IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV感染者的臨床轉(zhuǎn)歸關(guān)系

1、IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV感染者的臨床轉(zhuǎn)歸關(guān)系近來(lái)的全基因組關(guān)聯(lián)分析已經(jīng)證實(shí)，位于第19號(hào)染色體上編碼白細(xì)胞介素28B（IL28B，又稱為IFN-3）基因的單核苷酸多態(tài)性（SNPs）與HCV感染后能否發(fā)生自發(fā)性清除相關(guān)，而且也與聚乙二醇干擾素聯(lián)合利巴韋林（Peg-IFN/RBV）治療慢性HCV感染的療效密切相關(guān)，故已成為本領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。隨后的研究表明，IL28B遺傳變異也與HCV感染后的自然病程及新的治療策略重要相關(guān)?，F(xiàn)就這些重要的發(fā)現(xiàn)及其可能的生物學(xué)機(jī)制加以綜述。 1、IL28B及IL28家族的分子生物學(xué)特點(diǎn)Sheppard等于2003年最先報(bào)道了一組基因結(jié)構(gòu)與IL-10相似、氨基酸

2、序列與干擾素(IFN)更接近的新型細(xì)胞因子家族IL28家族（包括IL-29、IL-28A及IL-28B）1，而幾乎同時(shí)發(fā)現(xiàn)這組細(xì)胞因子的Kotenko等則將其命名為新型干擾素家族IFN-s，并相應(yīng)地稱為IFN-l(IL-29)、IFN-2(IL-28A)和INF-3(IL-28B) 2。IFN依據(jù)其氨基酸序列和特異性識(shí)別受體的不同分為型和型。型主要為IFN-、IFN-，其中IFN-包括13種亞型，IFN-只有一種亞型；型僅有IFN-一種類型。IFN-s在誘導(dǎo)機(jī)制、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和生物學(xué)活性等方面與I型干擾素十分相似，因此也有研究者建議將其命名為型干擾素3。關(guān)于對(duì)型干擾素的描述，有人建議，IL28家族

3、是其基因標(biāo)志，而IFN-s指的是其相應(yīng)蛋白質(zhì)分子，用于強(qiáng)調(diào)其抗病毒活性4。IFN-s普遍存在于脊椎動(dòng)物當(dāng)中，與單個(gè)外顯子編碼的I型干擾素不同，是由經(jīng)典的5到6個(gè)外顯子所編碼的5。如圖1所示，在人類，IL-29、IL-28A及IL-28B以三種組合形式集中分布于第19號(hào)染色體（19q13.13）上4，其中IL-28A和IL-28B表現(xiàn)出96%的同源性。 圖1. IFN-s基因（IL28B, IL28A and IL29）的基因結(jié)構(gòu)和關(guān)鍵的SNPs位置。IL28家族都有相同的異二聚體受體，包括IL-10R和IL-28R，受體的前一部分是與其他細(xì)胞因子所共享的，而后一部分是這三種細(xì)胞因子所特有的，該

4、受體在肝細(xì)胞及上皮細(xì)胞中的表達(dá)高于其他細(xì)胞6,7。與I型干擾素有很大程度的相似, 該受體信號(hào)的傳導(dǎo)也是通過(guò)JAK1和Tyk2激酶的磷酸化、系列轉(zhuǎn)錄因子(包括STAT1、STAT2和干擾素調(diào)節(jié)因子9)的活化并也通過(guò)對(duì)ISRE啟動(dòng)子序列相似基因的上調(diào)來(lái)共同完成的8（但各有不同的信號(hào)動(dòng)力學(xué)機(jī)制9）。IFN-s已被證實(shí)是由病毒感染和其他干擾素誘導(dǎo)而產(chǎn)生的10,11，不但在體外具有抗病毒的作用9,12，而且，在體內(nèi)也可對(duì)抗RNA病毒8,10。由于IFN-s可調(diào)控與IFN-類似的ISG，且在組織中的靶點(diǎn)更具有特異性，因此，其被認(rèn)為將來(lái)有可能替代IFN-進(jìn)行抗病毒治療1。 IFN-s能夠有效抑制HCV在細(xì)胞

