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文檔簡介
1、考綱要求:理解實驗目的、原理、方法和操作步驟,掌握相關的操作技能,并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。補初中實驗:認識顯微鏡的結構,學會使用顯微鏡實驗目的:認識顯微鏡的結構,初步掌握使用顯微鏡的方法。一、光學顯微鏡的結構、呈像原理、放大倍數(shù)計算方法結構:光學部分:目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器(有大小光圈)和反光鏡(有平面鏡和凹面鏡)機械部分:鏡座、傾斜關節(jié)、鏡臂、載物臺(上有通光孔、壓片夾)、鏡頭轉換器、粗、細準焦螺旋。注:目鏡無旋轉螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越??;物鏡有旋轉螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越大。呈像原理:映入眼球內的是倒立放大的虛像。(物鏡質量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度)放大倍數(shù)
2、:目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積)注:顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù),即長度和寬度,而不是面積。二、顯微鏡的使用:置鏡(裝鏡頭)對光置片調焦觀察1安放。顯微鏡放置在桌前略偏左,距桌緣810cm處,裝好物鏡和目鏡(目鏡5× 物鏡10×)2對光。轉動轉換器,使低倍鏡對準通光孔,選取較大光圈對準通光孔。左眼注視目鏡,同時把反光鏡轉向光源,直至視野光亮均勻適度。調節(jié)視野亮度只可用遮光器和反光鏡,光線過強,改用較小光圈或用平面反光鏡;光線過弱,改用較大光圈或用凹面反光鏡。選低倍鏡選較大的光圈選反光鏡(左眼觀察)3觀察。將切片或裝片放在載物臺上,標本正對通光孔中心。轉動粗準焦螺旋(順時針),
3、俯首側視鏡筒慢慢下降,直到物鏡接近切片(約0.5cm),左眼觀察目鏡,(反時針)旋轉粗準焦螺旋,使鏡筒慢慢上升,看到物像時輕微來回旋轉細準焦,直到物像清晰。(找不到物像時,可重復一次或移動裝片使標本移至通光孔中心)。觀察時兩眼都要睜開,便于左眼觀察,右眼看著畫圖。側面觀察降鏡筒左眼觀察找物像細準焦螺旋調清晰4高倍鏡的轉換。找到物像后,把要觀察的物像移到視野中央,把低倍鏡移走,換上高倍鏡,只準用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰,直到物像清楚為止。順序:移裝片轉動鏡頭轉換器調反光鏡或光圈調細準焦螺旋注:換高倍物鏡時只能移動轉換器,換鏡后,只準調節(jié)細準焦和反光鏡(或光圈)。問1:低倍鏡換為高倍鏡后,
4、若看不到或看不清原來的像,可能原因?(ABC) A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反,蓋玻片在下面 D、未換目鏡問2:放大倍數(shù)與視野的關系:放大倍數(shù)越小,視野范圍越大,看到的細胞數(shù)目越多,視野越亮,工作距離越長;放大倍數(shù)越大,視野范圍越小,看到的細胞數(shù)目越少,視野越暗,工作距離越短。故裝片不能反放。5裝片的制作和移動:制作:滴清水放材料蓋片移動:物像在何方,就將載玻片向何處移。(原因:物像移動的方向和實際移動玻片的方向相反)6污點判斷:1)污點隨載玻片的移動而移動,則位于載玻片上;2)污點不隨載玻片移動,換目鏡后消失,則位于目鏡;換物鏡后消失,則位于物鏡;3)污點不隨載玻片
5、移動,換鏡后也不消失,則位于反光鏡上。7完畢工作。使用完畢后,取下裝片,轉動鏡頭轉換器,逆時針旋出物鏡,旋進鏡頭盒;取出目鏡,插進鏡頭盒,蓋上。把顯微鏡放正。 實驗一:觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一P26)一實驗目的:初步掌握觀察DNA和RNA在細胞中分布的方法二實驗原理:1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。2鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色休中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。三方法步驟:
6、操作步驟注意問題解釋取口腔上皮細胞制片載玻片要潔凈,滴一滴質量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾下取細胞將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果保持細胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗固定裝片水解將烘干的載玻片放入質量分數(shù)為8%的鹽酸溶液中,用300C水浴保溫5min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,促進染色體的DNA與蛋白質分離而被染色沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min 觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,調節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀
7、察效果最佳 實驗二 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(必修一P18)一實驗目的: 嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質二實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應。1可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。如: 加熱
