結(jié)核分枝桿菌與結(jié)核病

1、結(jié)核分枝桿菌與結(jié)核病mycobacterium tuberculosisand tuberculosis1905年諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎(jiǎng)年諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎(jiǎng) 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌( (m.tuberculosism.tuberculosis) )在分類上在分類上屬于屬于放線菌門放線菌門、分枝桿菌屬分枝桿菌屬，簡稱結(jié)核桿菌。，簡稱結(jié)核桿菌。contents結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌是如何發(fā)現(xiàn)？是如何發(fā)現(xiàn)？1結(jié)核桿菌的生物學(xué)特征結(jié)核桿菌的生物學(xué)特征2結(jié)核桿菌所致疾病結(jié)核桿菌所致疾病3結(jié)核病的預(yù)防和治療結(jié)核病的預(yù)防和治療4mtb的發(fā)現(xiàn) 很早以前，法國杜鮑阿通過尸體解剖發(fā)現(xiàn)，很早以前，法國杜鮑阿通過尸體解剖

2、發(fā)現(xiàn)，結(jié)核病人肺部有白色的、較硬的，象粟粒大小的結(jié)核病人肺部有白色的、較硬的，象粟粒大小的一顆顆小結(jié)節(jié)，類似堅(jiān)果的核，稱之為一顆顆小結(jié)節(jié)，類似堅(jiān)果的核，稱之為“結(jié)核結(jié)核”。 1815年，法國賴萘克醫(yī)生提出年，法國賴萘克醫(yī)生提出結(jié)核病不是一結(jié)核病不是一個(gè)局部疾病，可以侵犯全身，可在身體任何部位個(gè)局部疾病，可以侵犯全身，可在身體任何部位發(fā)生結(jié)核病灶。發(fā)生結(jié)核病灶。 1881年，年，koch致力于結(jié)核病病因的研究。致力于結(jié)核病病因的研究。 koch認(rèn)為，認(rèn)為，“結(jié)節(jié)、結(jié)核結(jié)節(jié)、結(jié)核”里肯定存在具里肯定存在具有傳染性的病原菌。有傳染性的病原菌。 1882年，年， koch首先在首先在結(jié)核病灶中發(fā)現(xiàn)了一

3、種細(xì)結(jié)核病灶中發(fā)現(xiàn)了一種細(xì)長略帶彎曲的桿菌長略帶彎曲的桿菌結(jié)核結(jié)核桿菌，開創(chuàng)了結(jié)核病研究桿菌，開創(chuàng)了結(jié)核病研究的新記元，獲得諾貝爾醫(yī)的新記元，獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)與生理學(xué)獎(jiǎng)。學(xué)與生理學(xué)獎(jiǎng)。mtbmtb的發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)mtb的生物學(xué)特征1 1、形態(tài)及染色、形態(tài)及染色 1 1細(xì)長略彎曲的桿菌細(xì)長略彎曲的桿菌，大小大小14x0.4m；呈單個(gè)、分；呈單個(gè)、分枝排列，或聚集成團(tuán)。枝排列，或聚集成團(tuán)。 2 2. .無鞭毛、無芽胞、有莢膜；無鞭毛、無芽胞、有莢膜；一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特征一、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特征 2.染色方法：齊染色方法：齊-尼（尼（ziehl-neelsen）抗酸染色）抗酸染色法（法（acid-fa

4、st stain) 原理：細(xì)胞壁中含大量的脂質(zhì)，約占干重的原理：細(xì)胞壁中含大量的脂質(zhì)，約占干重的60%。尤其尤其是其中的分枝菌酸（是其中的分枝菌酸（mycolic acid）影響染料的滲透，且）影響染料的滲透，且一旦著色便可抵抗鹽酸酒精的脫色作用一旦著色便可抵抗鹽酸酒精的脫色作用 。鏡鏡 檢檢 步驟：步驟： 涂片、固定涂片、固定石炭酸復(fù)紅石炭酸復(fù)紅 結(jié)核桿菌呈結(jié)核桿菌呈 紅色紅色 背景為藍(lán)色背景為藍(lán)色 鹽酸酒鹽酸酒精脫色精脫色 美藍(lán)復(fù)染美藍(lán)復(fù)染 加熱35分鐘抗酸染色陽性，分枝狀排列的細(xì)長桿菌抗酸染色陽性，分枝狀排列的細(xì)長桿菌3 3、培養(yǎng)特性、培養(yǎng)特性 111 1營養(yǎng)要求較高：營養(yǎng)要求較高：lo

