血液細(xì)胞分析儀原理及應(yīng)用

1、血液細(xì)胞分析儀原理及應(yīng)用 主要內(nèi)容一血液細(xì)胞分析儀的發(fā)展簡(jiǎn)史二血細(xì)胞計(jì)檢測(cè)原理 人類(lèi)生理和病理變化，往往會(huì)引起血液組分的變化，所以及時(shí)了解血液組分的變化，可以為醫(yī)生提供診斷與治療疾病的重要依據(jù)。 紅細(xì)胞 雙凹圓盤(pán) 無(wú)核 紅細(xì)胞的直徑在69m之間，平均為7.2m。 成年男子的紅細(xì)胞個(gè)數(shù)為(4.66.2)1012個(gè)/l 成年女子的紅細(xì)胞個(gè)數(shù)為(4.25.4)1012個(gè)/l 白細(xì)胞 有核 球形 直徑為725m。 正常人的白細(xì)胞數(shù)目為(410)109個(gè)/l 血小板 兩面微凹的圓盤(pán)，受刺激時(shí)伸出偽足 正常人的血小板值為(100300)109個(gè)/l，直徑為24m。 血紅蛋白（血色素或血紅素） 血紅蛋白存在

2、于紅細(xì)胞中，是一種含鐵的色蛋白 成年男子為120160g/l 成年女子為110150g/l血液細(xì)胞分析儀測(cè)量參數(shù) 紅細(xì)胞rbc 白細(xì)胞wbc 血小板plt 血紅蛋白hgb 紅細(xì)胞比容hct 平均紅細(xì)胞容量mcb 平均血紅蛋白量mch 平均血紅蛋白濃度mchc一、血液細(xì)胞分析儀的發(fā)展簡(jiǎn)史 1956年美國(guó)科學(xué)家w.h.coulter將電阻法計(jì)數(shù)粒子的專(zhuān)利技術(shù)應(yīng)用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得成功 其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮血細(xì)胞在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)為基礎(chǔ)，進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定，這種方法稱(chēng)為電阻法或庫(kù)爾特原理。 國(guó)外廠商： 日本sysmex 美國(guó)beckman-cou

3、lter 日本kohden 美國(guó)danam 瑞典boule 美國(guó)bayer 美國(guó)abbott 國(guó)內(nèi)廠商： 南昌特康 南昌百特 深圳邁瑞 桂林百利特二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理1. 庫(kù)爾特計(jì)數(shù)原理2. 白細(xì)胞分類(lèi)及計(jì)算方法3. 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)核紅細(xì)胞比容測(cè)定原理4. 血紅蛋白測(cè)定原理5. 血小板計(jì)數(shù)原理6. 其它參數(shù)計(jì)算方法7. 五分類(lèi)血液分析儀原理及應(yīng)用機(jī)型1. 庫(kù)爾特計(jì)數(shù)原理 庫(kù)爾特原理（coulter principle） ：二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理庫(kù)爾特原理 懸浮在電解液中的顆粒/細(xì)胞，隨電解液通過(guò)小孔管時(shí)，因取代了相同體積的電解液，在恒電流設(shè)計(jì)的電路中導(dǎo)致小孔管內(nèi)外兩電極間電阻發(fā)生瞬時(shí)變化，而產(chǎn)生

4、了電位脈沖。脈沖信號(hào)的大小和次數(shù)與顆粒的大小和數(shù)目成正比。二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理2. 白細(xì)胞分類(lèi)及計(jì)算方法 根據(jù)脈沖的大小，即可人為地將血內(nèi)地白細(xì)胞分成幾群（二分群或三分群） 三分類(lèi)：淋巴細(xì)胞ly，單核細(xì)胞mo，粒細(xì)胞gi。 五分類(lèi)：淋巴細(xì)胞ly，單核細(xì)胞mo，粒細(xì)胞gi（中性細(xì)胞，嗜酸性細(xì)胞，嗜堿性細(xì)胞） 電阻抗法白細(xì)胞“分類(lèi)”不能代替顯微鏡涂片檢查二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 在進(jìn)行血細(xì)胞測(cè)定之前，全血標(biāo)本必須用稀釋液在儀器外部或內(nèi)部進(jìn)行一定比例的稀釋?zhuān)话阌?：251的稀釋倍數(shù)來(lái)測(cè)量白細(xì)胞 儀器將從白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中測(cè)量到體積35fl顆粒產(chǎn)生的電子脈沖的數(shù)量作為白細(xì)胞計(jì)數(shù)，根據(jù)細(xì)胞稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)算

