條件治病菌之(糞)腸球菌研究觀察

1、條件致病菌腸球摘要：腸球菌不像大多數(shù)的乳酸菌一樣，它不被認為是“安全可靠”(gras)。對于腸球菌 的安全評價仍存有爭議。雖然腸球菌被認為是“積極“或在奶酪技術(shù)屮有用，但它的隔離種 群己經(jīng)作為對人類的條件致病菌出現(xiàn)。因此，這些細菌對發(fā)酵乳制品是否有益處于似是而非 的地位，以為它存在冇潛在的危險。本篇綜述是概述了腸球菌的積極的和消極的兩種特性, 并舉例說明這個菌的具有爭議的特性。根據(jù)食品安全評價準則，我們提出對于每個潛在的技 術(shù)應(yīng)變逐個進行評估，并且建議腸球菌在發(fā)酵食晶中使用前進行個別研究。1. 簡介腸球菌最初列為d群鏈球菌，這種分類可以追溯到由蘭斯菲爾徳建立的計劃。1984年, 腸球菌給予了新

2、的位置被列為腸球菌屬，在經(jīng)過dna-dna和dna-rna雜交的研究后證 明它與鏈球菌屬冇較遠的關(guān)系(schleifer and kilpper-balz, 1984)。到目前為止32種已被提 議列入腸球菌屬(2005年10月26號)。腸球菌種適宜在6.5%氯化鈉，40%膽汁鹽且 ph值在9.6,并可以在60“ c的環(huán)境下生存30分鐘。大多數(shù)品種也町以在10°c至45°cz 間生長(moellering,1992;flahautet al.,1996)。糞腸球菌和屎腸球菌部是人類消化道微生物 白然存在的菌種，在胃腸道屮因為個體差異其含量差異變化很大(在每克消化系統(tǒng)內(nèi)容物屮

3、含有10211108) o腸球菌通常從食品、植物、水和土壤中分離，可能由于它的來源是糞便 使得他們的天性在惡劣環(huán)境中比較耐受(giraffa,2002)o在牛奶和奶酪制品中通常會找到糞 腸球菌、屎腸球菌和少量的堅忍腸球菌，偶然也會發(fā)現(xiàn)小腸腸球菌和鉛黃腸球菌。不同于其 他乳酸菌，腸球菌不能被認為是“-般認為安全”(gras)，并且它在水中檢測是作為糞 便污染物的指標的(godfree et al.,1997)。一般認為對于腸球菌的安全評價程序是一個模棱 兩可的狀況。一方血，腸球菌在作為奶酪技術(shù)屮作為發(fā)酵培養(yǎng)物被認為是由積極作用的 (giraffa,2003)：另一方面，它們被認為是新興的人類病原

4、體(moellering,1992)o這篇綜述主 耍是根據(jù)現(xiàn)有知識總結(jié)了腸球菌的積極和消極的性狀，來強調(diào)這種菌屈的爭議性。食品安全 準則著重強調(diào)了對抗生素耐藥性和毒力的因素，這樣使我們建議在發(fā)酵食品屮使用腸球菌前 應(yīng)對這兒項進行研究。2. 分類和鑒定山于腸球菌的表空多樣性，這使得腸球菌種的牛理測試鑒定一臣存在問題(devriese et al.,1993;park et al.,1999)。此外，物種鑒定的常規(guī)實驗往往需耍很長的培養(yǎng)時間(facklam et al.,2002)o使用16s和23s rdna基因的基因型鑒定方法更加的準確，雖然它們還不能區(qū) 分所有腸球菌的物種(例如鶉雞腸球菌和鉛

5、黃腸球菌有99.8%的16srdna的同源性)。 這種方法已經(jīng)成功的在應(yīng)用：1 )rrna基因間隔區(qū)的特異pcr擴增技術(shù)(naimi et al.,1997), ddl 和 van 基因(satake et al.,1997;kariyama et al.,2000),ace 基因(duh et al.,2001),soda 基因(jackson et al.,2004), 2)轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因 ef0027 的擴增(liu et al.,2005), 3) ddl 基因 (ozawa et al.,2000), cpn60 基因(goh et al.,2000)和 atpa 基因(naser e