8、; 葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O(磚紅色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。3蛋白質與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產生紫色反應。(蛋白質分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應。)三實驗材料1做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺
9、,易于觀察。)2做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蓖麻種子)。3做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。四、實驗試劑斐林試劑(包括甲液:質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:質量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)、蘇丹或蘇丹染液、雙縮脲試劑(包括A液:質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液:質量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)、體積分數(shù)為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水。五、方法步驟:(一)可溶性糖的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋1. 制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液
10、必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋。2. 取1支試管,向試管內注入2mL組織樣液。 3. 向試管內注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑; 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH ) 2在70900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應,無Cu ( OH ) 2生成。4. 試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺藍色
11、 棕色 磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者。也可用酒精燈對試管直接加熱。防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷; 縮短實驗時間。(二)脂肪的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。 用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精
12、。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上12滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中。 三、蛋白質的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過濾。) 黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑
13、B液34滴,搖勻,溶液變紫色。A液和B液也要分開配制,儲存。鑒定時先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反應的真實顏色。可用蛋清代替豆?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察 實
14、驗三 用顯微鏡觀察多種多樣的細胞(必修一P7)一實驗目的:1)使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞,比較不同細胞的異同點2)運用制作臨時裝片的方法二實驗原理: 利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細胞結構,例如:可以看到葉綠體、線粒體等細胞器,從而能夠區(qū)別不同的細胞。三方法步驟: 第一步:轉動反光鏡使視野明亮 第二步:在低倍鏡下觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野中央 第三步:用轉換器轉過高倍物鏡 問(1)是低倍鏡還是
15、高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么? 提示:低倍鏡的視野大,通過的光多,放大的倍數(shù)小;高倍鏡視野小,通過的光少,但放大的倍數(shù)高。 問(2)為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察? 提示:如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對象不在視野范圍內而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。 問(3)用轉換器轉過高倍鏡后,轉動粗準焦螺旋行不行?
