紫外分光光度法測(cè)定米非司酮血藥濃度

1、    紫外分光光度法測(cè)定米非司酮血藥濃度        摘要目的：介紹應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定米非司酮血藥濃度的方法。方法：以氯仿為提取液，甲醇為溶媒，在304 nm處進(jìn)行測(cè)定。血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍424 g.ml-1(r=0.999 7)。結(jié)果：平均回收率(93.3±4.6)%，RSD日內(nèi)(2.1±0.8)%，RSD日間(3.1±0.4)%。應(yīng)用該法對(duì)10例孕婦進(jìn)行米非司酮血藥濃度測(cè)定，其濃度在1020 g*ml-1之間。結(jié)論：分析結(jié)果表明該方

2、法簡(jiǎn)便可行。關(guān)鍵詞米非司酮，紫外分光光度法，血藥濃度Determination of mifepristone in human plasma by UV-spectrophotometryXiong Fengying, Jian Jie, Zhou Shuqun,et al(Liuzhou Workers Hospital, Guangxi 545005)Determination of mifepristone in plasma by UV-spectrophotometry was described. Trichloromethane was used as extraction s

3、olvent, methyl alcohol as solvent. The linear range was 424 g.ml-1 (r=0.999 7). The average recovery was (93.3±4.6)%, The RSD of within-day was 2.1%, and between-day was 3.1%. UV detection wavelength was 304 nm. The results showed that this method was simple and feasible.Key wordsmifepristone,

4、UV-spectrophotometric method, blood concentration抗早孕新藥米非司醇(Mifepristone,RU486)用于臨床以來(lái)，具有良好的抗早孕效果1.2。圍繞其臨床藥理亦出現(xiàn)了不少的研究報(bào)道3.4.5。本文探討了以紫外分光光度法測(cè)定米非司酮血藥濃度的方法，現(xiàn)報(bào)道如下。1儀器、試劑與試藥1.1儀器日本島津UV-2401紫外分光光度計(jì)；XW-80型旋渦混合器(上海第一醫(yī)學(xué)院儀器廠)；80-2型離心沉淀器(上海手術(shù)器材廠)。 1.2試劑無(wú)水乙醇；三氯甲烷；甲醇(均為分析純)。1.3試藥國(guó)產(chǎn)全合成米非司酮片劑(每片含25 mg米非司酮，北京第三制藥廠，批號(hào)9

5、60502)。2試驗(yàn)方法2.1片劑中米非司酮的提取和提純片劑中米非司酮的提取取米非司酮2片，置乳缽中研磨細(xì)，加10 ml氯仿提取兩次，過(guò)濾，收集濾液，再用氯仿蕩洗試管及沖洗濾紙，合并濾液及洗液，于55°C左右水浴蒸發(fā)，得黃色米非司酮粗提物。將粗提物加入少量新鮮蒸餾水，滴加稀鹽酸，輕搖使提取物完全溶解，過(guò)濾，容器再用少量蒸餾水蕩洗兩次，合并洗濾液，用氫氧化鈉試液調(diào)pH10左右，用氯仿20 ml分兩次進(jìn)行萃取。取氯仿液于55°C左右水浴蒸干，得黃色米非司酮提純物。經(jīng)掃描測(cè)定在波長(zhǎng)304 nm處有最大吸收峰，見(jiàn)附。附米非司酮的紫外譜2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作與回收率試驗(yàn)2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

6、制作精密稱定米非司酮純品適量，加甲醇溶解并稀釋成濃度為0.4 mg.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。另取6份各1 ml空白血漿，分別加入米非司酮標(biāo)準(zhǔn)液50，100，150，200，250，300 l，振蕩混勻后靜置2 min，以無(wú)水乙醇沉淀血漿蛋白，離心，過(guò)濾上清液，以少量無(wú)水乙醇分次清洗蛋白沉淀，過(guò)濾，合并濾液于80°C90°C水浴蒸至無(wú)乙醇味，取出放冷，加0.1 mol.L-1氫氧化鈉0.2 ml，氯仿5 ml，振蕩回提，吸取氯仿層于另一試管，于70°C80°C水浴蒸干。最后加甲醇5 ml，混勻，以空白血漿提取液為空白，在304 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。以濃度(C

7、)對(duì)吸收度(A)作直線回歸，得回歸方程：A=0.0 473C-0.0 511(r=0.999 7)，血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍424 g.ml-1。本法測(cè)定最低檢測(cè)濃度為4 g.ml-1。2.2.2回收率試驗(yàn)取空白血漿1 ml加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(8，16，24 g)，混勻，按2.2.1法操作，在波長(zhǎng)304 nm處測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。表 1回收率和精密度試驗(yàn)結(jié)果(n=6)加入量g回收率%日內(nèi)誤差RSD/%日間誤差RSD/%896.8±3.22.33.41695.1±2.52.22.72488.0±2.11.83.2±s93.3±4.62.1±

8、0.83.1±0.42.3孕婦米非司酮血藥濃度測(cè)定2.3.1受試者及給藥方法10位健康女性，年齡2030歲。經(jīng)確診處于妊娠期，為正常宮內(nèi)妊娠，孕周7周。自愿來(lái)我院實(shí)施藥物流產(chǎn)，經(jīng)檢查后，均采用米非司酮藥物流產(chǎn)法。受試者口服米非司酮50 mg.d-1,bid，連服3 d，第4 d早晨靜脈取血23 ml，肝素抗凝，離心，取血漿待測(cè)。2.3.2米非司酮紫外分析取1 ml血漿樣品，按標(biāo)準(zhǔn)曲線步驟提取稀釋后，以甲醇為空白(血漿甲醇空白校正值A(chǔ)為0.099)，以紫外分光度法于304 nm波長(zhǎng)處測(cè)定，計(jì)算時(shí)將實(shí)測(cè)A減去校正值A(chǔ)，代入回歸方程，10例孕婦測(cè)定及計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表2。 3討論3.1米非司酮回

9、歸方程顯示藥物濃度與吸收度之間線性良好(r=0.999 7)，平均回收率(93.3±4.6)%；重現(xiàn)性也良好，RSD日內(nèi)為2.1%，RSD日間為3.1%，說(shuō)明本法是可行的。表 210例孕婦血藥濃度的測(cè)定結(jié)果受試者年齡/歲AC/g*ml-11270.19615.662280.17513.443300.16612.484230.22819.045230.18013.966230.22218.407240.24020.318230.19415.449230.18814.8110260.16011.80±s25.0±2.60.2±0.0315.5±2.

10、73.2米非司酮在體內(nèi)主要代謝產(chǎn)物有去單甲基米非司 酮(RU42633)，去雙甲基米非司酮(RU42848)和羥基米非司酮(RU42698)等三種6.7。本方法測(cè)定含量為米非司酮及其三種代謝產(chǎn)物的總量。用紫外分光光度法測(cè)定10例孕婦的血藥濃度為1020 g.ml-1。 作者單位：廣西柳州市工人醫(yī)院柳州545005參考文獻(xiàn)1吳尚純，高紀(jì).抗孕激素RU486抗早孕.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，1990，6(6)：2832林新中.米非司酮臨床應(yīng)用進(jìn)展.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，1994，14(8)：3713石建平，蘇賈譜，朱艷霞.兩種國(guó)產(chǎn)米非司酮片劑的相對(duì)生物利用度研究.同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)報(bào)，1993，22(6)：4274劉金茂，宋維葵.抗早孕新藥米非司酮的藥理作用及臨床應(yīng)用.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，1994(1)：325賀昌海.RU486