6、t al.,2005)的測序, 和4)利用5端引物(gtg)的細菌基因組垂復序列pcr技術(shù)(svecet al.,2005)。有許多人試圖區(qū)分從人分離的菌株和從食物分離的菌株，大部分主要關(guān)注的dna指紋圖 譜。這些研究使用了多種分子分型方法,如擴增rdna限制性分析(ardra) (ulrich and muller,1998),脈沖場凝膠電泳(pfge)的dna宏觀限制模式(deschee-maeker et al.,1997;gambarotto et al.,2001 ;vancanneyt et al.,2002),隨機擴增多態(tài)性 dna (rapd) -pcr 檢測(cocconce

7、lli et al.,1995;descheemaeker et al.,1997;andrighetto et al.,2001;cosentino et al.,2004;martin et al.,2005)和擴增片段長度多態(tài)性(aflp)技術(shù) (antonishyn et al.,2000;willems et al.,2000;vancanneyt et al.,2002)。脈沖場凝膠電泳 (pfge)已成功地川于表現(xiàn)臨床和食品株之間的差異，以及從家禽和住院患者分離的菌株 的淬異(van den braak et al.,1998;lemcke and bulte,2000)o雖然h

8、l泳是區(qū)分腸球菌屬菌株的黃 金標準方法，但是它比較昂貴且耗時和比較復雜。最近，有兩種方法被證明比pfge更有辨 識力，一種是基于管家基因的核芹酸序列的多位點序列分型(mlst),另有一種是基于可變 數(shù)h串聯(lián)重復序列的多位變量分析(mlva) (homan et al.,2002, top et al., 2004, titze-de-almeida et al., 2004)。例如，411株屎腸球菌的種群結(jié)構(gòu)(來自于不同人洲和生態(tài)位), 通過這種方法分析衣明，人多數(shù)源占醫(yī)院的萬古霉素抗藥性腸球菌被叫做c17復合體都是 單一無性系(willems et al., 2005)。mlsa是廉腸球菌株

9、的流行病學分析的一種極好的方法, 它與mlva都能很好的替代pfgeo盡管腸球菌的分子分型方法在很大范圍內(nèi)都有效，并且 mlst的流行病學分析方法都是很有效的方法，但它們?nèi)匀浑y以明確區(qū)分食品株系和臨床株 系。3. 腸球菌在乳制品中的作用奶酪屮腸球菌的使用備受爭議。在南歐國家中腸球菌對于奶酪風味的影響是必要的因素 (表1),但在北歐大多數(shù)國家中對這持否定的態(tài)度。這些不同的觀點可能僅僅是由于文化 差異。一些研究表明，乳品株腸球菌對于傳統(tǒng)奶酪成熟具有積極的作用(franz et al., 1999; giraffa, 2003;foulquiemoreno et al., 2006)。腸球菌污染牛奶

10、要么是直接來自于動物糞便，要 么是間接的來自污染的水源，擠奶設(shè)備或者是散裝的儲存罐(giraffa, 2003)o在地中海式奶酪 凝乳中腸球菌的范圍從io。到106cfu/g ,而在完全成熟的奶酪菌落數(shù)達到io：到 107cfu/g(macedo et al., 1995; bouton et a., 1998; centeno et al., 1999)o 在牛奶制甜中經(jīng)常課 分離出糞腸球菌和屎腸球菌(franz et al., 1999; gelsomino et al., 2001)。堅忍腸球菌也經(jīng)常在 奶制品中分離出來(suzzi et al., 2000; andrighetto e

11、t al., 2001; cosentino et al., 2004),但往往被 低估，它過去可能是一種錯誤的鑒別。腸球菌對于奶酪的成熟和香氣的形成都有很大的幫助, 例如切達干酪、羊乳酪、water-buffalo mozarella> cebreiro> venaco 和 hispanico 都是由 于他們蛋白水解和酯水解和他們通過檸檬酸鹽的新陳代謝產(chǎn)生的雙乙酰產(chǎn)品(centeno et al.,1999; tsakalidou et al., 1993; centeno et al., 1999)。除了他們的工藝性能，許多的腸球菌株 (主要是糞腸球菌和屎腸球菌)生產(chǎn)的細菌素能

12、夠抑制李斯特菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭 菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和霍亂弧菌(giraffa et al., 1994; maisnier-patin et al., 1996;nunez et al.z 1997; sim on etta et al., 1997; enn ahar et al., 2001;laukova and czikkova, 2001; sara ntinopoulos et al., 2002b;leroy et al., 2003)。由于他們在奶酪成熟、風味形成和細菌素的生產(chǎn)的作用,表明了 這個具有理想的技術(shù)和代謝特點的腸球菌町以川做各種奶酪的發(fā)酵劑培養(yǎng)物(villan

