黃酮類化合物

1、第六章第六章 黃酮類化合物黃酮類化合物 Flavonoids大豆卵磷脂軟膠囊v神奇的大豆中國人吃了幾千年的大豆，過去用作飲料、豆制品和榨油，今天卻成了熱點。v大豆及其制品中含豐富異黃酮，大豆異黃酮對女性體內(nèi)雌激素具有雙向調(diào)節(jié)作用，具有抗衰老、防癌抗癌，防止骨質(zhì)疏松等功能問題：v黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)是怎樣的？黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)是怎樣的？v黃酮類化合物具有什么樣的理化性質(zhì)？黃酮類化合物具有什么樣的理化性質(zhì)？v我們?nèi)绾螌⑵涮崛『头蛛x出來，又如何進我們?nèi)绾螌⑵涮崛『头蛛x出來，又如何進行結(jié)構(gòu)鑒定？行結(jié)構(gòu)鑒定？分布廣泛分布廣泛v廣泛存在于蔬菜、水果、牧草和藥用植物中，是植物在長期自然選擇過程中產(chǎn)生的一些次級

2、代謝產(chǎn)物v對植物的生長、發(fā)育、開花和結(jié)果以及抵御異物的侵襲起著重要作用v在植物中已發(fā)現(xiàn)10000種結(jié)構(gòu)獨特的黃酮類化合物實例一 銀杏銀杏誕生在古生代, 距今已有二億三千萬年以上,銀杏為裸子植物門銀杏銀杏為裸子植物門銀杏綱銀杏植物綱銀杏植物(GinKgo bilba L.)，為為一科一屬一種一科一屬一種的特殊植物，又稱白的特殊植物，又稱白果、公孫樹，素有果、公孫樹，素有“活化石活化石”之稱，之稱，是國家二級保護植物。在我國廣泛種是國家二級保護植物。在我國廣泛種植，產(chǎn)量占全世界的植，產(chǎn)量占全世界的70%，是一種，是一種多用途的經(jīng)濟樹種。多用途的經(jīng)濟樹種。 銀杏o 宋代初年，白果被列為貢品上進宮廷。

3、宋代初年，白果被列為貢品上進宮廷?；实壅J為皇帝認為“白白”為不祥之兆，因看其外為不祥之兆，因看其外殼身白如銀，果實似杏，便改其名為殼身白如銀，果實似杏，便改其名為“銀杏銀杏”銀杏o 宋代詩人歐陽修詩云：宋代詩人歐陽修詩云：“絳囊初入貢，絳囊初入貢，銀杏貴中州。銀杏貴中州。”o 楊萬里在楊萬里在銀杏銀杏詩中將其描繪得出神詩中將其描繪得出神入化：入化：“深灰殘火略相遭，小苦微甜韻深灰殘火略相遭，小苦微甜韻最高。未必雞頭如鴨腳，不妨銀杏伴金最高。未必雞頭如鴨腳，不妨銀杏伴金桃。桃?！卑坠鹢 白果的藥用價值早在元代吳瑞著的白果的藥用價值早在元代吳瑞著的日用日用本草本草中即有記載，以后的許多醫(yī)學著作中即

4、有記載，以后的許多醫(yī)學著作也都有記載，主要是也都有記載，主要是三元延壽書三元延壽書、滇南本草滇南本草、本草綱目本草綱目、本草再本草再新新等。等。白果 記載的主要藥用功效為白果能斂肺氣、定喘嗽、記載的主要藥用功效為白果能斂肺氣、定喘嗽、止帶濁、縮小便，有治療哮喘、痰嗽、白帶、止帶濁、縮小便，有治療哮喘、痰嗽、白帶、白濁、遺精、淋病、便頻等作用。明代江蘇、白濁、遺精、淋病、便頻等作用。明代江蘇、山東、四川等地曾出現(xiàn)了用白果炮制的中成山東、四川等地曾出現(xiàn)了用白果炮制的中成藥用于臨床。藥用于臨床。 本章重點本章重點:1.黃酮類化合物的黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與分類結(jié)構(gòu)與分類、中藥中、中藥中常見的各類代表化合

