培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項

1、培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項1. 培養(yǎng)基配方的選定2.3. 同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規(guī)定進行配制外一般均應盡量收集有關資料加以比較核對再依據自己的使用目的加以選用，記錄其來源。4.5. 2 培養(yǎng)基的制備記錄6.7. 每次制備培養(yǎng)基均應有記錄，包括培養(yǎng)推各稱，配方及其來源和各種成份的牌號。最終 pH 值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。8.9. 3. 培養(yǎng)基成分的稱取10.11. 培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂最好一次完成，不要中斷。可將配

2、方置于傍側，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后還應進行一次檢查。12.13. 4. 培養(yǎng)基各成份的混合和溶化14.15. 培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。最好使用不銹鋼鍋加熱溶化也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發(fā)現有焦化現象、該培養(yǎng)基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應先用一部分水

3、將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，最后必須加以補足。16.17. 5. 培養(yǎng)塞 pH 的初步調整18.19. 培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應進行 pH 的初步調正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2. 而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養(yǎng)基的最終pH ，保證培養(yǎng)基的質量。 pH 調正后，還應將培養(yǎng)基煮沸數分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。20.21. 6培養(yǎng)基的過濾澄清22.23. 液體培養(yǎng)基必須絕對澄清，瓊脂培養(yǎng)基也應透明無顯著沉淀，因此，須

4、要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應拆疊成折扇成漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。24.25. 瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去，再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55- 60 的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內，裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ，每 1000ml 培養(yǎng)基加入1-2 個雞蛋的蛋白強力振搖3-5 分鐘， 置高壓蒸汽滅菌器中、121 加熱 20 分鐘、 取出趁熱以絨布過濾即可。26.27. 若能自行沉淀者

5、，亦可靜置冰箱中1-2 日、吸取其上清液即可。28.29. 7. 培養(yǎng)基的分裝30.31. 培養(yǎng)基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/ 3 。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還雙用防水紙包扎（現試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時最好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂抖面培養(yǎng)基時，分裝量應以能形成2 / 3 底層和 1/ 3 斜面的量為恰當。分裝容器應予先清洗干凈并經干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時滅菌，以為測定該批培養(yǎng)基最終pH之用。32.33. 8. 培養(yǎng)基的滅菌3

6、4.35. 一般培養(yǎng)基可采用121高壓蒸汽滅菌15 分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中，如無特殊規(guī)定，即可用此法滅菌。36.37. 某些畏熱成分，如糖類，應另行配成20% 如或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以后再用無菌操作技術、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50 左右的培養(yǎng)基中。38.39. 瓊脂斜面培養(yǎng)基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60 時，擺置成適當斜面、待其自然凝固。40.41. 9. 培養(yǎng)基的質量測試42.43. 每批培養(yǎng)基制備好以后應仔細檢查一遍：如發(fā)現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均

7、應挑出棄去。并測定其最終pH。44.45. 將全部培養(yǎng)基放入36± 1 恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現有菌生長，即棄去。46.47. 用有關的標準菌株接種1-2 管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng) 24- 48 小時， 如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次，如結果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應棄去，不能使用。48.49. 10. 培養(yǎng)基的保存50.51. 培養(yǎng)基應存放于冷暗處，最好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3 天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制各記錄副頁或明顯標簽。培養(yǎng)基的常規(guī)配制程序一、目的要求了解培養(yǎng)基的配制原理。了解培養(yǎng)基常規(guī)配制程序。了解培養(yǎng)基配制過程各環(huán)

8、節(jié)的要求和注意事項。二、基本原理正確掌握培養(yǎng)基基的配制方法是從事微生物學實驗工作的重要基礎，由于微生物種類及代謝類型的多樣性，因而用于培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的種類也很多，它們的配方及配制方法雖各有差異。但一般培養(yǎng)基的配制程序卻大致相同，例如器皿的準備，培養(yǎng)基的配制與分裝，棉塞的制作，培養(yǎng)基的滅菌，斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無菌檢查等基本環(huán)節(jié)大致相向。三、實驗材科（一 ）藥品待配各種培養(yǎng)的組成成分，瓊脂，1mol/L NaOH 溶液， 1mol/l （ 升，統一用大寫）HCl 溶液。（二 ）儀器天平或臺秤，高壓蒸汽滅菌鍋。（三 ）玻璃器皿移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。（四 ）

