納米藥物對(duì)藥物療效和毒性的影響

1、納米藥物對(duì)藥物療效和毒性的影響物理藥學(xué)與藥物輸送課程論文納米藥物對(duì)藥物療效和毒性的影響學(xué) 院（系）： 制藥科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 專 業(yè)： 藥物工程 學(xué) 生 姓 名： 王柳 學(xué) 號(hào)： 11307086 完 成 日 期： 2014年4月28日 大連理工大學(xué)Dalian University of Technology目 錄1 納米藥物41.1概念41.2藥物納米化的主要優(yōu)勢(shì)41.3 理想納米藥物所具備的條件42 納米藥物的分類52.1直接納米化52.2 納米載體系統(tǒng)52.2.1 高分子納米粒(polymer nanoparticles,PNP)52.2.2 固體脂質(zhì)納米粒（solid lipid nan

2、oparticles,SLN）52.2.3 納米脂質(zhì)體（nanoliposome,NL）52.2.4 聚合物膠束（polymeric micelles）63 納米藥物應(yīng)用實(shí)例63.1 抗腫瘤納米藥物米托蒽醌（MTO）63.1.1 米托蒽醌-固體脂質(zhì)納米球（MTO-SLN）的制備63.1.2體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)73.1.3 急性毒性93.1.4對(duì)MCF-7乳腺癌的抑制實(shí)驗(yàn)93.1.5 抑制P388細(xì)胞淋巴轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)103.2 抗結(jié)核納米藥物利福平（RIF）、異煙肼（INH）、比嗪酰胺（PZA）103.2.1 制備方法103.2.2 在豚鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征103.3 納米抗炎藥物阿司匹林納米囊103.3

3、.1 PEG600與芳香二酯共聚物的合成103.3.2 納米囊的制備及其理化特征103.3.3 藥理作用103.4 納米中藥水飛薊素103.4.1 不同粒徑的水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的制備103.4.2 三種粒徑的水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的比較104 納米藥物的毒性評(píng)價(jià)104.1 新型阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體的毒性研究9104.1.1 不同阿霉素制劑間細(xì)胞毒性的比較104.1.2 動(dòng)物體內(nèi)全身毒性104.1.3 透射電子顯微鏡觀察心肌損傷情況104.2 納米藥物對(duì)血腦屏障的毒性評(píng)價(jià)104.3 納米粒的安全性問(wèn)題10結(jié)論101 納米藥物1.1概念 納米藥物1是指運(yùn)用納米技術(shù)（特別是納米化制備技術(shù)）研

4、究開(kāi)發(fā)的一類新的藥物制劑。作為納米科技中最接近產(chǎn)業(yè)化、最具發(fā)展前景的方向之一，納米藥物特別是納米抗腫瘤藥物、納米多肽蛋白質(zhì)藥物，以及非病毒載體基因藥物的納米制劑的研究和開(kāi)發(fā)，已成為當(dāng)前國(guó)際醫(yī)藥學(xué)界的前沿和熱點(diǎn)。 1.2藥物納米化的主要優(yōu)勢(shì)（1） 增加藥物吸收：納米粒徑高度分散，表面積大，有利于增加藥物與吸收部位的生物膜接觸面積。 （2） 可靶向釋放：載藥納米?？勺鳛楫愇锒痪謩?shì)細(xì)胞吞噬，到達(dá)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)分布集中的肝、脾的靶部位和連接有配基、抗體、酶底物所在的靶部位。 （3） 緩釋性：通過(guò)調(diào)整載體材料種類或配比，可控制藥物的釋放速率，從而制備出具有緩釋特性的納米藥物。 （4） 增加生物膜的通透性

5、：納米藥物通過(guò)內(nèi)吞等機(jī)制進(jìn)入細(xì)胞，易于透皮吸收、易于穿過(guò)血腦屏障等。 （5） 降低藥物的毒副作用。1.3 理想納米藥物所具備的條件（1） 較高的載藥量(Drug Content, DC)大于30 ，其中載藥量定義為：DC%=納米粒中藥物的量干燥納米粒的量×100%（2） 較高的包封率(EncapsulationYeild, EY)大于80，包封率定義為： EY%=納米粒中藥物的量最初投入的藥量×100%（3） 制備和純化方法簡(jiǎn)便，易于擴(kuò)大生產(chǎn)。 （4） 載體材料可生物降解，低毒或無(wú)毒。 （5） 適當(dāng)?shù)牧脚c粒形。 （6） 較長(zhǎng)的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。2 納米藥物的分類 作為納米科技

