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1、 核酸檢測法應(yīng)用于血液標(biāo)本內(nèi)乙肝病毒檢測結(jié)果分析 馬巧琴【摘 要】目的:研究分析核酸檢測法對血液標(biāo)本內(nèi)乙肝病毒的檢測效果。方法:對210777份無償獻(xiàn)血的樣本給予核酸檢測、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),分析兩種方法篩查乙肝的效果。結(jié)果:比較窗口期,結(jié)果核酸檢測法短于酶聯(lián)免疫吸附法(p<0.05);核酸檢測法靈敏性、特異性更優(yōu),且不合格率更低,與酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果具有顯著差異(p<0.05)。結(jié)論:相比于酶聯(lián)免疫吸附法而言,核酸檢測法具有更好的靈敏性、特異性,且窗口期比較短,不合格率低,值得臨床將其作為篩查血液標(biāo)本內(nèi)乙肝病毒的首
2、選?!娟P(guān)鍵詞】核酸檢測法;血液標(biāo)本;乙肝病毒r446.11 a 672-3783(2020)08-0269-01酶聯(lián)免疫吸附法是臨床檢測乙肝病毒的常用方法,主要通過檢測血清對乙肝感染情況進(jìn)行篩查1。而核酸檢測法操作更加簡單,檢測結(jié)果更加可靠,近些年來,在臨床血液篩查過程中得到了廣泛的應(yīng)用2。鑒于此,本文特此以210777份血液標(biāo)本為例,著重對比探討了核酸檢測法與酶聯(lián)免疫吸附法的檢測效果,以供臨床參考。1.一般資料與方法1.1一般資料本次研究之中的觀察主體為無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本,總共210777份,均為本市中心血站于20
3、17年01月-2019年12月接收。通過hbs-ag快速試紙法以及alt化學(xué)法檢測,均為初篩合格的樣本。每份血液樣本留取2管,利用核酸檢測法、酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行乙肝感染篩查。各試管貼上條形碼,要求與血袋標(biāo)簽一致,便于讀取每份血液樣本的具體信息。通過離心機(jī)對血液樣本進(jìn)行離心操作,然后放置于4環(huán)境下,并在48h完成血液檢查。1.2方法儀器與試劑:酶聯(lián)免疫吸附法需要抗凝真空管、全自動酶聯(lián)免疫分析儀器、全自動加樣儀器,試劑盒由上??迫A提供,為hbv血清學(xué)標(biāo)志物試劑盒;核酸檢測法需要分離膠抗凝真空管理、全自動混樣提取儀器、核酸檢測系統(tǒng)、核酸擴(kuò)增檢測儀器、離心機(jī);試劑盒由上海科華提供,包括丙型肝炎病毒表面
4、抗原試劑盒、乙肝病毒試劑盒、i型免疫缺陷病毒核酸檢驗(yàn)試劑盒(實(shí)時熒光定量pcr系統(tǒng))。所有試劑盒均在有效期內(nèi)。利用酶免試劑檢測乙肝兩對半。根據(jù)衛(wèi)計(jì)委提出的要求,結(jié)合獻(xiàn)血者健康要求,對所有的血液樣本進(jìn)行初檢以及復(fù)檢。酶聯(lián)免疫吸附法:不同檢驗(yàn)人員應(yīng)用不同試劑、儀器分別檢測hbs-ag項(xiàng)目。本市中心血站關(guān)于hbs-ag項(xiàng)目設(shè)置,以0.7作為灰區(qū)值,既是指s/co值低于0.7,則視為無反應(yīng),若是s/co值超過0.7,則視為有反應(yīng)。雙試劑都無反應(yīng),則視為合格,雙試劑均有反應(yīng),則視為不合格,單試劑若是有反應(yīng),則待定備查。待定備查的血液標(biāo)本,利用反應(yīng)性試劑實(shí)施雙孔復(fù)試操作,如果復(fù)試發(fā)現(xiàn)兩孔都沒有反應(yīng),則視為
5、合格,若是復(fù)試發(fā)現(xiàn)有一孔存在反應(yīng),則視為不合格。核酸檢測法:針對酶免測定合格的血液樣本,利用核酸檢測系統(tǒng)進(jìn)行混樣檢測。單檢不合格的血樣。結(jié)果判定取決于ct值(各管內(nèi)熒光信號到達(dá)預(yù)定閾值之時的循環(huán)數(shù)),無反應(yīng)為ct值>45,反之則為有反應(yīng)?;鞓訖z測結(jié)果無反應(yīng),視為合格,若是混樣檢測結(jié)果有反應(yīng),需予以單檢,單檢無反應(yīng)視為合格。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析匯總并分析觀察主體的研究數(shù)據(jù),并利用spss22.0軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。百分比資料以例(%)描述,行卡方檢驗(yàn);計(jì)量資料以(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)描述,行t檢驗(yàn)。當(dāng)p值低于0.05時,說明存在較高的檢驗(yàn)價值。2.結(jié)果2.1窗口期對比核酸檢測法窗口期(
6、20.5±4.5)d短于酶聯(lián)免疫吸附法窗口期(35.3±6.9)d(t=17.028,p<0.05)。2.2兩種不同檢測方法的靈敏性、特異性、不合格率對比核酸檢測法法靈敏性98.89%(208435/210777)、特異性99.57%(20986/210777)高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)94.89%(20001/210777)、95.56%(201409/210777),而不合格率0.08%(163/210777)低于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)1.30%(2744/210777)(x2=77.524/68.530/12.047,p<0.05)。3.討論乙肝傳播主要以血液為載體3
7、。在我國,乙肝發(fā)病率極高,對無償獻(xiàn)血者進(jìn)行乙肝篩查,確保臨床輸液治療安全,具有十分重大的意義,而且檢測無償獻(xiàn)血血液樣本內(nèi)乙肝病毒,還有利于臨床降低乙肝感染風(fēng)險,抑制乙肝傳播。酶聯(lián)免疫吸附法是臨床中一種比較常用的檢測方法,在乙肝病毒檢測過程中比較多見,是臨床進(jìn)行血液樣本篩查的重要手段4。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)快速發(fā)展,核酸檢測法近些年來在臨床血液篩查過程中不斷得到了廣泛的應(yīng)用,此種檢測方法操作簡單,檢測結(jié)果可靠,同時還可以對酶聯(lián)免疫吸附檢測法進(jìn)行有效補(bǔ)充5。本文對照發(fā)現(xiàn),核酸檢測法靈敏性、特異性更高,而窗口期以及不合格例數(shù)更少,與酶聯(lián)免疫吸附檢測法差異顯著(p總而言之,核酸檢測結(jié)果靈敏性、特異性更高,漏診少、檢測結(jié)果可靠,值得引起臨床重視。參考文獻(xiàn)1 謝月娜,潘彤,劉軍.天津市hbv-dna單獨(dú)反應(yīng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本檢測結(jié)果分析j.中國輸血雜志,2019,32(11):1159-1162.2 黃永梅.核酸檢測法檢測血液標(biāo)本內(nèi)乙肝病毒的價值分析j.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2019,13(13):33-35.3 朱麗敏.核酸檢測法和酶聯(lián)免疫吸附法在檢測血液標(biāo)本內(nèi)乙肝病毒的價值對比j.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2019,40(04):454-455.4 裴寶芹,夏兵.核酸檢測hbv-dna在乙肝檢測
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