5、內(nèi)的復(fù)制9,12-14，體外實(shí)驗(yàn)表明，IFN-s能夠抑制HCV在所感染肝癌細(xì)胞株（Huh7）中的復(fù)制(經(jīng)IFN-1/2處理后能明顯減少HCV正鏈RNA數(shù)目)。另外，還有研究表明，IFN-s通過(guò)JAK-STAT通路觸發(fā)抗病毒級(jí)聯(lián)反應(yīng)，其與型干擾素（例如IFN-）類似并可能與型干擾素具有協(xié)同作用，盡管相應(yīng)的受體可能有所不同15；IFN-s在體內(nèi)和體外均有著與型干擾素相似的抗HCV的活性，然而體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，外源性IFN-s誘導(dǎo)了一個(gè)較IFN-相對(duì)緩慢、但更持久的干擾素刺激基因（ISGs）的表達(dá)16。這些發(fā)現(xiàn)很好地解釋了IFN-s在HCV清除中可能發(fā)揮的作用，但關(guān)于定位于IL28B起始密碼子上游的某些

6、核苷酸序列與HCV感染后自發(fā)清除及治療誘導(dǎo)的病毒清除的關(guān)系尚有待于進(jìn)一步的探討。 2、IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV自發(fā)性清除的關(guān)系 HCV感染后的慢性化幾率特別高，約占感染者的70-80%17，然而，在急性HCV感染者中仍有約20-30的個(gè)體可以發(fā)生自發(fā)性清除。有研究顯示，在除外病毒或環(huán)境因素，HCV感染后自發(fā)清除率在不同地域不同人群間存在著差異18；而且即使暴露于同一病毒株下，HCV自發(fā)清除也只發(fā)生在部分而非全部人群，該現(xiàn)象提示宿主基因的遺傳變異可能決定著HCV感染后的結(jié)局19，而且在最近進(jìn)行的幾項(xiàng)全基因組關(guān)聯(lián)分析已經(jīng)證實(shí)，編碼IL28B基因的某些單核苷酸多態(tài)性可能使IL28B的表達(dá)發(fā)生

7、變化，因而使HCV感染者的自發(fā)清除能力在個(gè)體間存在著差異。在針對(duì)一個(gè)侯選基因的研究中，Thomas等證實(shí)，宿主IL28B rs12979860為CC純合子表型的個(gè)體較CT和TT表型的個(gè)體有更高的HCV自發(fā)清除率，并推測(cè)這種差異可能與宿主的基因變異進(jìn)而影響了免疫應(yīng)答能力有關(guān)，故導(dǎo)致急性HCV感染后的結(jié)局不一致20。David B.Goldstein等在對(duì)HCV自發(fā)清除能力與IL28B基因相關(guān)性的研究中發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，慢性感染人群中IL28B基因rs12979860的C等位基因頻率明顯減低，提示高表達(dá)C等位基因可能有利于HCV的自發(fā)清除21。此外，來(lái)自于另一個(gè)更大樣本的全基因組關(guān)聯(lián)分析表明，I

8、L28B多態(tài)性rs8099917也是HCV自發(fā)清除的最強(qiáng)有力的遺傳標(biāo)志22。Grebely J等對(duì)近期感染HCV患者的研究也發(fā)現(xiàn)，IL28B rs8099917的TT純合子與GT/GG表型相比，對(duì)預(yù)測(cè)HCV能否發(fā)生自發(fā)性清除有重要意義23。 值得關(guān)注的是，幾項(xiàng)來(lái)自歐美地區(qū)的研究發(fā)現(xiàn)，感染HCV基因1型患者的C等位基因頻率較HCV基因2/3型患者的為低22,24-27。例如，一項(xiàng)來(lái)自德國(guó)的大樣本研究證實(shí)，rs12979860CC表型在HCV基因1型患者為33.9%，而在HCV基因2/3型患者則為42.7%，這與健康人群的49%相接近，因此推測(cè)HCV感染后的自發(fā)清除率在HCV基因1型患者中更有可能

9、發(fā)生26。關(guān)于這一發(fā)現(xiàn)，其確切機(jī)制需要更深入的研究加以探討。 3、IL28B單核苷酸多態(tài)性與慢性HCV感染者抗病毒治療的應(yīng)答關(guān)系 迄今為止，針對(duì)慢性HCV感染的標(biāo)準(zhǔn)化治療主要是PEG-IFN-/RBV聯(lián)合治療28。但并不是所有接受治療者都能發(fā)生SVR，而且，在治療過(guò)程中，還可能因藥物的副作用不得不減少藥物劑量乃至停藥，從而使SVR率更低。某些宿主和病毒因素已被證實(shí)有助于治療應(yīng)答的預(yù)測(cè)，尤其是宿主遺傳因素與HCV感染后的臨床轉(zhuǎn)歸的關(guān)系是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。其中，宿主IL28B單核苷酸多態(tài)性不僅與HCV自發(fā)清除密切相關(guān)，而且在預(yù)測(cè)慢性HCV感染治療結(jié)局方面也具有重要意義。 3.1 IL28B單核苷酸

