免疫學(xué)檢驗(yàn)考試

1、免疫學(xué)檢驗(yàn)老師給的重點(diǎn)，自己總結(jié)的，當(dāng)復(fù)習(xí)資料看看吧。第1章 緒論1、 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)是研究免疫學(xué)檢驗(yàn)的理論、技術(shù)、應(yīng)用，以及臨床免疫學(xué)性疾病發(fā)病機(jī)制、免疫診斷與防治的一門醫(yī)學(xué)應(yīng)用性學(xué)科。2、 臨床免疫學(xué)（clinical immunology）是利用免疫學(xué)的基礎(chǔ)理論和技術(shù)來研究臨床疾病的免疫病理機(jī)制、診斷和鑒別診斷、治療效果和預(yù)后判斷以及疾病預(yù)防等多個(gè)分支學(xué)科的總稱。3、 免疫學(xué)檢驗(yàn)建立的基礎(chǔ)第2章 抗原抗體反應(yīng)1、 抗原抗體反應(yīng)（antigen-antibody）是指抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)?？砂l(fā)生于體內(nèi)，也可發(fā)生于體外。2、 抗原抗體防御的原理是什么？具有哪些特點(diǎn)？

2、原理：基于抗原表位與抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，抗原與抗體間的結(jié)合是非共價(jià)鍵結(jié)合，通過靜電場(chǎng)力、范德華引力（作用最小）、氫鍵結(jié)合力（最具特異性）、疏水作用力（作用最大）等分子間的引力結(jié)合在一起，在特異性的基礎(chǔ)上形成非共價(jià)鍵由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。特點(diǎn)：特異性、比例性、可逆性。3、 影響抗原抗體反應(yīng)的因素有哪些？反應(yīng)物自身因素 抗原（理化性狀、分子量、表位的種類和數(shù)目）、抗體（來源、濃度、特異性與親和力）。環(huán)境因素 電解質(zhì)、酸堿度（一般在6-8之間為宜）、溫度（一般為15-40，常用抗原抗體反應(yīng)為37）。對(duì)照的設(shè)置 陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、空白對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照4、 親合力（avidity

3、）：抗體結(jié)合部位與抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度，與抗體結(jié)合價(jià)直接相關(guān)即所謂多價(jià)優(yōu)勢(shì)。5、 親和力（affinity):是指抗體分子單一抗原結(jié)合部位與抗原分子表面一個(gè)相應(yīng)抗原決定簇（表位）之間的結(jié)合強(qiáng)度，它是抗原抗體之間固有的結(jié)合力。第3章 免疫原和抗體的制備1、 抗體制備類型：?jiǎn)慰寺】贵w、多克隆抗體、基因工程技術(shù)。2、 各類抗體的制備原理和應(yīng)用？單克隆抗體，原理： 將抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞與具有體外長(zhǎng)期繁殖能力的小鼠骨髓瘤細(xì)胞通過融合劑（聚乙二醇，PEG）融為一體，在HAT選擇性培養(yǎng)基的作用下，只讓融合成功的雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，經(jīng)過反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)、篩選和單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)（克隆化），最終獲得既能產(chǎn)生所需單克隆

4、抗體，又能體外長(zhǎng)期繁殖的雜交瘤細(xì)胞系，將這種雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)，接種于小鼠腹腔，從小鼠腹腔積液中獲取高效價(jià)的單克隆抗體。 應(yīng)用：1檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑。作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用，很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展2蛋白質(zhì)的提純，單克隆抗體是親和層析中重要的配體。3 腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)，將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接，利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官，直接殺傷靶細(xì)胞，稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外，將放射性

5、標(biāo)記物與單克隆抗體連接，注入患者體內(nèi)可進(jìn)行放射免疫顯像，協(xié)助腫瘤的診斷。多克隆抗體，原理:抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一類抗原決定簇，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。當(dāng)將抗原注射入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)時(shí)，一系列抗體生成細(xì)胞會(huì)不同程度的與抗原結(jié)合，受抗原刺激后在血液中產(chǎn)生不同類型的抗體，這種由一種

6、抗原刺激產(chǎn)生的抗體稱為多克隆抗體。多克隆抗體中不同的抗體分子可以以不同的親和能力與抗原分子表面不同的部分抗原決定簇相結(jié)合。將抗原導(dǎo)入敏感動(dòng)物體內(nèi)后，可刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞系統(tǒng)，尤其是淋巴結(jié)和脾臟中的淋巴細(xì)胞大量增殖。通常初次免疫應(yīng)答往往比較弱，尤其是針對(duì)于易代謝，可溶性的抗原。首次注射后大約7天，在血清中可以觀察到抗體但抗體的濃度維持在一個(gè)較低的水平，在大約10天左右抗體的滴度會(huì)達(dá)到最大值。但同種抗原注射而產(chǎn)生的二次免疫應(yīng)答的結(jié)果明顯不同，和初次免疫應(yīng)答相比抗體的合成速度明顯增加并且保留時(shí)間也長(zhǎng)。免疫應(yīng)答的動(dòng)力學(xué)結(jié)果取決于抗原和免疫動(dòng)物的種類，但初次和二次免疫應(yīng)答之間的關(guān)系是免疫應(yīng)答的一個(gè)重要特點(diǎn)

7、。三次或以后的抗原注射所產(chǎn)生的應(yīng)答和二次應(yīng)答結(jié)果相似：抗體的滴度明顯增加并且血清中抗體的種類和性質(zhì)發(fā)生了改變，這種改變被稱為免疫應(yīng)答的成熟，具有重要的實(shí)際意義。通常在抗原注射4-6周后會(huì)產(chǎn)生具有高親和力的抗體?；蚬こ炭贵w應(yīng)用DNA重組及蛋白工程技術(shù)對(duì)編碼抗體基因按不同需要進(jìn)行改造和裝配，導(dǎo)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞后重新表達(dá)的抗體基因工程（genetic engineering）又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。

8、基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。所謂基因工程（genetic engineering）是在分子水平上對(duì)基因進(jìn)行操作的復(fù)雜技術(shù)。是將外源基因通過體外重組后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，使這個(gè)基因能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達(dá)的操作。它是用人為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)DNA大分子提取出來，在離體條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M(jìn)行切割后，把它與作為載體的DNA分子連接起來，然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長(zhǎng)、繁殖的受體細(xì)胞中，以讓外源物質(zhì)在其中“安家落戶”，進(jìn)行正常的復(fù)制和表達(dá)，從而獲得新物種的一種嶄新技術(shù)。它克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙?；蚬こ虘?yīng)用舉例1與醫(yī)藥衛(wèi)生 （1）生產(chǎn)基因工程藥