9、其他物品藥匙、稱量紙、pH 試紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙等。四、實驗內容(一 )玻璃器皿的洗滌和包裝1 玻璃器皿的洗滌玻璃器皿在使用前必須洗刷干凈。將錐形瓶、試管、 培養(yǎng)皿、 量筒等浸入含有洗滌劑的水中， 用毛刷刷洗，然后用自來水及蒸餾水沖凈。移液管先用含有洗滌劑的水浸泡。再用自來水及蒸餾水沖洗，洗刷干凈的玻璃器皿置于烘箱中烘干后備用。2滅菌前玻璃器皿的包裝(1)培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿由一蓋底組成一套?？捎脠蠹垖滋着囵B(yǎng)皿包成一包，或者將幾套培養(yǎng)皿直接置于特制的鐵皮圓筒內，加蓋滅菌。包裝后的培養(yǎng)皿須經滅菌之后才能使用。(2)移液管的包裝在移液管的上端塞入小段棉花(勿用脫

10、脂棉)。它的作用是避免外界及口中雜菌吹入管內，并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花應距管口約0.5cm 左有。棉花自身長度約1-1. 5cm。塞棉花時，可用一外圈拉直的曲別針，將少許棉花塞入管口內。棉花要塞得松緊適宜，吹時以能通氣而又不使棉花滑下為準。先將報紙裁成寬約5cm 左右的長紙條，然后將已塞好棉花的移液管尖端放在長條報紙的一端，約成45 度角，折疊紙條包住尖端，用左手握住移液管身，右手將移液管壓緊，在桌面上向前搓轉，以螺旋式包扎起來。上端剩余紙條，折疊打結，準備滅菌(見圖5 1 1)。(二 )液體及固體培養(yǎng)基的配制過程1液體培養(yǎng)基配制(1)稱量一般可用1/100 粗天平稱量配制培養(yǎng)基所

11、需的各種藥品。先按培養(yǎng)基配方計算各成分的用量，然后進行準確稱量。(2)溶化將稱好的藥品置于一燒杯中，先加入少量水(根據實驗需要可用自來水或蒸餾水 )，用玻棒攪動，加熱溶解。(3)定容待全部藥品溶解后，倒入一量筒中，加水至所需體積。如某種藥品用量太少時，可預先配成較濃溶液，然后按比例吸取一定體積溶液，加入至培養(yǎng)基中。(4)調 pH 一般用 pH 試紙測定培養(yǎng)基的pH 。用剪刀剪出一小段pH 試紙，然后用鑷子夾取此段pH 試紙， 在培養(yǎng)基中蘸一下，觀看其 pH 范圍， 如培養(yǎng)基偏酸或偏堿時，可用 1mol/lNaOH 或 1mol/l HCl 溶液進行調節(jié)。調節(jié)pH 時，應逐滴加入NaOH 或 H

12、Cl 溶液，防止局部過酸或過堿，破壞培養(yǎng)基中成分。邊加邊攪拌，并不時用pH 試紙測試，直至達到所需pH為止。（5）過濾用濾紙或多層紗布過濾培養(yǎng)基。一般無特殊要求時，此步可省去。2固體培養(yǎng)基的配制配制固體培養(yǎng)基時，應將已配好的液體培養(yǎng)基加熱煮沸，再將稱好的瓊脂（1 5 -2 ）加入，并用玻棒不斷攪拌，以免糊底燒焦。繼續(xù)加熱至瓊脂全部融化，最后補足因蒸發(fā)而失去水分。（三 ） 培養(yǎng)基的分裝根據不同需要，可將己配好培養(yǎng)基分裝入試管或錐形瓶內，分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾污管口或瓶口，造成污染。如操作不小心，培養(yǎng)基沾污管口或瓶口時，可用鑷子夾一小塊脫脂棉，擦去管口或瓶口的培養(yǎng)基，并將脫脂棉棄去。1試管的分裝