16、0; 提示:不行。用高倍鏡觀察,只需微調即可。轉動粗準焦螺旋,容易壓壞玻片。 第四步:觀察并用細胞準焦螺旋調焦。四:討論: 1.使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么? 答:(1)首先用低倍鏡觀察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。 (2)轉動轉換器,用高倍鏡觀察,并輕輕轉動細準焦螺旋,直到看清楚材料為止。 2.試歸納所觀察到的細胞在結構上的共同點,并描述它們之間的差異,分析產
17、生差異的可能的原因: 答:這些細胞在結構上的共同點是:有細胞膜、細胞質和細胞核,植物細胞還有細胞壁。各種細胞之間的差異和產生差異的可能原因是:這些細胞的位置和功能不同,其結構與功能相適應,這是個體發(fā)育過程中細胞分化產生的差異。 3.P8圖是一個大腸桿菌的電鏡照片和結構模式圖,大腸桿菌與你在本實驗中觀察到的細胞有什么主要區(qū)別?答:從模式圖中可以看出,大腸桿菌沒有明顯的細胞核,沒有核膜,細胞外有鞭毛,等等。 實驗四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)一實驗目的:
18、 使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)分布。二實驗原理:葉綠體的辨認依據(jù):葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。線粒體辨認依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色。三實驗材料: 觀察葉綠體時選用:蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。四方法步驟:步 驟注 意 問 題分 析1制片。用鑷子取一片黑藻的小葉,放入載玻片的水滴中,蓋
19、上蓋玻片。制片和鏡檢時,臨時裝片中的葉片不能放干了,要隨時保持有水狀態(tài)否則細胞或葉綠體失水收縮,將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察。2低倍鏡下找到葉片細胞 3高倍鏡下觀察葉綠體的形態(tài)和分布 4制作人的口腔上皮細胞臨時裝片在潔凈載玻片中央滴一滴健那綠染液用牙簽取碎屑蓋蓋玻片 5觀察線粒體藍綠色的是線粒體,細胞質接近無色。 討論:1、細胞質基質中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動,這種運動能隨時改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉
20、綠體的功能有什么關系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。實驗五:通過模擬實驗探究膜的透性(必修一P60“問題探討”)一實驗目的:1說明生物膜具有選擇透過性2嘗試模擬實驗的方法二實驗原理: 某些半透膜(如動物的膀胱膜、腸衣等),可以讓某些物質透過,而另一些物質不能透過?;蛘撸úAЪ垼┧肿涌梢酝高^,而蔗糖分子因為比較大,不能透過。可以用半透膜將不同濃度的溶液分隔開,然后通過觀察溶液液面高低的變化,來觀察半透膜的選擇透過特性,進而類比分析得出生物膜的透性。三方法步驟:1取兩個長頸
21、漏斗,分別在漏斗口處封上一層玻璃紙。2在A漏斗中注入硫酸銅溶液,B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少許紅墨水,使其略呈紅色。3將兩個漏斗分別浸入盛有蒸餾水的燒杯中,在兩漏斗的液面處做標記4靜置一段時間后,觀察燒杯中蒸餾水顏色的變化及長頸漏斗的液面變化,并將觀察到的結果設計表格進行記錄。四討論:1漏斗管內的液面為什么會升高?答:由于單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量多于從長頸漏斗滲出的水分子數(shù)量,使得管內液面升高。2如果用一層紗布代替玻璃紙,漏斗管內的液面還會升高嗎?答:用紗布替代玻璃紙時,因紗布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不會升高。3如果燒杯中不是清水,而是同樣濃度的蔗糖溶
22、液,結果會怎樣?答:半透膜兩側溶液的濃度相等時,單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量等于滲出的水分子數(shù)量,液面也不會升高。 實驗六 觀察植物細胞的質壁分離和復原(必修一P61“探究”)一、實驗目的:1學會觀察植物細胞質壁分離與復原的方法。2了解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。二實驗原理:1質壁分離的原理:當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而失水,細胞液中的水分就透過原生質層進入到溶液中,使細胞壁和原生質層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質層就會與細胞壁分離。2質壁分離復原的原理:當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,
23、細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質層進入到細胞液中,整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原。二、實驗材料:紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。三、實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析1制作洋蔥表皮的臨時裝片。在載玻片上滴一滴水,撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平(也可挑取幾條水綿放入水滴中)。蓋上蓋玻片。 蓋蓋玻片應讓蓋玻片的一側先觸及載玻片,然后輕輕放平。 防止裝片產生氣泡。2觀察洋蔥(或