5、物。常見的各類代表化合物。2.黃酮類化合物的黃酮類化合物的理化性質(zhì)理化性質(zhì)，重點掌握，重點掌握酸性的強弱酸性的強弱在提取和分離中的應用，在提取和分離中的應用，顯色反應顯色反應在各類檢識中的應用。在各類檢識中的應用。本章重點本章重點:3. 黃酮類化合物的提取黃酮類化合物的提取分離方法分離方法（PH梯梯度萃取法、柱色譜法）原理。度萃取法、柱色譜法）原理。4. 各類各類黃酮化合物的黃酮化合物的UV特征，重點掌特征，重點掌握握黃酮黃酮(醇醇)類類化合物化合物的的UV、1H-NMR特征特征和和MS基本裂解方式。基本裂解方式。 OO12364578色原酮色原酮 2-苯基色原酮苯基色原酮OO12364578

6、123456基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)一、黃酮一、黃酮(黃堿素類黃堿素類 )一、黃酮一、黃酮（1）、黃色帶有酮基化合物）、黃色帶有酮基化合物 （A B C 環(huán)）環(huán)）（2）、）、具有具有C6 C3 C6通式通式OABCC6-C3-C6 二、黃酮類化合物的生物合成途徑二、黃酮類化合物的生物合成途徑糖糖醋酸-丙二酸途徑莽草酸途徑RCH2COCoACoAOOCOHx 3OHOOH查耳酮OOOHOO桂皮酸桂皮酸 三三 生物活性生物活性 v抗氧化活性：抗氧化活性： 水飛薊素，槲皮素，高良姜素等水飛薊素，槲皮素，高良姜素等v對心血管系統(tǒng)的作用：對心血管系統(tǒng)的作用： 蘆丁蘆丁 橙皮苷橙皮苷v抗腫瘤活性：抗腫瘤活性： 染

7、料木素，黃芩苷，槲皮素染料木素，黃芩苷，槲皮素v抗炎、免疫調(diào)節(jié)活性：金雀異黃素，槲皮素抗炎、免疫調(diào)節(jié)活性：金雀異黃素，槲皮素v雌性激素樣作用：異黃酮雌性激素樣作用：異黃酮v抗菌抗病毒作用：蘆丁、兒茶素抗菌抗病毒作用：蘆丁、兒茶素 v解毒保肝和細胞保護作用解毒保肝和細胞保護作用 v對機體內(nèi)分泌和代謝的影響對機體內(nèi)分泌和代謝的影響生物活性生物活性葛根總黃酮葛根總黃酮及葛根素、及葛根素、銀杏葉總黃酮銀杏葉總黃酮：具：具有擴張冠狀血管作用，臨床可用于治療冠有擴張冠狀血管作用，臨床可用于治療冠心?。恍牟?；蘆丁蘆丁、橙皮苷、橙皮苷、d-兒茶素：具有降低毛細血兒茶素：具有降低毛細血管脆性和異常通透性作用，可

8、用作毛細血管脆性和異常通透性作用，可用作毛細血管性出血的止血藥及治療高血壓、動脈硬管性出血的止血藥及治療高血壓、動脈硬化的輔助藥；化的輔助藥；活性活性水飛薊素、異水飛薊素、次水飛薊素：水飛薊素、異水飛薊素、次水飛薊素：肝保護作用肝保護作用 ，臨床上用于治療急、慢性，臨床上用于治療急、慢性肝炎，肝硬化及多種中毒性肝損傷等疾肝炎，肝硬化及多種中毒性肝損傷等疾病均取得了較好的效果；病均取得了較好的效果；異甘草素、大豆素異甘草素、大豆素：具有類似罌粟堿的：具有類似罌粟堿的作用，解除平滑肌痙攣。作用，解除平滑肌痙攣。 1 黃酮類黃酮類2 黃酮醇類黃酮醇類3 二氫黃酮類二氫黃酮類4 二氫黃酮醇類二氫黃酮醇

9、類5 異黃酮類異黃酮類6 二氫異黃酮類二氫異黃酮類7 查耳酮類查耳酮類8二氫查耳酮類二氫查耳酮類9橙酮類橙酮類10花色素類花色素類11黃烷醇類黃烷醇類12雙黃酮類雙黃酮類13其他黃酮類其他黃酮類 結(jié)構(gòu)與分類結(jié)構(gòu)與分類依據(jù)依據(jù)C環(huán)的變化環(huán)的變化1、黃酮、黃酮 flavones ：占總數(shù)：占總數(shù) 1/4OOOHOHHO芹菜素芹菜素黃酮黃酮黃芩苷黃芩苷OOOOHOHOOHOHOHCOOH黃芩為清熱解毒類黃芩為清熱解毒類中藥，抗菌成分主中藥，抗菌成分主要有黃芩苷要有黃芩苷(baicalin)、次黃芩、次黃芩素素(wogonin)等。等。OOOOOHO黃芩素(黃色)OOOHHOHO黃芩酶黃芩苷COOHH