6、與現(xiàn)代制劑技術(shù)交叉、融合產(chǎn)生的納米制劑技術(shù)，其核心是藥物的納米化技術(shù)，包括藥物的直接納米化和納米載藥系統(tǒng)。 2.1直接納米化通過(guò)納米沉淀技術(shù)或超細(xì)粉碎技術(shù)直接制備藥物納米顆粒。 例如：納米混懸液(nanosuspension)：在表面活性劑和水等附加劑存在下，直接將藥物粉碎加工成納米混懸劑，通常適合于包括口服、注射等途徑給藥，以提高吸收或靶向性。通過(guò)對(duì)附加劑的選擇，可以得到表面性質(zhì)不同的微粒。特別適合于大劑量的難溶性藥物的口服吸收和注射給藥。2.2 納米載體系統(tǒng)通過(guò)納米載體，使藥物以溶解、分散、包裹、吸附、偶聯(lián)等方式成為納米分散體。 2.2.1 高分子納米粒(polymer nanoparti

7、cles,PNP) 包括高分子納米球和高分子納米囊。藥物被包裹在載體膜內(nèi)，稱納米囊（nanocapsule）；藥物分散在載體基質(zhì)中，稱納米球（nanosphere）。 納米囊和納米球主要由聚乳酸、聚丙交酯己交酯、殼聚糖、明膠等高分子材料制備而成。 根據(jù)材料的性能，適合于不同給藥途徑，如靜脈注射的靶向作用、肌肉或皮下注射的緩控釋作用。 2.2.2 固體脂質(zhì)納米粒（solid lipid nanoparticles,SLN） 以固態(tài)的天然或合成類脂（各種飽和脂肪酸）作為載體的納米載藥系統(tǒng)，將藥物包裹或夾嵌于類脂核中，制成粒徑約為50nm1000nm的固體膠粒給藥系統(tǒng)。 與PNP相比，SLN的最大特

8、點(diǎn)一是采用生理相溶性好、低毒性的類脂材料，二是可采用已成熟的高壓勻質(zhì)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。 2.2.3 納米脂質(zhì)體（nanoliposome,NL） 脂質(zhì)體是由磷脂（或與附加劑）為骨架膜材制成的，具有雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊狀體。藥物制成脂質(zhì)體制劑，具有靶向性、長(zhǎng)效作用（緩釋性）、降低藥物毒性、保護(hù)被包封的藥物，提高藥物穩(wěn)定性，具有較好的細(xì)胞親和性與組織相容性。 納米脂質(zhì)體又可分為單室脂質(zhì)體和多室脂質(zhì)體，單室脂質(zhì)體按照粒徑又可分為小單室脂質(zhì)體和打單室脂質(zhì)體，小單室脂質(zhì)體（SUV）的粒徑為2080nm，大單室脂質(zhì)體（LUV）的粒徑為1001000nm。納米脂質(zhì)體的雙分子層結(jié)構(gòu)包括親脂部分和親水部分，親脂

9、部分有脂肪酸基，親水部分指含羥基的含氮化合物，如：膽堿、乙醇胺等。多室脂質(zhì)體（MLV）粒徑為15m。藥物通常溶解在脂質(zhì)體內(nèi)的水相，或吸附或溶解在脂質(zhì)雙分子膜上。2.2.4 聚合物膠束（polymeric micelles） 聚合物膠束是由一類兩親性共聚物形成的新型納米載藥系統(tǒng)。 聚合物的親水嵌段常用聚乙二醇（PEG），而常用的疏水嵌段包括聚L-賴氨酸、天冬氨酸、聚己內(nèi)酯等。 親水端可通過(guò)修飾（偶聯(lián)配體或抗體），使聚合物膠束具有細(xì)胞靶向作用。 3 納米藥物應(yīng)用實(shí)例3.1 抗腫瘤納米藥物米托蒽醌（MTO） 米托蒽醌（mitoxantrone,MTO）是第二代蒽環(huán)類抗生素，屬細(xì)胞周期非特異性抗癌藥，

