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文檔簡介
1、丙型肝炎病毒基因分型及其與干擾素治療應(yīng)答的關(guān)系 丙型肝炎病毒基因分型及其與干擾素治療應(yīng)答的關(guān)系 中華實驗和臨床病毒學雜志 1998年第1期第0卷 論著 作者:趙和平程寶珠郭慧安張?zhí)焐鷱埩針s王勤英 單位:030001太原山西醫(yī)科大學第一醫(yī)院(趙和平郭慧安張玲榮王勤英);太原市商業(yè)職工醫(yī)院(程寶珠);鐵十二局醫(yī)院(張?zhí)焐? 關(guān)鍵詞: 肝炎病毒,丙型;基因型;限制性內(nèi)切片段
2、長度多態(tài)性;干擾素 【摘要】目的為了解山西省丙型肝炎病毒的基因型和基因型對干擾素療效的預示價值。方法用HCV5NC區(qū)酶切分型方法對94例丙型肝炎病人進行基因分型,并觀察其中45例患者對干擾素-1b治療的應(yīng)答。結(jié)果顯示HCV 組(、型)感染80例(85.1%),HCV 組(、型)感染12例(12.8%),HCV /組混合感染2例(2.1%)。在接受干擾素治療的病例中,HCV 組感染(35例)的應(yīng)答率為37.1%,持續(xù)應(yīng)答率為17.1%,而組感染(10例)的應(yīng)答率為80%,持續(xù)應(yīng)答率為60%,兩組相比,有顯著性差異(P0.05,P0.025)。結(jié)論表明
3、山西省以HCV 組感染為主,干擾素對HCV 組感染的療效優(yōu)于HCV 組感染,HCV基因型有預測干擾素療效的意義。 Genotypic analysis of hepatitis C viruses and its significance in interferon treatment Zhao Heping, Cheng Baozhu, Guo Huian, et al. The First Affilicated Hospital of Shanxi University of Medical Sc
4、iences, Taiyuan030001 AbstractTo study the genotypes of HCV infection in Shanxi Province and the response of HCV genotypes to interferon therapy, the genotypes of HCV were analysed by restriction fragment length polymorphism in 94 chronic hepatitis C patients who were positive
5、 for HCV RNA (RT-PCR). It was shown that 80 patients (85.1%) were group infection, 12 (12.8%) were group infection and 2 (2.1%) were group / co-infection. 45 chronic hepatitis C patients with different genotypes (35 with HCV group , 10 with group ) receirved rIFN -1b 3MU three times a week for 6 mon
6、ths and were followed up to 12-34months. The responsive rate was significantly higher in patients with group infection (80%) than that in patients infected with group (37.1%) (P0.05). Sustained response was observed in 60% for group and in 17.1% for group (P0.025). The date indicated that HCV group
7、is the major type of HCV infection in Shanxi Province the and HCV genotype seems to be an important factor in determining the response rate to IFN treatment in patients with chronic hepatitis C. Key words:Hepatitis CvirusGenotypeRestrictionfragmentlength
8、;polymorphismInterferon 丙型肝炎病毒(HCV)基因型的分布隨地區(qū)而異,同時HCV基因型具有重要臨床意義。曾報道HCV基因型與疾病嚴重性、治療應(yīng)答、感染轉(zhuǎn)歸等相關(guān)13。我們應(yīng)用限制性內(nèi)切酶技術(shù)對山西地區(qū)94例慢性丙型肝炎(CHC)患者進行HCV基因分型,并觀察不同基因型在CHC中的分布和對干擾素治療應(yīng)答方面的差異。 1材料和方法 1.1病例來源與診斷標準94例CHC為我院住院及門診病人,其中男63例,女31例;年齡569歲。血清抗-HC
9、V(ELISA)和HCV RNA(RT-PCR)皆陽性,5例合并慢性HBV感染。按1995年第五次病毒性肝炎診斷標準診斷,慢性肝炎輕度52例,中度31例,肝硬化11例。25例慢性肝炎經(jīng)肝活體組織檢查,78例(82.9%)有輸血或血制品史。 1.2方法 RT-PCR檢測血清HCV RNA試劑盒為北京肝病研究所制備。操作步驟按文獻報道進行4。 限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)分析進行HCV基因分型取第2次PCR產(chǎn)物,用乙醇沉淀,加10l TE緩沖液溶解,以限制性
10、內(nèi)切酶Hae 37消化,取消化產(chǎn)物用6%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,EB染色后于紫外光燈下檢查,根據(jù)酶切產(chǎn)物片段長度判斷基因型,HCV 組(、型)不為酶切,在紫外光下見一條145bp的基因條帶,而HCV 組(、型)被酶切成89bp和56bp兩條基因片段。如出現(xiàn)145bp,89bp和56bp三條基因片段為HCV /組混合感染。 CHC病人的干擾素治療45例CHC接受重組干擾素-1b(深圳科興生物制品有限公司生產(chǎn))治療,劑量為3MU/次,肌注。前3天每天1次,以后每周3次,療程6個月。每月復查1次血清ALT和HCV RNA,治療結(jié)束后隨訪1234個月,隨訪