10、OOHOHOOOOHHOO flavonol ：占總數(shù)：占總數(shù) 1/3 C環(huán)環(huán)(C3 - OH)OOOROHOHOHHO槲皮素槲皮素 R=H蘆丁蘆丁 R=蕓香糖基蕓香糖基黃酮醇黃酮醇OOOHOHOHOH山柰酚山柰酚 v 槲皮素槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治療支氣管炎。槲皮素片用于治療支氣管炎。v 蘆丁蘆丁(rutin)是槲皮素的是槲皮素的O蕓香糖苷。用于治蕓香糖苷。用于治療毛細管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔療毛細管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。助治療劑。 RUTINOOOHHOOHOHOrutinoseOOOH

11、HOOHOHOHQUERCETINflavanones ：C環(huán)環(huán)(C2 - C3)無雙鍵無雙鍵OOOHOHOHRO橙皮素橙皮素 R=H橙皮苷橙皮苷R=蕓香糖基蕓香糖基二氫黃酮二氫黃酮OOOHOR甘草素甘草素 R=H甘草苷甘草苷 R=glc甘草苷(liquiritin),具有潰瘍抑制作用OOOglcHO柚皮素（柚皮素（Naringenin）：來源于蕓香科植）：來源于蕓香科植物柚的果實；物柚的果實；v結(jié)構(gòu)式：結(jié)構(gòu)式： flavanonols ： C環(huán)無雙鍵環(huán)無雙鍵 C3-OH OOOHOHOHOHHO二氫槲皮素二氫槲皮素二氫黃酮醇二氫黃酮醇v 水飛薊素是二氫黃酮醇與苯丙素衍生物縮合水飛薊素是二氫黃

12、酮醇與苯丙素衍生物縮合成的成的黃酮木脂素類黃酮木脂素類成分。具有保肝作用，用于成分。具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎及肝硬化，代謝中毒性肝損治療急、慢性肝炎及肝硬化，代謝中毒性肝損傷。傷。 OOHOOHOHOOCH2OHOHOCH3水飛薊素(SILYBIN)異黃酮異黃酮-B環(huán)取代在環(huán)取代在C環(huán)環(huán) C3 上上 豆科植物葛。豆科植物葛。葛根總黃酮葛根總黃酮具有具有擴冠、增加冠擴冠、增加冠脈流量及降低脈流量及降低心肌耗氧量等心肌耗氧量等作用。作用。isoflavones ： R1OOR2OOR3葛根素葛根素 R2 = R3 = H R1 =glc 葛根素木糖苷葛根素木糖苷 R1 = glc R2

13、= xyl R3=H異黃酮異黃酮廣豆根：紫檀素廣豆根：紫檀素 R=CH3 三葉豆紫檀素三葉豆紫檀素 R= glc 高麗槐素高麗槐素 R=H二氫異黃酮二氫異黃酮-2，3位雙鍵被氫化位雙鍵被氫化ROOOOO123456678910101111Rchalcones ： C環(huán)是開裂狀態(tài)環(huán)是開裂狀態(tài)2-羥基查耳酮羥基查耳酮二氫黃酮二氫黃酮查耳酮查耳酮OOHOHOHO+2345623456v菊科植物菊科植物 v紅花。紅花。v 紅花所含的色素紅花所含的色素紅花苷紅花苷是第一個發(fā)現(xiàn)是第一個發(fā)現(xiàn)的的查耳酮類查耳酮類植物成分。植物成分。 v 紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；開紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；開花中期，

14、花冠呈深黃色；開花后期或采花中期，花冠呈深黃色；開花后期或采收干燥過程中由于酶的作用，氧化成紅收干燥過程中由于酶的作用，氧化成紅色。色。SO2氧化酶異構(gòu)化醌式紅花苷(紅色)紅花苷(carthamone)(黃色)新紅花苷(neo-carthamin)(無色)OHOOOOglcOHOHOHOHOOglcOHOOHOHOOglcOHOHOOHHOOglc梨根苷梨根苷二氫查耳酮類二氫查耳酮類，位雙鍵氫化位雙鍵氫化 C環(huán)是含氧五元環(huán)環(huán)是含氧五元環(huán) 定位母核碳原子的編號有不同定位母核碳原子的編號有不同 硫磺菊素硫磺菊素橙酮橙酮aurones HHOCHOHOOHOH1234567123456 C環(huán)上無羰基

