東華大學研一上發(fā)酵試題

1、一填空題：1.發(fā)酵原理：是工業(yè)發(fā)酵生物化學反應原理的簡稱，它爭辯工業(yè)微生物在生長、生殖與發(fā)酵過程中的正常和特別代謝規(guī)律 ，探究提高現(xiàn)有工業(yè)發(fā)酵產(chǎn)品的發(fā)酵生產(chǎn)力量，以及開發(fā)工業(yè)發(fā)酵新產(chǎn)品的和新原料的理論依據(jù)及應用原理。2.發(fā)酵過程以微生物反應為核心。是很多過程環(huán)節(jié)參與的綜合結(jié)果，整個過程貫穿以“速率” 為內(nèi)容的基礎(chǔ)。爭辯爭辯內(nèi)容： 動力學與反應器工程和微生物的生長和反應過程的爭辯。3. 發(fā)酵工程又稱微生物工程4. 發(fā)酵的類型依據(jù)：按培育基狀態(tài)分類：固態(tài)發(fā)酵，液態(tài)發(fā)酵。按發(fā)酵工藝流程：分批發(fā)酵，連續(xù)發(fā)酵，流加發(fā)酵（半連 續(xù)培育或分批補料培育）5. 工業(yè)常用微生物：細菌，放線菌，酵母，霉菌，其他菌（

2、擔子菌 藻類）。6. 培育基的分類：按純度分類：合成培育基，自然培育基按狀態(tài)分類：固體培育基：半固體培育基 ：液體培育基：用途分類（從發(fā)酵生產(chǎn)應用考慮）：孢子培育基，種子培育基、發(fā)酵培育基。7. 對發(fā)酵影響較大的參數(shù)有：溫度： ph：溶解氧濃度：8. 常用的基因工程菌及其表達系統(tǒng)：原核生物： 大腸桿菌；枯草芽孢桿菌；沙門氏菌。真核細胞表達系統(tǒng)：酵母表達體系；中國倉鼠卵細胞（ cho）表達系統(tǒng)。9. 一部分種子來源于種子罐，一部分來源于發(fā)酵罐，這樣的種子稱為：倒種；將一個種子罐接種到一個發(fā)酵罐中稱：雙種 。10. 滿足微生物呼吸的最低氧濃度稱為臨界溶氧濃度，在氧的傳遞過程中液膜阻力是把握因素。影

3、響氧的溶解效果的主要因素是：攪拌速度 與 通風量。11.限制性底物是指培育基中濃度最小的物質(zhì)，（錯）12. 微生物細胞的比耗氧速率 qo2（呼吸強度）是指：單位重量細胞在單位時間內(nèi)消耗氧氣的量，單位是 molo2 /kg 干細胞 。13. 微生物代謝產(chǎn)物的生成速率與菌體生長速率之間存在三種不同類型的關(guān)聯(lián)，他們是生產(chǎn)產(chǎn)物合成偶聯(lián)型（型）， 生產(chǎn)產(chǎn)物合成半偶聯(lián)型（型） ，生產(chǎn)產(chǎn)物合成非偶聯(lián)型（型）。14. 從環(huán)境中分別目的微生物時，一般要使目的微生物富集，這樣做得目的是： 讓目的微生物在種群中占優(yōu)勢，使篩選變得可能。二簡答題1. 連續(xù)發(fā)酵的把握方式？及其各自的定義？答：l 恒濁器法：菌體濃度達到恒

4、定值。維持肯定體積，利用濃度來檢測細胞的生長狀況。通過自控儀器來調(diào)整物料的進出，使菌液中的菌體濃度達到恒定值。l 恒化器法：生長限制基質(zhì)的濃度。維持肯定的體積，但不是直接把握菌體濃度，而是通過把握恒定輸入的養(yǎng)料中的某一種生長限制基質(zhì)的濃度來把握。2. 縮短微生物間歇培育延遲期常見的方法？答：以對數(shù)生長期的菌種接種加大接種量接種前后培育基的養(yǎng)分成分相差不大選擇生殖速度快得菌種通過遺傳學的方法轉(zhuǎn)變種的遺傳特性，使遲緩期縮短。3. 以堿性嗜熱噬菌體生產(chǎn)菌為例，涉及一條菌種篩選分別技術(shù)的方案？答：采樣預處理培育菌種選擇產(chǎn)物鑒定。4. 為什么說發(fā)酵工程在生物工程中的地位舉足輕重？舉例說 明。作為生物工程

5、最貼近工業(yè)生產(chǎn)組成部分愈受到科技界、工程界的關(guān)注，從技藝到科學的進展。發(fā)酵過程和酶工程、基因工程、細胞工程緊密相連，成為生物工程的重要組成部分。發(fā)酵在能源、糧食、環(huán)境方面有著舉足輕重的作用，例如新能源的開發(fā)，微生物發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇，生產(chǎn)簡潔蛋白，污水處理等。5. 重組菌基因的不穩(wěn)定性主要有哪 4 個緣由？答：基因的不穩(wěn)定性緣由：分別丟失，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性，宿主細胞調(diào)整突變1）.分別丟失：當細胞分裂時一個子細胞沒有接受質(zhì)粒就消滅分別丟失。2） 結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定：質(zhì)粒結(jié)構(gòu)發(fā)生轉(zhuǎn)變，而不產(chǎn)生外源蛋白，削減對細胞的有害影響，這就是結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性。3） 宿主細胞調(diào)整突變：宿主細胞的突變也會造成生產(chǎn)力量的下降。這些突

6、變通常轉(zhuǎn)變細胞調(diào)整，結(jié)果削減目標蛋白的合成。 4）生長速率占優(yōu)勢導致的不穩(wěn)定性6. 大腸桿菌基因工程菌高表達的障礙主要有那 4 個？l 外源基因的不穩(wěn)定，造成表達的下降l 高生長速率與高表達之間的沖突l 菌體生產(chǎn)所需要的能量大于菌體菌體有氧代謝供應的能量時，菌體會產(chǎn)生乙酸，影響菌體生長（乙酸的產(chǎn)生）l 菌體表達出的外源蛋白被菌株本身表達的蛋白酶降解7. 常規(guī)的高密度培育的措施有哪些？主要有哪幾種把握方式？答：補料把握、ph 把握、溫度把握、溶氧把握等，使菌體能夠達到高密度1） 要實現(xiàn)重組大腸桿菌的高密度培育，最常用和最有效的方法就是分批流加補料培育法。它可以消退高濃度底物對細胞生長的抑制作用，還可以彌補低濃度底物限制細胞生長的缺陷，從而有效地把握菌體生長。2） 現(xiàn)在常用的是反饋補料培育，有幾種反饋把握 ： 把握基質(zhì)濃度流加恒 ph 流加恒溶氧流加把握比生長速率的葡萄糖流加8. 有一個用于黑曲霉發(fā)酵的培育基配方如下：葡萄糖：20g/l，酵母浸膏 0.5 g/l，硫酸銨 2g/l 初始 ph 值用鹽酸和氫氧化鈉調(diào)至 5.0，發(fā)酵開頭后，發(fā)覺 ph 下降到 3.5，試分析其緣由。答：硫酸銨是生理酸性物