11、期間每3個月檢測血清ALT和HCV RNA。 2結(jié)果 全部病例血清HCV RNA皆陽性,其HCV RNA陽性產(chǎn)物的RFLP分析結(jié)果顯示,HCV 組80例(85.1%),組12例(12.8%),HCV /組混合2例(2.1%)。 80例HCV 組感染與12例HCV 組感染在年齡、性別、輸血史等方面基本相同(P0.05)在臨床類型中的分布亦未見明顯差異(P0.05)。見表1。 45例接受重組干擾素-1b治療的患者中,
12、35例為HCV 組感染。10例為HCV 組感染。此兩組病例在年齡、性別、輸血史、病程、病情、治療前血清ALT水平等方面均具有可比性(P0.05),見表2。以干擾素治療6月時血清ALT復常,HCV RNA陰轉(zhuǎn)定為有應(yīng)答,療效持續(xù)至治療結(jié)束后12月或12月以上為持續(xù)應(yīng)答,治療結(jié)束時ALT無明顯下降、HCV RNA仍為陽性者為無應(yīng)答。HCV 組感染的應(yīng)答率分別為37.1%和80%(P0.05)而持續(xù)應(yīng)答率分別為17.1%和60%(P0.025),兩組療效相比,有顯著性差異。見表3。 表1HCV 組和組感染病例的一般情況和臨床類型 &
13、#160; Tab.1General conditions and clinical types of HCV groups and infected cases 病人情況Conditions ofthe patients HCV 組HCV group (n=80) HCV組HCV group (n=12)
14、 年齡(年) 42.7±14.9 42.1±15.7 Age(year) 性別(男/女)
15、; 5426 8/4 Sex(male/female) 感染來源 lnfection source
16、0; 受血及血制品 69(86.3%) 9(75%) Recipient of unscreened
17、160;blood and blood product 散發(fā) 11(13.7%) 3(25%) Sporadic
18、160; HCV和HBV重疊感染 4(5%) 1(8.3%) HCV+HBV 臨床類型
19、0; Clinical type 慢性肝炎 Chronic hepatitis 輕型 43(53.8%)&
20、#160; 8(66.7%) Mild type 中型 26(32.5%) 4(33.3%) &
21、#160; Moderate type 肝硬化 11(13.7%) 0 Liver cirrhosis
22、160; 表2干擾素治療HCV 組和組患者的臨床情況 Tab.2Clinical conditions of interferon-treated HCV groups and group patients 病人情況Conditions of the patients
23、 HCV HCV group (n=35) HCV HCV group (n=10) 年齡(年) 45.2±14.9 42.6±15.8
24、; Age (year) 性別(男/女) 28/7 8/2 Sex (male/female)
25、 輸血史 28 7 Blood transfusion history 病程(月) 18.2
26、177;7.1 16.2±6.8 Course of illness(month) 治療前血清ALT水平 86.3±78.8 83.8±68.3
27、160; Sera ALT elevation before treatment 臨床類型(慢性肝炎)
28、 Clinical type (CH) 輕型 19(54.3%) 6(60.0%) Mild type
29、160; 中型 16(45.7%) 4(40.0%) Moderate type 表3HCV基因型與干擾
30、素應(yīng)答 Tab.3HCV genotype and interferon response HCV基因型 HCV genotype 病例數(shù) No. of patients 對干擾素應(yīng)答
31、0;Interferon response 無應(yīng)答 No-response 有應(yīng)答 Response 復發(fā) Relapse 持續(xù)應(yīng)答 S
32、ustained response 組 35 22(62.9%) 13(37.1%) 7(20.0%)
33、160; 6(17.1%) Group 組 10 2(20.0%) 8(80.0%)
34、; 2(20.0%) 6(60.0%) Group 3討論 HCV基因分型與命名尚未統(tǒng)一,目前國內(nèi)常用Okamoto命名系統(tǒng)分為型,根據(jù)此4型中親緣關(guān)系的遠近,型和型可歸入第組,型和型歸入第組。本文所用HCCV5
35、NC區(qū)Hae 酶切分型法是基于型、型無該酶切位點,而型、型存在此位點,因而可將HCV 型、型與型、型分開,亦即可將HCV 組和組分開。我們用此技術(shù)對山西地區(qū)94例CHC分型,結(jié)果顯示:組感染占大多數(shù)(85.1%),組感染和/組混合感染分別占12.8%和2.1%。鑒于文獻報道我國HCV 型感染甚少5,6。故研究結(jié)果表明山西省HCV感染以HCV 組中的型感染為主,此可供丙型肝炎的防治工作參考。 HCV基因型是影響干擾素療效的主要因素之一,大多數(shù)認為HCV 型感染對干擾素的治療反應(yīng)性比HCV 型感染差1,7,8,可能與其伴隨血清HCV RNA滴度較高有關(guān)
36、3。本文觀察二組病例在臨床背景相似的情況下,HCV 組感染患者對重組干擾素-1b的應(yīng)答率和持續(xù)應(yīng)答皆明顯高于組感染者,提示HCV 組對干擾素治療的反應(yīng)性較組敏感。HCV基因型的測定有助于預示干擾素療效。 若干報道HCV基因型與疾病嚴重程度、病變進展和轉(zhuǎn)歸有關(guān)13。本文結(jié)果顯示組、組基因在各型HCV中分布無明顯差異,唯11例肝硬化患者皆屬組感染。不同HCV基因型是否存在毒力、致病性差異,是否有預后重要性,尚需擴大病例數(shù),積累更多肝組織病檢資料,并通過長期隨訪研究方能定論。 此外,研究未發(fā)現(xiàn)HCV基因型與年齡、性別和傳播途徑有相關(guān)性。 本課題由山西省教委資助 1997年11月4日收稿12月30日修回
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