生物化學(xué)普通生物化學(xué)

1、生物化學(xué)（普通生物化學(xué)）生物化學(xué)（普通生物化學(xué)）考研答疑考研答疑蛋白質(zhì)化學(xué)蛋白質(zhì)化學(xué)酶酶蛋白質(zhì)的分解和氨基酸代謝蛋白質(zhì)的分解和氨基酸代謝核酸化學(xué)核酸化學(xué)核酸的分解和核苷酸代謝核酸的分解和核苷酸代謝生物氧化生物氧化一、蛋白質(zhì)的組成（元素組成，化學(xué)組成）一、蛋白質(zhì)的組成（元素組成，化學(xué)組成）二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)（一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)）（一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)）三、蛋白質(zhì)的性質(zhì)三、蛋白質(zhì)的性質(zhì)（等電點(diǎn)、分子量、膠體、沉淀反應(yīng)、顏色（等電點(diǎn)、分子量、膠體、沉淀反應(yīng)、顏色反應(yīng)、變性與復(fù)性）反應(yīng)、變性與復(fù)性）（一）蛋白質(zhì)的元素組成： c、h、o、n 及少量的及少量的 s 特點(diǎn)：特點(diǎn)：

2、n 在各種蛋白質(zhì)中的平均含量為在各種蛋白質(zhì)中的平均含量為16% 因?yàn)闃悠泛科骄谝驗(yàn)闃悠泛科骄?6%，取其倒數(shù)，取其倒數(shù)100/16=6.25，即為蛋白質(zhì)換算系數(shù)，其含義是樣，即為蛋白質(zhì)換算系數(shù)，其含義是樣品中每存在品中每存在1g元素氮，就說明含有元素氮，就說明含有6.25g 蛋白質(zhì)）；蛋白質(zhì)）；故：故：凱氏定氮法凱氏定氮法 蛋白質(zhì)含量蛋白質(zhì)含量=蛋白質(zhì)含氮量蛋白質(zhì)含氮量6.25優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：對(duì)原料無選擇性，儀器簡單，方法也簡單。對(duì)原料無選擇性，儀器簡單，方法也簡單。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：易將無機(jī)氮易將無機(jī)氮(如核酸中的氮如核酸中的氮)都?xì)w入蛋白質(zhì)中。都?xì)w入蛋白質(zhì)中。 (二）蛋白質(zhì)的水解1、完全

3、水解完全水解：用濃酸、堿將蛋白質(zhì)：用濃酸、堿將蛋白質(zhì) 完全水解為完全水解為氨基酸氨基酸。 酸水解酸水解：無消旋作用，產(chǎn)物為：無消旋作用，產(chǎn)物為l-氨氨 基酸?；?。 堿水解堿水解：多數(shù)：多數(shù)氨基酸氨基酸被破壞，有消被破壞，有消 旋現(xiàn)象。旋現(xiàn)象。2、部分水解： 一般用酶或稀酸在較溫和條件下，將蛋白質(zhì)分一般用酶或稀酸在較溫和條件下，將蛋白質(zhì)分子切斷，產(chǎn)物為分子大小不等的肽段和子切斷，產(chǎn)物為分子大小不等的肽段和氨基酸氨基酸。（三）氨基酸（三）氨基酸氨基酸氨基酸是蛋白質(zhì)水解的最終產(chǎn)物，是組成蛋是蛋白質(zhì)水解的最終產(chǎn)物，是組成蛋白質(zhì)的基本單位。從蛋白質(zhì)水解物中分離出白質(zhì)的基本單位。從蛋白質(zhì)水解物中分離出來