9、品 優(yōu)點(diǎn)：高質(zhì)量、低成本 舉例：胰島素、干擾素、乙肝疫苗等60多種 （2）基因診斷 含義：用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息，達(dá)到檢測(cè)疾病的目的。 舉例：用DNA探針檢測(cè)出肝炎患者的病毒，為診斷提供了一種快速簡(jiǎn)便方法。 成果：已能夠檢測(cè)出腸道病毒、單純皰疹病毒等多種病毒；在診斷遺傳病方面發(fā)展尤為迅速；在腫瘤診斷中的應(yīng)用取得重要成果。 （3）基因治療 含義：把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的。 舉例：半乳糖血癥（病因、研究成果） 發(fā)展前景：許多遺傳病及疑難病癥將被人類征服。 2與農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè) （1）農(nóng)業(yè)

10、：培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)或具特殊用途的動(dòng)植物新品種。 （2）畜牧養(yǎng)殖業(yè)：培育體型巨大（如超級(jí)小鼠、超級(jí)綿羊、超級(jí)魚等）、品質(zhì)優(yōu)良（如具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等）的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；利用外源基因在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的表達(dá)獲得人類所需要的各種物質(zhì)，如激素、抗體及酶類等。 （3）食品工業(yè)：為人類開辟新的食物來源。 3與環(huán)境保護(hù) （1）用于環(huán)境監(jiān)測(cè)：用DNA探針可檢測(cè)飲水中病毒的含量 方法：使用一個(gè)特定的DNA片段制成探針，與被檢測(cè)的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測(cè)出來。 特點(diǎn)：快速、靈敏 （2）用于被污染環(huán)境的凈化：分解石油的“超級(jí)細(xì)菌”；“吞噬”汞和降解土壤中DDT的細(xì)菌；能夠凈化鎘污染的植物；構(gòu)

11、建新的殺蟲劑；回收、利用工業(yè)廢物等3、 佐劑：預(yù)先或與抗原一起注射于機(jī)體，能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)。4、 抗體的臨床用途有哪些？抗體的主要功能是與抗原（包括外來的和自身的）相結(jié)合，從而有效地清除侵入機(jī)體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物，抗體（antibody）是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活，也可能無效但有時(shí)也會(huì)對(duì)機(jī)體造成病理性損害，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生，對(duì)人體可造成危害。5、 抗體的質(zhì)量要求？如何鑒定和保存？鑒定抗體特異性、效價(jià)、純度、親和力等保存方法：4度保存

12、：可保存三個(gè)月或半年冷凍保存：可保存23年 真空干燥保存：510年，保存時(shí)間最長(zhǎng)。第4章 凝集反應(yīng)1、 凝集反應(yīng)指顆粒性抗原（如細(xì)菌、紅細(xì)胞等）或覆蓋了可溶性抗原（或抗體）的顆粒性載體與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合后出現(xiàn)的肉眼可見的凝集現(xiàn)象；可用于定性和半定量。2、 凝集反應(yīng)的特點(diǎn)靈敏度高，方法簡(jiǎn)便。類型大致分為3類，直接凝集反應(yīng)，間接凝集反應(yīng)，抗球蛋白實(shí)驗(yàn)。3、 直接凝集反應(yīng)：顆粒性抗原在適當(dāng)電解質(zhì)參加下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合，當(dāng)兩者比例適當(dāng)時(shí)，出現(xiàn)肉眼可見的凝集顆粒。4、 間接凝集反應(yīng)：將可溶性抗原或抗體先吸附偶聯(lián)在適當(dāng)大小的顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)抗體或抗原作用，在適當(dāng)電解質(zhì)作用下，出現(xiàn)的特異

13、性凝集現(xiàn)象。5、 抗球蛋白試驗(yàn)的原理、類型及應(yīng)用：原理 機(jī)體受某些抗原刺激后，產(chǎn)生不完全抗體，這類抗體因體積小，長(zhǎng)度短，抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，但能封閉抗原決定簇，使其不能再與完全抗體相結(jié)合。此時(shí)加入抗IgG球蛋白的抗體后，出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象，稱為。分類和用途：直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn) 用于檢測(cè)表面集合的不完全抗體。如新生兒溶血癥和自身免疫性溶血貧血額檢查。間接抗球蛋白實(shí)驗(yàn) 用于檢測(cè)母體Rh（D）抗體，有助于及早發(fā)現(xiàn)及避免新生兒溶血癥的發(fā)生.。第5章 沉淀反應(yīng)1、 沉淀反應(yīng)概念指在適當(dāng)條件下可溶性的抗原和相應(yīng)的抗體特異性結(jié)合后形成沉淀物的現(xiàn)象。2、 哪些沉淀反應(yīng)技術(shù)是能定量的：免疫濁度測(cè)定

14、、膠乳增強(qiáng)免疫濁度測(cè)定、單擴(kuò)散試驗(yàn)、火箭電泳。3、 免疫比濁概念、技術(shù)特點(diǎn)、有哪些技術(shù)類型概念：是利用抗原、抗體在液相中特異性結(jié)合，形成小分子免疫復(fù)合物，在增濁劑作用下，形成較大的免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。特點(diǎn)：靈敏度高、快速簡(jiǎn)便、易于自動(dòng)化，已廣泛用于臨床各種微量物質(zhì)測(cè)定。分類;按檢測(cè)方式不同分為透射免疫比濁法和散射免疫比濁法（前者是測(cè)定液相中免疫復(fù)合物對(duì)透射光所衰減的光量；后者是測(cè)量免疫復(fù)合物對(duì)入射光成一定角度散射的光量）。散射免疫比濁法又分為終點(diǎn)散射比濁法和速率散射比濁法。速率-指單位時(shí)間內(nèi)抗原與抗體反應(yīng)的速度或免疫復(fù)合物形成的量。4、 免疫濁度分析類型、影響因素?；驹硎牵嚎乖?/p>