24、水綿)細胞可看到:液泡大,呈紫色,原生質層緊貼著細胞壁。(或水綿細胞中有帶狀葉綠體,原生質層呈綠色,緊貼著細胞壁。 液泡含花青素,所以液泡呈紫色。 先觀察正常細胞與后面的“質壁分離”起對照作用。3觀察質壁分離現(xiàn)象。從蓋玻片的一側滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一側用吸水紙吸引,重復幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏色由淺變深,原生質層與細胞壁分離。原生質層與細胞壁之間充滿蔗糖溶液。 重復幾次糖液濃度不能過高蔗糖溶液濃度大于細胞液濃度,細胞通過滲透作用失水,細胞壁伸縮性小原生質層的伸縮性大,液泡和原生質層不斷收縮,所
25、以發(fā)生質壁分離。為了使細胞完全浸入蔗糖溶液中。否則,細胞嚴重失水死亡,看不到質壁分離的復原。4觀察細胞質壁分離的復原現(xiàn)象。從蓋玻片的一側滴入清水,在另一側用吸水紙吸引,重復幾次。鏡檢。觀察到:液泡由小變大,顏色由深變淺,原生質層恢復原狀。 發(fā)生質壁分離的裝片,不能久置,要馬上滴加清水,使其復原。重復幾次。細胞液的濃度高于外界溶液,細胞通過滲透作用吸水,所以發(fā)生質壁分離復原現(xiàn)象。因為細胞失水過久,也會死亡。 為了使細胞完全浸入清水中。實驗討論答案:1如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細胞維持原狀,因為細胞液的濃度與外界溶
26、液濃度相等。2當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質壁分離?為什么?答:不會。因為紅細胞不具細胞壁。 實驗七 探究影響酶活性的因素(必修一P78、P83)一實驗目的:1探究不同溫度和PH對過氧化氫酶活性的影響。2培養(yǎng)實驗設計能力。二方法步驟:提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)實施實驗分析與結論表達與交流。 實例1:比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率一)實驗原理:鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經計算,質量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質量分數(shù)
27、為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二)方法步驟:步驟注意問題解釋取4支潔凈試管,編號,分別加入2mL H2O2溶液不讓H2O2接觸皮膚H2O2有一定的腐蝕性將2號試管放在900C左右的水浴中加熱,觀察氣泡冒出情況,與1號對照 向3號、4號試管內分別滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研磨液,觀察氣泡產生情況不可用同一支滴管 肝臟研磨液必須是新鮮的 肝臟在制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準確性 因為過氧化氫酶是蛋白質,放置
28、過久,可受細菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低 研磨可破壞肝細胞結構,使細胞內的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積2-3min后,將點燃的衛(wèi)生香分別放入3號和4號試管內液面的上方,觀察復燃情況放衛(wèi)生香時,動作要快,不要插到氣泡中現(xiàn)象:3號試管產生氣泡多,冒泡時間短,衛(wèi)生香猛烈復燃,4號試管產生氣泡少,冒泡時間長,衛(wèi)生香幾乎無變化避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅 實例2:溫度對酶活性的影響一)實驗目的:1初步學會探索溫度對酶活性的影響的方法。2探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。二)實驗原理:1淀粉遇碘后,形成紫藍色的復合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄
29、糖(淀粉水解過程中,不同階段的中間產物遇碘后,會呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C三)方法步驟: 操作注意問題解釋取3支試管,編上號,然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支試管,編上號,然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液 將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(約600C)、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液防止混合時,由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應溫度不是操作者所要控制的溫度,影響實驗結果。分別將淀粉酶溶液注入相同
30、溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自的溫度5min保持各自溫度時間不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間在3支試管中各滴入1-2滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄碘液不能滴加太多防止影響實驗現(xiàn)象的觀察用表格的形式顯示實驗步驟序號加入試劑或處理方法試管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鮮淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保溫5min600C1000C00C600C1000C00C3將a液加入到A試管,b液加入到B試管,c液加入到C試管中,搖勻 4保溫5min600C1000C00C 5滴入碘液,搖勻2滴2滴2滴 6觀察現(xiàn)象并記錄