4、的氨基酸有二十種，除脯氨酸和羥脯氨酸來的氨基酸有二十種，除脯氨酸和羥脯氨酸外，這些天然氨基酸在結(jié)構(gòu)上的共同特點(diǎn)為：外，這些天然氨基酸在結(jié)構(gòu)上的共同特點(diǎn)為：(1)與羧基相鄰的與羧基相鄰的-碳原子上都有一個(gè)氨基，因碳原子上都有一個(gè)氨基，因而稱為而稱為-氨基酸氨基酸。(2)除甘氨酸除甘氨酸外外,其它所有氨基酸分子中的其它所有氨基酸分子中的-碳原碳原子都為不對(duì)稱碳原子。目前已知的天然蛋白子都為不對(duì)稱碳原子。目前已知的天然蛋白質(zhì)中氨基酸都為質(zhì)中氨基酸都為l-型型。r（3）按r基團(tuán)的極性分：極性極性氨基酸：氨基酸： 極性極性不帶電荷不帶電荷：絲、蘇、天冬酰胺、：絲、蘇、天冬酰胺、 谷氨酰胺、酪、半胱、谷氨

5、酰胺、酪、半胱、 極性極性帶正電荷帶正電荷：組、賴、精、：組、賴、精、 極性極性帶負(fù)電荷帶負(fù)電荷：天冬、谷、：天冬、谷、非極性氨基酸：非極性氨基酸：甘、丙、纈、亮、異亮、甘、丙、纈、亮、異亮、 苯丙、甲硫、脯、色、苯丙、甲硫、脯、色、（4）按人體是否可合成來分：必需氨基酸必需氨基酸：機(jī)體不能自身合成，必須由食：機(jī)體不能自身合成，必須由食物供給的氨基酸。物供給的氨基酸。甲硫、色、賴、纈、異亮、亮、苯丙、蘇、甲硫、色、賴、纈、異亮、亮、苯丙、蘇、半必需氨基酸半必需氨基酸：人體可合成，但幼兒期合成：人體可合成，但幼兒期合成速度不能滿足需要。速度不能滿足需要。 組組*、精、精*、非必需氨基酸非必需氨基

6、酸：機(jī)體可自身合成的氨基酸。：機(jī)體可自身合成的氨基酸。（5）氨基酸的重要理化性質(zhì)(1)光吸收光吸收：構(gòu)成蛋白質(zhì)的構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸在可見種氨基酸在可見光區(qū)都沒有光吸收，但在遠(yuǎn)紫外區(qū)光區(qū)都沒有光吸收，但在遠(yuǎn)紫外區(qū)(pi，蛋白質(zhì)粒子，蛋白質(zhì)粒子帶負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向帶負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)；當(dāng)正極移動(dòng)；當(dāng)phpi，蛋白質(zhì)粒子帶正電荷，蛋白質(zhì)粒子帶正電荷，在電場(chǎng)中向負(fù)極移動(dòng)。在電場(chǎng)中向負(fù)極移動(dòng)。這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)電這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)電泳泳(electrophoresis)。三、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)的水溶液是一種穩(wěn)定的親水膠。蛋白質(zhì)的水溶液是一種穩(wěn)定的親水膠。由于蛋白質(zhì)的分子量很大，大小在由

7、于蛋白質(zhì)的分子量很大，大小在1-100nm范圍內(nèi)，它在水中能夠形成膠體溶范圍內(nèi)，它在水中能夠形成膠體溶液。液。同種電荷互相排斥；不能通過半透膜；同種電荷互相排斥；不能通過半透膜；分子周圍有雙電子層和水化層，有利于穩(wěn)分子周圍有雙電子層和水化層，有利于穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體系統(tǒng)。定蛋白質(zhì)膠體系統(tǒng)。由于膠體溶液中的蛋白質(zhì)不能通過半透膜，由于膠體溶液中的蛋白質(zhì)不能通過半透膜，因此可以應(yīng)用因此可以應(yīng)用透析法透析法將非蛋白的小分子雜將非蛋白的小分子雜質(zhì)除去質(zhì)除去四、沉淀反應(yīng)蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性與它的分子量大小、蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性與它的分子量大小、所帶的電荷和水化作用有關(guān)。所帶的電荷和水化作用有關(guān)。改變?nèi)芤旱?/p>