10、多態(tài)性與HCV基因1型感染者抗病毒療效的關(guān)系。 2009年相繼發(fā)表的三項(xiàng)關(guān)于Peg-IFN-/RBV聯(lián)合治療CHC患者療效的全基因組關(guān)聯(lián)分析21,29,30中，只有IL28B基因附近的單核苷酸多態(tài)性達(dá)到了與治療應(yīng)答之間的關(guān)聯(lián)意義。其中，rs12979860 C等位基因、rs8099917 T等位基因和rs12980275 A等位基因顯示出與SVR相關(guān)，尤其是前兩個(gè)多態(tài)性與SVR的相關(guān)性最強(qiáng)，并成為迄今為止最具特征性的兩個(gè)SNPs。然而，由于IL28B不同SNPs等位基因頻率在不同種族人群中分布上存在差異，因此，在不同的研究隊(duì)列中，其預(yù)測(cè)能力可能不同。Ge等21在一項(xiàng)超過(guò)1000例HCV基因1型

11、北美患者中進(jìn)行了全基因組關(guān)聯(lián)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在IL-28B基因區(qū)的7個(gè)SNPs中,位于IL-28B基因上游3kb處的rs12979860與PEG-IFN-/RBV聯(lián)合治療療效的相關(guān)性最強(qiáng)；攜帶有CC基因型的患者，較攜帶TT基因型患者對(duì)標(biāo)準(zhǔn)治療有超過(guò)兩倍的機(jī)會(huì)獲得SVR；他們還發(fā)現(xiàn)，這些研究結(jié)果在歐洲裔、非洲裔和拉美裔血統(tǒng)患者大致相同，盡管非洲裔患者的SVR率普遍低于歐洲裔血統(tǒng)患者；同時(shí)，也正是由于非洲裔人群的CC表型頻率明顯低于歐洲裔種族人群，因此很好地解釋了存在于不同種族人群間針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)治療后獲得的SVR率上的差異。來(lái)自日本名古屋大學(xué)的Tanaka Y等29在日本人群中針對(duì)感染HCV基因1型的

12、患者進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，攜帶rs12980275和rs8099917的G等位基因的感染者發(fā)生無(wú)應(yīng)答的風(fēng)險(xiǎn)顯著增高(OR=26.7,95%CI:9.376.5和OR=36.5，95%CI：11.6114.6)；治療無(wú)應(yīng)答者的G等位基因頻率明顯高于病毒學(xué)應(yīng)答者(74.3% vs 12.5% rs12980275；75.0% vs 9.4% rs8099917)，并且GG表型只出現(xiàn)在無(wú)應(yīng)答人群中。這一結(jié)果與來(lái)自澳大利亞悉尼大學(xué)的Suppiah V等人的研究結(jié)論相似，后者在高加索人中針對(duì)HCV基因1型感染的患者的研究中發(fā)現(xiàn)，在與治療無(wú)應(yīng)答相關(guān)的IL28B多態(tài)性位點(diǎn)中，rs8099917(OR=3.4，95

13、% CI:2.25.4)的相關(guān)性最強(qiáng)；與攜帶有rs8099917GT/TT表型的人群進(jìn)行比較，攜帶有GG表型的患者治療無(wú)應(yīng)答的危險(xiǎn)性增高約2倍30。 3.2 IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV非基因1型感染者抗病毒療效的關(guān)系。 HCV基因2/3型患者在標(biāo)準(zhǔn)治療方案下的SVR率明顯高于基因1型患者，總體來(lái)說(shuō)，即使是攜帶有利于應(yīng)答的IL28B表型的HCV基因1型患者的SVR率仍略低于HCV基因2/3型患者31，提示HCV基因型仍將是治療應(yīng)答的良好預(yù)測(cè)因子。盡管如此，IL28B遺傳變異對(duì)HCV非基因1型患者的抗病毒治療結(jié)局的影響也引起了人們的關(guān)注。 幾項(xiàng)研究明確地表明，IL28B變異與HCV基因1型和