5、，得到正確的白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。 二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理儀器是如何進(jìn)行細(xì)胞分群的呢？ 儀器除給出細(xì)胞數(shù)據(jù)結(jié)果外，同時(shí)提供出細(xì)胞體積分布圖形，這些可以表示出細(xì)胞群體分布情況的圖形被稱(chēng)為直方圖 它可以顯示出某一特定細(xì)胞群的平均細(xì)胞體積、細(xì)胞分布情況和是否存在明顯的異常細(xì)胞群 直方圖是由測(cè)量通過(guò)感應(yīng)區(qū)的每個(gè)細(xì)胞脈沖累積得到的，根據(jù)庫(kù)爾特原理可以在計(jì)數(shù)的同時(shí)進(jìn)行分析測(cè)量。 二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理直方圖與脈沖信號(hào)的關(guān)系二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 在進(jìn)行白細(xì)胞分析時(shí)，儀器的計(jì)算機(jī)部分可以將白細(xì)胞體積從35450fl分為256個(gè)通道，每個(gè)通道約為1.64fl，細(xì)胞根據(jù)其體積大小被分別放在不同通道中，從而得到白細(xì)胞體

6、積分布的直方圖 二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 經(jīng)過(guò)溶血?jiǎng)┨幚砗蟮陌准?xì)胞根據(jù)體積大小可以初步確認(rèn)其相應(yīng)的種類(lèi)： 第一亞群（小細(xì)胞群）是淋巴細(xì)胞lym； 第二個(gè)亞群是單個(gè)核細(xì)胞群mono，也被稱(chēng)為中間細(xì)胞mid； 相當(dāng)于粒細(xì)胞的細(xì)胞群gran位于第三亞群（大細(xì)胞群）。 二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 儀器根據(jù)各細(xì)胞群占總體積的比例計(jì)算出各細(xì)胞群的百分比，如果與該標(biāo)本為的白細(xì)胞總數(shù)相乘，即得到各項(xiàng)的絕對(duì)值 注意，由于各廠家血細(xì)胞分析儀使用的稀釋液和溶血?jiǎng)┏煞植煌耆嗤瑢?duì)白細(xì)胞膜的作用程度不同，所以?xún)x器對(duì)各類(lèi)白細(xì)胞區(qū)分界限的規(guī)定有所不同，在使用時(shí)不應(yīng)隨意更換生產(chǎn)廠家試劑

7、，防止造成錯(cuò)誤報(bào)告。 二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理3. 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞比容測(cè)定原理 大多數(shù)血細(xì)胞分析儀使用庫(kù)爾特法進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)核紅細(xì)胞比容測(cè)定，其原理同白細(xì)胞檢測(cè)一樣。 紅細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，形成大小相應(yīng)的脈沖，脈沖的多少即紅細(xì)胞的數(shù)目，脈沖的高度代表單個(gè)脈沖細(xì)胞的體積 脈沖高度疊加，經(jīng)過(guò)換算可得到紅細(xì)胞的比容 hct二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 紅細(xì)胞比容的測(cè)定方法： 紅細(xì)胞比容指紅細(xì)胞在全血中所占的容積百分比是用來(lái)檢測(cè)紅細(xì)胞數(shù)量的一個(gè)比值。 先以單個(gè)脈沖細(xì)胞的高度計(jì)算紅細(xì)胞的平均體積mcv，再乘以紅細(xì)胞的數(shù)，得出紅細(xì)胞比容 正常成年人的紅細(xì)胞比容,男性為40%-50%,女性為37%-48%。二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理4. 血紅蛋白測(cè)定原理 一般采取比色法 加入溶血?jiǎng)?，釋放血紅蛋白 用hicn 生成氰化血紅蛋白 ，或是用sls，光譜最大吸收在540nm附近。二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理5. 血小板計(jì)數(shù)原理 血小板隨紅細(xì)胞一起在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，由于血小板體積與紅細(xì)胞體積有明顯的差異，儀器設(shè)定了特定的閾值，將高于閾值者定于紅細(xì)胞，反之為血小板 。二、血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)原理 血小板分別貯存于64個(gè)通道內(nèi)，直方圖范圍為2-30fl。 為了使血小板計(jì)數(shù)更準(zhǔn)確，有些儀器專(zhuān)門(mén)設(shè)置了增加血小板準(zhǔn)確性的計(jì)數(shù)，如鞘流計(jì)數(shù)、浮動(dòng)界標(biāo)、擬合曲線等