8、條件，將影響蛋白質(zhì)的溶解性質(zhì)改變?nèi)芤旱臈l件，將影響蛋白質(zhì)的溶解性質(zhì)在適當(dāng)?shù)臈l件下，蛋白質(zhì)能夠從溶液中沉淀在適當(dāng)?shù)臈l件下，蛋白質(zhì)能夠從溶液中沉淀出來。出來。方法：方法：等電點(diǎn)沉淀，鹽析，有機(jī)溶劑，重金等電點(diǎn)沉淀，鹽析，有機(jī)溶劑，重金屬鹽，生物堿試劑屬鹽，生物堿試劑鹽析：在蛋白質(zhì)的水溶液中加入高濃度的中性鹽，使蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象稱為鹽析。原因，硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等中性鹽可有效破壞蛋白質(zhì)的水化層和中和電荷 ，從而使蛋白質(zhì)沉淀。鹽溶：鹽溶：一般在低鹽濃度的情況下，蛋白質(zhì)的一般在低鹽濃度的情況下，蛋白質(zhì)的溶解度隨鹽濃度的升高而增加，這種現(xiàn)象稱溶解度隨鹽濃度的升高而增加，這種現(xiàn)象稱為鹽溶。為鹽溶

9、。五、蛋白質(zhì)的變性（denaturation)和復(fù)性（renaturation)天然蛋白質(zhì)在理化因素的影天然蛋白質(zhì)在理化因素的影響下，高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，響下，高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，理化性質(zhì)和生物學(xué)功能改變理化性質(zhì)和生物學(xué)功能改變或喪失，但一級(jí)結(jié)構(gòu)保持不或喪失，但一級(jí)結(jié)構(gòu)保持不變，這種現(xiàn)象叫變，這種現(xiàn)象叫蛋白質(zhì)的變蛋白質(zhì)的變性。性。引起變性的主要因素是熱、引起變性的主要因素是熱、紫外光、激烈的攪拌以及強(qiáng)紫外光、激烈的攪拌以及強(qiáng)酸和強(qiáng)堿等。酸和強(qiáng)堿等。蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)的紫外吸收紫外吸收大部分蛋白質(zhì)均含有帶芳香環(huán)的苯丙氨酸、大部分蛋白質(zhì)均含有帶芳香環(huán)的苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。酪氨酸和色氨酸。這三種氨基酸

10、的在這三種氨基酸的在280nm 附近有最大吸收。附近有最大吸收。因此，大多數(shù)蛋白質(zhì)在因此，大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm 附近顯示強(qiáng)的附近顯示強(qiáng)的吸收。吸收。利用這個(gè)性質(zhì)，可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性鑒定。利用這個(gè)性質(zhì)，可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性鑒定。蛋白質(zhì)酶促降解及氨基酸代謝蛋白質(zhì)酶促降解及氨基酸代謝氨基酸在酶的催化下脫去氨基生成相應(yīng)的氨基酸在酶的催化下脫去氨基生成相應(yīng)的-酮酸的過酮酸的過程稱為氧化脫氨基作用。普遍存在于動(dòng)物細(xì)胞中，主要在程稱為氧化脫氨基作用。普遍存在于動(dòng)物細(xì)胞中，主要在肝中進(jìn)行。主要有以下兩種類型：肝中進(jìn)行。主要有以下兩種類型： -氨基酸氨基酸 氨基酸氧化酶（氨基酸氧化酶（fad、fmn）-酮

11、酸酮酸 r-ch-coo- nh+3 | r-c-coo-+nh3 o|h2o+o2h2o2l-谷氨酸脫氫酶谷氨酸脫氫酶h2onh3 -氨基酸氨基酸1 r1-ch-coo- nh+3 |-酮酸酮酸1 r1-c-coo- o| r2-c-coo- o|-酮酸酮酸2 r2-ch-coo- nh+3 |-氨基酸氨基酸2在轉(zhuǎn)氨酶的催化下，在轉(zhuǎn)氨酶的催化下， -氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到-酮酸的酮酮酸的酮基碳原子上，結(jié)果原來的基碳原子上，結(jié)果原來的-氨基酸生成相應(yīng)的氨基酸生成相應(yīng)的-酮酸，而原酮酸，而原來的來的-酮酸則形成了相應(yīng)的酮酸則形成了相應(yīng)的-氨基酸，這種作用稱為轉(zhuǎn)氨基氨基酸，這種作用稱