15、體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過量時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原量地增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增加，與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即可計(jì)算出受檢物和含量。三種類型：1.免疫透射濁度測(cè)定法；2.免疫膠乳濁度測(cè)定法；3.免疫散射濁度測(cè)定法免疫濁度分析的影響因素(一)抗體的質(zhì)量1.抗體質(zhì)量 免疫比濁測(cè)定法要求抗體的特異性強(qiáng)，效價(jià)高，親和力強(qiáng)。特異性差的抗血清由于含有大量雜抗體，反應(yīng)后可形成非特異性濁度（“偽濁度”），出現(xiàn)假性升高，使用低效價(jià)（<1:20）抗體，會(huì)使試劑消耗增多，同時(shí)也增加偽濁度的產(chǎn)生。2.抗體類型 R型抗體親和力較強(qiáng)，與抗原結(jié)合后不易解離，在抗

16、體過剩時(shí)亦形成大而穩(wěn)定的復(fù)合物，但抗原過剩時(shí)，則形成可溶性復(fù)合物。H型抗體親和力弱，抗原抗體結(jié)合后極易解離，而且抗原或抗體過剩易形成可溶性復(fù)合物。R型抗體是用于免疫比濁測(cè)定的較為理想的試劑。（二）抗原抗體比例抗原和抗體的比例是濁度形成的關(guān)鍵因素，抗原和抗體必須在適當(dāng)?shù)臐舛炔艜?huì)出現(xiàn)最高結(jié)合率。免疫濁度測(cè)定的反應(yīng)體系中必須始終保持抗體過量，以保證免疫復(fù)合物的生成量與濁度的改變一致。（三）反應(yīng)的條件抗原抗體反應(yīng)液的最適Ph值為6.5-8.5,超過此限度則不易形成復(fù)合物，甚至可引起復(fù)合物解離。在一定范圍內(nèi)，離子強(qiáng)度大復(fù)合物形成快，離子強(qiáng)度過低或無電解質(zhì)存在，則不易出現(xiàn)可見的沉淀反應(yīng)，離子的種類也可影響

17、免疫復(fù)合物的形成。（四）增濁劑的作用（五）標(biāo)本的因素5、 兩種電泳方式、用途、原理結(jié)合免疫缺陷免疫電泳的基本原理、應(yīng)用、方法評(píng)價(jià)：將蛋白質(zhì)抗原在瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳，樣品中不同抗原成分因所帶電荷、分子量及構(gòu)型不同，電泳遷移率各異，而被分離成肉眼看不見的不同區(qū)帶。停止電泳后，在與電泳方向平行挖一條型槽，加入相應(yīng)抗血清，置室溫或37C，使抗原和抗體呈雙向擴(kuò)散，在兩者比例合適處出現(xiàn)肉眼可見的弧形沉淀線。根據(jù)沉淀線的數(shù)量、性狀，可分析、鑒定樣品中所含抗原成分及其性質(zhì)。應(yīng)用：主要用于純化抗原或抗體的成分分析，粗略分析其純度；正常及異常體液中蛋白質(zhì)分析，免疫后不同抗體組分的動(dòng)態(tài)變化研究。方法評(píng)價(jià)：高分辨率

18、和高度特異性，目前應(yīng)用于純化Ag或Ab成分分析以及正常或異常體液蛋白的檢測(cè)和鑒定免疫固相電泳是區(qū)帶電泳和免疫沉淀相結(jié)合的免疫化學(xué)分析技術(shù)。原理：在區(qū)帶電泳后，將抗血清或浸透抗血清的乙酸纖維素或?yàn)V紙條放在區(qū)帶面，使Ab與對(duì)應(yīng)的Ag直接發(fā)生沉淀反應(yīng)，是Ag被固定在電泳位置上，對(duì)樣品中所含成分及其性質(zhì)進(jìn)行分析、鑒定。 評(píng)價(jià)：快速，分辨率更高，缺點(diǎn)：對(duì)Ag、Ab濃度要求嚴(yán)格，對(duì)于濃度高Ag作適當(dāng)稀釋。用途：廣泛應(yīng)用于鑒定遷移率近似的蛋白和M蛋白、免疫球蛋白輕鏈、尿液、腦脊液等微量蛋白、游離輕鏈、補(bǔ)體裂解產(chǎn)物等。第6章 熒光免疫技術(shù)1、熒光免疫技術(shù)（FI，fluorescence immunoassay

19、）：將抗原抗體反應(yīng)的特異性與熒光物質(zhì)檢測(cè)的敏感性和直觀性結(jié)合起來的一種免疫分析技術(shù)。2、熒光素（flaorescein）：能產(chǎn)生熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物。3、簡(jiǎn)述熒光標(biāo)記物的制備方法與特點(diǎn)制備：熒光素標(biāo)記抗體 攪選擇具有特異性和高親和力的抗體，所用抗血清中不應(yīng)含有針對(duì)標(biāo)本中正常組織的抗體，一般需純化。用拌法和透析法標(biāo)記。熒光素標(biāo)記抗體的純化 用透析法和凝膠柱層析法去除游離的熒光素和過度標(biāo)記的抗體。鑒定 鑒定指標(biāo)包括抗體效價(jià)和熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合比率等。熒光抗體的保存 （2） 特點(diǎn)：應(yīng)用范圍較為廣泛, 具有高靈敏度、 高穩(wěn)定性和高選擇性等特點(diǎn),4、 簡(jiǎn)述熒光免疫顯微技術(shù)的常用方法及基本原理

20、（定位、定性）：分為直接法、間接法、補(bǔ)體結(jié)合法和雙標(biāo)記法。間接法-用熒光素標(biāo)記抗球蛋白抗體（抗抗體），待基質(zhì)標(biāo)本中的抗原與相應(yīng)抗體/第一抗體反應(yīng)，再用熒光素標(biāo)記的抗抗體、第二抗體結(jié)合第一抗體，通過熒光現(xiàn)象檢查抗原或抗體；常用于檢測(cè)各種自身抗體。基本原理：應(yīng)用最多的是用熒光素標(biāo)記的抗體（或抗原）檢測(cè)待測(cè)組織、細(xì)胞或血清中的抗體（抗原），通過熒光顯微鏡直接觀察呈特異熒光的抗原抗體復(fù)合物，實(shí)現(xiàn)對(duì)組織或細(xì)胞抗原（抗體）進(jìn)行定性、定位或形態(tài)學(xué)定向的檢測(cè)方法。5、 簡(jiǎn)述熒光免疫測(cè)定技術(shù)的常用方法及基本原理常用方法：時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定、熒光酶免疫測(cè)定、熒光偏振免疫測(cè)定?；驹硎腔诳乖贵w反應(yīng)的特異性和