31、; 實例3:PH值對酶活性的影響操作步驟:用表格開式顯示實驗步驟:(注意操作順序不能錯)序號加入試劑或處理方法試管1231注入新鮮的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸餾水1mL/3注入氫氧化鈉溶液/1mL/4注入鹽酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保溫5min 7加入斐林試劑,邊加邊振蕩2mL2mL2mL8水浴加熱煮沸1min 9觀察3支試管中溶液顏色變化變記錄 實驗八葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)一實驗目的:1嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和
32、用紙層析法分離提取到的色素。2分析實驗結果,探究葉綠體中有幾種色素,以及各自所呈現(xiàn)的顏色。二實驗原理:1葉綠體中的色素是有機物,不溶于水,易溶于丙酮等有機溶劑中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以用層析法來分離四種色素。三、實驗材料:幼嫩、鮮綠的菠菜葉四、實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析1提取色素5克綠葉剪碎,放入研缽,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL無水乙醇)迅速、充分研磨。(若沒有無水乙醇,也可用體積分數(shù)為95%的乙醇,但
33、要加入適量的無水碳酸鈉,除去水分)加SiO2加CaCO3 加丙酮迅速加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂,可被細胞液中的有機酸產生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸,防止葉綠體被破壞。葉綠體色素易溶于丙酮等有機溶劑。減少研磨過程葉綠素的分解,減少有毒性的丙酮揮發(fā)。2收集濾液漏斗基部放一單層尼龍布,研磨倒入漏斗內擠壓,將濾液收集到小試管中,用棉花塞塞住試管口。 尼龍布起過濾作用。 試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮揮發(fā)。3制備濾紙條將干燥的濾紙,順著紙紋剪成長10cm,寬1
34、cm的紙條,一端剪去二個角,并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。 干燥順著紙紋剪成長條一端剪去二個角 可吸收更多的濾液。層析時,色素分離效果好??墒箤游鲆和瑫r到達濾液細線。4劃濾液細線用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線劃出細、齊、直的一條濾液細線,干后重復三次。 濾液細線越細、越齊越好。重復三次。 防止色素帶之間部分重疊。 增加色素在濾紙上的附著量,實驗結果更明顯。5紙層析法分離色素將3mL層析液倒入燒杯中,將濾紙條(劃線一端朝下)插入層析液中,用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。 層析液不能沒及濾紙條。燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。 防止色素溶解在層析液中
35、, 層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。6觀察實驗結果由上至下分別為:胡蘿卜素(橙黃色)葉黃素(黃色)葉綠素a(藍綠色)葉綠素b(黃綠色) 擴散最快是胡蘿卜素,擴散最慢是葉綠素b,含量最多的是葉綠素a。 四種色素之所以能被分離,是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同。五:實驗討論: 1濾紙條上的濾液細線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。2提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分;濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,
36、以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是:一是濾液細線要細且直,而且要重復劃幾次;二是層析液不能沒及濾液線。 實驗九 探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)一實驗目的:1了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況2學會運用對比實驗的方法設計實驗二實驗原理:1酵母菌是一種單細胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細胞呼吸的不同方式。方程式(略)2 CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產生情況。3橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)