5、wensteinlowensteinjensenjensen（l-jl-j）即羅氏培養(yǎng)）即羅氏培養(yǎng)基（含基（含蛋黃蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽和、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽和孔雀綠孔雀綠）含脂質(zhì)生長因子，刺激生長含脂質(zhì)生長因子，刺激生長抑制雜菌生長抑制雜菌生長固體培養(yǎng)：固體培養(yǎng)：2323周見菌落生長，呈顆粒、結(jié)節(jié)或花周見菌落生長，呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜狀；乳白色或米黃色；不透明菜狀；乳白色或米黃色；不透明液體培養(yǎng)：呈菌膜生長液體培養(yǎng)：呈菌膜生長2 2專性需氧；專性需氧；ph6.56.8ph6.56.8 營養(yǎng)要求高，結(jié)核桿菌生長十分緩慢，營養(yǎng)要求高，結(jié)核桿菌生長十分緩慢，1218h才分裂一才分裂一次，在固體

6、培養(yǎng)基上次，在固體培養(yǎng)基上1530d才出現(xiàn)肉眼可見的象才出現(xiàn)肉眼可見的象“菜花菜花”一樣的菌落。一樣的菌落。mtb在羅氏培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)在羅氏培養(yǎng)基上的菌落形態(tài) 結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁中含有脂質(zhì)結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁中含有脂質(zhì)，脂質(zhì)可脂質(zhì)可防止菌體水分丟失，故對(duì)干燥的抵抗力特別防止菌體水分丟失，故對(duì)干燥的抵抗力特別強(qiáng)。強(qiáng)。 結(jié)核桿菌在濕潤或干燥痰中可存活數(shù)周結(jié)核桿菌在濕潤或干燥痰中可存活數(shù)周或數(shù)月，在塵埃中或數(shù)月，在塵埃中10d仍保持傳染性。仍保持傳染性。 對(duì)鏈霉素（對(duì)鏈霉素（sm）、異煙肼（）、異煙肼（inh）利福）利福平（平（rfp）等抗結(jié)核藥物敏感。）等抗結(jié)核藥物敏感。4、抵抗力、抵抗力 對(duì)乙

7、醇敏感，在對(duì)乙醇敏感，在70%乙醇中乙醇中2min死亡。死亡。 對(duì)濕熱敏感，在液體中加熱對(duì)濕熱敏感，在液體中加熱6263 15分鐘或煮沸即被殺死。對(duì)紫外線敏感。分鐘或煮沸即被殺死。對(duì)紫外線敏感。5 5、變異性、變異性1.1.細(xì)菌形態(tài)、及菌落形態(tài)的變異；細(xì)菌形態(tài)、及菌落形態(tài)的變異；2.2.抗原性變異：卡介苗抗原性變異：卡介苗 bcg bcg （bacillus calmette-gurinbacillus calmette-gurin） 19081908年年 calmettecalmette與與gueringuerin對(duì)牛型結(jié)核桿菌（對(duì)牛型結(jié)核桿菌（m.bovism.bovis）持續(xù)持續(xù)1313

8、年、年、230230次傳代制成減毒活菌苗株。次傳代制成減毒活菌苗株。3 3耐藥性變異耐藥性變異22 結(jié)核桿菌耐藥檢出率為結(jié)核桿菌耐藥檢出率為202050%,50%,多重耐藥率為多重耐藥率為5%5%20%20%。結(jié)核桿菌的耐藥性變異主要與其染色體基因突變有關(guān)。結(jié)核桿菌的耐藥性變異主要與其染色體基因突變有關(guān)。l型變異型變異 結(jié)核分枝桿菌在體內(nèi)外經(jīng)青霉素、環(huán)絲氨酸或結(jié)核分枝桿菌在體內(nèi)外經(jīng)青霉素、環(huán)絲氨酸或溶菌酶誘導(dǎo)可影響細(xì)胞壁中肽聚糖的合成，異煙溶菌酶誘導(dǎo)可影響細(xì)胞壁中肽聚糖的合成，異煙肼影響分枝菌酸的合成，均可導(dǎo)致其變?yōu)殡掠绊懛种岬暮铣?，均可?dǎo)致其變?yōu)閘型，型，呈顆粒狀或絲狀。呈顆粒狀或絲狀。