15、，但環(huán)上無羰基，但C環(huán)環(huán)O原子是陽離子狀態(tài)原子是陽離子狀態(tài)O+R1OHR2HOOH矢車菊苷元矢車菊苷元 R1=OH R2=H飛燕草苷元飛燕草苷元 R1=R2=OH天竺葵苷元天竺葵苷元 R1=R2=H花色素花色素 anthooganidins ：v 是使花、葉、果、莖等呈現(xiàn)藍、紫、紅等是使花、葉、果、莖等呈現(xiàn)藍、紫、紅等顏色的色素。以苷的形式存在于細胞液中，顏色的色素。以苷的形式存在于細胞液中，經(jīng)水解可生成苷元經(jīng)水解可生成苷元花色素及糖?；ㄉ丶疤?。 矢車菊苷元(蘭色)花青素母核OHOOHOHOHOflavan3ols ： C環(huán)上無羰基環(huán)上無羰基兒茶素兒茶素黃烷醇黃烷醇OHOHOOHOHOHHH

16、黃烷黃烷-3-醇醇(flavan-3-ols)(+)兒茶素(-)表兒茶素OHOOHOHHOHHOHHOHOOHOHOHOHHOOHOHOHOHOHR1R2無色矢車菊素無色矢車菊素 R1=OH R2=H 無色飛燕草素無色飛燕草素 R1=R2=OH 無色天竺葵素無色天竺葵素 R1=R2=H黃烷黃烷-3，4-二醇二醇(flavan-3,4-diols)類類 二個黃酮（或黃酮醇）聚合二個黃酮（或黃酮醇）聚合 雙黃酮（醇）雙黃酮（醇）iflavonoids ：OOHOCH3OOHOOHOR2OR1OR銀杏素銀杏素 R1=CH3 R2=H異銀杏素異銀杏素 R1=H R2= CH3白果素白果素 R1=H R

17、2=H8，8-雙芹菜素型雙芹菜素型 OO HH OOOH OO HO HOO H H柏黃酮柏黃酮雙苯醚型雙苯醚型 例如扁柏黃酮（例如扁柏黃酮（hinokiflavone），是），是由二分子芹菜素通過由二分子芹菜素通過C4-O-C6醚鍵連醚鍵連接而成。接而成。OOHOOHOOOHOHOOHC環(huán)與環(huán)與B環(huán)駢合環(huán)駢合 苯駢色酮苯駢色酮 (山酮類山酮類)其他黃酮類其他黃酮類87654321異芒果素(isomengiferin)OOHOHOOHOHglc石葦中的異芒果素石葦中的異芒果素具有止咳祛痰的功效。具有止咳祛痰的功效。 取代基取代基 常見：常見： -OH ： 取代位置取代位置 A環(huán)環(huán) 5- 7-

18、; B環(huán)環(huán) 4 -OCH3： 異戊烯基：異戊烯基：A環(huán)環(huán)6- ； B環(huán)環(huán)4 成苷位置成苷位置 ： A環(huán)環(huán) 7- B環(huán)環(huán) 4 C環(huán)環(huán) 3-（一）單糖類（一）單糖類(P129) 1、D-glucose ( D-glc) D-glucaronic acid (D-gluA) 2、鼠李糖、鼠李糖 L-Rhamnose (L-Rha) 3、半乳糖、半乳糖 D-galactose (D-Gal) 4、甘露糖、甘露糖 D-mannoe (D-Man) 5、阿拉伯糖、阿拉伯糖 L-Arabinose (L-Ara) 6、木糖、木糖 D-xylose (D-Xyl)成苷的糖成苷的糖（二）雙糖類（二）雙糖類 槐糖

