不同居屬地半夏核苷類有效成分比較探究

1、不同居屬地半夏核昔類有效成分比較探究摘要目的：對全國不同居群半夏進(jìn)行初步的質(zhì)量評價, 為充分利用和開發(fā)半夏資源提供科學(xué)依據(jù)。方法：收集不同 居群的半夏品種，以其有效成分(核昔類成分)含量為評價 指標(biāo)，進(jìn)行品種質(zhì)量評價，以遴選出優(yōu)良半夏品種?？偤宋?類成分含量(以鳥昔計)采用高效液相色譜法(hplc)測定。 結(jié)果：不同居群半夏藥材的總核昔類成分存在顯著性差異， 江蘇泰半夏的核昔類成分含量顯著高于其他居群。結(jié)論：我 國半夏種質(zhì)參差不齊，要培育出優(yōu)質(zhì)半夏，需要通過各種人 工方法對品質(zhì)優(yōu)良的半夏進(jìn)行品種選育。關(guān)鍵詞半夏；核昔；含量比較；品種選育中圖分類號r28文獻(xiàn)標(biāo)識碼a 文章編 號1673-7210

2、 (2010) 11 (a) -023-03comparative study on active ingredients of tubers of pinellia ternata (thunb.) breit, from different populationsdai xiaobinl, tan xianhel, wu hao 1, wang kangcai2, zhang yul(1. department of pharmacy, nanjing university of traditional chinese medicine, nanjing 210046, china； 2.

3、 nanjing agricuitura.1 university, nanjing 210000,china)abstract objective： to evaluate the quality of rhizoma pinelliae from different populations and provide the scientific basis for using and exploiting resources of rhizoma pinelliae fully. methods： to collect rhizoma pinelliae from different pop

4、ulations, chose their active ingredient (nucleotide composition) content as the indicators for the quality evaluation, selected the excellent breed from them furthermore， adopt the method of hi gh-perf ormance liquid chromatography (hplc) for the content of the nucleotide composition (with guanosine

5、) measurement. resuits： the content of nucleotide composition from different populations were significantly different. rhizoma pinelliae from taizhou city was much higher than other populations on the content of nucleotide composition. conclusion： in our country, the quality of rhizoma pinelliae fro

6、m different populations is varied. in order to produce high-quality rhizoma pinelliae, it' s necessary to create the breed of rhizoma pinelliae which gathers various advantages through some artificial methods.key words rhizoma pinelliae； nucleosidecomposition； content； breed半夏為天南星科植物半夏pineilia t

7、ernata （thunb.） breit.的干燥塊莖，是我國傳統(tǒng)的大宗藥材，其性溫味辛， 有毒，具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)之功能1,是 歷代醫(yī)家治療疾病的要藥。半夏塊莖的質(zhì)量是半夏藥材品質(zhì) 及質(zhì)量控制研究的關(guān)鍵，半夏塊莖為植物的貯藏器官，含多 種藥效成分，目前評價半夏質(zhì)量尚未有統(tǒng)一的成分指標(biāo)2, 但以鳥昔和總生物堿作為半夏評價指標(biāo)成分已被廣泛應(yīng)用3-7 o張科衛(wèi)等8在測定不同居群半夏藥材中鳥昔含量時得出，利用超聲水提，采用髙效液相色譜法（itplc）測定 半夏藥材中的核昔含量（以鳥昔計），該法簡便、快速、準(zhǔn) 確、重現(xiàn)性好，可作為半夏藥材中核昔含量的檢測。本課題 采用該法測定半夏核昔類成

8、分含量，比較不同居群之間的差 異，為選育半夏優(yōu)良品種提供依據(jù)。本課題測定半夏總核昔 類成分時以鳥昔計。1儀器與試藥bp211d電子分析天平（德國sartorious公司）,h66025t超聲清洗機(jī)（無錫超聲電子設(shè)備廠），tdl-5離心機(jī) （centrifuge公司），數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海申勝生物技術(shù) 有限公司），石英亞沸高純水蒸館器（江蘇金城國勝實驗儀 器廠），waters 2690高效液相色譜儀，996pda二極管矩陣 檢測器，millinnium 32色譜工作站，色譜柱ace5 aq (150 mmx4. 6 mm, 5 um)。尿口密除、黃11 票吟、尿囉除核昔、次黃 11 票吟核昔、鳥