13、i and coppola, 1994; giraffa, 1995; centeno et al.z 1999; sarantinopoulos et al., 2002a)« 對于腸球菌在 奶酪的消極作用可能是由于它們能夠生產(chǎn)生物胺。在生產(chǎn)奶酪和發(fā)酵香腸時產(chǎn)生的生物胺中 一些腸球菌株被定義為有害的(gardin et al., 2001; connil et al., 2002;giraffa, 2002)。鑒于其共生的狀態(tài)，腸球菌也被用來作為人或家畜的益生菌(tannock and cook,2002)。 益生菌發(fā)酵乳商業(yè)上稱為gaio,這里面包含有是腸球菌菌株，在丹麥已經(jīng)商業(yè)

14、化(tamime, 2002)o腸球菌sf68已被用來治療腹瀉,并可以替代抗生素的治療(bellomoetal.,2980)。另 一種腸球菌的益生菌的使用是causidor培養(yǎng)，它包括嗜熱鏈球菌和糞腸球菌兩種菌株。然 而，作為-種益生菌腸球菌或作為奶酪的起始發(fā)酵的使用仍存在爭議，這是因為它的耐藥性 和毒力基因?qū)θ祟惾杂酗L險(franz etal., 2003)。2004年，加拿大禁止了益牛菌腸球菌的使用。4. 腸球菌和人類的健康 4.1腸球菌為條件致病菌雖然腸球菌己經(jīng)使用了兒個世紀，并沒有明確地把它作為劇毒的有機體。他們現(xiàn)在己經(jīng)成為 全球院內(nèi)感染的重要原因(murray and weinsto

15、ck, 1999)。在美國腸球菌是引起醫(yī)院血液感染 的第三大最常見原因(wisplinghoffetal., 2004)，在歐洲排笫四。腸球菌的感染主要是糞腸球 菌和屎腸球菌引起的,其中臨床菌株分別高達80%和20%(huycke et al., 1998; reynolds et al.,2004; coqueetal., 2005)o最近的研究表明，屎腸球菌感染的比例有所增加，主要是由于 表1與腸球菌冇關(guān)的奶酪產(chǎn)品(表中不太詳盡)originproductsreferencefrancecomt6 cheesesbouton et al. (1998)saint nectaire chee

16、sesduthoit et al. (2003)italytraditional goat and buffalo cheesesandrighetto et al. (2001)artisanal fiore sardo cheesecosentino et al. (2004)traditional alps(vanoi and rolle) cheesespoznanski et al. (2004)artisanal montasio cheesesmarino et al. (2003)artisanal goat's cheese (semicotto caprino)su

17、zzi et al. (2000)waterbuftalo mozzarella cheeserillani and coppola, 1994portugalmodel curdled goat's milkpintado et al. (2001)ewes'milk and cheesesfrom four portugueseregistered designation of originareasalves et al. (2004)greecefeta cheesessarantinopoulos et al (2002b)feta cheesesmanolopoul

18、ou et al (2003)spainfive different artisanal cheesesdelgado et al. (2002);cebreiro raw cow l-milk cheesescenteno et al (1996)serra ewe's cheesesmacedo et al. (1995)sloveniatolminc cheesescanzek maj henic et al (2005)irelandcheddar cheesesgelsomino et al (2001)對抗生素有抗藥性的腸球菌株越來越多(bhavnani et al., 2

19、000;jones et al., 2004; coque et al., 2005; treitmanet al., 2005)o k他的腸球菌菌種例如堅忍腸球菌、鶉雞腸球菌、鉛黃腸球菌、 棉子糖腸球菌被較少的與腸球菌感染有牽連。對于健康個體是無害的，腸球菌臨床菌株主要 使重癥監(jiān)護病房患者及嚴重基礎(chǔ)疾病的病人或免疫系統(tǒng)受損病人，或者是老人病院的病人致 病。腸球菌常與英他病原體的多種微生物腹內(nèi)感染冇關(guān)系，因此很難確定它在感染中的作用。 但是，腸球菌是泌尿道感染，菌血癥，心內(nèi)膜炎和后發(fā)性白內(nèi)障手術(shù)術(shù)后并發(fā)癥有關(guān)，這點 己經(jīng)很明確(malanietal., 2002)。在歐洲和美國腸球菌導致尿道感