14、4型患者的RVR和SVR密切相關(guān)22,32,33。相反，在對(duì)HCV基因2/3型患者的研究中則有著不同的結(jié)論。Mangia等針對(duì)一個(gè)大樣本的HCV基因2/3型患者進(jìn)行研究，所有患者均接受Peg-IFN-/RBV聯(lián)合治療，根據(jù)治療過(guò)程中是否獲得RVR而決定實(shí)施24W的標(biāo)準(zhǔn)療程或者給予12-24W的治療，并進(jìn)一步分析IL28B多態(tài)性rs12979860對(duì)治療結(jié)果的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，rs12979860既不與標(biāo)準(zhǔn)療程下的RVR和SVR相關(guān)，也不與獲得RVR并僅給予12W治療下的SVR相關(guān)；然而，在那些沒(méi)有獲得RVR并接受24W治療的病人中，攜帶rs12979860CC，CT和TT表型者的SVR率分別為8

15、7%，67%和29%，提示rs12979860與這部分患者的SVR有重要的相關(guān)性34。與Mangia等的報(bào)道不同的是，Sarrazin等發(fā)現(xiàn)，rs12979860不但與HCV基因2/3型患者的RVR相關(guān)，而且與沒(méi)有獲得RVR病人的SVR有相關(guān)性26。其他一些針對(duì)HCV基因2/3型患者的研究得出的結(jié)論與上述兩項(xiàng)研究結(jié)果大致相同，但大多數(shù)研究沒(méi)有顯示出IL28B多態(tài)性與SVR之間的重要相關(guān)性22，24,35-38。值得關(guān)注的是，Sarrazin C等39對(duì)267例HCV基因2/3型歐洲患者的IL28B多態(tài)性rs12979860、rs8099917及rs12980275進(jìn)行檢測(cè)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，攜帶r

16、s12979860 CC表型者獲得了較高的SVR率（87.4%），而攜帶CT和TT表型者的SVR率則分別為70.7%和73.1%，兩者相比，p=0.01；雖然攜帶較好表型（rs8099917 TT和rs12980275 AA）者獲得的SVR率分別達(dá)到80.5%和83.9%，但應(yīng)答不好表型（rs8099917 GG和rs12980275 GG）患者各自的SVR率也分別高達(dá)87.5%和80.0%。這提示對(duì)于HCV基因2/3型患者來(lái)說(shuō)，只有rs12979860 CC表型與SVR相關(guān)。在另外一項(xiàng)針對(duì)HCV基因2/3型患者的對(duì)比研究中，Rauch等也發(fā)現(xiàn)，rs8099917與Peg-IFN-/RBV聯(lián)合

17、治療的療效無(wú)關(guān)聯(lián)性22。 3.3 IL28B單核苷酸多態(tài)性與慢性HCV感染者肝移植后抗病毒療效的關(guān)系。 肝移植術(shù)后丙肝復(fù)發(fā)很常見(jiàn)，而且嚴(yán)重地影響了移植的肝臟和病人的總生存期40，因此，預(yù)防或者治療肝移植后HCV再感染顯得尤為必要。然而，遺憾的是，肝移植患者不但對(duì)Peg-IFN-/RBV聯(lián)合治療的療效有限，而且患者的耐受性也較差。理論上，IL28B單核苷酸多態(tài)性用于對(duì)移植后復(fù)發(fā)型丙型肝炎的管理還存在不確定因素，因?yàn)樵谝浦舱唧w內(nèi)，供者與受者的IL28B基因型可能會(huì)不同。值得重視的是，幾項(xiàng)回顧性研究表明，無(wú)論是供者還是受者的IL28B基因變異都與復(fù)發(fā)型丙型肝炎的抗病毒療效相關(guān)41-43。GCresp

18、o等44對(duì)132例肝移植后丙肝復(fù)發(fā)并接受至少12w Peg-IFN/RBV聯(lián)合治療病人及供者的IL28B基因進(jìn)行分型檢測(cè)。研究發(fā)現(xiàn)，受者IL28B rs12979860 CC表型或rs8099917 TT表型與SVR相關(guān)，而供者IL28B基因型與治療應(yīng)答之間未發(fā)現(xiàn)任何相關(guān)性。然而，值得關(guān)注的是，供體和受體同時(shí)攜帶有良好的IL28B基因型的移植者更有可能獲得SVR（79%），而其他各種基因型組合者的SVR率較低（33%，p=0.001）。在多變量的分析中，rs12979860CC表型（OR 4.2，95%CI 1.4-12.3，p=0.01）、較小的捐獻(xiàn)者年齡（OR 1.03，95%CI 1.0