12、為轉(zhuǎn)氨基作用或氨基移換作用。作用或氨基移換作用。輔酶： 所有轉(zhuǎn)所有轉(zhuǎn)氨酶輔酶氨酶輔酶為磷酸吡為磷酸吡哆醛哆醛，并，并作為作為 脫羧作用、脫羧作用、脫氨作用、脫氨作用、消旋作用消旋作用的輔酶。的輔酶。a a、轉(zhuǎn)氨酶與、轉(zhuǎn)氨酶與l-l-谷氨酸脫氫酶作用相偶聯(lián)谷氨酸脫氫酶作用相偶聯(lián)b b、轉(zhuǎn)氨基作用與嘌呤核苷酸循環(huán)相偶聯(lián)、轉(zhuǎn)氨基作用與嘌呤核苷酸循環(huán)相偶聯(lián) 是體內(nèi)氨基酸的脫氨基的主要方式。是體內(nèi)氨基酸的脫氨基的主要方式。轉(zhuǎn)氨酶與l-谷氨酸脫氫酶作用相偶聯(lián)轉(zhuǎn)氨酶l-谷氨酸脫氫酶-酮酸酮酸-氨基酸氨基酸-酮戊二酸酮戊二酸l-l-谷氨酸谷氨酸轉(zhuǎn)氨基作用與嘌呤核苷酸循環(huán)相偶聯(lián)-氨基酸氨基酸-酮酸酮酸-酮戊二酸

13、酮戊二酸谷氨酸谷氨酸草酰乙酸草酰乙酸天冬氨酸天冬氨酸腺苷酰琥珀酸腺苷酰琥珀酸蘋果酸蘋果酸延胡索酸延胡索酸腺苷酸腺苷酸次黃苷酸次黃苷酸nh3、-酮酸、胺酮酸、胺（1 1）重新生成氨基酸重新生成氨基酸（2 2）谷氨酰胺和天冬酰氨的生成谷氨酰胺和天冬酰氨的生成（3 3）尿素的生成尿素的生成尿素循環(huán)尿素循環(huán)（4 4）合成其他含合成其他含n n物質(zhì)物質(zhì)鳥鳥氨氨酸酸循循環(huán)環(huán)氨基酸氨基酸谷氨酸谷氨酸谷氨酸谷氨酸氨甲酰磷酸氨甲酰磷酸鳥氨酸鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨琥珀酸精氨琥珀酸鳥氨酸鳥氨酸精氨酸精氨酸延胡索酸延胡索酸草酰乙酸草酰乙酸氨基酸氨基酸谷氨酸谷氨酸 -酮戊二酸酮戊二酸天冬氨酸天冬氨酸atpa

14、mp+ppih2o2atp+co2+nh3+h2o2adp+pi基質(zhì)基質(zhì)線線粒粒體體胞液胞液尿素尿素氨的同化氨的同化植物體中的植物體中的n n源（硝酸還原生成）源（硝酸還原生成）nono3 3- -v氨同化的途徑氨同化的途徑gluglu的形成途徑的形成途徑氨甲酰磷酸形成途徑氨甲酰磷酸形成途徑硝酸還原酶硝酸還原酶nono2 2- -亞硝酸還原酶亞硝酸還原酶nhnh3 3aapro 其它含其它含n n化合物化合物酶( (enzymeenzyme) )酶的化學(xué)本質(zhì)及組成(大多數(shù)酶是大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),某些某些rna具有催化活性具有催化活性)酶的作用機(jī)制(酶催化作用的酶催化作用的中間產(chǎn)物中間產(chǎn)物學(xué)

