高考生物總復(fù)習(xí)生物技術(shù)實(shí)踐微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課下作業(yè)新人教版

1、專題課件第39講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用【課下作業(yè)】1(2018·泰安一模)多氯聯(lián)苯是一種對(duì)人體有很大危害的有機(jī)物，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除。研究發(fā)現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用，為消除這種污染，科研人員計(jì)劃從受污染的土壤中篩選出可以分解多氯聯(lián)苯的菌株。據(jù)此回答下列問題：(1)篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品_，接種到以_為唯一的碳源培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_。(2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行_，一般操作方法有兩種，如圖是_法。(3)若要測定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)，可在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)。若用_法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，

2、這樣做的目的是_。(4)將1 mL酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58，據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為_。解析：(1)依題意可知：篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋(溶解)接種到以多氯聯(lián)苯為唯一的碳源培養(yǎng)基上。在該培養(yǎng)基中，只有能降解多氯聯(lián)苯的微生物才能生長，而其他微生物則不能生長，所以從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行純化。如圖采用的操作方法是平板劃線法。(3)若要測定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可選用稀釋涂布平板(或涂布平板)

3、法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是：檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功(倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌)。(4)將1 mL酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58，據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為( 565758)÷3÷0.1×100×1035.7×107個(gè)。答案：(1)稀釋(溶解)多氯聯(lián)苯選擇培養(yǎng)基(2)純化平板劃線(3)稀釋涂布平板(或涂布平板) 檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功(倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌)

4、(4)5.7×1072(2018·湖南長郡中學(xué)模擬)急性腸胃炎是由細(xì)菌通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的。因此檢驗(yàn)飲用水中細(xì)菌的含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問題：(1)在檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，該小組將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為44、43和42，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。但通常計(jì)算出來的活菌數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是_。(2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要對(duì)照組？_。為什么？_。(3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌：培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；玻璃棒、試

5、管和燒瓶；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要消毒的是_，需要滅菌的是_。(4)下圖所示的四種菌落分布中，不可能由稀釋涂布平板法得到的是_。(5)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具有塞子的試管，應(yīng)如何判斷水樣中是否有大腸桿菌？_。解析：(1)由題意知1 mL水樣中的菌落數(shù)是(444342)÷3÷0.1×1004.3×104個(gè)，每升水樣中的活菌數(shù)為4.3×104×1034.3×107個(gè)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落導(dǎo)致通常計(jì)算出來的活菌數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低；(2)因?yàn)?/p>

6、需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)，所以用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要對(duì)照組；(3)在使用操作過程中，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手應(yīng)當(dāng)進(jìn)行消毒，培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿應(yīng)當(dāng)進(jìn)行滅菌，玻璃棒、試管、燒瓶和吸管等玻璃器皿應(yīng)當(dāng)進(jìn)行干熱滅菌；(4)題干所述方法為稀釋涂布平板法。據(jù)圖分析，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿的菌落分布均勻，應(yīng)該屬于稀釋涂布平板法得到的，D屬于平板劃線法接種得到的，不可能由稀釋涂布平板法得到，故選D；(5)通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測水樣，再注入適量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，塞上塞子，混勻后置于37 恒溫箱培養(yǎng)24 h。若試管內(nèi)有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌，否則，說明水

7、樣中無大腸桿菌。答案：(1)4.3×107當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(2) 需要 因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(3) (4)D(5)通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測水樣，再注入適量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，塞上塞子，混勻后置于37 恒溫箱中培養(yǎng)24 h。若試管內(nèi)有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌，否則，說明水樣中無大腸桿菌3(2018·襄陽調(diào)研)生活飲用水經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致

8、生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。我國生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB574985)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，大腸桿菌不得大于3個(gè)/L。據(jù)此回答下列問題：(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為_。(2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？為什么？_。(3)如分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿

9、菌數(shù)為_個(gè)。(4)純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用_法滅菌，_(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止雜菌污染。(5)如果要測定水中的病毒種類，可以用_技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用_技術(shù)進(jìn)行鑒定。答案：(1)稀釋涂布平板法(2)需要。因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被污染(3)1.61×108(4)高壓蒸汽滅菌不可(5)PCRDNA分子雜交4(2018·石家莊一模)“節(jié)約一張紙，增添一片綠”。紙的主要成分是木質(zhì)纖維，以纖維素類物質(zhì)生產(chǎn)燃料乙醇的研究越來越受重視。據(jù)此回答下列問題：(1)該技術(shù)需要從土壤中獲得纖維素分解菌，獲得該菌的方法是在含有纖維素的培養(yǎng)基上加入_染料，篩選周圍有