19、槐糖 sophorose （glc 12 glc） 蕓香糖蕓香糖 rutinose （rha 1 6 glc） 龍膽二糖龍膽二糖 （glc 1 6 glc）成苷的糖成苷的糖OO1、性狀：結(jié)晶或非結(jié)晶粉末、性狀：結(jié)晶或非結(jié)晶粉末 二氫黃酮不易結(jié)晶二氫黃酮不易結(jié)晶2、顏色：、顏色： （1）、顏色與分子中是否存在交叉共）、顏色與分子中是否存在交叉共軛體系有關(guān)軛體系有關(guān)第二節(jié)第二節(jié) 理化性質(zhì)和顯色反應理化性質(zhì)和顯色反應 (1) 黃酮、黃酮醇多顯灰黃黃色黃酮、黃酮醇多顯灰黃黃色; 查耳酮查耳酮 為黃橙黃色；為黃橙黃色； 二氫黃酮、二氫黃酮醇及黃烷醇二氫黃酮、二氫黃酮醇及黃烷醇 幾乎為無色；幾乎為無色；

20、異黃酮異黃酮 缺少完整的交叉共軛體系，僅顯微黃色。缺少完整的交叉共軛體系，僅顯微黃色。OO-+OOOO-+2、顏色：、顏色： （2）在黃酮（醇）在黃酮（醇）7 、4引入引入OH 、OCH3 等助色團，促進電子移位、重排，化等助色團，促進電子移位、重排，化合物的顏色加深合物的顏色加深 （3）花色素隨）花色素隨PH變化，顏色不同變化，顏色不同pH7時顯紅色，時顯紅色，pH為為8.5時顯紫色，時顯紫色，pH8.5時顯藍色。時顯藍色。pH7時顯紅色，時顯紅色，pH為為8.5時顯紫色，時顯紫色，pH8.5時顯藍色。時顯藍色。例如矢車菊苷例如矢車菊苷OOHOOHOH C6H11O5+HOH-OHOOOHO

21、紅 色 紫 色HOH-OHOOOO-藍 色 C6H11O5 C6H11O5 C6H11O5O C6H11O5OO C6H11O5 OH3 旋光性旋光性二氫黃酮二氫黃酮二氫黃酮醇二氫黃酮醇黃烷醇黃烷醇二氫異黃酮二氫異黃酮黃酮苷類由于結(jié)構(gòu)中含有糖部分，黃酮苷類由于結(jié)構(gòu)中含有糖部分，有旋光性，左旋。有旋光性，左旋。 有旋光有旋光4 溶解度溶解度取決于存在狀態(tài)取決于存在狀態(tài)v苷：親水性苷：親水性 易溶熱水、甲醇、乙醇易溶熱水、甲醇、乙醇; 難溶難溶CHCl3v苷元：親脂性苷元：親脂性 易溶易溶MeOH 、 EtOH 、 Et2O；難溶于水；難溶于水苷元苷元平面型分子平面型分子 難溶于水：難溶于水： 黃

22、酮（醇）、查耳酮黃酮（醇）、查耳酮 非平面型分子非平面型分子 溶解度稍大：溶解度稍大： 二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇）離子型分子離子型分子 具有鹽的通性，水溶性大具有鹽的通性，水溶性大 ：花青素：花青素溶解度溶解度黃酮成苷后黃酮成苷后 ：水溶性：水溶性 ，脂溶性，脂溶性 苷分子中糖基的數(shù)目、結(jié)合的位置，對溶解苷分子中糖基的數(shù)目、結(jié)合的位置，對溶解度亦有一定影響。度亦有一定影響。多糖苷比單糖苷水溶性大多糖苷比單糖苷水溶性大3-羥基苷比相應的羥基苷比相應的7-羥基苷水溶性大羥基苷水溶性大 OOOHHOP-共軛共軛7 、4OH 酸性強酸性強（一）、（一）、酸性：酸性： 7 、4 二二OH 7 或或4O

23、H 一般一般ph-OH 3或或5-OH 5%NaHCO3 5%Na2CO3 0.5% NaOH 5% NaOH5 酸堿性酸堿性 （二）、堿性（二）、堿性 1、堿性很弱，只與強酸成鹽、堿性很弱，只與強酸成鹽 2、生成鹽極不穩(wěn)定，加水分解、生成鹽極不穩(wěn)定，加水分解 3、與濃、與濃H2SO4 , HCl 反應呈特殊顏色反應呈特殊顏色OOH+OHO+X-OOHMg + HCl O+O-粉紅粉紅 1、還原反應、還原反應 1）、）、鹽酸鎂粉反應鹽酸鎂粉反應6 顯色反應顯色反應 操作和結(jié)果檢查：樣品檢查：樣品 /甲醇甲醇 + Mg粉粉 +3d 濃濃 HCl12分鐘分鐘顯色顯色黃酮（醇）黃酮（醇）二氫黃酮（醇

