水曲柳中香豆素類成分的研究

1、水曲柳中香豆素類成分的研究        【摘要】     目的研究水曲柳皮的香豆素類成分。方法對(duì)水曲柳皮95%乙醇提取物的醋酸乙酯部分和正丁醇部分進(jìn)行色譜分離，通過理化性質(zhì)和波譜分析鑒定其化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從水曲柳皮中分得8個(gè)香豆素類成分，分別鑒定為fraxinol(), isofraxidin(), fraxetin(), aesculetin(), mandshurin(), isofraxidin-D- glucoside(), fraxin(), isos

2、copoletin-D-glucoside()。結(jié)論，均為首次從水曲柳皮中分離得到。     【關(guān)鍵詞】  水曲柳; 香豆素; 化學(xué)成分    Study on the Chemical Constituents from the Bark of Fraxinus mandschurica Rupr.CHEN Yujuan1, WANG Huitang1,HE Lipeng2, ZHANG Honggui3, YIN Jinling1(1. College of Life Science, Changch

3、un University of Science and Technology, Changchun 130022, China;2. Pharmacological College, Jilin University, Changchun 130021, China;3. College of Traditional Chinese Pharmacology, Beijing University of Traditional of Chinese Medicine, Beijing, 100102, China)Abstract：ObjectiveTo investigate the ch

4、emical constituents from Fraxinus mandschurica Rupr. MethodsThe constituents of the EtOAc-solube portion and normal butanol solube portion in the 95% ethanol extract were isolated and purified by means of chromatography. Compounds were identified by their physical characteristics and spectral featur

5、es. ResultsEight compounds were isolated and identified as fraxinol(), isofraxidin(), fraxetin(), aesculetin(), mandshurin(), isofraxidin-D-glucoside(), fraxin(), isoscopoletin-D-glucoside(). ConclusionCompounds, , , , and are isolated for the first time from Fraxinus mandschurica Rupr.Key words：Fra

6、xinus mandschurica Rupr.; Coumarins; Chemical constituents水曲柳Fraxinus mandschurica Rupr.是木樨科梣屬植物，民間用其樹皮治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕、骨痛等疾病，作用療效確切，而對(duì)其化學(xué)成分的基礎(chǔ)研究較少，所以本實(shí)驗(yàn)選擇水曲柳皮作為研究對(duì)象，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了分析。從水曲柳樹皮的95%乙醇提取液提取物中分離得到8個(gè)香豆素類化合物，根據(jù)理化常數(shù)和光譜分析，鑒定為fraxinol(), isofraxidin(), fraxetin(), aesculetin(), mandshurin(), isofraxidin-D-

7、glucoside(), fraxin(), isoscopoletin-D-glucoside()。，均為首次從水曲柳皮中分離得到。1 儀器與材料1.1 儀器與試劑X-4數(shù)字顯微熔點(diǎn)測定儀(北京福凱儀器有限公司);柱層析硅膠(200-300目)和GF254為青島海洋化工產(chǎn)品;其余試劑均為分析純(北京化工)。1.2 樣品水曲柳采自長白山，經(jīng)吉林大學(xué)藥學(xué)院張靜敏教授鑒定為水曲柳Fraxinus mandschurica Rupr.。2 方法與結(jié)果2.1 提取與分離 水曲柳皮10 kg，粉碎，95%乙醇加熱回流提取3次，2 h/次，濾過，合并濾液，減壓濃縮回收溶劑，至小體積。濃縮液用水混懸后，依次

8、用乙醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。取醋酸乙酯部分50g，用石油醚-醋酸乙酯體系進(jìn)行硅膠柱層析，分段收集，共分離出4個(gè)簡單香豆素類化合物。取正丁醇層100g，用氯仿-甲醇-水體系進(jìn)行硅膠柱層析，分段收集，共分離4個(gè)香豆素苷類化合物。2.2 結(jié)構(gòu)鑒定分離所得的化合物結(jié)構(gòu)見圖1。化合物：黃色針狀結(jié)晶(MeOH)，mp.171172。TLC薄層板置紫外燈下(365 nm)顯弱黃色熒光。異羥肟酸鐵反應(yīng)陽性，表示有內(nèi)酯環(huán)存在;FeCl3 反應(yīng)陽性(墨綠色)，表示有酚羥基存在;判斷為香豆素類化合物。ESI-MS m/s:245.3 M+Na+，分子C11H10O5。 1H-NMR (DMSO-d6)g：9.02

9、(1H, brs, OH)，7.95(1H, d, J=9.66 Hz, 4-H)，6.84(1H, s, 8-H)，6.23(1H, d, J=9.66 Hz, 3-H)，3.85(3H, s, -OCH3)，3.82(3H, s, -OCH3 ); 13C-NMR(DMSO-d6) g：161.4(2-C)，153.8(7-C)，148.6(9-C)，143.7(5-C)，140.0(44-C)，136.5(6-C)，112.9(3-C)，107.5(10-C)，96.2(8-C)，61.97(-OCH3)，57.22(-OCH3)。根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)，對(duì)照文獻(xiàn)1，鑒定該化合物為fra

10、xinol(見圖1)。圖1 化合物,和的結(jié)構(gòu)式化合物：白色針狀結(jié)晶(MeOH)，mp.144146。異羥肟酸鐵反應(yīng)陽性，表示有內(nèi)酯環(huán)存在;FeCl3 反應(yīng)陽性(墨綠色)，表示有酚羥基存在;判斷為香豆素類化合物。ESI-MS m/s:245.4 M+Na+，分子式C11H10O5。1H-NMR (DMSO-d6) ：9.85(1H, brs, OH)，7.88(1H, d, J=9.45 Hz, 4-H)，7.00(1H, s, 5-H)，6.21(1H, d, J=9.45 Hz, 3-H)，3.78(6H, s, -OCH3); 13C-NMR(DMSO-d6) ：161.0(2-C)，14