19、03-1.06，p=0.017）、低病毒載量（OR 2.7，95%CI 1.5-4.8，p=0.001）和應(yīng)用環(huán)孢菌素A用于免疫抑制（OR 4.2，95%CI 1.5-11.7，p=0.005）被確定為SVR的獨(dú)立的基線預(yù)測(cè)因子。攜帶有CC表型和病毒載量小于6.5log10UI/ml的受者有85%的機(jī)會(huì)獲得SVR，這與攜帶CT/TT表型并且病毒載量大于6.5log10IU/ml的病人23%的SVR率相比具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.001）。因此建議：由于當(dāng)前對(duì)HCV感染的肝移植患者再次給予抗病毒的療效差，并且副作用發(fā)生率高，故聯(lián)合檢測(cè)幾個(gè)單獨(dú)的基線指標(biāo)（包括IL28B單核苷酸多態(tài)性在內(nèi)）可以用

20、于幫助指導(dǎo)是否選擇干擾素進(jìn)行治療。 4、IL28B單核苷酸多態(tài)性與慢性HCV感染者抗病毒治療后長(zhǎng)期隨訪中肝癌發(fā)生率的關(guān)系。 肝細(xì)胞癌（HCC）是慢性丙型肝炎后期最嚴(yán)重的一種臨床結(jié)局，由于進(jìn)展隱匿，往往發(fā)現(xiàn)時(shí)即已經(jīng)為中晚期。此時(shí)，患者已經(jīng)失去了最佳的治療時(shí)機(jī)，使得生活質(zhì)量下降及生存周期縮短。有證據(jù)表明，IL28B單核苷酸多態(tài)性不但與HCV感染后的自發(fā)清除及治療誘導(dǎo)的病毒清除相關(guān)，而且與HCV感染后的臨床進(jìn)程相關(guān)31。那么，是否IL28B遺傳變異與慢性丙型肝炎干擾素治療后的HCC的發(fā)生相關(guān)，也引起了人們的關(guān)注，以期藉此對(duì)高危人群給予早期的干預(yù)措施。Y. Asahina等45通過(guò)對(duì)1052例肝穿證實(shí)

21、并應(yīng)用干擾素治療的CHC病人進(jìn)行IL28B多態(tài)性分型檢測(cè)，并采用平均隨訪期為5.4年的Kaplan-Meier法和Cox比例風(fēng)險(xiǎn)分析法來(lái)確定HCC的累積發(fā)病率和患病風(fēng)險(xiǎn)。觀察發(fā)現(xiàn)，IL28B兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)rs8099917和rs12979860間存在連鎖不平衡（98%的一致性）。rs8099917基因型頻率如下：主要的純合子（TT）為72%，雜合子（TG）為27%，次要純合子（GG）為1%。攜帶有TT表型病人的SVR率顯著高于其他表型者（32%對(duì)13%，p0.001），攜帶有TT表型病人給予干擾素治療后5、10和15年HCC的累積發(fā)病率分別為3.4%、5.9%和8.5%，明顯低于攜帶有TG或G

22、G表型者（分別為5.5%、11.7%和15.1%，時(shí)序檢驗(yàn)，p=0.03），即使在無(wú)SVR病人，攜帶TT表型病人HCC的患病風(fēng)險(xiǎn)也相當(dāng)?shù)停≧R：2.5，95%CI：1.3-5.0，p=0.009）。在沒(méi)有獲得SVR病人，rs8099917 TT表型與干擾素治療后ALT和AFP的低水平密切相關(guān)（46對(duì)52IU/ml，p=0.04；5.8對(duì)8.5ng/ml，p0.001）。經(jīng)多變量分析證實(shí)，年齡、性別、肝纖維化和干擾素治療后的ALT或AFP水平是HCC相關(guān)的獨(dú)立的風(fēng)險(xiǎn)因素。因此得出結(jié)論：在沒(méi)有獲得SVR病人，經(jīng)年齡、性別和肝纖維化程度校正后，IL28B基因型與HCC進(jìn)展相關(guān)，這種相關(guān)性是間接的，并

23、且干擾素治療后ALT或AFP水平的下降與IL28B主要純合子相關(guān)，即使沒(méi)有獲得SVR，HCC的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)也顯著降低。5、IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV感染治療新策略的關(guān)系。隨著特異性靶向抗HCV治療藥物HCV NS3-4A蛋白酶抑制劑telaprevir和Boceprevir的即將批準(zhǔn)上市，更多的難治型HCV感染患者有可能接受telaprevir或Boceprevir與peg-IFN/RBV聯(lián)合的三聯(lián)治療策略46,47。其他的特異性靶向治療藥物包括NS5B聚合酶抑制劑、NS5A抑制劑或親環(huán)素A抑制劑（alisporivir）等正處于臨床開(kāi)發(fā)階段38,49。然而，三聯(lián)療法也增加了額外的顯著的副作

