制備色譜分離技術(shù)推薦課件

1、2021/8/221制備色譜分離技術(shù)制備色譜分離技術(shù)2021/8/222一.制備色譜簡(jiǎn)介色譜法利用不同物質(zhì)在兩項(xiàng)中具有不同分配系數(shù)通過(guò)兩相不斷的相對(duì)運(yùn)動(dòng)實(shí)現(xiàn)分離2021/8/223色譜的分類操作方式操作方式分析型分析型制備型制備型分析工具分離技術(shù)2021/8/224制備色譜制備色譜：是能分離純化制備一定量樣品 的色譜分離技術(shù)相間的吸附分配系數(shù)離子交換平衡值相間滯留時(shí)間不同實(shí)現(xiàn)分離得到所需產(chǎn)品2021/8/225色譜分離的重要性及應(yīng)用制備型色譜制備型色譜 最近幾年來(lái)引人注目的新型高效分離技 術(shù)，在生物，化工大分子的分離和純化 領(lǐng)域中將發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。廣泛大孔吸附樹脂離子交換色譜硅膠色譜20

2、21/8/226色譜分離的重要性及應(yīng)用重要性：在天然產(chǎn)物分離純化過(guò)程中，色譜技術(shù)是最有效的方法。是因?yàn)樯V法具有常規(guī)分離方法無(wú)法比擬的分離效果和分離速度。2021/8/227二：色譜分離的基本概念（1） 固定相(A相，staionary phase）固定相是色譜的一個(gè)基質(zhì)基質(zhì)待分離的化合物可逆吸附溶解交換2021/8/228二：色譜分離的基本概念固定相固體物質(zhì)液體物質(zhì)吸附劑凝膠離子交換劑固體在硅膠或纖維素上的溶液2021/8/229二：色譜分離的基本概念（2）流動(dòng)相：（B相，mobile phase）流動(dòng)相：推動(dòng)固體相上待分離的物質(zhì)朝一個(gè)方 向移動(dòng)的液體。在制備色譜分離中一般稱為洗脫劑。（3）

3、分配系數(shù)：分配系數(shù)：是指在一定條件下，某組分在固定相和 流動(dòng)相中含量（濃度）的比值，常用K表示。分配系數(shù)是色譜分離純化物質(zhì)的主要依據(jù)。2021/8/2210二：色譜分離的基本概念msCCK/sCmC分配系數(shù)式中 固體相中的濃度流動(dòng)相中的濃度分配系數(shù)是決定其中幾種物質(zhì)采用色譜方法能否分離的先決條件差異越大，分離效果越理想2021/8/2211二：色譜分離的基本概念分配系數(shù)主要與下列因素有關(guān)： 被分離的物質(zhì)本身的性質(zhì) 固定相和流動(dòng)相的性質(zhì) 色譜柱的溫度，一般情況下溫度與分配 系數(shù)成反比2021/8/2212三：色譜分離的特點(diǎn)色譜法具有高超分離能力及效率，其特點(diǎn)如下：（1） 分離效率高 能在較短的時(shí)

4、間分離出較復(fù)雜的樣品。（2） 靈敏度高（3） 分析速度快一般在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可完成一個(gè)試樣的分析。（4） 應(yīng)用廣泛可用于有機(jī)、無(wú)機(jī)、低分子、高分子等幾乎所有化合物的分離測(cè)定。2021/8/2213四：色譜的分類流動(dòng)相和固定相的狀態(tài)氣相色譜氣固色譜氣液色譜液相色譜液固色譜液液色譜超臨界流體色譜2021/8/2214四：色譜的分類超臨界流體色譜用超臨界流體（處于臨界溫度、臨界壓力以上的流體）作為流動(dòng)相進(jìn)行的色譜即為超臨界流體色譜。由于超臨界流體的特性使得溶質(zhì)在超臨界流體中具有較大的溶解度和擴(kuò)散系數(shù)，從而促進(jìn)了組分的分離，具有較高的分離度。2021/8/2215五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用大孔

5、吸附樹脂（macroporous adsorption resin）是20世紀(jì)60年代發(fā)展起來(lái)的一種新型非離子型高分子聚合物吸劑，具有大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸堿及各種有機(jī)溶劑。特點(diǎn)：吸附性能好，對(duì)有機(jī)成分選擇性較高，機(jī)械強(qiáng)度高，價(jià)格低廉， 再生處理方便。應(yīng)用：目前大孔吸附樹脂色譜被廣泛引用于天然藥物有效部位 及有效成分的分離和純化。2021/8/2216五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用大孔吸附樹脂柱色譜分離效果的影響因素大孔吸附樹脂柱色譜分離效果的影響因素1.大孔吸附樹脂性質(zhì)的影響（1）大孔吸附樹脂極性的影響根據(jù)被分離物質(zhì)的極性大小來(lái)選擇不同類型的樹脂：極性大的化合物，適用于在

6、中極性的樹脂上分離極性小的化合物，適用于在非極性的樹脂上分離2021/8/2217五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用例：黃岑黃酮具有多酚羥基結(jié)構(gòu)和糖苷鏈，具有一定的極性和親水性，有利于中極性樹脂的吸附。它與烷基糖苷的結(jié)構(gòu)有一定的相似性，所以對(duì)于烷基糖苷的分離，選擇中極性樹脂的吸附較好。通常樹脂的極性和被分離物質(zhì)的極性既不能相似，也不能相差太大極性相似注意吸附力過(guò)強(qiáng)被分離物不能被洗脫下來(lái)極性相差大吸附力過(guò)小無(wú)法達(dá)到分離的目的2021/8/2218五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用（2）大孔吸附樹脂比表面積的影響在樹脂具有適當(dāng)?shù)目讖酱_保被分離物質(zhì)良好擴(kuò)散的條件下，比表面積越大吸附量就越大。相同條件下應(yīng)選擇

7、比表面積較大的同類樹脂。2.被分離物質(zhì)的性質(zhì)的影響（1）被分離物質(zhì)極性大小的影響由于極性大小是一個(gè)相對(duì)的概念，應(yīng)根據(jù)分子中極性基團(tuán)（如羧基，羥基，羰基等）與非極性基團(tuán)（如烷基等）的數(shù)目和大小來(lái)綜合判斷。（2）被分離物質(zhì)分子大小的影響化合物的分子體積越大，疏水性增加，對(duì)非極性吸附樹脂的吸附能力越強(qiáng)。分子體積大的化合物應(yīng)選擇大孔徑樹脂。2021/8/2219五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用實(shí)例：對(duì)皂苷類化合物的分離可行性分析： 皂苷由皂苷元與糖構(gòu)成。 皂苷根據(jù)苷元連接糖鏈數(shù)目的不同，可分為單糖鏈 皂苷、雙糖鏈皂苷 及三糖鏈皂苷。 皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)中，由于苷元具有不同程度的親脂 性，糖鏈具有較強(qiáng)的親水性，使皂苷成為一種表面 活性劑，水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的肥皂樣泡沫。 一些富含皂苷的植物提取物被用于制造乳化劑、洗 潔劑 和發(fā)泡劑等。2021/8/2220五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應(yīng)用結(jié)論：與烷基多苷的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有一定的相似 性，所以對(duì)于烷基多苷的分離可以借鑒皂 苷的分離方法。大孔吸附樹