10、通過(guò)吸附作用嵌入細(xì)胞核酸中，抑制癌細(xì)胞核酸的合成而發(fā)揮藥效。臨床主要用于急性白血病、各期乳腺癌和惡性淋巴瘤。3.1.1 米托蒽醌-固體脂質(zhì)納米球（MTO-SLN）的制備固體脂質(zhì)納米球（SLN）4常用的固體脂質(zhì)材料為高熔點(diǎn)脂質(zhì)，有飽和脂肪酸的甘油酯、硬脂酸、癸酸、棕櫚酸、甾體等。乳化劑可用多種磷脂以及合成乳化劑等，但以混合乳化劑的效果為好。將一定量的山崳酸甘油酯與磷脂溶于氯仿，減壓薄膜蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑得薄膜，加入一定量MTO和含硬脂酸聚烴氧酯（S-40）的水溶液，溶脹薄膜，超聲分散2min既得。以山崳酸甘油酯、磷脂、S-40和MTO用量為自變量，包封率、載藥量和體外釋放度為考察指標(biāo)，經(jīng)單因素和球

11、面設(shè)計(jì)優(yōu)化，繪制若干三維圖和自變量與因變量的關(guān)系方程，如圖3.1為以MTO用量為自變量，以載藥量和包封率為考察指標(biāo)繪制的三維圖。圖3.1 根據(jù)MTO的百分含量預(yù)測(cè)包封率EY與DC的響應(yīng)曲面 由此得出最佳配比，即在10ml水相中含有0.20% MTO，1.0%山崳酸甘油酯，3.0%磷脂，0.5%S-40。比較在最優(yōu)條件下制備的米托蒽醌脂質(zhì)納米球響應(yīng)變量的觀察值與期望值，結(jié)果如表3.1所示，其中包封率與載藥量的觀察值分別為87.23%和4.18%，與試驗(yàn)預(yù)測(cè)值相符，并且偏差在±2.5%之內(nèi)。表3.1 比較在最優(yōu)條件下制備的米托蒽醌脂質(zhì)納米球響應(yīng)變量的觀察值與期望值 響應(yīng)變量預(yù)測(cè)值觀察值（

12、平均值±S.D.）偏差（%）EY(%)89.2187.23±2.16-2.21DC(%)4.084.18±0.102.32Q2h(%)9.017.56±0.19-16.05Q24h(%)36.0025.85±0.82-28.20t50(d)5.115.25±1.102.68t50(d)31.0428.38±4.50-8.563.1.2體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn) 納米球經(jīng)10kGy的Co輻照滅菌，檢查無(wú)菌合格，包封產(chǎn)率與載藥量物明顯變化。用SD大鼠進(jìn)行體內(nèi)分布試驗(yàn)，結(jié)果如圖3.1所示，白色柱形為MTO-SLN，黑色為MTO的溶液對(duì)照組。結(jié)果

13、顯示皮下注射MTO納米球在注射部位的消除較MTO的溶液對(duì)照組慢。圖3.3顯示的是皮下組織對(duì)MTO的吸收，結(jié)果MTO在皮下組織的吸收要慢于溶液對(duì)照組。圖3.2 MTO在皮下組織中的消除 圖3.3 MTO在皮下組織中的吸收 根據(jù)表3.2所示的體內(nèi)分布藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，我們可以看到納米球組合溶液組在淋巴的濃度均高于其他組織，說(shuō)明納米球和MTO本身均具有淋巴靶向性，但納米球在淋巴結(jié)的濃度高于溶液組，說(shuō)明納米載體增加了藥物的靶向性。表3.2 體內(nèi)分布的藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 組織Cmax (g/g)Tmax (h)aAUC0120 (g/(mL h)MTO-SLNMTO-SolnMTO-SLNMTO-SolnMTO-SL

14、NMTO-Soln腋淋巴結(jié)21.729 ± 13.97210.587 ± 2.07572 ±024 ± 02496.70 ± 1605.401052.30 ± 206.20心臟1.932 ± 0.6742.721 ± 0.73272 ±024 ± 0208.63 ± 72.8186.60 ± 77.10肝臟3.113 ± 0.8653.706 ± 1.19774 ±024 ± 0274.84 ± 76.41333.02