24、用和治療成本，因此，特異性靶向治療藥物批準(zhǔn)上市后，IL28B SNPs是否能夠用于篩選哪些病人更適合于接受三聯(lián)治療將具有十分重要的臨床意義。已有研究者提供了IL28B遺傳變異對(duì)三聯(lián)治療應(yīng)答預(yù)測(cè)價(jià)值的初步數(shù)據(jù)。Akuta等近期在日本人群中針對(duì)高病毒載量基因1b型HCV感染者進(jìn)行了一項(xiàng)關(guān)聯(lián)分析，對(duì)12w的telaprevir / peg-IFN / RBV的三聯(lián)治療及12w上述三聯(lián)治療后又繼續(xù)peg-IFN / RBV聯(lián)合治療12w的兩組患者進(jìn)行了評(píng)價(jià)，研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)12w和24w治療后，各自的總體SVR率分別為45%和67%；而且，三聯(lián)治療后，與rs8099917的GT/GG表型及rs12979

25、860的CT/TT表型相比，TT及CC表型攜帶者獲得SVR的機(jī)會(huì)均要超出2倍以上；值得關(guān)注的是，在這些受試者中，大多數(shù)病人都是先前治療無(wú)應(yīng)答者和復(fù)發(fā)者，這提示IL28B在這個(gè)特定人群中可能發(fā)揮著重要的作用，并可能對(duì)復(fù)治患者的療效預(yù)測(cè)具有重要價(jià)值49。相比之下，在針對(duì)另外一個(gè)HCV蛋白酶抑制劑TMC435聯(lián)合peg-IFN / RBV的三聯(lián)治療的研究發(fā)現(xiàn)，IL28B單核苷酸多態(tài)性對(duì)治療期間的病毒動(dòng)力學(xué)影響極小50。然而，一項(xiàng)針對(duì)IL28B遺傳變異與非核苷類HCV聚合酶抑制劑ANA598聯(lián)合peg-IFN / RBV的三聯(lián)治療的研究中，Muir AJ等51發(fā)現(xiàn)，與rs12979860CT/TT相比

26、，CC表型攜帶者獲得RVR的幾率更高（80%對(duì)31%），提示IL28B遺傳變異與聯(lián)合ANA598的三聯(lián)治療期間早期病毒學(xué)應(yīng)答密切相關(guān)。IL28B遺傳變異與標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)治療期間的早期病毒動(dòng)力學(xué)密切相關(guān)。理論上，這一發(fā)現(xiàn)暗示了攜帶有較差應(yīng)答的IL28B等位基因的患者對(duì)特異性靶向治療藥物存在較高的耐藥風(fēng)險(xiǎn)，故此，尚需更多的臨床和基礎(chǔ)研究對(duì)此進(jìn)行闡述，以期對(duì)后續(xù)的特異性靶向治療藥物的耐藥管理奠定基礎(chǔ)。6、IL28B單核苷酸多態(tài)性與慢性HCV感染自然病程的關(guān)系除在HCV自發(fā)性清除和治療誘導(dǎo)的病毒清除中具有顯著的作用外，IL28B遺傳變異似乎對(duì)HCV感染后的自然病程也有不同程度的影響。在一項(xiàng)全基因組關(guān)聯(lián)分析中

27、，Ge等發(fā)現(xiàn)，IL28B良好應(yīng)答表型不但與治療誘導(dǎo)的病毒清除相關(guān)，而且，也與較高的基線病毒載量水平相關(guān)21。其他幾項(xiàng)包括針對(duì)HCV基因1、2、3和4型患者的研究中，研究人員也進(jìn)一步證實(shí)了Ge等的結(jié)論22,24,26,33。然而，Thompson等對(duì)納入研究的患者根據(jù)血清HCVRNA載量進(jìn)行分組（界值為600,000IU/ml）分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IL28B基因型在高HCVRNA載量組和低HCVRNA載量組的分布頻率大致相同52。這個(gè)研究結(jié)果，可能解釋了為什么IL28B變異和基線病毒載量都是CHC患者抗病毒療效獨(dú)立可靠的預(yù)測(cè)因子的原因。另有研究表明，具有良好應(yīng)答的IL28B變異也與肝臟更嚴(yán)重的壞死性