21、敏感性，與熒光標(biāo)記技術(shù)的相結(jié)合，在完成抗原抗體反應(yīng)后，利用特殊儀器測(cè)定熒光強(qiáng)度而推算被測(cè)定物濃度的方法。第7章 放射免疫技術(shù)1、 放射免疫技術(shù)的特點(diǎn)特點(diǎn) 1.靈敏度高，能測(cè)到ug/L，甚至到ng/L或pg/L水平。2.特異性強(qiáng)，與結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)間的交叉反應(yīng)少。3.準(zhǔn)確性、重復(fù)性好，批間批內(nèi)誤差低。4.需樣品量少。5.操作簡(jiǎn)便，使用的試劑大部分都有配套的試藥盒供應(yīng)。但，放射性核素污染，易衰變和放射性標(biāo)記物不穩(wěn)定，導(dǎo)致試劑有效期短。2、 放射免疫技術(shù)的原理以放射性核素標(biāo)記的抗原和反應(yīng)系統(tǒng)中非標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。3、 免疫放射分析的原理：屬于非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)，是將放射性核素標(biāo)記在抗

22、體上，用過量的標(biāo)記抗體與待測(cè)抗原反應(yīng)，待充分反應(yīng)后除去游離的標(biāo)記抗體，抗原標(biāo)記抗體結(jié)合物的放射性強(qiáng)度與待測(cè)抗原量成正比關(guān)系。第8章 酶免疫技術(shù)1、 酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體或抗原作為主要試劑，將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶高效催化反應(yīng)的專一性相結(jié)合的一種免疫檢測(cè)技術(shù)。2、 酶免疫技術(shù)特點(diǎn)及分類：特點(diǎn)，試劑穩(wěn)定、無放射性污染、特異性、敏感性、簡(jiǎn)便安全、應(yīng)用廣泛、但是標(biāo)記可能影響抗體或抗原的天然構(gòu)象。 酶免疫測(cè)定分為均相和異相兩種類型。均相酶免疫分析有酶放大免疫分析技術(shù)、克隆酶供體免疫分析，異相酶免疫分析有液相酶免疫測(cè)定、固相酶免疫分析。3、 常用酶及要求：目前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）、

23、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用最廣。要求：活性高和純度高；專一性強(qiáng)；性質(zhì)穩(wěn)定；酶催化底物后產(chǎn)生的有色信號(hào)產(chǎn)物易于測(cè)量且方法簡(jiǎn)單、敏感和重復(fù)性好，；對(duì)人體無害；酶和底物廉價(jià)易得。4、 包被與封閉的含義及其作用包被：將抗體（抗原）與固相載體連接的過程稱為包被。封閉：酶標(biāo)反應(yīng)板用抗原或抗體包被后，由于包被液蛋白濃度很低，造成固相載體表面常剩余少量未吸附位點(diǎn)，可非特異的吸附標(biāo)本中的蛋白質(zhì)及酶標(biāo)記物，形成非特異性結(jié)合，導(dǎo)致本底偏高。包被后用牛血清蛋白再包被一次，高濃度蛋白占據(jù)空白位點(diǎn)以消除上述干擾，此過程稱為封閉。5、 均相與異相：根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物，酶免

24、疫測(cè)定而分為均相和異相兩種類型，如果反應(yīng)后需要進(jìn)行分離結(jié)合的與未結(jié)合的酶標(biāo)記物則為非均相法，如果反應(yīng)后不需要進(jìn)行分離而直接檢測(cè)則為均相法。、6、 固相與液相：根據(jù)測(cè)定方法是否使用固相支持物，又分為液相和固相酶免疫分析兩類。液相酶免疫分析主要用于檢測(cè)樣品中微量的短肽激素和某些藥物小分子半抗原，其靈敏度可達(dá)納克甚至皮克水平。固相酶免疫分析是利用固相支持物作載體預(yù)先吸附抗體后抗原，是測(cè)定的免疫反應(yīng)在其表面進(jìn)行而形成抗原抗體復(fù)合物，洗滌除去反應(yīng)液中無關(guān)成分，固相載體上的酶標(biāo)記物催化底物生成有色產(chǎn)物，測(cè)定光密度值，就可以推算樣品中抗原或抗體的成分。7、 ELISA基本原理、操作流程及臨床應(yīng)用 ELISA

25、基本原理把抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；并將抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)記抗原或抗體，它既保留了免疫活性，又保留了酶的活性；測(cè)定時(shí)將受檢樣品（含待測(cè)抗原或抗體）和酶標(biāo)記抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物；用洗滌的方法將固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例；加人底物后，底物被固相載體上的酶催化變成有色產(chǎn)物，通過定性或定量檢測(cè)有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測(cè)物質(zhì)含量。流程：包被、封閉、洗滌、加標(biāo)本、加酶標(biāo)抗體、加底物 使酶與地物顯色將抗原或抗體固定于固相載體表面并保留原有免疫活性

26、穩(wěn)定，是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的基礎(chǔ)臨床應(yīng)用：可對(duì)多種物質(zhì)進(jìn)行定性及半微量、微量、超微量定量分析。廣泛用于傳染病的診斷，病毒如病毒性肝炎（甲肝抗體、“乙肝三對(duì)”、丙肝抗體、丁肝抗體、戊肝抗體），風(fēng)疹病毒，皰疹病毒，輪狀病毒等；細(xì)菌如結(jié)核桿菌，幽門螺桿菌等。也用于一些蛋白質(zhì)檢測(cè)，如各種免疫球蛋白，補(bǔ)體，腫瘤標(biāo)記物（甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原）。第9章 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)1、 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)是將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立起來的一種新型檢測(cè)微量抗原或抗體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)。2、 化學(xué)發(fā)光劑chemiluminescence reagent：指在化學(xué)反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)射光子的形式

27、釋放能量的化合物。3、 簡(jiǎn)述化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理及用途直接化學(xué)發(fā)光免疫分析：是用化學(xué)發(fā)光劑（如吖啶酯）直接標(biāo)記抗體（抗原），與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)只需加入氧化劑（H2O2）和pH糾正液（NaOH）成為堿性環(huán)境，吖啶酯即可在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光?；瘜W(xué)酶免疫分析：用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶來標(biāo)記抗體（或抗原）。與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，加入底物（發(fā)光劑），酶催化和分解底物發(fā)光。電化學(xué)發(fā)光免疫分析：以電化