15、77; 107.57脾臟7.164 ± 2.4219.078 ± 2.95072 ±072 ± 0684.06 ± 231.21991.50 ± 322.24肺2.861 ± 1.0503.000 ± 0.66072 ±072 ± 0284.62 ± 104.46335.20 ± 73.74腎臟8.174 ± 2.4697.060 ± 2.59872 ±072 ± 0870.98 ± 293.24790.07 ± 2

16、90.753.1.3 急性毒性用昆明小鼠進(jìn)行急性病毒性實(shí)驗(yàn)，MTO-SLN的 LD50為5.3±1.0mg/kg，稍小于溶液對(duì)照組的5.9±1.1 mg/kg，暗示我們SLN可能存在一些毒性。3.1.4對(duì)MCF-7乳腺癌的抑制實(shí)驗(yàn) 用BALB/c-nu裸鼠進(jìn)行MCN-7乳腺癌實(shí)驗(yàn)5，結(jié)果顯示納米球與2倍劑量的溶液組之間瘤體大小無(wú)明顯差異，但均顯著小于空白對(duì)照組。表3.3 抑制腫瘤大小及其抑制百分比分組MTO劑量(mg/kg)腫瘤大小(mm3)Pa抑制率（%）PaMTO-SLN1.052.27 ± 67.36P1 < 0.0044, P2 > 0.868

17、1.81±14.03P2 > 0.88MTO-Soln2.046.88 ± 31.52P1 < 0.006682.86±11.13空白0351.23 ± 163.8903.1.5 抑制P388細(xì)胞淋巴轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)用昆明小鼠P388進(jìn)行抑制淋巴轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)。納米球組與2倍劑量的溶液組均能明顯抑制淋巴轉(zhuǎn)移，而對(duì)照組不行，并且MTO納米球的作用更加顯著。表3.4 比較注射或不注射MTO對(duì)注射了P388細(xì)胞的小鼠的淋巴結(jié)大小分組MTO劑量(mg/kg)淋巴結(jié)大小(mm3)PaMTO-SLN1.041.85 ± 27.42P1 < 0.05，P

18、2 > 0.05MTO-Soln2.0119.32 ± 57.30P1 > 0.20空白0186.83 ± 77.71綜上所述，米托蒽醌固體脂質(zhì)納米球確實(shí)具有淋巴靶向性，對(duì)乳腺癌及淋巴轉(zhuǎn)移的療效優(yōu)于原藥3.2 抗結(jié)核納米藥物利福平（RIF）、異煙肼（INH）、比嗪酰胺（PZA）利福平、異煙肼、比嗪酰胺屬抗結(jié)核藥。作為一線抗結(jié)結(jié)核病治療藥物，由于治療療程長(zhǎng)，患者用藥的依從性差（需每天用藥）、不良反應(yīng)發(fā)生率高（呈劑量依賴性），不僅影響療效，而且易引起多藥耐藥性出現(xiàn)。用納米技術(shù)對(duì)其進(jìn)行劑型改造，提高治療指數(shù)，減少臨床用藥劑量是克服上述問(wèn)題的途徑之一。3.2.1 制備方

19、法Sharma等6用聚乙交酯-丙交酯poly(lactide-co-glycolide),PLG納米粒作為載體，經(jīng)多級(jí)乳化法對(duì)RIF-INH-PZA進(jìn)行包裹，形成PLG-RIF-INH-PZA納米載藥系（PLG-RIF-INH-PZA-NP）。 將含INH-PZA水溶液加入到含聚合體PLG的二氯甲烷(DCM)中，經(jīng)超聲乳化，在超聲前將RIF直接加入到DCM中。再初步乳化的溶液加入到含聚乙烯醇(PVA)的水溶液中進(jìn)行超聲，形成水/油/水乳液。乳液不斷攪拌12h以徹底除去DCM，800010000r/min離心5分鐘，用水洗滌，減壓干燥，即得PLG-RIF-INH-PZA-NP。 其粒徑范圍為：1