15、說學(xué)說, ,活性中心活性中心) )影響酶促反應(yīng)速度的因素(酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué))一、酶的化學(xué)本質(zhì)及組成分類（一）酶的特點(diǎn)催化效率高、酶易失活、酶活性受調(diào)控、高度專一性催化效率高、酶易失活、酶活性受調(diào)控、高度專一性絕對(duì)專一性絕對(duì)專一性：只作用一種底物。：只作用一種底物。相對(duì)專一性相對(duì)專一性：作用于一類底物。：作用于一類底物。包括鍵專一性和簇包括鍵專一性和簇（基團(tuán)）專一性。（基團(tuán)）專一性。立體異構(gòu)專一性立體異構(gòu)專一性：這類酶不能辨別底物不同的立體異：這類酶不能辨別底物不同的立體異構(gòu)體，只對(duì)其中的某一種構(gòu)型起作用，而不催化其他構(gòu)體，只對(duì)其中的某一種構(gòu)型起作用，而不催化其他異構(gòu)體。包括異構(gòu)體。

16、包括旋光異構(gòu)專一性旋光異構(gòu)專一性和和幾何異構(gòu)專一性幾何異構(gòu)專一性。（二）酶的組成（二）酶的組成1、單純酶、單純酶（簡單蛋白質(zhì)）（簡單蛋白質(zhì)）2、結(jié)合酶：、結(jié)合酶：酶蛋白酶蛋白+輔因子輔因子=全酶全酶輔因子輔因子(cofacter)：熱穩(wěn)定的非蛋白小分子。：熱穩(wěn)定的非蛋白小分子。輔酶輔酶(coenzyme): 結(jié)合較結(jié)合較松松，可透析去除可透析去除； 輔基輔基(prosthetic grup)： 結(jié)合較結(jié)合較緊緊，透析不易除去透析不易除去。酶蛋白酶蛋白負(fù)責(zé)專一性；負(fù)責(zé)專一性；輔因子輔因子負(fù)責(zé)電子、原子或基團(tuán)轉(zhuǎn)移。負(fù)責(zé)電子、原子或基團(tuán)轉(zhuǎn)移。 同一輔因子可與多種不同酶蛋白結(jié)合，顯示不同同一輔因子可與

17、多種不同酶蛋白結(jié)合，顯示不同催化活性催化活性按酶的分子特點(diǎn)分：1、單體酶：、單體酶：一條肽鏈構(gòu)成。一條肽鏈構(gòu)成。2、寡聚酶：、寡聚酶：幾到幾十個(gè)亞基（相同或不同）幾到幾十個(gè)亞基（相同或不同） 組成。組成。3、多酶體系：、多酶體系：幾種酶彼此嵌合的復(fù)合體，幾種酶彼此嵌合的復(fù)合體， 有利于一系列反應(yīng)連續(xù)進(jìn)行。有利于一系列反應(yīng)連續(xù)進(jìn)行。（三）酶的分類（三）酶的分類國際酶學(xué)委員會(huì)（國際酶學(xué)委員會(huì)（ec）根據(jù)酶催化反應(yīng)的類型分類：）根據(jù)酶催化反應(yīng)的類型分類： 1 、氧化還原酶、氧化還原酶 2、轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)移酶 3、水解酶、水解酶 4、裂解酶、裂解酶 5、異構(gòu)酶、異構(gòu)酶 6、合成酶、合成酶二、酶的作用機(jī)制酶