9、 l形細(xì)菌常見于陳舊性肺結(jié)核和強(qiáng)力化療或用形細(xì)菌常見于陳舊性肺結(jié)核和強(qiáng)力化療或用3種主要抗癆藥異煙肼、鏈霉素及乙胺丁醇等治療種主要抗癆藥異煙肼、鏈霉素及乙胺丁醇等治療效果不佳的病人。因細(xì)胞壁缺陷，可逃避抗細(xì)胞效果不佳的病人。因細(xì)胞壁缺陷，可逃避抗細(xì)胞壁抗體的作用而能在體內(nèi)長期存留。壁抗體的作用而能在體內(nèi)長期存留。6 致病性致病性3致病性莢膜（capsule)脂質(zhì)蛋白質(zhì)多糖如索狀因子核酸核酸是本菌的免疫原，刺激機(jī)體產(chǎn)是本菌的免疫原，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫生特異性細(xì)胞免疫結(jié)核菌素為主要成分，與蠟質(zhì)結(jié)核菌素為主要成分，與蠟質(zhì)d共同刺激機(jī)體產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)；共同刺激機(jī)體產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)； 1）磷脂：促使單

10、核細(xì)胞增生，造）磷脂：促使單核細(xì)胞增生，造成結(jié)核結(jié)節(jié)、干酪樣壞死；成結(jié)核結(jié)節(jié)、干酪樣壞死； 2）分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)）分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)（脂質(zhì)中的主要成分）；（脂質(zhì)中的主要成分）； 3）蠟質(zhì)）蠟質(zhì)d：肽糖脂與分枝菌酸的：肽糖脂與分枝菌酸的復(fù)合物，激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型變復(fù)合物，激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)；并具有佐劑作用；態(tài)反應(yīng)；并具有佐劑作用；1）與吞噬細(xì)胞表面的補(bǔ)體受體）與吞噬細(xì)胞表面的補(bǔ)體受體3（cr3）結(jié)合，有助于結(jié)核分枝）結(jié)合，有助于結(jié)核分枝桿菌在宿主細(xì)胞上的粘附與入侵桿菌在宿主細(xì)胞上的粘附與入侵 2）具有多種酶，可降解宿主組）具有多種酶，可降解宿主組織中的大分子物質(zhì)，提供細(xì)菌繁織中

11、的大分子物質(zhì)，提供細(xì)菌繁殖所需要的營養(yǎng)殖所需要的營養(yǎng) 多糖與結(jié)核桿菌的毒力有關(guān)，多糖與結(jié)核桿菌的毒力有關(guān)，可使中性粒細(xì)胞增多，引起局可使中性粒細(xì)胞增多，引起局部病灶細(xì)胞浸潤。部病灶細(xì)胞浸潤。 7 7 免疫性免疫性44n感染免疫（感染免疫（infection immunity infection immunity ） 又稱有菌免疫又稱有菌免疫n抗結(jié)核免疫主要是細(xì)胞免疫抗結(jié)核免疫主要是細(xì)胞免疫n細(xì)胞免疫與遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在細(xì)胞免疫與遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在 n科赫現(xiàn)象科赫現(xiàn)象n免疫反應(yīng)免疫反應(yīng)結(jié)核桿菌核糖體結(jié)核桿菌核糖體rnarna引起引起n超敏反應(yīng)超敏反應(yīng)結(jié)核菌素蛋白和蠟質(zhì)結(jié)核菌素蛋白和蠟質(zhì)d

12、 d共同引起共同引起免疫和超敏反應(yīng)免疫和超敏反應(yīng)結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn) 應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，來測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，來測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌能否引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)，以判定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌有菌能否引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)，以判定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌有無免疫力。無免疫力。結(jié)核菌素試驗(yàn) 結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性，一般表示無結(jié)核桿菌感染，結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性，一般表示無結(jié)核桿菌感染，機(jī)體無免疫力，應(yīng)接種卡介苗。機(jī)體無免疫力，應(yīng)接種卡介苗。 結(jié)核菌素結(jié)核菌素三、結(jié)核桿菌所致疾病三、結(jié)核桿菌所致疾病5 結(jié)核病是一個(gè)古老的疾病，至今仍然嚴(yán)重威脅著人類健康結(jié)核病是一個(gè)古老的疾病，至今仍然嚴(yán)重威脅著人類健康。 近

13、十幾年來，近十幾年來，由于結(jié)核菌的耐藥性、由于結(jié)核菌的耐藥性、 hiv/tbhiv/tb雙重感染雙重感染 移民（流動(dòng)人口）問題移民（流動(dòng)人口）問題 使全球結(jié)核病控制工作面臨嚴(yán)重挑戰(zhàn)。使全球結(jié)核病控制工作面臨嚴(yán)重挑戰(zhàn)。結(jié)核病基本情況結(jié)核病基本情況據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)目前全球約有據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)目前全球約有：1/31/3人口（人口（2020億）感染結(jié)核菌；億）感染結(jié)核菌；20002000萬結(jié)核病人；萬結(jié)核病人；每年有每年有800800萬萬-1000-1000萬新發(fā)病例；萬新發(fā)病例；每年每年300300萬人死于結(jié)核??；萬人死于結(jié)核??；全球約全球約1/31/3人口感染人口感染tbtb。20112011