20、86290nm，包封率在55%73%。 3.2.2 在豚鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征 單劑量口服給藥研究PLG-RIF-INH-PZA納米載藥體系在豚鼠體內(nèi)的藥時(shí)濃度曲線，下圖3.4依次為利福平（RIF）、異煙肼（INH）、比嗪酰胺（PZA）的藥時(shí)濃度曲線。研究表明單劑量口服PLG-RIF-INH-PZA納米載藥體系治療劑量，利福平可維持有效血藥濃度5天，異煙肼和比嗪酰胺可維持有效血藥濃度12天；口服2/3治療劑量時(shí)，納米載藥體系中RIF、INH、PZA在體內(nèi)的清除時(shí)間為7、12、11天，而原形藥在體內(nèi)的清除時(shí)間為12小時(shí)，由此可見(jiàn)納米載藥體系的相對(duì)生物利用度較原形藥相比有較大提高。圖3.4 單劑量

21、口服PLG-RIFINH-PZA-NP和裸藥后血漿藥物濃度時(shí)間曲線 3.3 納米抗炎藥物阿司匹林納米囊3.3.1 PEG600與芳香二酯共聚物的合成 7 將5-羥基間苯二甲酸甲酯與PEG600放入圓底燒瓶中，加入適量酶，在90真空條件下反應(yīng)48h，經(jīng)過(guò)濾、透析，冷凍干燥得聚合物3；等量的聚合物3與溴烷（醇、酸）溶于丙酮中，加入碳酸鉀進(jìn)行反應(yīng)，過(guò)濾，真空干燥，得聚合物（7）、（8）、（9）。圖3.5 聚乙二醇600與芳香二酯共聚物的合成 3.3.2 納米囊的制備及其理化特征 共聚物7和疏水性藥物阿司匹林分別用氯仿溶解后，按5:1（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的比例混合15min，在真空下除去有機(jī)溶劑，得到高黏度藥

22、物與共聚物的混合物，在不斷振搖情況下降該混合物溶于水中形成納米囊。 圖3.6 阿司匹林、空納米囊和阿斯匹林納米囊的紫外吸收光譜 圖3.6顯示阿司匹林、空納米囊和阿司匹林納米囊吸收光譜。阿司匹林納米囊在277nm處有最大吸收，另在310nm處同樣有最大吸收，該吸收來(lái)源于空納米囊。3.3.3 藥理作用 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：阿司匹林納米囊制劑與等劑量普通阿司匹林制劑以及空納米囊均具有抗炎作用。以小鼠耳腫脹程度為指標(biāo)，與模型組相比，其對(duì)耳腫脹強(qiáng)度的降低率分別為：62%，32%和18%圖3.7 阿司匹林PEG納米囊的抗炎作用 3.4 納米中藥水飛薊素水飛薊素(silymarin，SM)是從菊科植物水飛薊中提取

23、得到的黃酮木脂素類化合物，臨床上用于治療慢性肝炎、各種肝損傷、肝纖維化和早期肝硬化等肝病。由于SM難溶于水和一般有機(jī)溶劑，口服吸收差，導(dǎo)致口服制劑的生物利用度較低，影響了其臨床療效，因此如何提高其生物利用度，改善臨床療效是制劑研究人員所面臨的重要課題之一。3.4.1 不同粒徑的水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的制備8 稱取處方量的SM、山榆酸甘油酯、大豆磷脂，在(80±5)水浴下，溶于適量無(wú)水乙醇后，揮盡溶劑，迅速移至-20 冰箱中冷凍2 h。取一定量的poloxamer（泊咯沙姆）188和甘油分散于4 的水中，形成均勻的水相，加入上述所得凍干固體，研磨至形成均勻的微粒水分散體系后，分別采用高

24、壓乳勻法(70 MPa，10 cycles)、高速剪切分散乳化法(1萬(wàn)r·min，30 s)和超聲分散法(3.5萬(wàn)HZ，10 min)，制備得3種粒徑大小的SM-SLN。 表3.5 不同粒徑SM-SLN粒徑、包封率、載藥量期望達(dá)到粒徑值/nm制備方法實(shí)測(cè)粒徑值/nm包封率/%載藥量/%150高壓乳勻161.60±0.1693.76±0.162.73±0.04500高速攪拌540.40±50.7091.81±0.592.67±0.021000超聲處理1170.23±122.9091.44±1.072.66&