18、催化作用的酶催化作用的本質(zhì)：本質(zhì)：降低反應(yīng)活化能降低反應(yīng)活化能酶催化作用的酶催化作用的中間產(chǎn)物中間產(chǎn)物學(xué)說：學(xué)說：e + s = e-s e + s = e-s p + e p + e在酶催化的反應(yīng)中，第一步是酶與底物形成在酶催化的反應(yīng)中，第一步是酶與底物形成酶底物中間復(fù)合物。當(dāng)?shù)孜锓肿釉诿缸饔妹傅孜镏虚g復(fù)合物。當(dāng)?shù)孜锓肿釉诿缸饔孟掳l(fā)生化學(xué)變化后，中間復(fù)合物再分解成產(chǎn)下發(fā)生化學(xué)變化后，中間復(fù)合物再分解成產(chǎn)物和酶。物和酶?；钚灾行幕钚灾行模好阜肿又兄苯雍偷孜铮好阜肿又兄苯雍偷孜锝Y(jié)合并起催化反應(yīng)的空間局限結(jié)合并起催化反應(yīng)的空間局限（部位）。（部位）。酶的作用機(jī)理（誘導(dǎo)契合學(xué)說）酶的作用機(jī)理（誘導(dǎo)契

19、合學(xué)說）當(dāng)當(dāng)e e與與s s接近時(shí)，接近時(shí)，e e蛋白受蛋白受s s分子的誘分子的誘導(dǎo)，其導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生有構(gòu)象發(fā)生有利于利于s s結(jié)合的變化結(jié)合的變化，e e與與s s在此基礎(chǔ)上互在此基礎(chǔ)上互補(bǔ)契合、進(jìn)行反應(yīng)。補(bǔ)契合、進(jìn)行反應(yīng)。三、影響酶促反應(yīng)速度的因素酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)是研究酶促反應(yīng)的速度及影響此是研究酶促反應(yīng)的速度及影響此速度的各種因素的科學(xué)。速度的各種因素的科學(xué)。（一）底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度影響在低底物濃度時(shí)在低底物濃度時(shí), , 反反應(yīng)速度與底物濃度成應(yīng)速度與底物濃度成正比，表現(xiàn)為正比，表現(xiàn)為一級(jí)反一級(jí)反應(yīng)特征應(yīng)特征。當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到一定當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到一定值，幾乎所有的酶都值，幾

20、乎所有的酶都與底物結(jié)合后，反應(yīng)與底物結(jié)合后，反應(yīng)速度達(dá)到最大值速度達(dá)到最大值（v vmaxmax），此時(shí)再增），此時(shí)再增加底物濃度，反應(yīng)速加底物濃度，反應(yīng)速度不再增加，表現(xiàn)為度不再增加，表現(xiàn)為零級(jí)反應(yīng)零級(jí)反應(yīng)。米氏方程michaelis & menten根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說推導(dǎo)出表根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說推導(dǎo)出表示酶促反應(yīng)中底物濃度與反應(yīng)速度關(guān)系的公式示酶促反應(yīng)中底物濃度與反應(yīng)速度關(guān)系的公式稱米氏方程。稱米氏方程。v=vmax skm + skm 米氏常數(shù)米氏常數(shù)vmax 最大反應(yīng)速度最大反應(yīng)速度v=v m a x s k m + s測(cè)米氏常數(shù)1 1 k km 1 1m 1 1 = = + + v

21、 v v vmax s max s v vmaxmaxv=v m ax s k m + s-4-202468100.00.20.40.60.81.01/s(1/mmol.l-1)1/v斜率斜率=km/vmax-1/km1/vmax1、量截距；、量截距；2、量一個(gè)截距求斜率、量一個(gè)截距求斜率(二）抑制劑對(duì)酶反應(yīng)的影響抑制劑（抑制劑（inhibitor, i ) ： 凡與凡與e結(jié)合后，使結(jié)合后，使e的活性部位結(jié)構(gòu)和性質(zhì)改的活性部位結(jié)構(gòu)和性質(zhì)改變而引起變而引起 e活性降低或喪失的物質(zhì)，叫抑制活性降低或喪失的物質(zhì)，叫抑制劑。劑。(1)不可逆抑制作用不可逆抑制作用： 抑制劑與酶反應(yīng)中心的活性基團(tuán)以共價(jià)形

