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1、脂溢性皮炎序列分析論文【提示】本文僅提供摘要、關(guān)鍵詞、篇名、目錄等題錄內(nèi)容。為中國(guó)學(xué)術(shù)資源庫(kù)知識(shí) 代理,不涉版權(quán)。作者如有疑義,請(qǐng)聯(lián)系版權(quán)單位或?qū)W校?!菊勘尘埃厚R拉色菌是一種嗜脂酵母,是人類正常常駐菌, 為了研究馬拉色菌與馬拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、特異性皮炎等疾 病的發(fā)病關(guān)系,因此快速準(zhǔn)確的鑒定馬拉色菌菌種顯得尤為重要。目 的:1)比較表型鑒定方法和序列測(cè)定分析方法的差別。2)以本地區(qū) 脂溢性皮炎患者的臨床株為研究對(duì)象,以健康志愿者菌株為對(duì)照組, 在首先獲得每個(gè)菌株its區(qū)堿基序列后,采用分子系統(tǒng)學(xué)軟件對(duì)基因 片段序列進(jìn)行分析,將菌株鑒定到種,結(jié)合這些菌株的形態(tài)學(xué)特征、 &理&a
2、mp;化鑒定結(jié)果,確定馬拉色菌菌種分類,從而揭示本地區(qū)脂溢性 皮炎(seborrheic dermatitis, sd)患者及健康志愿者面部馬拉色 菌菌種差異。方法:本研究對(duì)124株臨床分離株分別進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生 化試驗(yàn)、dna序列分析等方法的試驗(yàn),通過(guò)表型鑒定方法與分子生物 學(xué)鑒定方法相互驗(yàn)證來(lái)更可靠的對(duì)所得臨床株分類。本研究所用到的 形態(tài)學(xué)方法主要包括直接鏡檢、觀察培養(yǎng)菌落形態(tài)、培養(yǎng)后菌株鏡檢, 生化試驗(yàn)方法主耍采用沙氏培養(yǎng)基生長(zhǎng)試驗(yàn)、葉溫試驗(yàn)、七葉莒分解 試驗(yàn)、過(guò)氧化氫試驗(yàn)等傳統(tǒng)試驗(yàn)方法,同時(shí)應(yīng)用分子生物學(xué)方法屮的 dna序列分析法來(lái)對(duì)臨床收集到的菌株進(jìn)行鑒定。本研究采用玻璃珠 破壁、酚-
3、氯仿-異戊醇抽提法提取基因組dna,并應(yīng)用真菌通用引物 its4、its5選擇性pcr擴(kuò)增真菌基因組核糖體dna (rdna)的 its1-5. 8s-its2區(qū),并對(duì)該區(qū)進(jìn)行測(cè)序,應(yīng)用dnaman、bioedit軟 件對(duì)測(cè)序所得dna堿基序列進(jìn)行編輯,與genbank數(shù)據(jù)庫(kù)中的序列比 對(duì),以此鑒定馬拉色菌菌種。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件spss 11. 5分析兩種疾病 的菌種構(gòu)成,顯著性檢驗(yàn)水平為a=0. 05o結(jié)果:dna測(cè)序鑒定結(jié)果 與表型鑒定結(jié)果存在一定差異,有89. 52% (111/124)的菌株兩方法 的鑒定結(jié)果是一致的。以測(cè)序鑒定結(jié)果為準(zhǔn),脂溢性皮炎患者面部菌 株糠機(jī)馬拉色菌49株占76.
4、56%,隨后是合軸馬拉色菌8株占12. 5%, m. japonica6株占9. 38%,球形馬拉色菌1株占1.56%;健康志愿者 面部菌株糠砒馬拉色菌37株占61. 67%,合軸馬拉色菌15株占 25.00%, m. japonica4株占6. 67%,鈍形馬拉色菌、球形馬拉色菌均 為2株各占3. 33%o結(jié)論:本研究中脂溢性皮炎患者和健康志愿者面 部菌群總體構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,兩組人群面部帶菌均以糠秫馬 拉色菌為主,其次是合軸馬拉色菌。表型鑒定方法和dna序列分析法 得岀的鑒定結(jié)果存在一定差異。dna序列分析法能快速、準(zhǔn)確的鑒定 馬拉色菌菌種,以便臨床醫(yī)生對(duì)病人疾病管理快速做出針對(duì)性的決 策?!娟P(guān)鍵詞】馬拉色菌;脂溢性皮炎;序列分析;【篇名】脂溢性皮炎患者和健康志愿者面部馬拉色菌菌種差 異分析【目錄】脂溢性皮炎患者和健康志愿者面部馬拉色菌菌種差異分 析英漢縮略詞名稱對(duì)照4-6 中文摘要6-8abstract 8-9前言10-13材料和方法13-27結(jié)果27-39討論39-44結(jié)論44-45參考文獻(xiàn)45-47致謝47-48綜述48-54 參考文獻(xiàn)53-54 附錄:攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及著作54素購(gòu)全文
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