25、#177;0.033.4.2 三種粒徑的水飛薊素固體脂質(zhì)納米粒的比較分別測(cè)定大鼠口服3種粒度大小的SM-SLN后的血藥濃度，血藥濃度經(jīng)時(shí)曲線如圖3.8所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，口服150nm粒子的藥時(shí)曲線下面積分別是500、1000nm的2.08和2.54倍，說(shuō)明納米粒子的粒徑對(duì)粒子在胃腸道的吸收有極大的影響，粒徑在150nm左右的粒子可以獲得更高的生物利用度。圖3.8 血藥濃度經(jīng)時(shí)曲線 4 納米藥物的毒性評(píng)價(jià)4.1 新型阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體的毒性研究9 多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是目前臨床腫瘤治療的主要障礙。本文研制了新型阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體(DARSLs

26、) ，并對(duì)其體外細(xì)胞毒和體內(nèi)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)。 采用硫酸銨梯度法將阿霉素(DOX)和維拉帕米(VER)藥物同時(shí)包載到隱形脂質(zhì)體內(nèi)，制備成DARSLs；采用耐藥性鼠前列腺腫瘤細(xì)胞株MLLB2和人子宮肉瘤細(xì)胞株MES2SA /DX5進(jìn)行體外細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)；采用SD大鼠對(duì)阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體進(jìn)行體內(nèi)毒性評(píng)價(jià)。 4.1.1 不同阿霉素制劑間細(xì)胞毒性的比較 各種阿霉素制劑對(duì)鼠前列腺耐藥腫瘤細(xì)胞和人子宮肌瘤的體外細(xì)胞毒性采用MTT分析方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。如圖4.1結(jié)果顯示：阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體的IC50大約為0.08M/L。對(duì)耐藥細(xì)胞株的毒性增加13倍。隱形脂質(zhì)體增加了對(duì)耐藥性腫瘤細(xì)胞的毒性。表4.1 不同劑

27、型阿霉素對(duì)MLLB2和MES2SA /DX5細(xì)胞的IC50值IC50 /mol·L - 1FD FDFV LD LDLV LDFV FDLV DARSLs MLLB2 141 ±33 0.15 ±0.03 89 ±4 0.100 ±0.010 1.0 ±0.5 0.30 ±0.15 0.080 ±0.020 MES2SA /DX5 2.3 ±0.4 0.130 ±0.020 2.1 ±0.3 0.140 ±0.020 0.21 ±0.06 0.140 ±0

28、.020 0.130 ±0.010 注1）：FD：游離DOX ；LD：脂質(zhì)體包載DOX；FDFV：游離DOX和游離VER 組成的混合液；LDFV：脂質(zhì)體包載DOX和游離VER組成的混合液；LDLV ：DOX脂質(zhì)體和VER脂質(zhì)體組成的混合液；DARSLs：阿霉素抗耐藥性隱形脂質(zhì)體 4.1.2 動(dòng)物體內(nèi)全身毒性 在給藥的9 d內(nèi)，每天記錄動(dòng)物存活數(shù)目和體重。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在給藥3個(gè)劑量后，游離性藥物FD 或FDFV組動(dòng)物發(fā)生嚴(yán)重的體重減輕（如圖4.1），并且出現(xiàn)30% 50%的死亡率。而接受脂質(zhì)體制劑給藥組（LDFV和DARSL s）動(dòng)物，體重減輕情況明顯改善且存活率仍為100%。另外，生理

29、行為學(xué)觀察結(jié)果顯示游離藥物組中80%動(dòng)物有不同程度的腹瀉癥狀發(fā)生并且毛發(fā)臟亂，而在脂質(zhì)體制劑組則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這些特征。 圖4.1 注射不同劑型藥物后小鼠的體重變化 4.1.3 透射電子顯微鏡觀察心肌損傷情況 心肌損傷的典型電子顯微照片顯示如圖4.2，圖A為用生理鹽水處理的對(duì)照組的動(dòng)物正常心肌。從圖中可以看出，游離藥物組（圖B和圖C）動(dòng)物右心室心肌均發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷，心肌細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重的空泡以及心肌纖維發(fā)生嚴(yán)重萎縮；而脂質(zhì)體組（圖D和圖E）心肌切片中僅發(fā)現(xiàn)輕微的心肌損傷。圖4.2 分別注射Saline (A) , FD (B) , FDFV (C) , LDFV (D) , DARSL s ( E)后，心