20、染(utis)排名笫二(huycke et al., 1998; bouza et al.,2001a,b)。流行病學研究往往是研究患者的胃腸道定植前與腸球菌感染的關(guān)系(weinstein et al., 1996)o腸球菌易位穿過真?zhèn)€腸道粘膜屏障被認為會導致菌血癥(wells et al., 1990; jett et al., 1994)o其他可以確認的腸球菌菌血癥的來源包括靜脈注射管、膿腫和尿道感染(jett et al., 1994)o腸球菌菌血癥的死亡率的危險因素包括疾病的嚴重程度，年齡，廣譜抗生素的使川, 如第三代頭抱菌素或甲硝哇(soodet al., 1998)o然而，關(guān)于萬古

21、霉索耐藥性和高濃度慶大霉 素耐藥性對于死亡率的影響的相關(guān)數(shù)據(jù)仍存有爭議(huycke et al., 1991,edmond et al., 1996; caballero-granado et al., 1998; edmond et al., 1996; pelz et al.z 2002) 腸球菌菌血癥可導致心 內(nèi)膜炎，這對于治療腸球菌感染血液來說是最大的挑戰(zhàn)，并l它一直死亡率的增加有關(guān)。 在鏈球菌和金黃色衙萄球菌之后，腸球菌(主要是糞腸球菌)是引起心內(nèi)膜炎的第三大原因, 它要對 5-20%的心內(nèi)膜炎癥負責(megran, 1992; mcdonaldet al., 2005)。雖然對于

22、腸球菌感染的主要危險因索仍冇爭論，但對于未能采取衛(wèi)生保護扭丿施，預先的 抗生素治療，長時間的住院以及腸球菌出現(xiàn)在泌尿系統(tǒng)或血管導管屮，這是公認的導致腸球 菌感染的危險因素。雖然各個醫(yī)院病房対于死廣率的研究各不和同，但其平均死亡率大約是 20%到 30%(lucas et al.,1998; caballero-granado et al., 2001; lavigne et al., 2005)。腸球菌感染 是一個重要的健康問題，由于醫(yī)院病原體他們必須通過延長住院治療，并要求提供額外的治 療，這對于醫(yī)院來說有直接和重大的經(jīng)濟影響(wenzel and edmond,2001)o 4.2抗生素耐

23、藥性糞腸球菌和屎腸球菌抗牛素耐藥性的趨勢得到了廣泛的審查(huycke et al., 199& cetinkaya et al., 2000; bonten et al., 2001; franz et al., 2003; klare et al.,2003)。大部分是研究臨 床腸球菌株和人腸球菌株，因為他們有很高的臨床影響。腸球菌的硬度特性賦予它一個特性, 使它對于兒類低濃度的抗生索的能夠冇異常高的固冇的耐藥性，這兒類抗生索包括氨棊糖昔 類、b 內(nèi)酰胺類(第三代頭抱菌素類)和唾諾酮類。特別是屎腸球菌臨床分離株能夠耐受 高濃度的青霉素。除了其國冇的耐受性/抵抗水平，腸球菌已獲得了遺

24、傳因素使其能抵抗多 種類的抗牛索，特別是糖肽類抗牛索(力古霉索和替考拉寧)，以及對內(nèi)酰胺類和氨基糖 甘類抗生素的協(xié)同作用(endtzetal., 1999)。特別是，萬古霉素抗藥性腸球菌(vre)構(gòu)成 人體臨床治療感染的一個主要原因(cetinkaya et al., 2000),因為這種藥物是作為最后手段 來治療對多種抗生素具有抗藥性的腸球菌(huycke et al., 1998)。萬古寄素的抗藥性冇的是 先天固有的(vanc),有的是后天獲得的(vana, vanb, vand, vane, vang) (leclercq et al., 1989, 1992;perichon et a

25、l., 1997; fines et al，1999)。最常見的轉(zhuǎn)移萬古霉素耐藥表型是 vana,它是一個高層次的誘導抗性和替考拉寧交互抗性相關(guān)的萬古霉素，另一種表型是 vanb,它通常只對萬古霉索顯示誘導抗性參差不齊(cetinkaya et al., 2000)o在美國醫(yī)院 抗萬占霉素腸道球菌(vre)是廣泛存在的。在美國vre的血液感染的發(fā)病率從1989年 得0.4%升至1999年的25.2%,隨之而來的是是腸球菌株中的vre的快速增長(60%屎 腸球菌比2%的糞腸球菌)(wisplinghoff et al., 2004)0人們普遍認為,在美國vre的出現(xiàn) 是由于在醫(yī)院使用抗生素的結(jié)果