24、）二氫黃酮（醇）查耳酮、橙酮、兒茶素：陰性查耳酮、橙酮、兒茶素：陰性顯橙紅紫紅色顯橙紅紫紅色 供試液中供試液中不加鎂粉不加鎂粉，加入濃鹽酸進行，加入濃鹽酸進行觀察，產(chǎn)生紅色，則表明供試液中含觀察，產(chǎn)生紅色，則表明供試液中含有花色素類或某些橙酮或查耳酮類。有花色素類或某些橙酮或查耳酮類。 鹽酸鎂粉反應鹽酸鎂粉反應檢查花色素2）、四氫硼鈉反應（）、四氫硼鈉反應（NaBH4）樣品甲醇液加NaBH4滴加1%鹽酸樣品甲醇液噴2%NaBH4濾紙濾紙熏濃鹽酸蒸氣觀察觀察選擇性還原二氫黃酮（醇）類選擇性還原二氫黃酮（醇）類紅紅紫紅色紫紅色OOOHOHOHOOH 黃酮類化合物具有結(jié)構(gòu)單元：黃酮類化合物具有結(jié)構(gòu)單

25、元：2、金屬離子絡(luò)合反應、金屬離子絡(luò)合反應均可與重金屬生成絡(luò)合物均可與重金屬生成絡(luò)合物 Al 3+ ，Pb 2+ ，Zr 3+ ，Mg 2+ ，Sr2+，F(xiàn)e 3+（1）1% AlCl3 / MeOH Al(NO3)3 2、金屬離子絡(luò)合反應、金屬離子絡(luò)合反應 黃色熒光絡(luò)合物（黃色熒光絡(luò)合物（ max = 4.5 nm）（2）1% PbAc2 1%Pb (OH)Ac 黃黃紅色紅色 原因：原因： 3-OH黃酮鋯鹽絡(luò)合物比黃酮鋯鹽絡(luò)合物比5-OH黃酮黃酮 鋯鹽絡(luò)合物穩(wěn)定鋯鹽絡(luò)合物穩(wěn)定OOOOHOZr / 44+穩(wěn)定穩(wěn)定Zr / 44+OOO不穩(wěn)定不穩(wěn)定（3）2%ZrOCl2 / MeOH + 枸櫞酸

26、枸櫞酸 區(qū)別區(qū)別 3-OH 與與 5-OH黃酮黃酮 區(qū)別區(qū)別 3-OH 與與 5-OH黃酮黃酮+ 2%ZrOCl2 / MeOH3-OH黃酮黃酮5-OH黃酮黃酮黃色鋯絡(luò)合物黃色鋯絡(luò)合物 黃色鋯絡(luò)合物黃色鋯絡(luò)合物+ 枸櫞酸枸櫞酸鮮黃色鮮黃色黃色退去黃色退去二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇）-天藍色天藍色熒光熒光黃酮（醇）黃酮（醇）異黃酮異黃酮黃橙黃褐色黃橙黃褐色OOOHOHOHOHHO+ Sr2+ + 2OH-Sr2+OOO+ 2H2O（5）氨性氯化鍶反應（鄰二酚羥基）氨性氯化鍶反應（鄰二酚羥基 ） 綠棕色黑色綠棕色黑色 3. 硼酸顯色反應硼酸顯色反應 5-羥基黃酮羥基黃酮 6-羥基查耳酮類羥基查耳酮

27、類在無機酸或有機酸存在條件下，可與硼酸反應，產(chǎn)生在無機酸或有機酸存在條件下，可與硼酸反應，產(chǎn)生亮黃色。亮黃色。草酸草酸顯黃色并具有綠色熒光，顯黃色并具有綠色熒光，枸櫞酸丙酮枸櫞酸丙酮-顯黃色而無熒光。顯黃色而無熒光。 堿性試劑：堿性試劑： NH3氣：顏色可逆的氣：顏色可逆的 NaHCO3水溶液：顏色不可逆水溶液：顏色不可逆 堿性試劑反應可以幫助鑒別分子中某些結(jié)構(gòu)堿性試劑反應可以幫助鑒別分子中某些結(jié)構(gòu)特征特征4、堿性試劑顯色反應、堿性試劑顯色反應 二氫黃酮二氫黃酮OH-查耳酮查耳酮（橙黃色）（橙黃色）黃酮黃酮OH-黃色橙黃色橙深紅紫紅色深紅紫紅色放置放置5. 與五氯化銻的反應與五氯化銻的反應 （