28、學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體（抗原），以三丙胺為電子供體，在電場(chǎng)中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過程。4、 簡(jiǎn)述電化學(xué)發(fā)光免疫分析的原理電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)在電極表面進(jìn)行，發(fā)光底物為基態(tài)三聯(lián)吡啶釕，另一反應(yīng)物為電子供體三丙胺（TPA）。在陽(yáng)極表面，以及兩種化合物均可失去電子而發(fā)生氧化反應(yīng)，TPA被氧化成陽(yáng)離子自由基，可將一個(gè)電子傳遞給三聯(lián)吡啶釕使其變成激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕在衰減時(shí)發(fā)射一個(gè)波長(zhǎng)為620nm的光子而又回到基態(tài)，這一過程可在電極表面周而復(fù)始的進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子，是光信號(hào)得以增強(qiáng)。5、 化學(xué)發(fā)光劑的類型可分為直接發(fā)光劑和間接發(fā)光劑，直接發(fā)光劑在發(fā)光免疫分析

29、過程中不需酶的催化作用，能直接參加發(fā)光反應(yīng)，主要包括吖啶酯和三聯(lián)吡啶釕。間接發(fā)光劑包括酶促反應(yīng)發(fā)光劑和酞箐、二甲基噻吩衍生物及Eu螯合物。常用酶促反應(yīng)發(fā)光劑包括魯米諾及其衍生物、金剛烷（AMPPD） 。第10章 膠體金免疫技術(shù)1、膠體金免疫技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物或顯色劑，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。2、膠體金是金鹽被還原成金原子后形成的金顆粒懸液；膠體金顆粒是一個(gè)金原子核與包圍在外周的雙離子層構(gòu)成（內(nèi)層負(fù)離子層AuCl2-，外層為帶正電荷H+）。特性：大小在1-100nm；穩(wěn)定、均勻，呈單一分散狀態(tài)懸浮于液體中；對(duì)電解質(zhì)敏感；大小不同則呈色不同，光吸收性也不同，可見光范圍內(nèi)

30、吸收峰波長(zhǎng)520-550nm；影響溶膠穩(wěn)定性的有電解質(zhì)、溶膠濃度、溫度和穩(wěn)定劑。制備方法-檸檬酸三鈉還原法。3、免疫金指膠體金與抗原或抗體等大分子物質(zhì)的結(jié)合物。制備過程實(shí)質(zhì)上是抗體蛋白等大分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。4、斑點(diǎn)免疫層析的試驗(yàn)的方法、結(jié)果判定及用途。是以硝酸纖維素膜為載體，將膠體金標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)結(jié)合起來的快速固相膜免疫分析技術(shù)；DICA液體的移動(dòng)是基于層析作用的橫流，測(cè)試時(shí)滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細(xì)管虹吸作用向另一端移動(dòng)，在移動(dòng)過程中被分析物與途徑玻璃纖維上干燥的抗體結(jié)合稱可溶性復(fù)合物，繼續(xù)層析與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結(jié)合而被固相化，無關(guān)物

31、則越過該區(qū)域被分離，然后通過膠體金的呈色條帶來判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果。DICA的判定：1雙抗體夾心法，陰性一條紅線，陽(yáng)性：兩條紅線，無紅線出現(xiàn)為試劑失效；2抑制法，T區(qū)無紅色線條出現(xiàn)結(jié)果為陽(yáng)性，T區(qū)有紅色條帶結(jié)果為陰性；若C區(qū)無紅色條帶出現(xiàn)則試劑失效3間接法，T和c處出現(xiàn)紅色線條為陽(yáng)性，不出現(xiàn)為陰性用途：適用于急診臨床、現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)、家庭檢驗(yàn)及需要大面積推廣的篩查項(xiàng)目的檢驗(yàn)等，也是床旁檢驗(yàn)的主要檢測(cè)手段之一。由于這類實(shí)驗(yàn)不能準(zhǔn)確定量，古目前主要用于檢測(cè)正常體液中不存在的物質(zhì)和正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(zhì)定性檢測(cè)。臨床的測(cè)定項(xiàng)目包括激素系列如絨毛膜促性腺激素（HCG）、促黃體激素（LH）、促卵泡激

32、素（FSH）等，腫瘤標(biāo)記物系列如甲胎蛋白（AEP）、癌胚抗原（CEA）等；傳染病系列如乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體等；心血管病標(biāo)志物系列如心肌鈣蛋白I（Tn-I）、心肌鈣蛋白T（Tn-T）等；毒品系列如可卡因、嗎啡等，并有繼續(xù)發(fā)展的趨勢(shì)。第11章 免疫組織化學(xué)技術(shù)1、 免疫組織化學(xué)技術(shù)的概念、特點(diǎn)及用途免疫組織化學(xué)技術(shù)immunohistochemistry technique簡(jiǎn)稱免疫組化技術(shù)，指用顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性定位定量的一項(xiàng)新免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)特點(diǎn)：特異性、敏

33、感性、可見性、集形態(tài)研究與動(dòng)能代謝相結(jié)合。用途：抗原檢測(cè)，服務(wù)于臨床疾病的診斷、鑒別診斷、機(jī)制探討、病程了解等。2、 常用的示蹤物有哪些辣根過氧化氫酶、鐵蛋白、葡聚糖鐵顆粒、放射性同位素標(biāo)記、重金屬以及血藍(lán)蛋白。3、 什么是親和免疫化學(xué)技術(shù)是利用兩種物質(zhì)之間的高度親和力而建立的免疫學(xué)方法。第12章 免疫細(xì)胞的分離與功能檢測(cè)1、 免疫細(xì)胞是指參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)的細(xì)胞2、 PBMC，外周血單個(gè)核細(xì)胞即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，3、 免疫磁珠即表面包被有免疫物質(zhì)的磁性微珠，其兼有免疫配基和磁響應(yīng)的性質(zhì)，即在磁場(chǎng)中顯示磁性，移除磁場(chǎng)時(shí)磁性消除。4、 PBMC分離的原理

