第三章固定化酶與固定化細(xì)胞

1、第三章-固定化酶與固定化細(xì)胞第三章固定化酶與固定化細(xì)胞第一節(jié)概述第二節(jié)固定化酶的性質(zhì)及其影響因素第三節(jié)固定化酶的制備第四節(jié)固定化細(xì)胞第五節(jié)固定化輔酶和原生質(zhì)體第六節(jié)酶反應(yīng)器和固定化酶（細(xì)胞）的應(yīng) 用第一節(jié)概述 什么是固定化酶？ 第一節(jié)概述.固定化酶的優(yōu)缺點(diǎn)多次使用可以裝塔連續(xù)反應(yīng)優(yōu)點(diǎn)：純化簡(jiǎn)單提高產(chǎn)物質(zhì)量應(yīng)用范圍廣缺點(diǎn)：首次投入成本高大分子底物較困難第一節(jié)結(jié)束 點(diǎn)擊返回 第二節(jié)固定化酶的性質(zhì)及其影響因素一. 影響固定化酶性質(zhì)的因素二. 固定化后酶性質(zhì)的變化三. 評(píng)價(jià)固定化酶的指標(biāo)一. 影響固定化酶性質(zhì)的因素1 .酶本身的變化，主要是由于活性中心的 氨基酸殘基、高級(jí)結(jié)構(gòu)和電荷狀態(tài)等發(fā)生了 變化。

2、二. 固定化后酶性質(zhì)的變化1. 固定化對(duì)酶活性的影響：酶活性下降，反應(yīng)速度下降2 .固定化對(duì)酶穩(wěn)定性的影響穩(wěn)定性提高（原因）3. pH的變化（原因）載體帶負(fù)電荷，pH向堿性方向移動(dòng)。 載體帶正電荷，pH向酸性方向移動(dòng)。 催化反應(yīng)的產(chǎn)物為酸性時(shí)，固定化 酶的pH值比游離酶的pH值高；反之則低固定化后酶穩(wěn)定性提高的原因：a. 固定化后酶分子與載體多點(diǎn)連接。b. 酶活力的釋放是緩慢的。c. 抑制自身降解，提高了酶穩(wěn)定性。PH 對(duì)酶活性的影響：(1) 改變酶的空間構(gòu)象(2) 影響酶的催化基團(tuán)的解離(3) 影響酶的結(jié)合基團(tuán)的解離(4) 改變底物的解離狀態(tài)，酶與底物不能 結(jié)合或結(jié)合后不能生成產(chǎn)物。4. 最

3、適溫度變化一般與游離酶差不多，但有些會(huì)有較 明顯的變化。5. 底物特異性變化作用于低分子底物的酶特異性沒有明顯變化既可作用于低分子底物又可作用于大 分子低物的酶特異性往往會(huì)變化。6. 米氏常數(shù)Km的變化，Km值隨載體性質(zhì)變 化(鏈接)米氏常數(shù)Km的變化，Km值隨載體性質(zhì)變化 由于分配效應(yīng)：P =Si微環(huán)境/S宏觀環(huán)境Km'=Km/ p (表觀米氏常數(shù))(1)載體與底物帶相同電荷，Si<S, p<1,Km' >Km|固定化酶降低了酶的親和力。（2）載體與底物電荷相反，靜電作用，Si>S，貝Up >1,Km'<Km三. 評(píng)價(jià)固定化酶的指標(biāo)

4、：1. 酶活定義（IU）:在特定條件下，每一分鐘催化一個(gè)微摩爾底 物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量定義為1個(gè)酶活單位。 計(jì)量單位2. 酶比活定義（游離）：每毫克酶蛋白或酶RNA（DNA所具有的酶活 力單位品質(zhì)的體現(xiàn)3. 固定化酶的比活：每（克）干固定化酶所具有的酶活力單位。4. 操作半衰期：連續(xù)測(cè)活條件下固定化酶活力下降為最 初活力一半所需要的時(shí)間（t 1/2 ） 衡量 穩(wěn)定性的指標(biāo)。5.6.或稱偶聯(lián)效率，活力保留百分?jǐn)?shù)。5. 相對(duì)酶活力：具有相同酶蛋白（或RNA量的固定化酶活力與游離酶活力的比值稱為相對(duì) 酶活力。四固定化酶的活力測(cè)定方法介紹1. 振蕩測(cè)定法：稱取一定量的固定化酶加入一定量的底物溶液，一邊振