28、區(qū)別查耳酮與其他黃酮）（區(qū)別查耳酮與其他黃酮）樣品溶于無水樣品溶于無水四氯化碳四氯化碳五氯化銻五氯化銻查耳酮查耳酮 紅紅紫紅色紫紅色黃酮黃酮二氫黃酮二氫黃酮 黃黃橙色橙色黃酮醇黃酮醇第三節(jié)第三節(jié) 提取與分離提取與分離分三個階段：分三個階段：提取提取純化純化分離分離 成分成分-苷或苷元苷或苷元 原材料原材料-葉，莖或根葉，莖或根溶劑溶劑-水或醇水或醇去除雜質(zhì)去除雜質(zhì)將總黃酮將總黃酮單體黃酮單體黃酮1、熱水提取法：、熱水提取法：藥材藥材10倍量水煎煮倍量水煎煮1h3次次濾液濾液注意：注意： 提取苷類，先破壞酶活性提取苷類，先破壞酶活性 破壞酶活性的方法：沸水提取破壞酶活性的方法：沸水提取 高濃度醇

29、高濃度醇一、提取方法：一、提取方法：苷類苷類藥材藥材10倍量水煎煮倍量水煎煮1h3次次濾液濾液藥材藥材10倍量水煎煮倍量水煎煮1h3次次渣渣濾液濾液藥材藥材10倍量水煎煮倍量水煎煮1h3次次系統(tǒng)溶劑萃取系統(tǒng)溶劑萃取濃縮濃縮浸膏浸膏 例如：例如：槐米粗粉槐米粗粉20倍沸水1h / 1次2水煎液水煎液 蘆丁溶解度：蘆丁溶解度： 熱水熱水 冷水冷水 熱乙醇熱乙醇 冷乙醇冷乙醇 1:200 1:104 1:60 1:650放置放置, 過濾過濾粗品蘆丁粗品蘆丁苷類苷類重結(jié)晶重結(jié)晶蘆丁蘆丁 熱乙醇熱乙醇蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又可析出，如

30、何易溶于堿液中，酸化后又可析出，如何利用此性質(zhì)提取蘆丁？利用此性質(zhì)提取蘆丁？RUTINOOOHHOOHOHOrutinoseOOOHHOOHOHOHQUERCETIN堿提取酸沉淀法堿提取酸沉淀法 蘆丁的工業(yè)生產(chǎn)提取方法如下：蘆丁的工業(yè)生產(chǎn)提取方法如下：P167 槐米粗粉槐米粗粉加約加約6倍量水及硼砂適量，煮沸，在攪拌下緩緩加入倍量水及硼砂適量，煮沸，在攪拌下緩緩加入石灰乳至石灰乳至pH89。在保持該。在保持該pH條件下，條件下，微沸微沸2030分鐘，隨時補充失去的水份，趁熱抽分鐘，隨時補充失去的水份，趁熱抽濾，藥渣加濾，藥渣加4倍量水，同法再提倍量水，同法再提2次。次。熱水或乙醇重結(jié)晶熱水或乙

31、醇重結(jié)晶 蘆蘆 丁丁在在6070下用濃鹽酸調(diào)下用濃鹽酸調(diào)pH5，攪勻，靜，攪勻，靜置，抽濾，水洗至洗液呈中性，置，抽濾，水洗至洗液呈中性，60干燥。干燥。 蘆丁粗品蘆丁粗品合并提取液合并提取液注意：注意：（1）堿濃度不宜過高，強堿加熱易破壞母核）堿濃度不宜過高，強堿加熱易破壞母核（2）花、果類藥材，含雜質(zhì)果膠、粘液質(zhì)，）花、果類藥材，含雜質(zhì)果膠、粘液質(zhì)，宜用石灰乳（水），可使含宜用石灰乳（水），可使含COOH的雜的雜質(zhì)生成鈣鹽質(zhì)生成鈣鹽 ，有利于純化，有利于純化（3）酸化時，濃度不宜過強，否則生成鹽，）酸化時，濃度不宜過強，否則生成鹽，使析出的黃酮又重新溶解，降低產(chǎn)率使析出的黃酮又重新溶解，降