34、、原則、方法（主要指淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞）的分離：原理-從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脾臟或淋巴組織中獲取外周靜脈血，利用密度梯度離心法（細(xì)胞密度不同）對(duì)PBMC進(jìn)行分離或利用聚蔗糖-泛影葡胺分層液法（單次差數(shù)密度梯度離心分離法）分離PMBC。常用方法是密度梯度離心法原理：對(duì)于人PBMC，根據(jù)其細(xì)胞密度與其他細(xì)胞不同的特點(diǎn)，利用密度介于1.075-1.092之間、近于等滲的分層液進(jìn)行密度梯度離心，可使不同密度的血細(xì)胞按其相應(yīng)密度梯度重新分布、聚集、分層，從而將PBMC分離出來。原則在獲取細(xì)胞后的試驗(yàn)操作應(yīng)盡量在低溫（4-8）條件下或置冰塊中進(jìn)行。5、 F-H分離液的要求分離介質(zhì)必須是對(duì)細(xì)胞無毒、不溶于血漿、有一定比

35、重的等滲溶液。Ficoll分離液主要用于分離外周血中的單個(gè)核細(xì)胞，是單詞差速密度梯度離心的分離方法，有聚蔗糖-泛影葡胺混合而成的一種較理想的細(xì)胞分層液，分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞以比重在1.077±0.001的Ficoll分離液為佳。6、 吞噬細(xì)胞的類型與功能吞噬細(xì)胞是指具有吞噬功能的一類細(xì)胞，如中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。吞噬細(xì)胞所具有的吞噬功能不僅使其在固有免疫應(yīng)答中能夠及時(shí)有效地清除病原體，還能將吞入的病原體進(jìn)行消化、處理、提呈抗原肽給淋巴細(xì)胞，從而啟動(dòng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答，因此吞噬小白的功能將直接影響到集體的固有免疫和適應(yīng)性免疫的水平。7、 如何鑒別T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞外周血中

36、單個(gè)核細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞 不同，紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞密度較大，為1.090左右，而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞密度為1.0751.090，血小板為1.0301.035。為此利用一種密度介于1.0751.092之間而近似于等滲的溶液（分層液）做密度梯度離心，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將各種血細(xì)胞加以分離。根據(jù)T、B細(xì)胞表面標(biāo)志及粘附能力等不同，可將二者加以分離。我們這次實(shí)驗(yàn)利用E花結(jié)形成法從淋巴細(xì)胞中提取T細(xì)胞。綿羊紅細(xì)胞（SRBC）能與人類T細(xì)胞形成E花環(huán)。經(jīng)溴化二氨基異硫基異硫脲氫化物（AET）處理SRBC，能與T細(xì)胞形成穩(wěn)定而巨大的E花環(huán)。淋巴細(xì)胞分

37、離液分離時(shí)，AET-E花環(huán)沉與管底，在分離液界面的為淋巴B細(xì)胞；沉于管底的AET-E花環(huán)經(jīng)低滲溶液溶解花環(huán)周圍的SRBC，即可獲得純的T細(xì)胞。第13章 流式細(xì)胞術(shù)1、 流式細(xì)胞術(shù)可在細(xì)胞保持完整的情況下，精確、快速、高通量的對(duì)液相的單個(gè)細(xì)胞或懸浮顆粒的理化及生物學(xué)特征進(jìn)行分子水平的多參數(shù)、定量分析，并可對(duì)特定群體進(jìn)行分選的技術(shù)。特點(diǎn)-檢測(cè)速度快、靈敏度高、多參數(shù)檢測(cè)、精度高、純度高、無害性。2、 其檢測(cè)參數(shù)有哪些？其相應(yīng)意義是什么？散射光信號(hào)（物理參數(shù)）-與細(xì)胞的大小、活力、細(xì)胞膜及核膜、細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度有關(guān)。分為前向角散射光FSC（與細(xì)胞大小/直徑平方正相關(guān)）和側(cè)向角散射光SSC（與胞

38、漿內(nèi)顆粒度正相關(guān)）。熒光信號(hào)（特殊性信號(hào)）：表示抗原表達(dá)量的多少。3、 光譜重疊是指在一個(gè)熒光信號(hào)檢測(cè)器中檢測(cè)到另一種熒光信號(hào)。4、 熒光補(bǔ)償去除交叉檢測(cè)到的熒光的過程，確保檢測(cè)熒光信號(hào)特異性。5、 流式圖有哪些形式：?jiǎn)螀?shù)直方圖、雙參數(shù)散點(diǎn)圖、多參數(shù)等高圖、假三維圖等。6、 流式細(xì)胞術(shù)的免疫學(xué)應(yīng)用答：1.淋巴細(xì)胞亞群分類包括T淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞及其亞群分析和NK細(xì)胞分析。2.淋巴細(xì)胞功能分析包括細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒性試驗(yàn)、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子測(cè)定與活化和記憶性細(xì)胞的檢測(cè)。3.分析自身免疫性疾病相關(guān)HLA抗原、AIDS病檢測(cè)中的、血液病和腫瘤的免疫檢測(cè)以及器官移植方面的應(yīng)用。第15章 免疫學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量保證

39、1、 質(zhì)控的目的：保證檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量，準(zhǔn)確、可靠、及時(shí)、有效，并盡可能使各實(shí)驗(yàn)室室間檢驗(yàn)結(jié)果有可比性。2、 質(zhì)控的方法：Levey-Jennings質(zhì)控圖方法、Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法、累積和（CUSUM）質(zhì)控方法、“即刻法”質(zhì)控方法。3、 免疫學(xué)檢測(cè)方法診斷的常用指標(biāo)診斷敏感性，實(shí)際患者正確地判斷為陽(yáng)性（真陽(yáng)性）的百分率；診斷特異性：將實(shí)際無病者正確診斷為陰性（真陰性）的百分率；診斷效率，能準(zhǔn)確區(qū)分患者和非患者的能力；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，特定試驗(yàn)方法測(cè)定得到的陽(yáng)性結(jié)果中真陽(yáng)性的比率；陰性預(yù)測(cè)值，特定試驗(yàn)方法測(cè)定的陰性結(jié)果中真陰性的比值。4、 標(biāo)準(zhǔn)品及分類：標(biāo)準(zhǔn)品（standard）指性質(zhì)純的處