22、抑制劑與酶反應(yīng)中心的活性基團(tuán)以共價(jià)形式結(jié)合，引起酶失活。透析、超濾不能除去式結(jié)合，引起酶失活。透析、超濾不能除去 i 。如有機(jī)磷毒劑二異丙基氟磷酸酯。作用于。如有機(jī)磷毒劑二異丙基氟磷酸酯。作用于催化乙酰膽堿水解的膽堿酯酶，引起一系列催化乙酰膽堿水解的膽堿酯酶，引起一系列神經(jīng)中毒癥狀。神經(jīng)中毒癥狀。有機(jī)磷、烷化劑：作用于有機(jī)磷、烷化劑：作用于ser、thr的的-oh；氰化物：作用于氰化物：作用于fe2+ ，抑制細(xì)胞呼吸；，抑制細(xì)胞呼吸；重金屬鹽、汞、砷：作用于含重金屬鹽、汞、砷：作用于含-sh的酶；的酶；(2)(2)可逆抑制作用：可逆抑制作用：抑制劑與酶蛋白以非共價(jià)方式結(jié)合，引起酶抑制劑與酶蛋白

23、以非共價(jià)方式結(jié)合，引起酶活性暫時(shí)性喪失。抑制劑可以通過透析等方活性暫時(shí)性喪失。抑制劑可以通過透析等方法被除去。法被除去。可逆抑制根據(jù)可逆抑制根據(jù)i與與s的關(guān)系分三類：的關(guān)系分三類： 競(jìng)爭(zhēng)性抑制：競(jìng)爭(zhēng)性抑制： 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：非競(jìng)爭(zhēng)性抑制： 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：競(jìng)爭(zhēng)性抑制：i 在在分子結(jié)構(gòu)上與分子結(jié)構(gòu)上與s類似，類似， i與與s競(jìng)爭(zhēng)性。抑制競(jìng)爭(zhēng)性。抑制程度取決于程度取決于 i和和s以及與以及與e的親和力；可通的親和力；可通過增加過增加s來減輕或解除抑制。來減輕或解除抑制。藥物設(shè)計(jì)的應(yīng)用：如磺胺藥物設(shè)計(jì)的應(yīng)用：如磺胺非競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶可同時(shí)與底物及抑制劑結(jié)合，引起酶分子構(gòu)象酶可同時(shí)與底物及抑制劑

24、結(jié)合，引起酶分子構(gòu)象變化，并導(dǎo)致酶活性下降。由于這類物質(zhì)并不是變化，并導(dǎo)致酶活性下降。由于這類物質(zhì)并不是與底物競(jìng)爭(zhēng)與活性中心的結(jié)合，所以稱為與底物競(jìng)爭(zhēng)與活性中心的結(jié)合，所以稱為非競(jìng)爭(zhēng)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑性抑制劑。反競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶只有在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合，引起酶活性下降。(三）激活劑對(duì)酶反應(yīng)的影響凡是能提高酶活力的物質(zhì)都稱為凡是能提高酶活力的物質(zhì)都稱為激活劑。激活劑。（activator)activator)（四）（四）酶濃度酶濃度對(duì)酶反應(yīng)的影響對(duì)酶反應(yīng)的影響酶促反應(yīng)的速度和酶濃度成正比。酶促反應(yīng)的速度和酶濃度成正比。（五）溫度對(duì)酶反應(yīng)的影響大多數(shù)酶都有一個(gè)大多數(shù)酶都有一個(gè)最適溫度最適溫度。

25、在最適溫度條件下在最適溫度條件下, ,反應(yīng)速度最大。反應(yīng)速度最大。1）低于最適溫度：反應(yīng)速度隨溫度）低于最適溫度：反應(yīng)速度隨溫度上升而加快；上升而加快；2）高于最適溫度：）高于最適溫度：e蛋白隨溫度上蛋白隨溫度上升而變性失活。升而變性失活。1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 0 8 0 9 002 04 06 08 01 0 0t e m p e ra tu re ocrelative activity (%)（六）ph對(duì)酶反應(yīng)的影響在一定的在一定的phph下下, , 酶具有最大的酶具有最大的催化活性催化活性, ,通常稱此通常稱此phph為為最適最適ph.ph.1）ph影響e活