32、低產(chǎn)率2、堿提取酸沉淀法、堿提取酸沉淀法 3、乙醇或甲醇提取法、乙醇或甲醇提取法v高濃度的醇（如高濃度的醇（如90%95%）：）： 適用于提取游離黃酮適用于提取游離黃酮v60%醇：適用于提取黃酮苷類。醇：適用于提取黃酮苷類。 藥材藥材10倍量水 + H+ + CHCl3回流藥渣藥渣CHCl3液液 總黃酮苷元總黃酮苷元4、有機溶劑提取法（極性小的苷元）、有機溶劑提取法（極性小的苷元）5、超臨界萃取法、超臨界萃取法v適合于提取熱敏性和易氧化的物質(zhì)（脂溶性）v第七節(jié) 實例-銀杏黃酮和內(nèi)酯分離依據(jù)分離依據(jù) A：酚：酚OH ,酸性不同酸性不同 梯度梯度pH萃取萃取 B：依據(jù)分子量大小：依據(jù)分子量大小Se

33、phadex LH-20 C：依據(jù)分子極性：依據(jù)分子極性-硅膠柱色譜硅膠柱色譜分離方法分離方法 水或不同濃度的醇提取水或不同濃度的醇提取 濃縮濃縮 溶劑萃取法溶劑萃取法-初步分離初步分離 有機溶劑萃取有機溶劑萃取葉綠素等脂溶葉綠素等脂溶性成分性成分石油醚石油醚游離黃酮等游離黃酮等氯仿氯仿黃酮苷黃酮苷正丁醇正丁醇2.梯度梯度PH萃取法萃取法 適用范圍：分離酸性強弱不同的黃酮苷元適用范圍：分離酸性強弱不同的黃酮苷元 依次用依次用弱堿弱堿強堿強堿萃取萃取-黃酮苷元由黃酮苷元由強酸強酸弱酸弱酸順序萃取出來順序萃取出來混合苷元CHCl35% NaHCO3 5%堿水層CHCl3層5% Na2CO3 堿水層

34、CHCl3層0.2% NaOHCHCl3層堿水層4% NaOH堿水層(7,4二二OH)(7或或4二二OH)(一般一般ph-OH)(5-OH黃酮黃酮)流程圖流程圖硅膠柱色譜：極性差異硅膠柱色譜：極性差異 適宜分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇適宜分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化或乙?；狞S酮及黃酮醇類。及高度甲基化或乙?；狞S酮及黃酮醇類。柱色譜法柱色譜法聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜：分離黃酮類較理想：分離黃酮類較理想 原理：原理：H 鍵吸附鍵吸附，吸附能力取決于，吸附能力取決于H 鍵鍵能力的大小，即能力的大小，即酚羥基數(shù)目和位置酚羥基數(shù)目和位置 特點：吸附容量高特點：吸附容量高 柱色譜法

35、柱色譜法分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多則吸附力越強分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多則吸附力越強 OOOHOHOHOHOOOHOHOHOHHO桑色素桑色素 山柰酚山柰酚酚羥基數(shù)目相同時，如所處位置易于形成分子內(nèi)氫酚羥基數(shù)目相同時，如所處位置易于形成分子內(nèi)氫鍵，則其與聚酰胺的吸附力減小，易被洗脫下來。鍵，則其與聚酰胺的吸附力減小，易被洗脫下來。 OOHOOHOOHOOHOCH3H大豆素大豆素 卡來可新卡來可新 分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力越強，越強，查耳酮要比相應的二氫黃酮吸附力強。查耳酮要比相應的二氫黃酮吸附力強。例如對橙皮查耳酮的吸附力強于橙皮素：例如對橙皮查耳酮的吸附力強于橙皮素：OHOHOOHOHOCH3OOHOOHOHOCH3H 橙皮查耳酮橙皮查耳酮 橙皮素橙皮素不同類型黃酮化合物，被吸附強弱順序不同類型黃酮化合物，被吸附強弱順序 黃酮醇黃酮醇 黃酮黃酮 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 異黃酮異黃酮 以以含水移動相含水移動相（如（如甲醇甲醇-水水）作洗脫劑，）作洗脫劑， 黃酮苷比游離黃酮先洗脫下來黃酮苷比游離黃酮先洗脫下來 洗脫的先后順序一般是：洗脫的先后順序一般是： 叁糖苷雙糖苷單糖苷游離黃酮；叁糖苷雙糖苷單糖苷游離黃酮；洗脫劑的影響洗脫劑的