5、蕩或攪拌，一邊進(jìn)行催化反應(yīng)取出一定量的反應(yīng)液進(jìn)行酶活力測(cè)定。2. 酶柱測(cè)定法：將一定量的固定化酶裝進(jìn)具有恒溫裝置的反應(yīng)柱中讓底物溶液以一定的流速流過酶柱收集流出的反應(yīng)液測(cè)定其中產(chǎn)物的生成量或底物的消耗量。3. 連續(xù)測(cè)定法利用連續(xù)分光光度法等測(cè)定方法可以對(duì)固 定化酶反應(yīng)液進(jìn)行連續(xù)測(cè)定，從而測(cè)定固定 化酶的酶活力。第二節(jié)固定化酶的性質(zhì)及其影響因素提要影響固定化酶性質(zhì)的因素固定化酶的性質(zhì)評(píng)價(jià)固定化酶的指標(biāo)第二節(jié)結(jié)束點(diǎn)擊返回第三節(jié)固定化酶的制備一. 一般方法及特點(diǎn)二. 酶的固定化方法一. 一般方法及特點(diǎn)1. 四大類方法：吸附法(包括電吸附法) 結(jié)合法(無機(jī)多孔材料) 交聯(lián)法(雙功能試劑) 包埋法(微膠

6、囊法)各類固定化方法的特點(diǎn)比較：2. 選擇方法依據(jù)：(1) 酶的性質(zhì)(2) 載體的性質(zhì)(3) 制備方法的選擇3. 固定化后酶的考察項(xiàng)目：(1) 測(cè)定固定化酶的活力，以確定固定化 過程的活力回收率。(2) 考察固定化酶穩(wěn)定性2 )考察固定化酶最適反應(yīng)條件酶的固定化方法（一）吸附法（二）結(jié)合法（三）交聯(lián)法（四）包埋法（entrapping method ） 酶和細(xì)胞固定化示意圖（一）吸附法1.物理吸附：禾I用各種固體吸附劑將酶或含酶菌體吸附在其表面上2. 常用載體：（1）無機(jī)載體：氧化鋁、活性碳、皂土、 硅藻土、金屬氧化物、硅膠。一般吸附量1mg 蛋白/克吸附劑（2）有機(jī)載體：淀粉、白蛋白等。一般

7、吸 附量幾十毫克蛋白/克吸附劑 研究熱點(diǎn)：大孔型合成樹脂、陶瓷（二）結(jié)合法1. 離子鍵結(jié)合法2. 共價(jià)鍵結(jié)合法1. 離子鍵結(jié)合法 概念常用載體:DEAE-纖維素，DEAE-葡聚糖凝膠 使用注意：pH離子強(qiáng)度、溫度2. 共價(jià)鍵結(jié)合法（1）概念（2） 可以形成共價(jià)鍵的基團(tuán)： 游離氨基, 游離羧基，巰基，咪唑基，酚基，羥基, 甲硫基，吲哚基，二硫鍵（3 ）常用載體：天然高分子、人工合成的 高聚物、無機(jī)載體（4）載體活化的方法A. 重氮法B. 疊氮法C. 烷基化反應(yīng)法D. 硅烷化法E. 溴化氰法A.重氮法反應(yīng)示意式如下A.重氮法目前在我們國(guó)內(nèi)用的較多的載體是對(duì)氨基 苯磺酰乙基（ABSE纖維素、瓊脂糖，

8、葡聚 糖凝膠和瓊脂等該方法需要載體具有芳香族氨基A.重氮法反應(yīng)式及原理A.重氮法例5'-磷酸二酯酶的固定化。此酶用來降解核酸，可分離得到四個(gè)5'-單核苷酸（本成果榮獲國(guó)家發(fā)明三等獎(jiǎng)，中國(guó)科學(xué)院 上海生化研究所袁中一等，我國(guó)第一個(gè)用于 工業(yè)生產(chǎn)的固定化酶）B疊氮法例用羧甲基纖維素疊氮衍生物制備固定化胰 蛋白酶，步驟如下： 酯化：CM纖維素先洗滌干燥，然后懸于 無水甲醇中，在冰浴中通入 HCI氣體，進(jìn)行 酯化反應(yīng)；然后洗滌，空氣干燥。 肼解。把酯化后的 CM纖維素懸于甲醇 中，再加入80%水合肼回流反應(yīng)1小時(shí)，過 濾，洗滌干燥。疊氮化。肼解后的CM纖維素（1g）加入 150ml 2