30、肌的顯微圖綜上所述，DARSL s具有相對(duì)較低的毒性，且能有效抑制耐藥腫瘤的生長(zhǎng)。 4.2 納米藥物對(duì)血腦屏障的毒性評(píng)價(jià) 納米粒表面電荷可改變血腦屏障的完整性和通透性10。血腦屏障由于物理和靜電屏障限制治療藥物滲入腦內(nèi)。制備蜂蠟微乳，使其表面負(fù)荷中性、陰性或陽(yáng)性表面活性劑，采用大鼠腦灌流方法測(cè)定血腦屏障的完整性和納米粒腦滲透能力。結(jié)果為中性和低濃度陰性納米粒對(duì)血腦屏障的完整性無(wú)影響，高濃度陰離子納米粒和陽(yáng)離子納米粒則破壞血腦屏障的完整性。低濃度陰性納米粒的攝入大于同濃度的中性和陽(yáng)性納米粒。研究結(jié)果顯示，中性和低濃度陰性納米?？勺鳛槟X部給藥的藥物載體，陽(yáng)性納米粒對(duì)血腦屏障有中等程度的毒性，納米表

31、面電荷對(duì)大腦的毒性和腦分布特征性應(yīng)加以考慮。4.3 納米粒的安全性問(wèn)題 納米粒對(duì)環(huán)境和人類健康的影響是當(dāng)前納米科學(xué)研究中令人關(guān)注的問(wèn)題，日益受到世界各國(guó)的重視。納米粒能夠穿透皮膚，進(jìn)入肺部，在機(jī)體內(nèi)自由穿梭而不受免疫系統(tǒng)的干擾；金屬納米粒進(jìn)入肺部而形成矽肺；納米?？赏ㄟ^(guò)嗅球進(jìn)入大腦而致動(dòng)物死亡，特氟龍塑料在20nm粒徑時(shí)能迅速致大鼠死亡；單壁納米炭管能透過(guò)皮膚進(jìn)入體內(nèi)，沉淀于肺泡中，誘發(fā)炎癥或肉芽腫。由此可見(jiàn)，納米粒進(jìn)入體內(nèi)后與機(jī)體間存在相互作用，不同直徑的納米粒和不同種類的材料對(duì)機(jī)體的影響可能是不同的，需要大量的研究來(lái)確定。結(jié)論納米材料給疾病治療治療帶來(lái)了新的機(jī)遇，展示出誘人的美好前景。但是

32、，如何科學(xué)、合理地應(yīng)用納米材料，也面臨著新的挑戰(zhàn)。如納米材料的新特性對(duì)生產(chǎn)者、消費(fèi)者、公共場(chǎng)所與環(huán)境可以引起新的危險(xiǎn)。一些納米材料顯示出毒性特征，特別是納米材料與人體或環(huán)境相互作用的后果還不清楚。這些危險(xiǎn)與不確定性高度提示納米技術(shù)應(yīng)該被視作為雙刃劍，在納米材料被加工成商業(yè)化產(chǎn)品之前，應(yīng)充分研究其生物學(xué)效應(yīng)、作用機(jī)制及其毒性的消除措施，為合理利用納米材料奠定理論基礎(chǔ)。 參考文獻(xiàn)1 楊祥良.納米藥物M.北京：清華大學(xué)出版社，2007:1-32 吉順莉, 張春燕, 戈延茹. 納米載藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展J. 中國(guó)藥業(yè), 2010 (14): 82-833 平其能. 納米藥物和納米載體系統(tǒng)J. 中國(guó)新藥雜志, 2002, 11(1): 42-46. 4 Lu B, Xiong S B, Yang H, et al. Solid lipid nanoparticles of mitoxantrone for local injection against breast cancer and its lymph node metastasesJ. European journal of pharmaceutical sciences, 2006, 28(1): 86-95. 5 Lu B,X