37、生化學反應,在酸性條件下,變成灰綠色。三方法步驟:提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)實施實驗分析與結論表達與交流。1酵母菌培養(yǎng)液的配制取20g新鮮的食用酵母菌,分成兩等份,分別放入錐形瓶A(500mL)和錐形瓶B(500mL)中 ,再分別向瓶中注入240mL質量分數(shù)為5%的葡萄糖溶液2檢測CO2的產生用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置(如圖),并連通橡皮球(或氣泵),讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個錐形瓶(約50min)。然后將實驗裝置放到25-350C的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。3檢測灑精的產生各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈
38、的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液(體積分數(shù)為95%-97%)并輕輕振蕩,使它們混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。 實驗十 觀察細胞的有絲分裂(必修一P115)一實驗目的:1制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片2觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細胞周期不同時期的時間長短。3繪制植物細胞有絲分裂簡圖。二實驗原理:1在高等植物體內,有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。2染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內染色體
39、(或染色質)的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的完整過程。三實驗材料: 洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細胞分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細胞。四實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析一、根尖的培養(yǎng)實驗前34天,讓洋蔥放在廣口瓶上,底部接觸清水。根長約5cm時可用。 置于溫暖處,常換水。 因為細胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離漂洗染色制片)1解離:上午10時至下午2時,剪取洋蔥根尖23mm,立即放入盛有質量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室溫下
40、解離35min。 解離時間要保證,細胞才能分散開來。 解離時間也不宜過長。 目的:溶解細胞間質,使組織中的細胞相互分離開來。此時,細胞已被鹽酸殺死。否則,根尖過于酥軟,無法取出。2漂洗:待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min。漂洗要充分,可換水12次。 目的:洗去解離液,便于染色。 3染色:把洋蔥根尖放進盛有質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色4制
41、片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片, 目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標本被壓成云霧狀。三、觀察1低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。 2高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰,仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。 一定要找到分生區(qū)。 在一個視野里,往往不容
42、易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞。如果是這樣,可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。 分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期。討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質被溶解,使細胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當,要使根尖被壓平,細胞分散開。 實驗十一 模擬探究細胞表面積與體積的關系(必修一P110)一實驗目的:通過探究細胞大小,即細胞的表面積與體積,與物質運輸效率之間的
43、關系,探討細胞不能無限長大的原因。二實驗原理:用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊越小,其表面積越大,則其與外界效換物質的表面積越大,經交換進來的物質在瓊脂塊中擴散的速度快;瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。三操作步驟:操作方法注意問題解釋用塑料餐刀將含酚酞的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體 將3塊瓊脂塊放在燒杯內,加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺不時翻動瓊脂塊。不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面避免干擾實驗結果戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干,用塑料刀