11、6.5(6-C)，145.7(4-C)，144.84(8-C)，143.9(9-C)，135.6(7-C)，112.9(3-C)，111.1(10-C)，105.3(5-C)，61.6(-OCH3)，57.0(-OCH3)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)2對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為isofraxidin(見圖1)?；衔铮狐S色晶體(MeOH)，mp.235236，溶于熱的甲醇和乙醇。異羥肟酸鐵反應(yīng)陽性，表示有內(nèi)酯環(huán)存在。FeCl3 反應(yīng)陽性(墨綠色)，表示有酚羥基存在。判斷為香豆素類化合物。ESI-MS m/s:231.1 M+Na+，分子式C10H8O5。1H-NMR (DMSO-d6) ：9.44(1H, brs,

12、OH)，9.54(1H, brs, OH)，7.89(1H, d, J=9.45 Hz, 4-H)，6.80(1H, s, 5-H)，6.21(1H, d, J=9.45 Hz, 3-H)， 3.81(3H, s, -OCH3 ); 13C-NMR(DMSO-d6)：161.37(2-C)，146.2(7-C)，145.8(4-C)，140.2(6-C)，140.1(8-C)，133.7(9-C)，112.7(3-C)，111.1(10-C)，101.2(5-C)，56.9(-OCH3)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)3對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為fraxetin(見圖1)?；衔铮旱S色針晶，mp. 259260。紫外燈

13、下(365nm)顯亮藍(lán)色熒光，TLC薄層板與標(biāo)準(zhǔn)品秦皮乙素有相同的Rf值，UV顯示香豆素的特征吸收，F(xiàn)eC13反應(yīng)陽性(墨綠色)。ESI-MS m/s:201.2M+Na+，分子式C9H6O4。1H-NMR (DMSO-d6) ：10.06(1H, brs, OH)，9.48(1H, brs, OH)，7.82(1H, d, J=9.30 Hz, 4-H)，6.93(1H, s, 8-H)，6.69(1H, s, 5-H)，6.12(1H, d, J=9.30 Hz, 3-H);13C-NMR(DMSO-d6)g：161.3(2-C)，150.9(7-C)，149.0(9-C)，144.9(4

14、-C)，143.3(6-C)，112.8(5-C)，111.2(10-C)112.0(3-C)，103.1(8-C)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)3對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為aesculetin(見圖1)。化合物：白色無定形粉末，mp.128130，Molish反應(yīng)陽性，示有糖，TLC檢出fraxinol和葡萄糖。13C-NMR(DMSO-d6)：161.1(2-C)，157.7(7-C)，152.0(9-C)，149.8(5-C，6-C)，140.1(4-C)，113.0(3-C)，107.5(10-C)，103.3(1'-C)，97.1(8-C)，78.1(5'-C)，77.3(3'-C)，

15、74.9(2'-C)，70.8(4'-C)，63.1(6'-C)，61.7(-OCH3)，57.5(-OCH3)。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)1對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為mandshurin(見圖1)?；衔铮簾o色針晶(MeOH)，mp.218219，Molish反應(yīng)陽性，示有糖，TLC檢出isofraxidin和葡萄糖。13C-NMR(DMSO-d6) ：160.6(2-C)，150.3(6-C)，145.2(4-C)，143.2(8-C)，142.5(7-C)，141.1(9-C)，115.5(10-C)，115.3(3-C)，106.3(5-C)，103.0(1'-C)，78.3(

16、3'-C)，77.3(5'-C)，75.0(2'-C)，70.7(4'-C)，62.1(6'-C)，61.6(-OCH3)，57.4(-OCH3)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)2對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為isofraxidin-D-glucoside(見圖1)。化合物：淺黃色針狀結(jié)晶(MeOH)，mp.208209。Molish反應(yīng)陽性，示有糖，TLC檢出fraxetin和葡萄糖。13C-NMR(DMSO-d6) ：160.7(2-C)，145.9(7-C)，145.2(4-C)，143.1(8-C)，144.2(6-C)，132.1(9-C)，112.7(3-C)，110.6(

17、10-C)，105.5(5-C)，104.4(1'-C)，77.8(3'-C)，76.7(5'-C)，74.3(2'-C)，70.1(4'-C)，61.3(6'-C)，56.6(-OCH3)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)1，3對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為fraxin(見圖1)?；衔铮喊咨勰?，mp.152153。紫外燈下(365 nm)顯亮藍(lán)色熒光，異羥肟酸鐵反應(yīng)陽性，表示有內(nèi)酯環(huán)存在，Molish反應(yīng)陽性，示有糖，TLC檢出葡萄糖，表明化合物為香豆素苷。13C-NMR(DMSO-d6) ：161.7(2-C)，153.7(7-C)，150.8(9-C)，145.2(4-

18、C)，144.2(6-C)，114.0(5-C)，113.6(3-C)，112.1(10-C)，101.2(1'-C，8-C)，77.9(3'-C)，77.7(5'-C)，74.0(2'-C)，70.5(4'-C)，61.5(6'-C)，57.1(-OCH3)，數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)4對(duì)照，確認(rèn)其結(jié)構(gòu)為isoscopoletin-D-glucoside(見圖1)。    【參考文獻(xiàn)】  1 Hiroki Tsukamoto, Sueo Hisada, Sansei Nishibe, Coumarins from Bark of Fraxinus japonica and F. mandschurica var. japonicaJ.Chem.Pharm. Bull. 1985, 33(9):4069.2 李創(chuàng)軍，張東明，羅永明.寬葉金粟蘭化學(xué)成分的研究J.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，