26、性中心及附近有關(guān)基團(tuán)的解離，使之易或不易與s 結(jié)合；2）ph影響s的極性基團(tuán)，從而影響這些基團(tuán)與e的結(jié)合；3）過酸、過堿可使酶變性失活。別構(gòu)酶別構(gòu)酶(allosteric(allosteric enzyme) enzyme)亦稱變構(gòu)酶，是一類重要的調(diào)節(jié)酶。一般為亦稱變構(gòu)酶，是一類重要的調(diào)節(jié)酶。一般為寡聚酶寡聚酶,其上有二個(gè)重要部位其上有二個(gè)重要部位活性部位活性部位和和別構(gòu)別構(gòu)部位?；钚圆课唬翰课??；钚圆课唬贺?fù)責(zé)負(fù)責(zé)e對(duì)對(duì)s的結(jié)合與催化；的結(jié)合與催化；別構(gòu)部位。別構(gòu)部位?？山Y(jié)合調(diào)節(jié)物，負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)酶反應(yīng)可結(jié)合調(diào)節(jié)物，負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)酶反應(yīng)速度速度 。大多數(shù)別構(gòu)酶動(dòng)力大多數(shù)別構(gòu)酶動(dòng)力學(xué)曲線不符合米氏學(xué)曲線不符

27、合米氏方程方程同工酶（isoenzyme）指能催化同一反應(yīng)，但酶蛋白本身分子結(jié)構(gòu)組成、指能催化同一反應(yīng)，但酶蛋白本身分子結(jié)構(gòu)組成、生理性質(zhì)、理化性質(zhì)及反應(yīng)機(jī)理都有所不同的一組生理性質(zhì)、理化性質(zhì)及反應(yīng)機(jī)理都有所不同的一組酶。酶。乳酸脫氫酶（乳酸脫氫酶（ldh）的亞基可以分為兩型：骨骼肌的亞基可以分為兩型：骨骼肌型型(m型型)和心肌型和心肌型(h型型)。m、h亞基的氨基酸組成有亞基的氨基酸組成有差別，可用電泳分離。其免疫抗體無交叉反應(yīng)。兩差別，可用電泳分離。其免疫抗體無交叉反應(yīng)。兩種亞基以不同比例組成五種四聚體即為一組種亞基以不同比例組成五種四聚體即為一組ldh同同工酶工酶ldh1(h4)、ldh

28、2(h3m)、ldh3(h2m2)、ldh4(hm3)和和ldh5(m4)。酶活力酶活力：又稱為酶活性，一般把酶催化一定又稱為酶活性，一般把酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力，通常以在一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力，通常以在一定條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速度來表示。條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速度來表示?；盍挝换盍挝籾 u（unitunit），許多酶活力單位都是以，許多酶活力單位都是以最佳條件或某一固定條件下每分鐘催化生成最佳條件或某一固定條件下每分鐘催化生成1 1molmol產(chǎn)物所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位。產(chǎn)物所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位。酶的酶的比活力比活力是每單位（一般是是每單位（一般是mgmg）蛋白質(zhì)中）蛋白質(zhì)中的酶活力單位數(shù)。對(duì)同一種酶來講，比活力的酶活力單位數(shù)。對(duì)同一種酶來講，比活力愈高則表示酶的純度越高（含雜質(zhì)越少），愈高則表示酶的純度越高（含雜質(zhì)越少），所以比活力是評(píng)價(jià)酶純度高低的一個(gè)指標(biāo)。所以比活力是評(píng)價(jià)酶純度高低的一個(gè)指標(biāo)。維生素與輔酶維生素一般習(xí)慣分為維生素一般習(xí)慣分為脂溶性脂溶性和和水溶性水溶性兩大類。兩大類。其中脂溶性維生