CI） TCT(ASCUS) （95% CI）HPV （95% CI）符合率符合率65.37%(63.24-67.49)49.47%(47.22-51.72)41.81%(39.56-44.05)KA

20、PPA32.29%(28.43-36.15)10.73%(7.44-14.02)7.15%(5.25-9.04)靈敏度靈敏度77.86%(74.68-81.04)79.34%(76.20-82.48)95.51%(93.88-97.13)特異度特異度58.93%(56.23-61.63)34.24%(31.61-36.87)14.52%(12.55-16.49)陽性預(yù)測值陽性預(yù)測值49.42%(46.37-52.47)38.09%(35.48-40.70)36.21%(33.89-38.54)陰性預(yù)測值陰性預(yù)測值83.78%(81.36-86.20)76.47%(72.96-79.98)86.41%(81.73-91