泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題

1、泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題 關(guān)鍵詞 支原體 衣原體檢測健康訊 :摘 要對泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀進行綜述，著重分析目前支原體和衣原體檢測中存在的亟待解決的問題。 解脲脲原體（ UU）、人型支原體（ MH）、生殖支原體（ MG）和沙眼衣原體（ CT）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎（ NGU）的最主要病因 (90%以上 ) ，且已成為發(fā)病率最高的性傳播疾病， 已越來越受到重視。但由于技術(shù)局限， 目前對其檢測仍存在不少問題亟待解決。 筆者結(jié)合自己的工作經(jīng)驗，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題，

2、以裨于試劑的改進和臨床檢測方法的提高。1 檢測現(xiàn)狀培養(yǎng)法 支原體可用人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng)， 由于不具有甾醇合成能力， 培養(yǎng)系統(tǒng)應添加含甾醇等長鏈不飽和脂肪醇豐富的物質(zhì)，一般采用 SP 4 培養(yǎng)基加馬血清。 MG生長所需的營養(yǎng)成分復雜，生長極緩慢，一般需 2 周 3 月。CT必須采用細胞培養(yǎng)，一般用McCoy細胞系進行培養(yǎng)，但細胞培養(yǎng)需專業(yè)化技術(shù)、試劑和設備，要求較高，周期也較長，目前臨床一般不采用， 僅在科研單位進行科研活動， 或作為新診斷試劑方法學評價的金標準。培養(yǎng)法不能快速檢測支原體感染，一般 UU和 MH需 2 3 天才能出結(jié)果。不過隨著實驗水平提高，市面上已出現(xiàn)一些 24 h 可出結(jié)果的

3、試劑。但 MG尚未實現(xiàn) 24 h 培養(yǎng)出結(jié)果，因此臨床上不采用培養(yǎng)法檢測 MG，僅用于科研活動。 目前臨床培養(yǎng)法檢測 UU和 MH多采用液體培養(yǎng)基， 加樣培養(yǎng)變色判斷結(jié)果。 理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發(fā)生，因此要求變色后過濾除菌， 再接種到固體培養(yǎng)基上觀察菌落。若培養(yǎng)基選用適當抗生素， 有效地抑制雜菌生長， 單純液體培養(yǎng)基結(jié)果就有相當高的臨床可信度。即使有個別變色是雜菌所致，標本病人也有細菌性炎癥，采用抗生素也不為過。免疫法 采用此法檢測的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或金標法）檢測抗體，比較而言金標法檢測抗體的試劑用得更多；而用于檢測支原體抗原的試劑目前尚未商品

4、化。 此類試劑一般采用夾心法檢測CT特異性脂多糖抗原 (LPS) ，影響較大的有金標試劑和免疫熒光試劑。 由于免疫反應的特異性和酶催化底物反應的高效性或熒光信號的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。PCR法 此類衣原體試劑有定性和定量（多是 PCR酶免試劑）兩類，而支原體試劑只有定性一類。 PCR反應有較高的靈敏度，對實驗條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當易造成錯誤判斷， 并且 PCR定性試劑一般沒有藥品批準文號，臨床上使用應慎重。 定量試劑有藥品批準文號， 但面市不久，尚處于推廣中?？蒲袉挝皇褂?PCR試劑一般用于鑒定血清型， 而醫(yī)療單位使用 PCR定量試劑多用于臨床療效

5、觀察。 快速生化法 由于支原體生化酶反應速度和特異性都存在問題，目前尚無檢測支原體快速生化法試劑， 但衣原體已有此方法學試劑。 國內(nèi)開發(fā)的生殖道 CT生化檢測試劑即為此類， 它是根據(jù) CT侵染上皮細胞后產(chǎn)生的獨特的化學結(jié)構(gòu)， 配以生化酶試劑與之反應， 觀察變色與否判斷結(jié)果。 臨床觀察資料表明，以細胞培養(yǎng)為金標準，此試劑的靈敏度和特異性分別為 87%以上和 97% 以上，加之價格較低，具有良好的應用前景。 2 存在問題 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據(jù)一次抗體檢測結(jié)果，很難判斷標本病人是既往感染還是現(xiàn)癥感染， 再次測定支原體抗體滴度增加時方可判為支原體陽性。 為

6、此要求檢測支原體抗體的應為定量試劑， 而目前國內(nèi)間接法檢測支原體抗體的試劑都是定性試劑， 且有一定的市場占有率， 這就說明了為什么許多病人檢測抗體為陽性而培養(yǎng)則為陰性 1，也在一定程度上影響了病情的確診。國內(nèi)有些科研單位正研制間接法檢測支原體抗原的試劑 2，直接檢測病原體抗原，因此比檢測抗體試劑有更高的特異性和準確性。 基于支原體抗體定性檢測試劑的可靠性存在問題， 在檢測支原體抗體定量試劑和支原體抗原試劑商品化之前，宜采用液體培養(yǎng)法。MG診斷問題以往資料顯示 MG感染率不超過 5%，鑒于培養(yǎng)周期長，有關(guān)研究又不多，臨床一般不檢測 MG。但有資料表明MG的陽性率并不低（ %）3，以前資料的低感染率可能是試劑的靈敏度偏低所致。因此進一步開展MG的研究，開發(fā)臨床適用的試劑， 應是當前工作重點之一。支原體計數(shù)的可靠性問題目前國內(nèi)市場上銷售的支原體藥敏試劑，一般都帶支原體計數(shù)，計數(shù)的前提必須是標本采集量的標準化，若標本采集量不標準， 計數(shù)就是空談。血清標本比較容易定量采