9、% HCI在冰浴中混合，攪拌滴加 9m 3%NaNO反應(yīng)20min，過濾用冷蒸餾水洗滌， 同時(shí)加酶（4）偶聯(lián)。經(jīng)疊氮化后的載體加入0.05N pH 8.0磷酸緩沖液（內(nèi)含250-500mg酶），5C 攪拌2-3小時(shí)，過濾，用0.001N HCI，水 洗滌，即為固定化胰蛋白酶（凍干保存）C. 烷基化反應(yīng)法D. 硅烷化法一般常用的載體：多孔玻璃，多孔陶瓷。多孔玻璃特點(diǎn)： 機(jī)械強(qiáng)度好，表面積大。 耐有機(jī)溶劑和微生物破壞。載體可以再 生，壽命長(zhǎng)等。D.硅烷化法D.硅烷化法D.硅烷化法E 溴化氰法本方法主要用溴化氰（CNB）活化多糖類物 質(zhì)。如纖維素、葡聚糖、瓊脂糖等.（三）交聯(lián)法概念：借助雙功能試劑使

10、酶分子之間發(fā)生交 聯(lián)作用，制成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固定化酶的方法。 用處：可用于含酶菌體或菌體碎片的固定 化。（三）交聯(lián)法的形式交聯(lián)法有2種形式： 酶直接交聯(lián)法酶 輔助蛋白交聯(lián) 雙重固定法（1）吸附交聯(lián)法（2）交聯(lián)包埋法 酶直接交聯(lián)法 概念：在酶液中加入適量多功能試劑，使其 形成不溶性衍生物。影響因素：固定化依賴酶與試劑的濃度、溶液 pH 和離子強(qiáng)度、溫度和反應(yīng)時(shí)間之間的平衡。 酶輔助蛋白交聯(lián)概念：為避免分子內(nèi)交聯(lián)和在交聯(lián)過程中因 化學(xué)修飾而引起酶失活，可使用第二個(gè) “載 體"蛋白質(zhì)（1）吸附交聯(lián)法概念：先將酶吸附在硅膠、皂土、氧化鋁、球 狀酚醛樹脂或其他大孔型離子交換樹脂上， 再用戊二醛等雙

11、功能試劑交聯(lián)。用此法所得固定化酶也可稱為殼狀固定化 酶。（2）交聯(lián)包埋法概念：把酶液和雙功能試劑（戊二醛）凝結(jié) 成顆粒很細(xì)的集合體，然后用高分子或多糖 一類物質(zhì)進(jìn)行包埋成顆粒。優(yōu)點(diǎn)：這樣避免顆粒太細(xì)的缺點(diǎn)，同時(shí)制得 的固定化酶穩(wěn)定性好。（四） 包埋法（entrapping method ） 定義：將酶或含酶菌體包埋在各種多孔載體中，使 酶固定化的方法稱為包埋法。（四）包埋法 包埋法分為網(wǎng)格型和微囊型1.網(wǎng)格型2 微囊型1.網(wǎng)格型概念：將酶或含酶菌體包埋在凝膠細(xì)微網(wǎng)格 中，制成一定形狀的固定化酶，稱為網(wǎng)格型 包埋法。也稱為凝膠包埋法。2 微囊型包埋法是將酶包埋在各種高分子聚合物制成的小 球內(nèi)，制

12、成固定化酶。由于固定化形成的酶 小球直徑一般只有幾微米至幾百微米，所以 也稱為微囊化法。微囊化法制備固定化酶有兩種方法 界面沉淀法 界面聚合法 界面沉淀法這是一種簡(jiǎn)單的物理法，它是利用某些高聚 物在水相和有機(jī)相的界面上溶解度較低而 形成的皮膜將酶包埋。此法條件溫和，酶失 活少，但要完全除去膜上殘留的有機(jī)溶劑很 麻煩。 界面聚合法是用化學(xué)手段制備微囊的方法。利用油水界 面上發(fā)生聚合反應(yīng)形成聚合體而將酶包裹 起來。界面聚合法第三節(jié)提要一般方法及特點(diǎn)酶的固定化方法 第三節(jié)結(jié)束 點(diǎn)擊返回第四節(jié)微生物、植物和動(dòng)物細(xì)胞固定化 細(xì)胞特性比較概念：固定在載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行 生命活動(dòng)的細(xì)胞稱為固定化

