光激化學(xué)發(fā)光新一代化學(xué)發(fā)光PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1光激化學(xué)發(fā)光新一代化學(xué)發(fā)光光激化學(xué)發(fā)光新一代化學(xué)發(fā)光工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺LiCA第1頁/共34頁放免酶聯(lián)免疫化學(xué)發(fā)光熒光免疫60年代70年代80年代90年代免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展國產(chǎn)進(jìn)口酶促化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光LiCA（LOCI）第2頁/共34頁光激化學(xué)發(fā)光光激化學(xué)發(fā)光 LiCALiCAL Light ight I Initiated nitiated C Chemiluminescenthemiluminescent A Assayssay第3頁/共34頁LiCALiCA技術(shù)基礎(chǔ)技術(shù)基礎(chǔ)第4頁/共34頁 直徑：直徑：200nm 包被親和素包被親和素 紅

2、色激光紅色激光680nm照射照射 釋放單線態(tài)氧釋放單線態(tài)氧 直徑：直徑：200nm 用于包被抗體用于包被抗體/抗原抗原 接受單線態(tài)氧接受單線態(tài)氧 產(chǎn)生產(chǎn)生610nm光光感光微粒發(fā)光微粒LiCALiCA原理原理兩種微粒兩種微粒第5頁/共34頁LiCALiCA原理原理 單線態(tài)氧（能量載體）單線態(tài)氧（能量載體）三線態(tài)氧（基三線態(tài)氧（基態(tài)）態(tài)）單線態(tài)氧（激發(fā)態(tài)單線態(tài)氧（激發(fā)態(tài)）第6頁/共34頁感光微粒感光微粒親和素親和素發(fā)光微粒發(fā)光微粒-Anti-HBsHBsAg生物素生物素-Anti-HBs發(fā)射光發(fā)射光610 nm200nm激發(fā)光激發(fā)光680 nm1O2LiCALiCA原理原理舉例（雙抗體夾心法）舉

3、例（雙抗體夾心法）不含待測抗原不含待測抗原激發(fā)光激發(fā)光680 nm1O2200nm第7頁/共34頁LiCALiCA發(fā)光原理發(fā)光原理光激化學(xué)發(fā)光 = 光能化學(xué)能光能第8頁/共34頁工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺LiCA第9頁/共34頁均相反應(yīng)反應(yīng)充分速度更快LiCALiCA技術(shù)特點(diǎn)技術(shù)特點(diǎn)均相反應(yīng)均相反應(yīng)酶標(biāo)板，板式磁微粒，微米級，非均相LiCA微粒，納米級，類均相第10頁/共34頁微粒包被微粒包被第11頁/共34頁等質(zhì)量比表面積 A : B = 5dA=200nmdB=1m等質(zhì)量微粒（比表面積）等質(zhì)量微粒（比表面積）第12頁/共34頁LiCALiCALiCA抗體載量優(yōu)勢抗體載量優(yōu)勢第13頁/

4、共34頁準(zhǔn)確成本快速LiCALiCA的技術(shù)特點(diǎn)的技術(shù)特點(diǎn) 加樣加樣 孵育孵育15% 洗滌洗滌 孵育孵育80% 檢測檢測5%隨機(jī)誤差隨機(jī)誤差 / 交叉污交叉污染染自動化平臺免洗/免分離類均相反應(yīng)技術(shù)納米級別微粒包被500 Tests/Hour清清洗洗廢液處理廢液處理大量純化水清洗管路大量純化水清洗管路 管路定期更換管路定期更換（一般半年一換）（一般半年一換）進(jìn)口原裝管昂貴進(jìn)口原裝管昂貴需達(dá)到無害環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)需達(dá)到無害環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)繁瑣繁瑣水質(zhì)要求達(dá)標(biāo)水質(zhì)要求達(dá)標(biāo)高額隱性成本高額隱性成本免洗免洗提升經(jīng)濟(jì)和社會效益品牌平臺測試速度羅氏2010（e411）80e170（e601）170雅培i1000100i20

5、00200貝克曼Access 2100Dxi 800400第14頁/共34頁 采用680nm弱能量紅光激發(fā) 單線態(tài)氧不易受外界環(huán)境因素干擾 取樣量僅25l，試劑中有表面活性劑LiCALiCA的抗干擾性的抗干擾性O(shè)2-O2-O2-O2-O2-O2-第15頁/共34頁間接相關(guān)間接相關(guān)直接相關(guān)直接相關(guān)SCISCI1010/ /核心期刊核心期刊/ /4 4生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究新藥的篩選目標(biāo)小分子的多樣性 蛋白 核酸 糖LiCALiCA的應(yīng)用拓展的應(yīng)用拓展第16頁/共34頁技術(shù)特點(diǎn)優(yōu)勢均相免疫反應(yīng)充分免清洗/分離結(jié)果精密度高高通量500 測試/小時易使用免疫=生化高靈敏度10-15 mol納米微粒技術(shù)提高