44、把瓊脂塊切成兩半。仔細觀察切面的顏色變化,變成紅色的部分代表NaOH擴散的深度,測量每一塊上NaOH擴散后著色的濃度。記錄測量結果應避免NaOH與皮膚和眼睛等接觸。如潑灑出來,應立即用水沖洗潑灑處。每兩次操作之間必須把刀擦干NaOH有腐蝕性 避免干擾實驗結果根據(jù)測量結果進行計算,并將結果填在記錄表中 結論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減?。籒aOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。四課后討論題答案:1.當NaOH與含酚酞的瓊脂塊相遇時,其中的酚酞變成紫紅色,這是常用的檢測NaOH的方法,從瓊脂塊的顏色變化就知道Na
45、OH擴散到多遠;在相同時間內,NaOH在每一瓊脂塊內擴散的深度基本相同,說明NaOH在每一瓊脂塊內擴散的速率是相同的。2.根據(jù)球體的體積公式V=4/3r3,表面積公式S=4r2,計算結果如下表。細胞直徑(m)表面積(m2)體積(m3)比值(表面積/體積)201 2564 1870.30302 82614 1300.203.細胞越大,物質運輸?shù)男试降?,所以多細胞生物體是由許多細胞而不是由少數(shù)體積更大的細胞構成的。細胞越大,需要與外界環(huán)境交流的物質越多;但是細胞體積越大,其表面積相對越小,細胞與周圍環(huán)境之間物質交流的面積相對小了,所以物質運輸?shù)男试降汀?#160; 實驗十二 觀察細胞
46、的減數(shù)分裂(必修二P21)一實驗目的:通過觀察蝗蟲精母細細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別減數(shù)分裂不同的階段染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目,加深對減數(shù)分裂過程的理解。二實驗原理:蝗蟲的精母細胞進行減數(shù)分裂形成精細胞,再形成精子。此過程要經過兩次連續(xù)的細胞分裂:減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂。在此過程中,細胞中的染色體形態(tài)、位置和數(shù)目都在不斷地發(fā)生變化,因而可據(jù)此識別減數(shù)分裂的各個時期。三方法步驟: A.精巢管頂端 B.減數(shù)第一次分裂 C.減數(shù)第二次分裂
47、160; D.精子細胞 E.精子 四課后討論題:1.減數(shù)第一次分裂會出現(xiàn)同源染色體聯(lián)會、四分體形成、同源染色體在赤道板位置成對排列、同源染色體分離、移向細胞兩極的染色體分別由兩條染色單體組成等現(xiàn)象。減數(shù)第二次分裂的中期,非同源染色體成單排列在細胞赤道板位置,移向細胞兩極的染色體不含染色單體。2.減數(shù)第一次分裂的中期,兩條同源染色體分別排列在細胞赤道板的兩側,末期在細胞兩極的染色體由該細胞一整套非同源染色體組成,其數(shù)目是體細胞染色體數(shù)的一半,每條染色體均由兩條染色單體構成。減數(shù)第二次分裂的中期,所有染色體的著絲點排列在細胞的
48、赤道板的位置。末期細胞兩極的染色體不含染色單體。3.同一生物的細胞,所含遺傳物質相同;增殖的過程相同;不同細胞可能處于細胞周期的不同階段。因此,可以通過觀察多個精原細胞的減數(shù)裂,推測出一精原細胞減數(shù)分裂過中色體的連續(xù)變化。 實驗十三 低溫誘導染色體加倍(必修二P88)一實驗目的:1學習低溫誘導植物染色體數(shù)目變化的方法2理解低溫誘導植物細胞染色體數(shù)目變化的作用機制二實驗原理:1進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞,在有絲分裂后期,染色體的著絲點分裂,子染色體在紡綞絲的作用下分別移向兩極,最終被平均分配到兩個子細胞中去。2用低溫處理植物組織細胞,使紡綞體的形成受到抑制,以致影響
49、染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。三方法步驟:四課后討論題答案:兩者都是通過抑制分裂細胞內紡錘體的形成,使染色體不能移向細胞兩極,而引起細胞內染色體數(shù)目加倍。實驗十四 調查常見的人類遺傳?。ū匦薅91)一實驗目的:1初步學會調查和統(tǒng)計人類遺傳病的方法2通過對幾種人類遺傳病的調查,了解這幾種遺傳病的發(fā)病情況3通過實際調查,培養(yǎng)接觸社會,并從社會中直接獲取資料或數(shù)據(jù)的能力二實驗原理:顯性遺傳病具有世代相傳的特點,隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點是交叉遺傳,隔代出現(xiàn),患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點是世代相傳,患者女性
50、多于男性。三方法步驟:可以以小組為單位開展調查工作。其程序是:組織問題調查小組確定課題分頭調查研究撰寫調查報告匯報交流調查結果(如右流程圖)注意事項:1調查時,最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等2為保證調查的群體足夠大,小組調查的數(shù)據(jù),應在班級和年級中進行匯總34人類常見的遺傳病類型概括 實驗十五 探究植物生長調節(jié)劑對扦插枝條生根的作用(必修三P51)一實驗目的:1了解植物生長調節(jié)劑的作用2進一步培養(yǎng)進行實驗設計的能力二實驗原理:植物插條經植物生長調節(jié)劑處理后,對植物插條的生根情況有很大的影響,而且用不同濃度、不同時間
51、處理其影響程度亦不同。其影響存在一個最適濃度,在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多,生長最快。三方法步驟:1.選擇生長素類似物:2,4-D或-萘乙酸(NAA)等。2.配制生長素類似物母液:5 mg/mL(用蒸餾水配制,加少許無水乙醇以促進溶解)。3.設置生長素類似物的濃度梯度:用容量瓶將母液分別配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5 mg/mL的溶液,分別放入小磨口瓶,及時貼上相應標簽。NAA有毒,配制時最好戴手套和口罩。4.剩余的母液應放在4 保存,如果瓶底部長有綠色毛狀物,則不能繼續(xù)使用。5選擇插條:以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活)實驗