28、炎癥活動(dòng)、以及較高的血清ALT和AST水平相關(guān)26,53。這些發(fā)現(xiàn)可能提示，具有良好的IL28B應(yīng)答表型患者對(duì)HCV有更顯著的免疫應(yīng)答反應(yīng)，尤其是適應(yīng)性免疫應(yīng)答，這是由于IL28B的良好應(yīng)答變異與ISGs的低水平表達(dá)相關(guān)53。IL28B遺傳變異與肝纖維化間的潛在關(guān)聯(lián)目前尚無(wú)定論。在一項(xiàng)大型的全基因組關(guān)聯(lián)分析中，研究人員發(fā)現(xiàn)，IL28B變異與肝纖維化程度沒(méi)有相關(guān)性54。然而，在來(lái)自瑞士的一項(xiàng)丙肝隊(duì)列研究中，研究人員對(duì)超過(guò)600例未經(jīng)治療的患者進(jìn)行配對(duì)肝活檢，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，具有良好應(yīng)答型IL28B變異患者的肝纖維化進(jìn)程明顯加速（Pierre-Yves Bochud未公布的信息）31。而來(lái)自Fabris

29、等人55的研究發(fā)現(xiàn)：丙型肝炎后肝硬化患者較其他原因（包括乙型肝炎）所致肝硬化患者及慢性輕度丙型肝炎患者攜帶IL28B多態(tài)性rs12979860 T等位基因的幾率更高；伴有肝癌的肝硬化患者rs12979860 T 等位基因頻率較不伴有肝癌的肝硬化患者要高出很多(P0.005)?？傮w來(lái)說(shuō),攜帶CC表型的患者在非病毒性肝硬化組、病毒性肝硬化組、不合并肝癌的非病毒性肝硬化組和合并肝癌的病毒性肝硬化組中所占的比例是依次減少的。此外，也有人對(duì)與CHC患者相關(guān)的代謝異常與IL28B基因型進(jìn)行相關(guān)性分析。在一項(xiàng)研究中，Li JH等發(fā)現(xiàn)，rs12979860 CC表型與HCV感染者體內(nèi)血清中高水平的低密度脂蛋白

30、（LDL）及其他血脂參數(shù)密切相關(guān)56。另有研究表明，具有良好應(yīng)答型IL28B變異的CHC患者，其脂肪肝的發(fā)生率明顯低于應(yīng)答不好表型的IL28B變異者57。干擾素能夠降低血清膽固醇及其他脂類代謝產(chǎn)物水平，良好應(yīng)答型IL28B變異與血清中較高的LDL及膽固醇水平相關(guān)，因此提示，在治療前，這些患者體內(nèi)干擾素的活性較低58。有關(guān)IL28B遺傳變異與CHC患者相關(guān)的代謝異常間的具體機(jī)制尚不清楚，有待于深入的研究加以探討。7、IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV感染轉(zhuǎn)歸關(guān)系的生物學(xué)機(jī)制目前為止，有關(guān)IL28B單核苷酸多態(tài)性與HCV感染自發(fā)清除及治療誘導(dǎo)的病毒清除間的具體生物學(xué)機(jī)制尚不清楚。 有研究者推測(cè)，目前

31、已經(jīng)鑒定出的最具相關(guān)性的rs12979860和rs8099917存在著連鎖不平衡（在亞洲和高加索人群），并且均位于IL28B基因起始密碼子上游（分別位于IL28B上游的約3kb和8kb處）21,22，而不是位于IL28B基因的編碼區(qū)，因此可能只是影響了IL28B的轉(zhuǎn)錄，并因而影響IL28B的表達(dá)水平。其他一些有潛在作用的SNPs也被鑒定出來(lái)，這其中包括位于IL28B基因第2外顯子的一個(gè)非同義SNP（rs8103142）21，這個(gè)多態(tài)性導(dǎo)致了單個(gè)氨基酸的置換（70位的賴氨酸被精氨酸取代），因此可能潛在地影響了IL28B的功能，包括受體結(jié)合，或者蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性等。Ge等對(duì)未感染HCV的志愿者外周血

32、單核細(xì)胞中IL28BmRNA水平進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)IL28B多態(tài)性rs12979860與IL28BmRNA水平之間沒(méi)有相關(guān)性21。Tanaka等對(duì)一個(gè)包含20個(gè)患者的小樣本病例進(jìn)行研究，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)外周血單核細(xì)胞中IL28BmRNA水平，研究發(fā)現(xiàn)，攜帶rs8099917較差應(yīng)答型等位基因純合子患者的IL28BmRNA呈低水平表達(dá)29。在另外一個(gè)對(duì)沒(méi)有感染HCV的有限病例的研究中，Suppiah等也發(fā)現(xiàn)，攜帶有rs8099917較差應(yīng)答等位基因者的IL28A和IL28B呈低水平的組成性表達(dá)（p=0.044）30。因此，有關(guān)不同IL28B表型患者IL28B表達(dá)水平方面的研究結(jié)論仍然存在著