13、取一個玻璃漏斗，裝在鐵架上，漏斗下連一根橡皮管，橡皮管下端再與另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一彈簧夾。分裝時， 用左手拿住空試管中部，并將漏斗下的玻璃管嘴插入試管內， 以右手拇指及食指開放彈簧夾，中指及無名指夾住玻璃管嘴，使培養(yǎng)基直接流入試管內（圖5 1 2）。裝入試管培養(yǎng)基的量視試管大小及需要而定，若所用試管大小為15X 150 mm時，液體培養(yǎng)基可分裝至試管高度1 4 左右為宜；如分裝固體或半固體培養(yǎng)基時，在瓊脂完全融化后，應趁熱分裝于試管中。用于制作斜面的固體培養(yǎng)基的分裝量為管高1/5（約34m1）;半固體培養(yǎng)基分裝量為管高的1 3 為宜。2錐形瓶的分裝用于振蕩培養(yǎng)微生物用時，可在250

14、 m1 錐形瓶中加入50 ml 的液體培養(yǎng)基，若用于制作平板培養(yǎng)基用時，可在250 ml錐形瓶中加入150ml培養(yǎng)基，然后再加入 3g瓊脂粉（按2%計算），滅菌時瓶中瓊脂粉同時被融化。（四 ）棉塞的制作及試管、錐形瓶的包扎為了培養(yǎng)好氣性微生物，需提供優(yōu)良通氣條件，同時為防止雜菌污染，則必須對通入試管或錐形瓶內空氣預先進行過濾除菌。通常方法是在試管及錐形瓶口加上棉花塞等。1試管棉塞的制作制棉塞時，應選用大小、厚薄適中的普通棉花一塊，鋪展于左手拇指和食指扣成的圓孔上，用右手食指將棉花從中央壓入團孔中制成棉塞，然后直接壓入試管或錐形瓶口。也可借用玻璃棒塞入，也可用折疊卷塞法制作棉塞(圖51 3)。制

15、作的棉塞應緊貼管壁，不留縫隙，以防外界微生物沿縫隙侵入。棉塞不宜過緊或過松，塞好后以手提棉塞，試管不下落為準。棉塞的2 3 在試管內，1 3 在試管外(圖 5 1 4)。目前也有采用金屬或塑料試管帽代替棉塞。直接蓋在試管口上。滅菌待用。將裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或蓋好管帽的試管擁成一捆，外面包上一層牛皮紙。用鉛筆注明培養(yǎng)基名稱及配制日期，滅菌待用。2錐形瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一層紗布，再塞在瓶口上。有時為了進行液體振蕩培養(yǎng)加大通氣量，則可用 8 層紗布代替棉塞包在瓶口上。目前也有采用無菌培養(yǎng)容器封口膜直接蓋在瓶口，既保證良好通氣，過濾除菌又操作簡便，故極受歡迎。在裝好培養(yǎng)基并塞好棉塞或包上八層

16、紗布或蓋好培養(yǎng)容器封口膜的錐形瓶口上，再包上一層牛皮紙并用線繩捆好，滅菌待用。(五 )培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基經分裝包扎之后，應立即進行高壓蒸汽滅菌，100Pa滅菌20min (滅菌條件根據培養(yǎng)基不同有所差異，含糖培養(yǎng)基105，30min） 。如因特殊情況不能及時滅菌，則應暫存于冰箱中。（六 ）斜面和平板的制作1斜面的制作將已滅菌裝有瓊脂培養(yǎng)基的試管，趁熱置于木棒上，使成適當斜度，凝固后即成斜面（圖5 1 5）。斜面長度不超過試管長度1 2 為宜。如制作半固體或固體深層培養(yǎng)基時，滅菌后則應垂直放置至冷凝。2平板的制作將裝在錐形瓶或試管中已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基融化后，待冷至50左右傾入無菌培養(yǎng)皿中。 溫度