6、反應(yīng)面積和抗體載量離子氧傳遞能量不易受反應(yīng)環(huán)境影響目標(biāo)分子多樣性蛋白質(zhì)、核酸等LiCALiCA的技術(shù)特點(diǎn)與優(yōu)勢的技術(shù)特點(diǎn)與優(yōu)勢第17頁/共34頁工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺LiCA第18頁/共34頁LiCA SP 移液工作站LiCA HT 均相發(fā)光免疫分析儀LiCALiCA產(chǎn)品平臺產(chǎn)品平臺第19頁/共34頁樣品臂樣品臂試劑臂試劑臂試管架試管架試劑倉試劑倉槍頭架槍頭架微孔板微孔板廢物盒廢物盒LiCALiCA SP SP 移液工作站移液工作站第20頁/共34頁未包被任何抗原未包被任何抗原/ /抗體抗體96個反應(yīng)空杯個反應(yīng)空杯LiCALiCA微孔板微孔板第21頁/共34頁托盤托盤上蓋板上蓋板Li

7、CALiCA HT HT 均相免疫發(fā)光分析儀均相免疫發(fā)光分析儀 第22頁/共34頁性激素BhCGPTFSHLHE2E3Prolactin腫瘤標(biāo)志物AFPCEACA12-5CA19-9CA153CA50CA24-2CY21-1fPSAPSANSESCCpro-GRPPG-/心肌標(biāo)志物cTnIMyOmCKMBBNPNT-proBNPhsCRP新陳代謝C-peptideInsuliniPTHDPD傳染性疾病HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBcAnti-HAV IgMAnti-HBc IgMAnti-HCVAnti-HIVAnti-TPLiCALiCA項(xiàng)目菜單項(xiàng)目菜單第

8、23頁/共34頁工作原理性能參數(shù)技術(shù)特點(diǎn)系統(tǒng)平臺LiCA第24頁/共34頁LiCA LiCA 系統(tǒng)的多中心臨床評估系統(tǒng)的多中心臨床評估項(xiàng)目項(xiàng)目臨床評估單位臨床評估單位參比系統(tǒng)參比系統(tǒng)乙型肝炎上海市第一人民醫(yī)院雅培I2000乙型肝炎北京協(xié)和醫(yī)院強(qiáng)生Vitros乙型肝炎上海市瑞金醫(yī)院國產(chǎn)試劑腫瘤上海市中山醫(yī)院羅氏E170腫瘤上海市瑞金醫(yī)院雅培I2000腫瘤上海市新華醫(yī)院羅氏e601甲狀腺上海市第六人民醫(yī)院西門子Centaur第25頁/共34頁乙肝靈敏度特異性符合率HBsAg97.92%100%99.78%Anti-HBs95.98%97.38%96.69%HBeAg95.24%100%99.59%

9、Anti-HBe90.77%97.21%95.36%Anti-HBc91.54%98.9%94.48%LiCALiCA性能多中心臨床評估（乙型肝炎）性能多中心臨床評估（乙型肝炎）第26頁/共34頁相關(guān)性相關(guān)性相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)線性系數(shù)線性系數(shù)AFP顯著相關(guān)0.990.74CEA顯著相關(guān)0.930.89N=200N=200，上海市中山醫(yī)院，上海市中山醫(yī)院參比試劑：羅氏參比試劑：羅氏E170E170第27頁/共34頁相關(guān)性相關(guān)性相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)線性系數(shù)線性系數(shù)AFP顯著相關(guān)0.970.88CEA顯著相關(guān)0.960.79N=500N=500，上海市瑞金醫(yī)院，上海市瑞金醫(yī)院參比試劑：雅培參比試劑：雅培I

10、2000I2000第28頁/共34頁甲狀腺甲狀腺相關(guān)性相關(guān)性相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)線性線性TSH顯著相關(guān)0.990.84FT3顯著相關(guān)0.931.25FT4顯著相關(guān)0.90.84TT3顯著相關(guān)0.940.99TT4顯著相關(guān)0.930.73N=300N=300，上海市第六人民醫(yī)院，上海市第六人民醫(yī)院參比試劑：西門子參比試劑：西門子AdviaAdvia centuarcentuar第29頁/共34頁AFPHBsAg4.50%1.79%4.91%2.14%AFP12345MeanSDCV批內(nèi)批內(nèi)86.1186.3688.4087.9086.4386.271.551.79%批間批間74.59 73.63 69.64 71.90 71.96 71.01 3.20 4.50%HBsAg12345MeanSDCV批內(nèi)批內(nèi)72.59 71.25 76.50 75.05 78.03 76.61 1.642.14%批間批間0.22 0.22 0.23 0.22 0.23 0.23 0.01 4.91%批內(nèi)批間LiCALiCA的精密度的精密度第30頁/共34頁LiCALiCA的的TSHTSH功能靈敏度功能靈敏度第31頁/共34頁第32頁/共34頁博陽