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1、姓名河豚魚(yú)基因組序列片段和多藥耐藥基因序列分析學(xué)號(hào)組號(hào)日期年月日1. 研究背景和文獻(xiàn)閱讀1) 閱讀劉勇博士論文,簡(jiǎn)述該論文的研究目的、研究方法和主要研究結(jié)果。2) 閱讀河豚魚(yú)基因組測(cè)序計(jì)劃相關(guān)論文,說(shuō)明河豚魚(yú)基因組特點(diǎn)。3) 閱讀 NCBI 免費(fèi)書(shū)架提供的 ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族( The Human ATP-Binding Cassette(ABC) Transporter Superfamily)網(wǎng)絡(luò)書(shū)籍及其它相關(guān)論文,簡(jiǎn)述ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族分類(lèi)和功能, 說(shuō)明人 ABCB1家族(即多藥耐藥基因家,Mutidrug Resistance )的基因結(jié)構(gòu)、染色體定位、序列特征和主要功能。4)
2、閱讀 Molecule of the Month 有關(guān)多藥耐藥蛋白的文章,說(shuō)明哺乳動(dòng)物和細(xì)菌多藥耐藥蛋白的異同。2.數(shù)據(jù)庫(kù)檢索和序列分析1) 檢索 UniProtKB 序列數(shù)據(jù)庫(kù)中 ABCB1 基因家族,列表說(shuō)明已經(jīng)過(guò)人工審閱的序列條目;對(duì)上述序列進(jìn)行多序列比對(duì),說(shuō)明比對(duì)結(jié)果。2)瀏覽人多藥耐藥基因蛋白質(zhì)注釋信息、文獻(xiàn)報(bào)道和數(shù)據(jù)庫(kù)交叉鏈接,說(shuō)明其功能、 亞細(xì)胞定位、組織特異性、互作蛋白、結(jié)構(gòu)域特征、剪接變體、序列特征、基因結(jié)構(gòu)、基因組定位、表達(dá)特異性等。3) 檢索核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)中人 ABCB1 基因的 mRNA 序列,提取其編碼區(qū)核苷酸序列,并將其翻譯成蛋白質(zhì)序列。3. 河豚魚(yú)柯氏質(zhì)?;蚪M序
3、列片段分析1) 提取 GenBank 中劉勇等提交的柯氏質(zhì)粒河豚魚(yú)基因序列片段全長(zhǎng)序列,用點(diǎn)陣圖方法確定其中是否包含重復(fù)片段。2)用多種方法預(yù)測(cè)上述河豚魚(yú)基因組重復(fù)片段基因結(jié)構(gòu),比較它與人ABCB1 基因結(jié)構(gòu)的異同。3) 分析上述重復(fù)序列的全長(zhǎng)基因 DNA 序列、編碼區(qū)序列及其翻譯得到的氨基酸序列的相似性,說(shuō)明分析結(jié)果。4) 用 WebLab 中 coderet 程序提取上述柯氏質(zhì)粒河豚魚(yú)基因組序列條目中所有基因的編碼區(qū)序列和所編碼的氨基酸序列。5)用點(diǎn)陣圖方法分析上述提取的序列中第一個(gè)基因(即多藥耐藥基因MDR2 )所編碼的氨基酸序列,說(shuō)明是否有重復(fù)結(jié)構(gòu)域。6) 用多種跨膜螺旋預(yù)測(cè)程序預(yù)測(cè)上
4、述MDR2 蛋白質(zhì)序列中可能的跨膜螺旋。4. 數(shù)據(jù)庫(kù)搜索1)以上述河豚魚(yú)基因組多藥耐藥基因全長(zhǎng)序列,用BlastN 搜索人基因組核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù),調(diào)節(jié)不同參數(shù),比較搜索結(jié)果。2)以上述河豚魚(yú)基因組多藥耐藥基因編碼區(qū)序列,用 BlastX 搜索人基因組蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù),調(diào)節(jié)不同參數(shù),比較搜索結(jié)果。3)以上述河豚魚(yú)基因組多藥耐藥基因氨基酸序列,用 BlastP 搜索人基因組蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù),調(diào)節(jié)不同參數(shù),比較搜索結(jié)果。4) 分析上述搜索策略,說(shuō)明 Blast 數(shù)據(jù)庫(kù)搜索工具的正確使用方法,舉例說(shuō)明不同參數(shù)對(duì)結(jié)果的影響。5. 歸納總結(jié)1)通過(guò)以上河豚魚(yú)柯氏質(zhì)粒基因組序列片段分析過(guò)程,說(shuō)明基因組序列分析的一般方法,所用軟件種類(lèi)和基本
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