10、_的菌落。其產(chǎn)生的分解纖維素的酶至少包括_三種組分，在這三種酶協(xié)同作用下，纖維素最終被水解成_。(2)用獲得的糖液發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，常用的微生物是_，在_的發(fā)酵液中，該菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物受到抑制。發(fā)酵過程中檢測該菌數(shù)量可采用_法計(jì)數(shù)，示意圖A和B中，圖_表示的是用該法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。答案：(1)剛果紅透明圈C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶葡萄糖(2)酵母菌缺氧呈酸性稀釋涂布平板B5(2018·貴州貴陽模擬)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的­淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。請(qǐng)回答下列問題

11、：(1)自然界中獲取的微生物，必須經(jīng)過_后才能應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。(2)圖甲中，過程的選擇、接種需要重復(fù)幾次的目的是_。(3)某同學(xué)嘗試過程的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_；推測該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是_。(4)在微生物的培養(yǎng)過程中，需將培養(yǎng)皿_放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以防止冷凝水影響酵母菌的生長。(5)若以淀粉為原料，在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵時(shí)，相對(duì)于普通酵母菌菌種，接種工程酵母菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是_。(6)上述工程酵母菌培養(yǎng)過程中，下列有關(guān)操作錯(cuò)誤的是_。A接種工具用酒精燈火焰灼燒進(jìn)行滅菌B配制好的培養(yǎng)基分裝到錐形瓶后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C倒平板和取

12、菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行D獲得的菌種如果需要保藏，可置于37 ，恒溫保藏解析：(1)自然界中的微生物需要經(jīng)過分離和純化后才能應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。(2)圖甲中，過程需重復(fù)幾次，其作用在于“純化”，從而進(jìn)一步篩選出分解淀粉能力更強(qiáng)的酵母菌。(3)圖乙所示培養(yǎng)基平板中的菌落呈分散分布，是采用稀釋涂布平板法接種的結(jié)果；然而該平板上的菌落并非“均勻分布”而是相對(duì)集中于左上側(cè)，這可能是由于制作平板時(shí)“涂布不均勻”所致。(4)在微生物的培養(yǎng)過程中，需將平板倒過來放置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以防止冷凝水影響酵母菌的生長。(5)若以淀粉為原料，則相對(duì)于普通菌種，由于工程酵母菌因轉(zhuǎn)入了­淀粉酶基因，其利用淀

13、粉的能力將更強(qiáng)，故發(fā)酵產(chǎn)生CO2的能力更強(qiáng)，因此需要先排氣。(6)菌種的保藏方法是在4 的冰箱中臨時(shí)保藏或在20 的冷凍箱中長期保藏，D錯(cuò)誤；接種工具用酒精燈火焰灼燒進(jìn)行滅菌、配制好的培養(yǎng)基分裝到錐形瓶后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌、倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行等，都是實(shí)驗(yàn)過程中的無菌操作，A、B、C正確。答案：(1)分離和純化 (2)篩選出可以高效利用淀粉的工程酵母菌菌種 (3)稀釋涂布平板法涂布不均勻 (4)倒置 (5)工程酵母菌能夠高效利用淀粉，發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速度很快 (6)D6(2018·河北唐山模擬)蛋白酶在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。某同學(xué)為篩選產(chǎn)蛋白

14、酶的高產(chǎn)菌株，做了如下實(shí)驗(yàn)步驟(配制了下列培養(yǎng)基，在適宜條件下培養(yǎng))。據(jù)此回答下列問題：步驟取樣培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果土壤樣品葡萄糖，(NH4)2SO4，K2HPO4·3H2O，KH2PO4，NaCl，CaCl2，MgSO4·7H2O，加水定容培養(yǎng)液a1 mL培養(yǎng)液a同上菌落挑取單菌落細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)液b(1)為實(shí)現(xiàn)篩選目的，步驟所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除_并加入高濃度的_。(2)為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入_制成平板，采用的接種方法是_，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖A。(3)步驟應(yīng)挑取圖A中_處的菌落，本步驟的目的是_。(4)圖B是該蛋白酶和其他酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在