40、于一定機(jī)制中已知含量或成分且特性明確的物質(zhì)，通常用于比較檢測(cè)未知的物質(zhì)或成分。分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，商業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品是三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。5、 質(zhì)控品及分類：質(zhì)控品（quality testing materisls）是專門用于質(zhì)量控制的目的特性明確的物質(zhì)，其含量已知并處于與實(shí)際標(biāo)本相同的基質(zhì)中，故質(zhì)控物必需按患者標(biāo)本一樣對(duì)待進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)用途分為室內(nèi)質(zhì)控品、室間質(zhì)評(píng)樣本和質(zhì)控血清盤三類。根據(jù)物理性質(zhì)分為凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品。根據(jù)方法分為定性質(zhì)控品和定量質(zhì)控品。第16章 超敏反應(yīng)性疾病及免疫學(xué)檢驗(yàn)1、 超敏反應(yīng)的概念、特點(diǎn)超敏反應(yīng)是指被某種抗原致敏的機(jī)體再次

41、受相同抗原刺激時(shí)，出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷的異常免疫應(yīng)答。特點(diǎn)、II、III型超敏反應(yīng)發(fā)生比較快、可由抗體介導(dǎo)，并通過血清中的抗體被動(dòng)轉(zhuǎn)移給正常人。I型必須有與肥大細(xì)胞及嗜堿細(xì)胞高親和的IgE參與；II型必須有靶細(xì)胞表面抗原結(jié)合的IgG、IgM參與；III型必須有IgG或IgM與抗原形成一定大小的免疫復(fù)合物，且沉積之后致??；IV型超敏反應(yīng)是由T細(xì)胞介導(dǎo)。2、 各型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制、特點(diǎn)、免疫學(xué)特征及檢驗(yàn)指標(biāo) 型超敏反應(yīng)/速發(fā)型/變態(tài)反應(yīng)/過敏反應(yīng)：是由特異性IgE抗體介導(dǎo)的，肥大細(xì)胞核嗜堿性粒細(xì)胞釋放的活性介質(zhì)引起生理功能紊亂或組織損傷的超敏反應(yīng)。特征：發(fā)生快，消退也快；通常使機(jī)體出現(xiàn)

42、功能性紊亂，不發(fā)生嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷；具有明顯的個(gè)體差異和遺傳背景；效應(yīng)器官為平滑肌、黏膜、毛細(xì)血管、皮膚等。機(jī)制：a致敏階段-抗原初次進(jìn)入機(jī)體后，誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生IgE類抗體應(yīng)答。IgE類抗體以其Fc段與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面相應(yīng)的FcR結(jié)合，而使機(jī)體處于對(duì)該變應(yīng)原的致敏狀態(tài)。b激發(fā)階段-相同變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體時(shí)，通過與致敏肥大細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞表面IgE抗體特異性結(jié)合，使膜表面FcR交聯(lián)，觸發(fā)致敏靶細(xì)胞脫顆粒，釋放及合成生物活性介質(zhì)。c效應(yīng)階段-生物活性介質(zhì)作用于效應(yīng)組織和器官，引起局部或全身過敏反應(yīng)。常見?。哼^敏性休克、支氣管哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎等。免疫學(xué)檢測(cè)診斷：皮膚測(cè)試（包

43、括皮內(nèi)試驗(yàn)和點(diǎn)刺試驗(yàn)）和IgE測(cè)定。 型超敏反應(yīng)/細(xì)胞溶解型/細(xì)胞毒型：由抗細(xì)胞表面抗原的IgG或IgM類抗體介導(dǎo)，補(bǔ)體活化、抗體和補(bǔ)體的調(diào)理作用及ADCC造成細(xì)胞損傷。機(jī)制： IgG和IgM類抗體與靶細(xì)胞表面抗原特異性結(jié)合后，可通過激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑形成膜免疫復(fù)合物，直接引起膜損傷使靶細(xì)胞溶解破壞；也可通過Fc段與吞噬細(xì)胞表面相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮抗體調(diào)理作用，或通過與吞噬細(xì)胞表面C3b受體結(jié)合，促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬破壞靶細(xì)胞；IgG類抗體與靶細(xì)胞特異性結(jié)合后，還可通過其Fc段與效應(yīng)細(xì)胞(巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和NK細(xì)胞)表面相應(yīng)受體結(jié)合，對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生ADCC作用，使之溶解破壞；此外，抗細(xì)胞表面受體的自身

44、抗體與相應(yīng)受體結(jié)合，可導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂，表現(xiàn)為受體介導(dǎo)的對(duì)靶細(xì)胞的刺激或阻斷作用。常見?。狠斞磻?yīng)、新生兒溶血癥、藥物過敏性血細(xì)胞減少癥、自身免疫性溶血性貧血、腎小球腎炎、急性風(fēng)濕熱、肺出血-腎炎綜合征、Graves病、重癥肌無力、胰島素抗性糖尿病等。免疫學(xué)檢驗(yàn)：檢測(cè)血細(xì)胞抗體。特點(diǎn)：發(fā)作較快；抗體（IgG或IgM）直接與靶細(xì)胞表面抗原結(jié)合；補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和NK細(xì)胞參與 III型超敏反應(yīng)/免疫復(fù)合物型/血管炎型：由免疫復(fù)合物IC介導(dǎo)，補(bǔ)體活化、中性粒細(xì)胞釋放溶酶體酶和血小板活化導(dǎo)致血管性炎癥和組織損傷。機(jī)制：可溶性免疫復(fù)合物(IC)沉積于局部或全身毛細(xì)血管基底膜后，通過激活補(bǔ)體和血小板、嗜堿性

45、粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞參與作用下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。常見病：局部免疫復(fù)合物病、鏈球菌感染后腎小球腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等免疫學(xué)檢驗(yàn)：檢測(cè)免疫復(fù)合物。特點(diǎn)：游離抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物（IC），若IC不能被及時(shí)清除，即可在局部沉積，通過激活補(bǔ)體，并在血小板、中性粒細(xì)胞及其他細(xì)胞參與下，引發(fā)一系列連鎖反應(yīng)而致組織損傷。在免疫應(yīng)答過程中，抗原抗體復(fù)合物的形成是一種常見(型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生機(jī)理現(xiàn)象，但大多數(shù)可被機(jī)體的免疫系統(tǒng)清除。如果因?yàn)槟承┮蛩卦斐纱罅繌?fù)合物沉積在組織中，則引起組織損傷和出現(xiàn)相關(guān)的免疫復(fù)合物病。 IV型超敏反應(yīng)/遲發(fā)型