14、年新發(fā)病例年新發(fā)病例870870萬，萬，140140萬人死亡。萬人死亡。世界結(jié)核病防治現(xiàn)狀世界結(jié)核病防治現(xiàn)狀66我國結(jié)核病現(xiàn)狀我國結(jié)核病現(xiàn)狀 我國的結(jié)核病疫情依然十分嚴(yán)重，是世界上我國的結(jié)核病疫情依然十分嚴(yán)重，是世界上結(jié)核病患病率最高的結(jié)核病患病率最高的2222個(gè)國家之一。個(gè)國家之一。 是耐藥結(jié)核病最多的全球是耐藥結(jié)核病最多的全球2727個(gè)國家之一。個(gè)國家之一。 每年新登記的結(jié)核病患者約每年新登記的結(jié)核病患者約130130萬。萬。我國結(jié)核病現(xiàn)狀 20002000年全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)年全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào) 查初步結(jié)果顯示：查初步結(jié)果顯示： 全國受結(jié)核菌感染人口超過全國受結(jié)核菌感染人口超

15、過5.65.6億億； 全國現(xiàn)有傳染性肺結(jié)核病人全國現(xiàn)有傳染性肺結(jié)核病人200200萬，傳染性肺結(jié)核患病率為萬，傳染性肺結(jié)核患病率為157.8/10157.8/10萬。萬。 結(jié)核病死亡率為結(jié)核病死亡率為9.8/109.8/10萬，在各種死亡原因中占第萬，在各種死亡原因中占第1111位。位。 結(jié)核菌耐藥率：結(jié)核菌耐藥率：27.8%27.8%，初始耐藥率，初始耐藥率18.6%18.6%，獲得性耐藥率：，獲得性耐藥率：46.5%46.5%。inh:17.6%inh:17.6%，smsm：17.3%17.3%，rfprfp：16.6%16.6%，embemb：1.5%1.5%，mdrmdr：10.7%1

16、0.7%。 非結(jié)核分枝桿菌感染：非結(jié)核分枝桿菌感染：11%11%結(jié)核桿菌所致疾病v結(jié)核分枝桿菌可通過呼吸道、結(jié)核分枝桿菌可通過呼吸道、消化道消化道或皮膚或皮膚損傷侵入易感機(jī)體，引起多種組織器官的結(jié)損傷侵入易感機(jī)體，引起多種組織器官的結(jié)核病，其中以通過呼吸道引起核病，其中以通過呼吸道引起肺結(jié)核肺結(jié)核為最多為最多。 原發(fā)感染原發(fā)感染v1、肺、肺結(jié)核結(jié)核 繼發(fā)感染繼發(fā)感染v2、肺外感染、肺外感染原發(fā)感染原發(fā)感染n多發(fā)于兒童多發(fā)于兒童n傳染源傳染源n傳播途徑傳播途徑原發(fā)灶原發(fā)灶淋巴管炎淋巴管炎腫大的肺門淋巴結(jié)腫大的肺門淋巴結(jié)原發(fā)綜合征原發(fā)綜合征 “啞鈴啞鈴”型陰型陰影影結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié)

17、結(jié)核結(jié)節(jié)n多發(fā)于成年人多發(fā)于成年人n多為內(nèi)源性感染，少數(shù)為外源性感染多為內(nèi)源性感染，少數(shù)為外源性感染n病灶多局限病灶多局限n慢性肉芽腫性炎癥，結(jié)核結(jié)節(jié)，干酪樣壞死慢性肉芽腫性炎癥，結(jié)核結(jié)節(jié)，干酪樣壞死 n開放性肺結(jié)核開放性肺結(jié)核繼發(fā)感染繼發(fā)感染肺外感染肺外感染 n結(jié)核性腦膜炎結(jié)核性腦膜炎n泌尿生殖系統(tǒng)結(jié)核泌尿生殖系統(tǒng)結(jié)核n骨與關(guān)節(jié)結(jié)核病骨與關(guān)節(jié)結(jié)核病n腸結(jié)核及結(jié)核性腹膜炎腸結(jié)核及結(jié)核性腹膜炎n皮膚結(jié)核皮膚結(jié)核艾滋病和結(jié)核病艾滋病和結(jié)核病7 結(jié)核病是艾滋病高發(fā)區(qū)人群的首要死因結(jié)核病是艾滋病高發(fā)區(qū)人群的首要死因hiv與結(jié)核桿菌雙重感染是一種致死性的結(jié)合，與結(jié)核桿菌雙重感染是一種致死性的結(jié)合，兩者互