13、細(xì)胞 該細(xì)胞能進(jìn)行正常的生長(zhǎng)、繁殖和新陳代 謝，又稱固定化活細(xì)胞或固定化增殖細(xì)胞。 細(xì)胞固定化方法吸附法 包埋法 吸附法 它主要通過載體與細(xì)胞間的靜電引力，即細(xì) 胞表面與載體之間范德華作用力，離子鍵和 氫鍵作用力，才使細(xì)胞固定在載體上的。影響吸附法的主要因素（1）Z-電位：Z-電位能近似地代表表面電 荷密度的大小(2 )細(xì)胞的性質(zhì)和細(xì)胞壁的組成：細(xì)胞壁 的電荷性質(zhì)(3) 載體的性質(zhì)：特別是玻璃、陶瓷等無 機(jī)材料包埋固定法包理法是在細(xì)胞自身并不與凝膠基體發(fā)生 化學(xué)鍵合的情況下將其包埋在半透性聚合 物顆粒(或膜)內(nèi)的一種固定化方法。包埋法的最大優(yōu)點(diǎn)是能較好的保持細(xì)胞內(nèi) 多酶系統(tǒng)的活力，可象游離細(xì)胞

14、那樣進(jìn)行產(chǎn) 物的發(fā)酵生產(chǎn)。包埋法分類常用載體：瓊脂、海藻酸鈣、角叉菜膠、明膠、聚丙烯酰胺常用凝膠包埋法通過改變載體溶液參數(shù)包埋細(xì)胞改變載體溶液、操作溫度、鹽濃度、pH值和 溶劑等參數(shù)時(shí)，亦可使其轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)， 將細(xì)胞包埋其中。研究熱點(diǎn)光交聯(lián)樹脂包埋法例：相對(duì)分子量為1000-3000的光交聯(lián)聚氨 酯預(yù)聚物等，加入19左右的光敏劑，加水配 成一定濃度，加熱至50 C,然后與一定濃度 的細(xì)胞懸浮液混合均勻，攤成一定厚度的薄 層，用紫外照射3min，就可制得 固定化細(xì)胞的目的微生物菌體：不需多次培養(yǎng)、擴(kuò)大，從而縮 短了發(fā)酵生產(chǎn)周期植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞第四節(jié)固定化細(xì)胞提要特點(diǎn)方法目的第四節(jié)結(jié)束點(diǎn)擊返回第

15、五節(jié)固定化原生質(zhì)體和輔酶一原生質(zhì)體固定化的方法制備原生質(zhì)體 將原生質(zhì)體重新懸浮在 含有滲透壓穩(wěn)定劑的緩沖液中配成原生質(zhì) 體懸浮液 包埋法固定化原生質(zhì)體。關(guān)鍵：原生質(zhì)體如何制備？二原生質(zhì)體的制備將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞收集懸浮在含有滲透壓穩(wěn)定劑的咼滲緩沖液中去細(xì)胞壁一一分離純化一一得到原生質(zhì)體-活性鑒 三酶解注意要點(diǎn)1酶解前要預(yù)處理：主要是為了使酶滲透到 細(xì)胞器中去。采取的策略：先加入物質(zhì)抑制或阻止某種細(xì) 胞壁的成分合成，可以使酶插入。一般加入：巰基乙醇，Trito n-100,甘氨酸、 青霉素。三酶解注意要點(diǎn)2 酶系選擇：溶菌酶蝸牛酶3葡聚糖酶纖維素、半纖維素、和果膠酶3 酶濃度選擇（0.5%-1%

16、三酶解注意要點(diǎn)4酶解溫度和pH5酶解終點(diǎn)確定四穩(wěn)定劑（高滲溶液）要求1加入的化合物對(duì)細(xì)胞和原生質(zhì)體無毒性2不會(huì)影響水解酶的活性3對(duì)代謝產(chǎn)物無不良影響 四穩(wěn)定劑加入操作注意點(diǎn)1 一定pH （酶和菌體活性最高）2 一定的濃度（過高濃度原生質(zhì)體易脫水皺 縮）3種類：無機(jī)鹽-對(duì)細(xì)菌有機(jī)物糖和糖醇-酵母4易于滲入質(zhì)膜、易于被原生質(zhì)體和菌體分 解的物質(zhì)不宜作為穩(wěn)定劑五原生質(zhì)體細(xì)胞活性的檢測(cè)1熒光素雙醋酸鹽（FDA）染色法2酚藏花紅染色法3伊文思蘭染色法四輔酶固定化1原因有機(jī)輔因子中具有某些特殊的化學(xué)基團(tuán)，參 與酶的催化反應(yīng)（遞氫、遞電子或遞某些化 學(xué)基團(tuán)的作用）有機(jī)輔因子在使用過程中要流失，并且不能 自行