17、過高時，皿蓋上的冷凝水太多，溫度低于50，培養(yǎng)基易于凝固而無法制作平板。平板的制作應采用無菌操作，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶的底部或試管，左于同時用小指和手掌將棉塞打開，灼燒瓶口，月左手大拇指將培養(yǎng)皿蓋打開一縫，至瓶口正好伸入，傾入 10-12m1 的培養(yǎng)基，迅速蓋好皿蓋，置于桌上，輕輕旋轉平皿、使培養(yǎng)基均勻分布于整個平皿中、冷凝后即成平板（圖5 1 6）。（七 ）培養(yǎng)基的無菌檢查滅菌后的培養(yǎng)基，一般需進行無菌檢查。最好從中取出1-2 管（瓶） ，置于37恒溫箱中培養(yǎng)1 2 天，確定無菌后方可使用。（八 ）無菌水的制備在每個 250 mL 的錐形瓶內裝99mL 的蒸餾水并塞上棉塞。在每支試管內

18、裝4.5m1 蒸餾水。塞上棉塞或蓋上塑料試管蓋。再在棉塞上包上一張牛皮紙。高壓蒸汽滅菌，100 Pa滅菌20 分鐘。-、MS培養(yǎng)基母液的配制母液成分規(guī)定量濃縮倍數稱取量(mg)母液體枳(ml)配制1升 培養(yǎng)基吸 取量定容編號種類1大於元索KNO3190010190001000100NH4NO316501016500MgSO4-7H2O370103700KH2PO41701017002CaCl2 2H2O44010440010001003微量元素MnSO4 - 4H2O22.31002230100010ZnSO4 - 7H2O8.6100860H3BO36.2100620KI0.8310083N

19、a2MoO4 - 7H2O0.2510025CuSO4.5H2O40.0251002.5CoCL2.6H2O0.0251002.54鐵Na2-EDTA37.31003730100010FcSO4.4H2O27.810027805ff機物甘氨酸2.010010050010款酸毗哆靜0.510025鹽酸硫錢索0.11005煙酸0.5100256肌酸100100500050010注意：i.大量元素按照使用時島io倍的數位稱取.分別將各種化合物稱量后.除I VII II wwI UY注意：L大量元素按照使用時高10倍的數值稱取.分別將各種化合物稱量后.除 CaCIrlHiO牛獨配制外.其余化合物混合在

20、500ml燒杯中加適量蒸鐳水溶解.用坡地棒摸 拌促溶.倒入1000ml容量瓶中用蒸熔水定容至刻度.置小門瓶中保存.貼上標簽注明化合 物名稱（或編號）,濃縮倍數.配制日期和配制者姓名,CaCYHQ配制同上置于另一小口 瓶中.2 .微量元素母液的配制按要求濃縮100倍的數值稱取,分別將各種化G物稱如除鐵鹽（FcSO47H2O和 NarEDTAZILO）作為 綱單獨配制外,其余化合物用混介者F燒杯內加少早繳偏水溶解后.定容在1000ml容量版中.置小口瓶中保存,貼上標簽。3 .鐵鹽配制將制SO/7H2。和NaMDTA.2H2。分別落于450ml蒸慵水中.加熱.（很重要） 不斷攪拌,溶解后.兩液混合.

21、調PH至5.5加水定容至1000ml,置于小口瓶中,貼上標簽.4 .右機物用液配制,按用液要求濃縮50倍.除灰柏按3%單獨臨時稱量外,其余分別稱量 后.溶解，定容在5（X）ml容量瓶中.置于小口瓶中保存.貼上標簽。5 .母液最好在2Tle的冰箱中貯存,特別是有機類物質,貯存時間不宜過長,無機拉用液 最好在一個月內用完.如發(fā)現有霉菌和沉淀產生，就不能再使用。1 .制番母液和營養(yǎng)培養(yǎng)基時.所用蒸儲水或無離子水必須符G標準要求.化學藥品必須是 高純度的（分析純）.2 .林威藥物采用高靈敏度的天平.每種藥品專用一藥匙.生長調節(jié)劑用液配制：為了操作方便,節(jié)約時間.生長調節(jié)劑也可如同理制母液一樣.先配成原

22、液.這樣配制 4 A . t * e« ii - > «a > v ” ， > i . .，a . . 。t 11 j|La- 4, r 一 一 0 AlAr 一 上H-rr* U* F -h=0&c=news&cf=1&ch=0&di=8&fv=0&is-app=0&jk=ad58efeed63b8a3b&k：川 J 休 |1丈，inj. -K IX Unj |j ）（UHi MJ vu. PUIVrli'J »V45C IT，71； OL MX ZV, Jk*if I T