46、超敏反應(yīng)DTH：由TDTH細(xì)胞介導(dǎo)，T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)、活化及產(chǎn)生的細(xì)胞因子引起炎癥反應(yīng)和組織損傷。機(jī)制：典型的細(xì)胞免疫應(yīng)答過程?？乖镔|(zhì)經(jīng)APC加工處理后，使具有相應(yīng)抗原受體的Th和CTL細(xì)胞識(shí)別活化，產(chǎn)生效應(yīng)性CD4+Thl和CD8+ CTL細(xì)胞。效應(yīng)T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及所產(chǎn)生的細(xì)胞因子和細(xì)胞毒性介質(zhì)與炎癥反應(yīng)和組織損傷有關(guān)。常見病：感染性遲發(fā)型超敏反應(yīng)性疾病、接觸性皮炎、移植排斥反應(yīng)、自身免疫病等免疫學(xué)檢驗(yàn)：皮膚測(cè)試。特點(diǎn)：病情發(fā)展快慢不一可發(fā)生于藥物外用、職業(yè)性化學(xué)接觸、疫苗接種、抗毒血清注射、器官移植、組織外傷、自身隱蔽性抗原接觸等常發(fā)生于皮膚、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、甲狀腺、眼等表現(xiàn)為皮膚紅

47、腫、癢、滲出、肌張力降低，多發(fā)性感覺或運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能低下，眼紅疼痛、畏光，視力減退等第17章 自身免疫病與免疫學(xué)檢驗(yàn)1、 自身免疫病的概念、分類及基本特征2、 自身免疫病AID由于過度而持久的自身免疫應(yīng)答導(dǎo)致組織、器官損傷并引起相應(yīng)器官病變或臨床癥狀的一類疾病。分類（1）按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類，可分為結(jié)締組織病，消化系統(tǒng)疾病和內(nèi)分泌疾病等。 （2）按病變組織涉及的范圍分類，可分為器官特異性（慢性甲狀腺肝炎、自身免疫性溶血性貧血、重癥肌無力）和非器官特異性（RASLE）。自身免疫病的基本特征：1多數(shù)病因不明，往往女性高發(fā)，且具有遺傳傾向性。2患者體內(nèi)可檢出高效價(jià)的自身抗體和自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞。

48、3一般病程較長(zhǎng)，多呈反復(fù)發(fā)作和慢性遷移不愈，疾病轉(zhuǎn)歸與自身免疫應(yīng)答的強(qiáng)度密切相關(guān)。4腎上腺皮質(zhì)激素等免疫抑制治療可緩解癥狀。5常有其他自身免疫病同時(shí)存在。6可在體外復(fù)制出相關(guān)動(dòng)物病理模型。3、 抗核抗體的檢測(cè)方法及臨床意義抗核抗體ANA-活動(dòng)性SLE的敏感指標(biāo)抗DNA抗體daDNA-SLE特征性指標(biāo)抗ENA抗體：抗UI-RNP抗體-混合性結(jié)締組織病特征性抗體；抗Sm抗體-SLE特異抗體；抗SS-A(Ro)抗體-干燥綜合征、SLE、原發(fā)性膽汁性肝硬化；抗SS-B(La)抗體-干燥綜合征、SLE；抗Scl-70抗體-進(jìn)行性系統(tǒng)硬化癥；抗Jo-1抗體-多發(fā)性肌炎；抗組蛋白抗體：缺乏特異性；抗PCNA

49、-SLE；抗Ki(SL)抗體-SLE；核糖體蛋白P抗原-SLE；抗磷脂抗體-原發(fā)性抗磷脂綜合征、SLE。意義-ANA滴度及熒光核型對(duì)于SLE等疾病的自身抗體檢測(cè)具重要意義；常見熒光核型-均質(zhì)型H、斑點(diǎn)型S、核膜型M、核仁型N、著絲點(diǎn)型等。第18章 免疫增殖病與免疫學(xué)檢驗(yàn)1、免疫增殖病（immunoproliferative diseases）是指免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞）異常增生（良性或惡性）引起的機(jī)體病理?yè)p傷。2、單克隆蛋白（monoclonal protein，MP）單克隆免疫球蛋白病時(shí)，由于單株漿細(xì)胞異常增殖，而產(chǎn)生大量理化性質(zhì)十分均一的免疫球蛋白3、

50、本周蛋白（Bence-Jones protein）游離于血清的免疫球蛋白輕鏈可以從尿中排出4、簡(jiǎn)述單克隆免疫球蛋白病的免疫學(xué)鑒定程序血清蛋白區(qū)帶電泳：血清標(biāo)本中不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)經(jīng)區(qū)帶電泳可明顯分開，形成不同的區(qū)帶，很容易發(fā)現(xiàn)患者電泳圖譜有一狹窄而濃縮的集中帶。即M區(qū)帶，若出現(xiàn)假的狹區(qū)帶，易與M蛋白混淆，應(yīng)進(jìn)一步做免疫電泳等分析1.待測(cè)血清標(biāo)本與某型TG重鏈輕鏈抗血清產(chǎn)生相同遷移度的特殊沉淀弧，且存在于M蛋白，多見于IgG、IgA、TgM型多發(fā)性骨髓瘤或原發(fā)性巨球蛋白血癥等；2.在同一抗輕鏈血清的反應(yīng)中同時(shí)出現(xiàn)一條毗鄰的特殊沉淀弧，可能除M蛋白外還存在游離輕鏈，或另一種M蛋，應(yīng)該進(jìn)一步側(cè)本周蛋白；3.患者血清只與IgG、IgA或IgM中的一種抗重鏈血清產(chǎn)生一特殊沉淀弧，但在兩型抗輕鏈血清中無相應(yīng)位置的沉淀出現(xiàn)，經(jīng)-2硫基乙醇還原處理后，仍無改變，可能為重鏈病，需進(jìn)一步測(cè)定其分子量；4.患者血清僅于其中一種抗輕鏈抗血清產(chǎn)生一種特殊的沉淀弧。5.非分泌型骨髓瘤血清標(biāo)本在免疫電泳中均不出現(xiàn)特殊沉淀。5.本周蛋白：對(duì)輕鏈病的診斷是必不可少的項(xiàng)目，并對(duì)多發(fā)性骨髓瘤厚發(fā)性巨球蛋白血癥，重鏈病等的診斷鑒別和預(yù)后判斷均有一定幫助。第19章 免疫缺陷病