52、表明,插條部位以種條中部剪取的插穗為最好,基部較差,梢部插穗仍可利用。實驗室用插穗長57 cm,直徑11.5 cm為宜。6處理插條:枝條的形態(tài)學上端為平面,下端要削成斜面,這樣在扦插后可增加吸收塔水分的面積,促進成活。每一枝條留3-4個芽,所選枝條的芽數(shù)盡量一樣多。處理方法:1)浸泡法:把插條的基部浸泡在配制好的溶液中,深約3cm,處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低,并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進行處理)2)沾蘸法:把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。7探究活動:提出問題作出假設設計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設計實驗記錄表格)
53、實施實驗分析與結論表達與交流。 注1:可先設計一組梯度比較大的預實驗進行摸索,再在預實驗的基礎上設計細致的實驗。2.實驗材料:可以用楊、加拿大楊、月季等的枝條。3.實驗用具:天平、量筒、容量瓶、燒杯、滴管、試劑瓶、玻璃棒、木箱或塑料筐(下方帶流水孔)、盛水托盤、礦泉水瓶。實例如下:1.提出問題不同濃度的生長素類似物,如2,4-D或NAA,促進楊插條生根的最適濃度是多少呢?2.作出假設適宜濃度的2,4-D或NAA可以使楊或月季插條基部的薄壁細胞恢復分裂能力,產生愈傷組織,長出大量不定根。3.預測實驗結果經過一段時間后(約35 d),用適宜濃度的2,4-D或NAA處理過的插條基部和樹皮皮孔處(插條
54、下1/3處)出現(xiàn)白色根原體,此后逐漸長出大量不定根;而用較低濃度、較高濃度或清水處理的枝條長出極少量的不定根或不生根。4.實驗步驟(1)制作插條。(2)分組處理:將插條分別用不同的方法處理(藥物濃度、浸泡時間等可多組。如可分別在NAA中浸泡1、2、4、8、12、24 h等)。(3)進行實驗:將處理過的插條下端浸在清水中,注意保持溫度(2530 )。(4)小組分工,觀察記錄:前三天每天都要觀察記錄各小組實驗材料的生根情況。自行設計記錄表格,記錄用不同濃度生長素類似物處理后枝條生根情況,如生根條數(shù),最長與最短根的長度等。(濃度適宜的生長素類似物處理后,在綠色樹皮的皮孔處長有白色幼根;時間長一些會在
55、枝條下端斜面樹皮與木質部之間長有白色根原體)。每隔23 d記錄也可。(5)研究實驗中出現(xiàn)的問題。 分析不同插條的生根情況。不能生出不定根:有可能是枝條上沒有芽、枝條倒插等。都能生出不定根:促進扦插枝條生根是指刺激枝條的下端生出不定根,而不是刺激根生長。不同的枝條可能生出的不定根的數(shù)目多少不一樣,如枝條上芽多,則產生的生長素就多,就容易促使不定根的萌發(fā)。分析與本實驗相關的其他因素。A.溫度要一致;B.設置重復組。即每組不能少于3個枝條;C.設置對照組。清水空白對照;設置濃度不同的幾個實驗組之間進行對比,目的是探究2,4-D或-萘乙酸促進扦插枝條生根的最適濃度。5.分析實驗結果,得出實驗結論按照小
56、組分工認真進行觀察,實事求是地對實驗前、實驗中(包括課內、課外)和實驗后插條生根的情況進行記錄,并及時整理數(shù)據(jù),繪制成表格或圖形。最后分析實驗結果與實驗預測是否一致,得出探究實驗的結論。不要求實驗結果都一致,但要求有分析研究。6.表達與交流實驗小組的每一個成員都要寫出自己個性化的實驗報告,向小組和全班匯報探究過程和結果、經驗、教訓或體會,包括在科學態(tài)度、科學方法和科學精神方面的收獲。7.進一步探究:進行擴展性的探究和實踐,大多數(shù)需要在課外完成。 實驗十六 模擬尿糖的檢測(必修三P26相關知識)一實驗目的:學會尿糖的檢測方法,檢查“尿樣”中是否含有葡萄糖。二實驗原理:葡萄糖
57、試紙是一種酶試紙,由葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和某種無色的化合物固定于濾紙上制成。當尿液滴加到酶試紙上時,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖酸和過氧化氫,過氧化氫在酶的催化作用下形成水和原子氧,原子氧可以將試紙上無色的化合物氧化成有色化合物,使試紙呈現(xiàn)特定的顏色,再與標準比色卡比對,即可知道尿樣中葡萄糖的含量。葡萄糖 葡萄糖酸+H2O2 H2O2 H2O+O無色化合物+O有色化合物三方法步驟:1將5個分別裝有水、葡萄糖溶液、三份模擬“尿樣”的滴瓶和5條葡萄糖試紙分別對應做好標記,并在記錄本上設計好記錄表格。2分別用滴管從5個滴瓶中吸取溶液,在對應的葡萄糖試紙上各滴加2滴。3觀察試紙的顏色變化并與標準比色卡對比,判斷出“尿糖”的含量。4將實驗結果記在記錄表中。 實驗十七 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化(必修三P68)一實驗目的:1通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,嘗試建構種群增長的數(shù)學模型。2用數(shù)學模型解釋種群數(shù)量的變化。3學會使用血球計數(shù)板進行計數(shù)。二實驗原理:1在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一個封閉容器內的酵母菌種群,通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。2養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。三方法步驟: 提出問題作出假設討論探究思路制定計劃實施計劃
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