15、不同溫度下保溫足夠長的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在6070 保溫一定時(shí)間，其作用是_。解析：(1)培養(yǎng)基中添加特定的成分以促進(jìn)需要的微生物生長而抑制其他微生物生長，用于進(jìn)行微生物篩選；根據(jù)題意，為篩選產(chǎn)蛋白酶的高產(chǎn)菌株，步驟所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除葡萄糖并加入高濃度的蛋白質(zhì)。(2)為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入瓊脂(凝固劑)制成平板，采用的接種方法是稀釋涂布平板法。(3)圖A中a處的菌落透明圈最大，故其菌種分解蛋白質(zhì)的能力最強(qiáng)，所以步驟應(yīng)挑取圖A中a處的菌落，本步驟的目的是快速增加目的菌的種群數(shù)量(即擴(kuò)大培養(yǎng)

16、)。(4)圖B曲線表明，6070 條件下，蛋白酶的活性很高而此時(shí)其他酶的活性很低，因此在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在6070 保溫一定時(shí)間，其作用是可大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性。答案：(1)葡萄糖蛋白質(zhì)(2)瓊脂稀釋涂布平板法(3)a快速增加目的菌的種群數(shù)量(擴(kuò)大培養(yǎng))(4)大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性7(2018·安徽淮北模擬)類胡蘿卜素中的胡蘿卜素是一種常用的色澤鮮艷、對(duì)人體有益的天然色素類食品添加劑，且類胡蘿卜素可從微生物體中獲取。下圖為篩選獲得高產(chǎn)紅酵母菌菌種的過程，下表為篩選培養(yǎng)過程中獲得的部分?jǐn)?shù)據(jù)(表中細(xì)胞生物量是指培養(yǎng)期間單位體積內(nèi)所含的生物個(gè)體總

17、量)。請(qǐng)分析回答下列問題：紅酵母菌在不同的培養(yǎng)基中類胡蘿卜素產(chǎn)量菌種培養(yǎng)基成分細(xì)胞生物量(g/L)類胡蘿卜素含量(mg/g)類胡蘿卜素產(chǎn)量(mg/L)a葡萄糖2.426.0162.4b甘蔗汁9.21.917.5c泥炭提取物4.81.2616.03(1)酵母菌不具有的結(jié)構(gòu)有_(填“擬核”“芽體”“葉綠體”或“細(xì)胞壁”)。(2)圖中過程的目的是_。為獲得單菌落，可采用_法，通過接種環(huán)將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上后連續(xù)劃線培養(yǎng)，接種時(shí)需要先進(jìn)行的操作是_。(3)表中顯示的培養(yǎng)基成分是為紅酵母菌生長提供_，圖中過程的目的是_。(4)根據(jù)上表信息，你認(rèn)為進(jìn)一步提高高產(chǎn)紅酵母菌類胡蘿卜素產(chǎn)量的有效措施是_

18、。解析：(1) 酵母菌屬于真核生物，擬核是原核細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)，葉綠體是綠色植物特有的細(xì)胞器，酵母菌都沒有，但是在出芽生殖的過程中會(huì)產(chǎn)生芽體，并且具有細(xì)胞壁。(2)過程的目的是人工誘變(提高紅酵母菌的突變率)。為獲得單菌落，可采用平板劃線法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上，接種時(shí)需要對(duì)接種環(huán)滅菌處理，即先進(jìn)行的操作是灼燒接種環(huán)并冷卻。(3)表中葡萄糖、甘蔗汁以及泥炭提取物等均為酵母菌生長提供碳源，圖中過程的目的是篩選出培養(yǎng)獲得的高產(chǎn)紅酵母菌的最適宜培養(yǎng)基。(4)根據(jù)以上圖表信息，為進(jìn)一步提高高產(chǎn)紅酵母菌類胡蘿卜素產(chǎn)量的有效措施是優(yōu)化培養(yǎng)基。答案：(1)擬核、葉綠體 (2)人工誘變(提高紅酵母菌的突變率)平板劃線灼燒接種環(huán)并冷卻(3)碳源篩選出最適宜的用于培養(yǎng)高產(chǎn)紅酵母菌的培養(yǎng)基(4)優(yōu)化培養(yǎng)基8(2018·福建廈門第一中學(xué)模擬)羧甲基纖維素鈉(CMC)是常用的食品添加劑，不能被人體消化吸收，因此通常被認(rèn)為是安全的食品添加劑。研究者用含1.0%CMC無菌水作為飲用水，連續(xù)飼喂實(shí)驗(yàn)小鼠12周，測定小鼠體重，結(jié)果如圖1、圖2所示。據(jù)此回答下