26、(menichetti, 2005)o在歐洲各國之間vre的忠病率差異很 大，似乎在意人利和英國的最高(menichetti, 2005)。在歐洲不同的國家，來h于各種動物源 的vre的分離菌株已經(jīng)收回(klare et al., 1995)。這個儲藏已鏈接到在動物屮使用的阿伏霉 素(aarestrup, 1995;bager et al., 1997; wegener et al., 1999),并且在動物和人類之間發(fā)生 基因轉(zhuǎn)移(通過食物鏈污染)。這種聯(lián)系進一步支持了在從人類和非人類屮分離的vre菌 株中難分辨的vana基因簇屮基因型的存在，且在歐盟取締了阿伏霉素的使用之示vre的 定植率

27、在不斷下降(quednau et al., 1998; klare et al., 1999;kuhn et al., 2005; van den bogaard and stobberingh, 1999)«臨床分離腸球菌菌株對丁臨床利益的其他抗菌化合物的 抵抗也是一個重大的關(guān)切，特別是對抗生素有抗藥性的糞腸球菌比率的增加(treitman et al., 2005) o一些研究試圖去比較根據(jù)人類，動物或食物來源不同的腸球菌的耐藥譜(klare and witte, 1997; drahovska et al., 2004)對抗生索冇抗藥性的腸球菌是從食物中分離出來的， 只冇少數(shù)的

28、對于臨床上的重要抗生素(包括冇氮茉青霉素，青霉素，慶大霉素，萬古霉素) 有抗藥性。至于其他抗菌化合物，其中乳制品中的抗生素耐藥性菌株稍微的有點研究，往往 都是因地區(qū)的不同而又很大的變化，或是不同的分離方法。牛奶中的重要的糞腸球菌對于氯 霉素，四環(huán)素，紅霉素的抗藥性分別是64%, 45%和32%。耐抗生素腸球菌的頻繁檢出可 能與抗性基因的高效傳遞冇關(guān)，這種傳遞則依靠結(jié)合質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座子的傳遞達成。例如，在食 物中分離的腸球菌菌株四環(huán)素抗性(tet)是最常見的抗生素耐約性的形式z-o 2004年 huys研究表明在食物腸球菌中的四環(huán)素抗性主要是由同一類型四環(huán)素基因賦予的tetm, tetl和tets,

29、這與以前在獸醫(yī)學和臨床分離的腸球菌菌株的發(fā)現(xiàn)是一樣的。他們還發(fā)現(xiàn)四 環(huán)索抗性菌株所表現(xiàn)出的重要的部分是共同抵抗紅霉索和氯霉索，這表明四環(huán)索抗性基因的 選擇可以為進一步的多抗的選擇提供一個合適的分子基礎(chǔ)。這可能是因為四環(huán)素抗性基因與 帶有多個抗生素耐藥性的轉(zhuǎn)座子有聯(lián)系的原因。在過去兒年中，一些研究報告說，在不同共 轆模型中正在使用抗生素抗性基因轉(zhuǎn)移：i)在實驗室條件，在臨床，共生，食品和益生菌 株之間；ii)在食物基質(zhì)；iii)在無菌小鼠中。最近，mater利用宿主小鼠模型的研究顯示第 一次在消化道腸球菌株植入到人的微牛物菌群屮發(fā)牛了 vana基因簇的轉(zhuǎn)移。另一個嚴重問 題是抗病慕因轉(zhuǎn)移到更致病

30、物種。noble已經(jīng)證明了在小鼠皮膚模型小糞腸球菌可轉(zhuǎn)移到金 黃色衙萄球菌，并且在體外轉(zhuǎn)移到李斯特菌種也已經(jīng)報道。最近這種轉(zhuǎn)移與抗萬古霉素和抗 青霉索的金黃色葡萄球菌的出現(xiàn)有關(guān)系。市丁這種病原菌的主要威脅，這種新的抗性類型必 須仔細的檢測。作為一種潛在的抗生索耐藥性基因在腸球菌和其他菌種z間交流，這種普遍存在的抗生 素耐藥性提高了奶酪的生態(tài)系統(tǒng)問題。4 3致病因子人約有十兒個致病因索已經(jīng)在各種動物模型小通過毒力分析被報道(表2) o他們附著 在豬主細胞和細胞外基質(zhì)蛋a(as,esp, efaa),在對抗巨噬細胞(as,hypr),在細胞核組 織損傷中(cyl, gele,spre)和在逃避免疫