33、嚴(yán)重的分歧，尚需進(jìn)一步的研究加以確認(rèn)。 在最近的一項(xiàng)研究中,Honda等59發(fā)現(xiàn)，在慢性HCV感染患者，rs8099917應(yīng)答不好的基因型與抗病毒治療前患者體內(nèi)的干擾素刺激基因(ISGs)高表達(dá)相關(guān),并且最終表現(xiàn)為治療失敗。值得關(guān)注的是，先前的研究結(jié)果顯示，基于IFN-治療的治療前高水平ISG表達(dá)往往導(dǎo)致應(yīng)答緩慢或者治療無(wú)應(yīng)答60,61。因此，有研究人員嘗試從IL28B分子水平與ISGs的角度來(lái)解釋因IL-28B遺傳變異所導(dǎo)致的HCV感染后臨床結(jié)局的不同。研究指出，攜帶有保護(hù)性IL28B基因型者，發(fā)生急性HCV感染后，在HCV及內(nèi)源性IFN-的誘導(dǎo)下，IL28B分子表達(dá)水平較高，因而上調(diào)ISG

34、s的表達(dá)，從而有利于HCV感染后的自發(fā)性清除；而對(duì)于慢性HCV感染者來(lái)說(shuō)，ISGs的產(chǎn)生是由內(nèi)源性IFN-的低水平表達(dá)來(lái)調(diào)控的，良好應(yīng)答型的IL28B變異與慢性HCV感染者體內(nèi)的ISGs低水平產(chǎn)生密切相關(guān)，攜帶有保護(hù)性IL28B基因型者，高表達(dá)的IL28B分子水平進(jìn)一步協(xié)同外源性IFN-來(lái)上調(diào)肝組織中原本呈低水平表達(dá)的ISGs，從而產(chǎn)生HCV感染對(duì)干擾素治療的良好應(yīng)答62。但是，最近的一項(xiàng)研究結(jié)果顯示，IL28B基因型與ISGs的表達(dá)無(wú)關(guān)，兩者均可獨(dú)立地預(yù)測(cè)慢性丙型肝炎的抗病毒治療應(yīng)答，而且肝組織內(nèi)ISG比IL28B的表型能更好地預(yù)測(cè)患者對(duì)抗病毒治療的應(yīng)答效果63。 隨著研究的不斷深入，闡明這

35、些機(jī)制將是十分關(guān)鍵的，因?yàn)檫@可以進(jìn)一步加深對(duì)IL28家族在HCV感染及治療中的作用的理解。8、結(jié)語(yǔ)綜上所述，宿主IL28B SNPs是HCV基因1型患者治療前的重要預(yù)測(cè)因子，但對(duì)基因2/3型患者來(lái)說(shuō)，IL28B SNPs對(duì)SVR的預(yù)測(cè)價(jià)值還不確定，且只有一個(gè)SNP rs12979860與SVR有相關(guān)性。與此同時(shí)，初步的數(shù)據(jù)表明，IL28B遺傳變異不但對(duì)肝移植后的丙肝復(fù)發(fā)再治療有預(yù)測(cè)價(jià)值，而且對(duì)新的治療策略（包含直接抗病毒藥物在內(nèi)的三聯(lián)治療）也有重要的影響?；谶@些發(fā)現(xiàn)，IL28BSNPs在將來(lái)對(duì)CHC患者的管理中可能發(fā)揮關(guān)鍵的作用，尤其是有利于最佳治療方案的制定和個(gè)體化治療時(shí)間的確定，這將是慢

36、性丙肝治療史上的一個(gè)突破。有關(guān)IL28B遺傳變異與HCV感染自然病程間關(guān)系的研究及其與HCV感染臨床轉(zhuǎn)歸關(guān)系的機(jī)制上的研究盡管尚無(wú)定論，但也正在不斷的深入，這無(wú)疑很好地推進(jìn)了IFN-s在丙型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用的基礎(chǔ)研究，為進(jìn)一步加深對(duì)HCV感染免疫遺傳機(jī)制的理解及新的HCV治療藥物的研發(fā)提供廣闊的思路。 參考文獻(xiàn)：1 Sheppard P, Kindsvogel W, Xu W, et al. IL-28，IL-29 and their class cytokine receptor IL-28R. Nature Immunol，2003; 4(l): 63-68. 2 Kotekno SV

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