9、嗦吟核昔對照品均購自中國藥品生物制品檢定 所。2方法與結(jié)果2. 1對照品溶液的制備精密稱取尿囉噪、黃嚓吟、尿囉噪核昔、次黃嚓吟核昔、 鳥11 票吟核昔對照品各6. 07. 3. 32. 8. 72. 3. 28. 10. 0 mg于 100ml量瓶中，加蒸館水定容，即為混合對照品儲備液。采 用逐級稀釋法一次取混合對照品儲備液1、5、10、15、20、 25 ml至100 ml量瓶中，加水至刻度，即以此為1、2、3、 4、5、6號混合對照品溶液。以鳥昔計，各混合對照品溶液 中鳥昔濃度分別為1、5、10、15、20、25 g/mlo2.2半夏樣品共收集到11批樣品(表1),分別來自四川、山東、山

10、西、江蘇、湖北、江西等六省的不同地區(qū)的半夏原藥材，經(jīng) 我校藥植教研室談獻(xiàn)和教授鑒定為天南星科植物三葉半夏 pineilia ternata (thunb. ) breit.的干燥塊莖。將其 在6(tc烘干，打粉，過4號篩，即得本品粉末，貼上標(biāo)簽， 做好記號，備用。2. 3供試品溶液制備取本品粉末約lg,精密稱定，置離心管中，加入10ml 蒸餡水，超聲處理(功率500 w,頻率40 khz) 30 min,離 心(3 000 r/min),將上層水液倒入蒸發(fā)皿中，如此超聲、 離心重復(fù)3次，合并上層水液，置水浴鍋上蒸發(fā)濃縮，濃縮 液轉(zhuǎn)移至10 ml量瓶中，加蒸憎水至刻度，搖勻，即得。每 個樣品平行

11、制備3份供試品溶液。2. 4系統(tǒng)適應(yīng)性試驗色譜條件的選擇：以乙月青-水系統(tǒng)為流動相進(jìn)行色譜分 析，流動相為乙睛-水(0. 1 : 99.9), 25 min后以髙濃度有 機(jī)溶劑洗脫；測定波長：綜合五種化合物的紫外光譜，將其 測定波長確定在254 nm；柱溫：30°c；流速：0.8 ml/mirio2. 5方法學(xué)考察2. 5. 1線性關(guān)系考察取上述各不同鳥昔濃度的混合對 照品溶液，每個濃度進(jìn)樣2次，記錄鳥昔對應(yīng)的保留時間處 的峰面積。以對照品濃度對平均峰面積值進(jìn)行回歸，得到回 歸方程為 a=5. 730 2x107c-52 961 (r=0.999 4),可見鳥昔 在092824.73

12、4 g/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，見圖1。圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果fig. ithe resuit of standardized curve2. 5.2精密度試驗取4號混合對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，以鳥昔為指標(biāo)進(jìn)行精密度考察試驗，得出rsd二0.07%, 符合要求。2. 5. 3穩(wěn)定性試驗 取上述半夏供試品溶液，隔2h測1 次，共測6次。結(jié)果表明，供試液中鳥昔在10 h內(nèi)穩(wěn)定，rsd為1. 35%,符合要求。2. 5.4重復(fù)性試驗取重慶半夏樣品粉末，平行處理6 份，依法測定鳥昔含量，得出鳥昔含量rsd為2.40%,重復(fù) 性良好。2. 5.5回收率試驗 精密稱取重慶半夏粉末共6份，各0.5 g,精密稱

13、定，置50 ml具塞三角瓶中，分別加入對照 品溶液稀釋液1 ml,再分別加入水至10 ml,與供試品溶液同法提取檢測。計算鳥昔的回收率為102. 74%,rsd為2.91%,符合要求。2.6不同居群半夏中核昔的含量測定（以鳥昔計）取上述供試品溶液進(jìn)樣，每份進(jìn)樣1次，進(jìn)樣量20 ulo取峰面積計算鳥昔含量，對照品溶液隨行對照。在檢測波長 254 nm下，得出半夏對照品溶液和供試品溶液（以重慶半夏 為例）的hplc圖，分別以圖2、3o圖譜中peakl. peak2. peak3 peak4、peak5分別代表尿口密噪、黃口票吟、尿口密噪核 昔、次黃瞟吟核昔、鳥嚓吟核昔的保留值。圖3表明重慶半 夏中5種核昔類成分均含有，而計算時則以鳥嚓吟核昔計。2. 7結(jié)果實驗原始數(shù)據(jù)(表1)表明，雖然由于操作失誤等原因, 個別產(chǎn)地的個別編號未測出某些核昔類成分，但總體看，用 于本次實驗的各個批次半夏均含有尿囉唳、黃卩票吟、尿”密噪 核昔、次黃嗥吟核昔、鳥昔等