18、相影響，形成惡性循環(huán)兩者互相影響，形成惡性循環(huán)。 一一方面，方面，hiv感染可以推毀免疫系統(tǒng)，使機(jī)感染可以推毀免疫系統(tǒng)，使機(jī)體抵抗力大大降低，易于感染結(jié)核桿菌，體抵抗力大大降低，易于感染結(jié)核桿菌，也可使也可使原先感染過結(jié)核桿菌但已穩(wěn)定的病灶復(fù)活，或使原先感染過結(jié)核桿菌但已穩(wěn)定的病灶復(fù)活，或使已有的結(jié)核病惡化，已有的結(jié)核病惡化，從而使從而使hiv感染者更易患結(jié)感染者更易患結(jié)核病，病死率高。核病，病死率高。 另一方面，結(jié)核桿菌也可通過某些途徑，另一方面，結(jié)核桿菌也可通過某些途徑，如激活如激活cd4t 細(xì)胞等，促進(jìn)細(xì)胞等，促進(jìn)hiv的復(fù)制，的復(fù)制，在在hiv感染過程中起協(xié)同因子的作用，感染過程中起協(xié)

19、同因子的作用，加速加速aids的進(jìn)的進(jìn)程。程。肺結(jié)核的臨床表現(xiàn)肺結(jié)核的臨床表現(xiàn)8 四、結(jié)核病的預(yù)防與治療四、結(jié)核病的預(yù)防與治療態(tài)生兩靨之愁，態(tài)生兩靨之愁，嬌襲一身之病。嬌襲一身之病。淚光點(diǎn)點(diǎn)，淚光點(diǎn)點(diǎn)，嬌喘微微。嬌喘微微。閑靜時(shí)如姣花照水，閑靜時(shí)如姣花照水，行動(dòng)時(shí)如弱柳扶風(fēng)。行動(dòng)時(shí)如弱柳扶風(fēng)。 黛玉一翻身，卻原來是一場(chǎng)惡夢(mèng)。喉間猶是哽咽，黛玉一翻身，卻原來是一場(chǎng)惡夢(mèng)。喉間猶是哽咽，心頭還是亂跳，枕頭上已經(jīng)濕透，肩背身心，但覺冰心頭還是亂跳，枕頭上已經(jīng)濕透，肩背身心，但覺冰冷。冷。 一回兒咳嗽起來。一回兒咳嗽起來。紫鵑開了屋門去倒那痰盒紫鵑開了屋門去倒那痰盒時(shí)，只見滿盒子痰，痰中好些血星時(shí)，只見

20、滿盒子痰，痰中好些血星 “林姑娘臉上一點(diǎn)血色也沒有，摸了摸身上，只剩林姑娘臉上一點(diǎn)血色也沒有，摸了摸身上，只剩得一把骨頭得一把骨頭”。 只見黛玉肝火上炎，兩顴紅赤。只見黛玉肝火上炎，兩顴紅赤。喘成一處，只是出氣大入氣小，已經(jīng)促疾的很了。喘成一處，只是出氣大入氣小，已經(jīng)促疾的很了。 “寶玉，寶玉，你好寶玉，寶玉，你好”，說到，說到“好好”字，便渾身字，便渾身冷汗，不作聲了。冷汗，不作聲了。結(jié)核病的預(yù)防與治療結(jié)核病的預(yù)防與治療n預(yù)防預(yù)防卡介苗接種卡介苗接種是預(yù)防結(jié)核是預(yù)防結(jié)核病的最有效措施病的最有效措施 n接種對(duì)象：新生兒接種對(duì)象：新生兒和結(jié)核菌素試驗(yàn)陰和結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性的兒童性的兒童n免疫時(shí)間：免疫時(shí)間：6 61010年年治療治療 一般治療一般治療 合理營養(yǎng)，注意休息合理營養(yǎng)，注意休息 抗結(jié)核藥物的治療原則抗結(jié)核藥物的治療原則 早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律、分階段治療和堅(jiān)持早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律、分階段治療和堅(jiān)持全程全程 抗結(jié)核菌藥物：鏈霉素、異煙肼、對(duì)氨基水楊酸鈉、抗結(jié)核菌藥物：鏈霉素、異煙肼、對(duì)氨基水楊酸鈉、利福平等。利福平等。 世界防治結(jié)核病日世界防治結(jié)核病日 3 3月月2424日日參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)1張濤,