23、ILrtJ'J 培養(yǎng)基時只要稍加計算,按需要量取即可.不同藥拈在配制時若不溶于水,可用少量不同的溶劑先溶解.泰乙酸（NAA）.弓|1味乙 酸IAA），赤霉素（GA3）2.4D等生長素和卜米衰（ZT）可先用少量95%酒精溶解.然 后加水,如溶解不完全再加熱。激動水（KT）和6水基如溶（BA）可溶于少量Imol/L的 鹽酸中,葉酸偌用少量稀城水溶解。稱取50mg生長調節(jié)物質.溶解后,在100ml的容量瓶中定容,配制的用液每總升則含仃生 長調節(jié)物質0.5mg,配制后一般要求在低溫0-4-0保存.配制培養(yǎng)基時如每升H000ml） 需添加的生長調節(jié)劑物質為0.5tng時.則取1ml用液即可。二、

24、培養(yǎng)基配制和滅甫一養(yǎng)培養(yǎng)基配制程序（一）.母液吸取量的計算配制培養(yǎng)基的升數公式I：母液吸取量=母液體積CC） X理液濃縮倍數培養(yǎng)基要求的含量公式2：母液吸取量=（各種生長調節(jié)劑）母液每CC的含量（二）各種母液按版序編號排列A.大量元素：B. CaCl 21L-0 : C.微量元素：D.鐵鹽； E.有機物： F.生長素蔡乙酸（NAA）：配制0. 5mg/ml的NAA稱取50mR . NAA用少量95%酒精溶解 后加蒸儲水定容至1000ml； G.細胞分裂索、激動索（KT）配制0.5mg/ml的KT稱50mgKT 用少量IN HCL溶解后，加蒸鐳水定容至100mL（=）配制培養(yǎng)基 1000ml）1

25、 .瓊脂：稱取57g瓊腑.加入300ml蒸懦水,加熱溶解直至完全溶解為止.2 .蔗糖3%川質量較好的白糖代札 稱取30g F1糖.溶于溶石瓊脂的300ml蒸懦水中.3 .各種母液的吸?。ㄅ囵B(yǎng)基IL）1） 用50ml量筒量取大量元素用液（A）和HQ/液CB）各100ml （2）分別用10ml移液管或吸管吸取微量元素（C）,鐵鹽（D）母液各10ml（3） 用10ml移液管或吸管吸取有機物（H） 10ml（4） 移取激素將上述溶液全部混合于瓊脂與蔗柚溶液中.混合均勻后.加熱至80'C左右用酸/計 或粕密PH試紙測定培養(yǎng)基的PH 一般要求5.8-6.0.過酸過硬則用IN NaoH和IN HCL

26、調 必二.分裝：用一個接仃膠管的分裝霜趁熱裝培養(yǎng)基I000E1培養(yǎng)基分裝到2530個三角胭 中.每個三角腋約30ml左右（一般占試管、三角瓶容用1/47/3左右）注：培養(yǎng)基勿礙胭 壁.三.包裝：分裝好的三角瓶用封口膜包孔好標明培養(yǎng)基代號即可進行滅菌。用JL清理和洗涿：各種母液按原位置把整齊用過的量筒.移液管、燒壞.鋁偶等用水 洗滌干凈.然后按次序放回蝮處.一，高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法具體操作步驟：L高樂鍋放水至平把架：2 .把包扎好的培養(yǎng)基裝入有壓煙；3 .部上熱壓鋼蓋，上緊螺帽（注意對角擰緊螺帽）關上氣閥和安全閥.4 .然后接通電源.5 .壓力計升至0.U5MPa時,打開放氣應拉除冷空氣（此

