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1會(huì)計(jì)學(xué)SNAPtag蛋白標(biāo)記技術(shù)蛋白標(biāo)記技術(shù) SNAP-tag蛋白中作為反應(yīng)位點(diǎn)的半膀氨酸親和進(jìn)攻O6修飾的苯甲基鳥嘌呤的芐基，脫去鳥嘌呤結(jié)構(gòu)后，半膀氨酸與芐基形成穩(wěn)定的硫醚共價(jià)鍵，實(shí)現(xiàn)對(duì)靶蛋白的共價(jià)標(biāo)記。SNAP-tag技術(shù)的應(yīng)用技術(shù)的應(yīng)用 Johnsson等將SNAP-tag及其突變體作為融合標(biāo)簽蛋白，成功應(yīng)用于雷帕霉素介導(dǎo)的FKBP與雷帕霉素靶蛋白結(jié)構(gòu)域的相互作用研究。 Johnsson利用SNAP與BG之間不可逆的共價(jià)結(jié)合特點(diǎn)，設(shè)計(jì)了帶有兩個(gè)BG結(jié)構(gòu)的交聯(lián)劑，用于特異性、穩(wěn)定交聯(lián)兩個(gè)SNAP-tag融合蛋白。 SNAP-tag蛋白由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成，Mie等將其分裂成nSNAP和cSNAP蛋白片段的組裝，分別與可能相互作用的兩個(gè)蛋白融合，從而迅速恢復(fù)與SNAP-tag底物的反應(yīng)活性，通過(guò)熒光檢測(cè)兩個(gè)蛋白是否相互作用。 細(xì)胞內(nèi)的二氫葉酸還原酶常被融合于線粒體靶向序列，以用來(lái)研究線粒體輸入的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，Krayl等通過(guò)構(gòu)建細(xì)胞色素2-DHFR-SNAP-tag融合蛋白分析了線粒體前體蛋白的運(yùn)輸過(guò)程。 Johnsson利用SNAP與BG之間不可逆的共價(jià)結(jié)合特點(diǎn)，設(shè)計(jì)了帶有兩個(gè)BG結(jié)構(gòu)的交聯(lián)劑，用于特異性、穩(wěn)定交聯(lián)兩個(gè)SNAP-tag融合蛋白。 細(xì)胞內(nèi)的二氫葉酸還原酶常被融合于線粒體靶向序列，以用來(lái)研究線粒體輸入的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，Krayl等通過(guò)構(gòu)建細(xì)胞色素2-DH

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