31、系統(tǒng)時。表2糞腸球菌毒性相關(guān)基因和其假定的功能基因編碼因子假定的作用粘附素agg聚集物質(zhì)附著和定植efaa (心內(nèi)膜炎抗原a)糞腸球菌抗原a抗宿主防御和泄植esp (表面蛋白)腸球菌表面蛋白附著和定植ace (膠原結(jié)合蛋白)糞腸球菌膠原蛋白粘附到細胞外基質(zhì)(ecm)蛋白酶gele明膠酶組織損傷spre絲氨酸蛋白酶組織損傷分泌的因素cyla-m細胞溶素/血溶索組織損傷gls24葡萄糖饑餓誘導蛋白在宿主的持久性胞外多糖cpsa-k莢膜多糖抗宿主防御epa莢膜多糖nd*轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)bcylr1-r2二肽系統(tǒng)紐件cyla-m的管理fsra-c地帶樣的監(jiān)管制度gele和spre的管理eta rsompr類2

32、組分體系ndhypr過氧化氫穩(wěn)壓器抗宿主防御perr過氧化調(diào)節(jié)nda未確定的b作為調(diào)節(jié)器，他們可能會有多效性這些致病因素被編碼通過接合質(zhì)粒基因(as和cyl)或染色體區(qū)域重新排列。i) fsr位點 (gele, spre和fsr), ii)被描述為致病島大的染色體區(qū)域(esp, cyl, as和gls24-like iii) cps位點。質(zhì)粒編碼的毒力因素被證明是通過基因轉(zhuǎn)移機制而具有的傳染性(chow et al., 1993;wirth, 1994)。最近，從糞腸球菌v583的基因紐序列和在應(yīng)變mmh594屮的致病島屮 鑒別出一組與糞腸球菌毒力有關(guān)的基因(shankar et al., 2

33、002; paulsen et al.,2003)。他們假 定的粘附素和侵襲素、胞外酶、蛋白酶和表面細胞外的蛋白質(zhì)。在這個具有多重抗生素耐藥 性的臨床菌株的基因組中很大一部分轉(zhuǎn)座因子可以通過同水平轉(zhuǎn)移的基因組進化來影響它 的高容量。數(shù)據(jù)集由多種將會提供新的研究糞腸球菌毒性因子和隔離組間基因組多變性的方 法的基因序列和組成，而這一方法將會是全球通用。至于屎腸球菌，只有兩個假定的致病基 因己被確定，它們編碼腸球菌表而蛋口(espefm)和一個假泄的透明質(zhì)酸酶(hyl) (willems et al.,2001; rice et al., 2003)。然而，屎腸球菌基因組( 可能顯示了額外的假定的如

34、一些種特片性的致病因子，迄今為止，在屎腸球菌基因組草案中 已檢測到不超過40%的糞腸球菌蛋l(fā)l|(p. scrror, personal communication)0據(jù)我們所知，還沒有 在其他腸球菌種中發(fā)現(xiàn)毒力因子。人們已經(jīng)對山不同資源分離出來的糞腸球菌之間的的毒力 因子的分布做了大雖的研究，分離資源包括臨床，共生體，食品和環(huán)境。根據(jù)早期的綜述 (gilmore et al., 2002; tendolkar et al., 2003),各種研究之間的毒力因子發(fā)生率的多變性,經(jīng)常 導致才盾的結(jié)論。例如腸球菌聚合物質(zhì)，有文獻報道(huycke and gilmore, 1995; archim

35、baud et al., 2002)其相似地分布于糞便和臨床分離中，但是另有文獻(coque et al., 1995;waar et al., 2002)i|j認為其在臨床分離屮更頻繁。雖然糞腸球菌和屎腸球菌假定的致病因素在臨床菌株 中發(fā)生率較高，但是它們也被發(fā)現(xiàn)在食品相關(guān)菌株中(eaton and gasson, 2001;franz et al., 2001; mannu et al., 2003; semedo et al., 2003; creti et al., 2004; lepage et al., 2006)。在乳制品 和臨床的堅忍腸球菌和小腸腸球菌分離的esp,as和gele編碼基因的檢測結(jié)果都衣明在腸球菌 種屬里，我們所己知的糞腸球菌毒力是決定因索且是普遍存在的(semedoetai., 2003) 0到目 前為止，上述致病因素都沒有被發(fā)現(xiàn)在臨床菌株屮普遍存在，因此盡管這些因素可能并不是 糞腸球菌致病性必不可少的，但是它們?nèi)稳豢赡苡绊懠膊〉膰乐爻潭?，同樣建議對致病突變 體進行動物模型研究(d