27、步很重要）。6 .排除冷空氣后，關切放氣網待壓力升到O.IIMPa 67置時.開始計算滅的時間.具體方 法：當壓力鍋指針升至0J2MPa時.關閉電源.待指針下降至O.IIMPa時接通電源.不斷 重更此操作過程，維持20分鐘。7 .滅菌時間達到20分鐘后.除去電源.打開放氣閥（注意要逐漸放氣）待高樂禍內的空氣完 全排除后.打開熱樂滅的鍋蓋（注意對角川松螺蠟評自特冷后再把培養(yǎng)基取出8 .經過滅的的營養(yǎng)培養(yǎng)基不宜放置太長,應盡早使用.但為了在使用前能檢杳培養(yǎng)基仃無 微生物污染.可將培養(yǎng)基置325c卜保存4天,如果培養(yǎng)基君要貯存較長時間可在4。低 溫下保存.滅菌高壓偶有大型臥式、中型立式、小型手提式等

28、多種型號和規(guī)格.無論哪種型小 探 作的步驟都很相近.進水一放進培喬基一芾蟹書茜一關上放汽閥一檢查安全同一枝上加熱源一待壓力升至 （）.（）5MPa時持鍋內冷穿氣.關上放氣閥一0.I1MPWI21C）卜火菌2025分鐘.保持穩(wěn)定軍力 一除熱源一逐漸打開放氣同一輛內空氣排除完后一開放鍋蓋一稍冷后取出培養(yǎng)基，四、無曲操作技術<-）田物材料表面一消毒劑滅菌LJ瓜典 聞士山 R 如枷J歸f WWaHlDJlfiU,4*i匕遷處陽一 11祗入卜之”丑7nj/r in »jj、 chjlj、Jv i»«aa.th /upcwttm p 內作的步驟都很相近.進水一放進培養(yǎng)基

29、一蓋米鍋蓋一關上放汽閥一檢有安全徊一接上加熱源一待壓力升至 0.05MPJ時掛鍋內冷空氣關上放氣閥一0.11MPM121C）下滅菌2（X25分鐘.保持穩(wěn)定壓力 除熱源一逐漸打開放氣同一禍內空氣排除完后一開放禍蓋一稍冷后取出培養(yǎng)相.四.無菌操作技術（一）植物材料表面消毒劑滅菌從外界或室內選取的植物材料都不同程度庖?guī)в懈鞣N微生物。這些污染源 只帶入培養(yǎng)基. 便會造成培養(yǎng)基污染因此.柏物材料必須經嚴格的我向滅曲處理.再經無曲操作手續(xù)接到 培養(yǎng)基上.這一過程叫做接種.1 ,接種步驟：第一步！清理材料-一流水沖洗-一加入IH混（或洗衣粉）清洗一一自來水沖洗第二步：對材料的表面浸淵滅的：70%酒精浸153

30、。秒一f無曲水第三步：滅的劑處理-f 0.11%升汞58min （或其他滅菌劑）第四步：無曲水進行沖洗離異征婚交友黃金怎么做 英國留學一年 租跑車主題酒店設計注意事項，1 .滅商劑一股要臨時配制.現配現用.升汞可以短期陸存.2 .對去除較容易的滅菌劑滅菌后無曲水沖洗3-4次.升汞一般5-8次.每次不少于3 min3 .滅黃時要輕輕的攪杼.消除氣泡.使消毒史徹底.4 .滅背時間是從倒入消毒液開始至倒入無雨水時為止.3 .火明叼變粒粒的猊拜汨城泡忙冶內更例底.4 .滅菌時間是從倒入消毒液開始，至倒入無前水時為止.5 .滅菌液要充分沒沒材料6 .無由操作可按以下步驟進行：'I ）在接種3天前川甲酹奧蒸接種室，并于接種前3小忖打開其內蒙外畿燈進行殺菌;<2）在接種前20分鐘,打開超凈工作臺的風機以及臺上的紫外線燈；（3）接種員先洗凈雙手,在緩沖間換好專用實臆服.并換穿拖輪等；<4）上工作臺后,用酒精棉球捺拭雙手,特別是指甲處.然后搽拭工作臺面；（5）先用酒精棉球搽拭接種工具.再將鑲子和剪刀從頭至尾過火一遍.然后反復過火尖端 處,對培養(yǎng)皿要過火烤干；（6）接種時,接種員雙手不能離開工作臺,不能說話、走動和咳嗽等；材料吸F后