17、再生有機(jī)輔因子價(jià)格昂貴工業(yè)上應(yīng)用全酶的關(guān)鍵是有機(jī)輔因子 的保留和再生輔酶固定化的方法：2固定化方法與酶相似，一般采用溴化氰 法，碳二亞胺法以及重氮偶聯(lián)法等共價(jià)偶 聯(lián)，或?qū)⑵溥M(jìn)行適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾后固定在超 濾器中。3輔酶固定化必須解決輔酶在多個(gè)酶之間 傳遞的障礙。策略：先在輔酶的一定部位進(jìn)行修飾-引入 功能團(tuán)和間隔臂（形成輔酶衍生物） -再 與水溶性高分子結(jié)合輔酶的固定化輔酶的固定化輔酶再生的形式：第五節(jié)固定化原生質(zhì)體和輔酶的固定化原生質(zhì)體輔酶固定化第五節(jié)結(jié)束點(diǎn)擊返回第六節(jié)酶反應(yīng)器和固定化酶（細(xì)胞）的應(yīng) 用酶反應(yīng)器介紹酶反應(yīng)器的選擇和應(yīng)用 固定化酶和細(xì)胞的應(yīng)用 生物催化反應(yīng)器工程 一酶反應(yīng)器。分批

18、攪拌反應(yīng)器。 攪拌罐型連續(xù)流攪拌桶反應(yīng)器。 固定床型（填充床反應(yīng)器） 流化床反應(yīng)器 連續(xù)攪拌桶-超濾反應(yīng)器 循環(huán)反應(yīng)器 膜式反應(yīng)器 鼓泡塔型分批攪拌反應(yīng)器反應(yīng)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，不需要特殊裝置，適與小 規(guī)模試驗(yàn)連續(xù)流攪拌桶反應(yīng)器 連續(xù)攪拌釜式反應(yīng)器填充床反應(yīng)器 旋轉(zhuǎn)填充床 流化床反應(yīng)器與連續(xù)流攪拌桶式反應(yīng)器類似，是讓適量的 顆粒狀酶懸浮于反應(yīng)床中，不用攪拌器，而 是底物向上流過固定酶床，因此流速要適當(dāng) 控制。循環(huán)反應(yīng)器高效內(nèi)循環(huán)生物反應(yīng)器（HCR連續(xù)攪拌桶-超濾反應(yīng)器膜式反應(yīng)器定義：由膜狀或板狀固定化酶或固定化微生物組 裝的反應(yīng)器均稱為膜式反應(yīng)器。類型：擴(kuò)散型膜反應(yīng)器； 多相酶膜反應(yīng)器。鼓泡塔型反應(yīng)器

19、適用對(duì)象：反應(yīng)中涉及氣體的吸收或產(chǎn)生時(shí) 適用。氣體進(jìn)入方式：與底物一起從底部進(jìn)入，經(jīng)過氣體分散板分 散。和循環(huán)液從底部以切線方向進(jìn)入 生物催化反應(yīng)-分離耦合反應(yīng)器 反應(yīng)分離耦合反應(yīng)器成功實(shí)現(xiàn)產(chǎn)物在線分離產(chǎn)物在線分離策略實(shí)現(xiàn)頭孢克羅半連續(xù)制 備減壓式反應(yīng)器用于生物催化反應(yīng)中易揮發(fā) 產(chǎn)物的在線去除反應(yīng)器選擇 酶的形式：溶液酶顆粒狀或片狀固定化酶膜狀和纖維狀固定化酶底物的物理性質(zhì)：溶解性、顆粒物質(zhì)和膠體 物質(zhì)反應(yīng)操作要求 酶的穩(wěn)定性應(yīng)用和可塑性和成本酶反應(yīng)器的應(yīng)用控制酶反應(yīng)器液態(tài)流動(dòng)方式反應(yīng)器中流動(dòng)方式的改變會(huì)使酶與底物的 接觸不良，造成反應(yīng)器生產(chǎn)能力降低。流動(dòng)方式改變?cè)斐煞椿斐潭鹊淖兓?，?huì)發(fā)生 程

20、度不同的反應(yīng)或副反應(yīng)。物料粒子進(jìn)入反應(yīng)器后所經(jīng)歷的時(shí)間稱為 粒子的年齡。粒子離開反應(yīng)器時(shí)的年齡稱為 停留時(shí)間。反應(yīng)器內(nèi)不同年齡的粒子間的混合稱為反 混。酶反應(yīng)器的應(yīng)用酶反應(yīng)器對(duì)底物恒定轉(zhuǎn)化目的：反應(yīng)器能平穩(wěn)的進(jìn)行工作，有利于實(shí) 現(xiàn)自控操作方法：控制底物流速國(guó)外熱點(diǎn)：將固定化酶反應(yīng)器串聯(lián)或并聯(lián)操 作。酶反應(yīng)器的應(yīng)用保持酶反應(yīng)器的穩(wěn)定性：防止酶變性、中毒、自溶或載體磨損。 防止酶反應(yīng)器中微生物污染向底物中加入殺菌、抑菌物質(zhì)，或有機(jī)溶劑 底物物料預(yù)先除菌在45度以上環(huán)境中或酸、堿緩沖液中進(jìn)行 反應(yīng)酶反應(yīng)器每次用后消毒一固定化酶（細(xì)胞）的應(yīng)用1.固定化酶（細(xì)胞）在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用2.固定化酶在醫(yī)藥治

21、療上的應(yīng)用3.固定化酶在分析化學(xué)中應(yīng)用4.固定化酶和親和色譜5.固定化酶與環(huán)境保護(hù)6.新能源開發(fā)中的應(yīng)用7固定化酶在基礎(chǔ)理論研究中應(yīng)用1.固定化酶（細(xì)胞）在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用 葡萄糖異構(gòu)酶世界上生產(chǎn)規(guī)模最大的一種固定化酶。用吸附法、結(jié)合法、凝膠包埋法等進(jìn)行固定 化。葡萄糖異構(gòu)酶葡萄糖果糖果葡糖漿固定化酶在工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 聚丙烯酰胺凝膠包埋含有延胡索酸酶的產(chǎn)氨短桿菌菌體，制得固定化延胡索酸酶。工 業(yè)化生產(chǎn)L-蘋果酸利用固定化乳糖酶可以連續(xù)生產(chǎn)低乳糖奶 固定化酵母細(xì)胞等微生物可用于生產(chǎn)各種 酒類固定化原生質(zhì)體的應(yīng)用研究中：固定后化枯草桿菌原生質(zhì)體生產(chǎn)堿性磷酸 酶，使原來存在于細(xì)胞中的堿性磷酸酶，

22、全 部分泌到發(fā)酵液中，提高產(chǎn)率 36%可連續(xù) 使用37天。2. 固定化酶在醫(yī)藥治療上的應(yīng)用例1固定化青霉素酰化酶，只要改變pH值等條件，就既可以催化青霉素或頭抱菌素水解生 成6-氨基青霉烷酸酸或7-氨基頭孢霉烷酸 也可以催化6-APA或7-ACA與其他的羧酸衍 生物進(jìn)行反應(yīng)合成新的具有不同惻鏈基團(tuán)的青霉素或頭 孢霉素青霉素?；复呋铣深^孢類抗生素 青霉素?；复呋铣深^抱類抗生素酶促合成頭抱類抗生素-Reversible reacti on-Hydrolysis of substrate or product by biocatalyst-Difficulty of separation of product from reacta nts固定化酶在醫(yī)藥治療上的應(yīng)用例2:制造人工腎利用固定化脲酶透析液和活性炭一起制成 的體外循環(huán)裝置，大大提高了療效。固定化 脲酶由酶與離子交換樹脂一起制成微小膠 囊尿酶可分解尿素為 NH和CQ, NH3被樹脂 吸附，CO可由肺部排出，活性炭用以吸附尿 素以外的代謝廢物。3. 固定化酶在分析化學(xué)中應(yīng)用酶柱和酶管，可與分光光度計(jì)、熒光計(jì)或電 量計(jì)結(jié)合，形成酶電極，進(jìn)行某些物質(zhì)的自 動(dòng)分析。酶電極 酶電極 特點(diǎn)：快速、方便、靈敏、精確 范圍：糖類