Caco_2細(xì)胞模型在中藥口服吸收及機(jī)制研究中的應(yīng)用

1、616中草藥ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月綜述Caco-2細(xì)胞模型在中藥口服吸收及機(jī)制研究中的應(yīng)用盧智玲,馮怡,徐德生3,林曉,楊揚(yáng)(上海中醫(yī)藥大學(xué),上海201203)摘要:吸收過(guò)程是決定口服藥物生物利用度的重要因素,Caco22細(xì)胞模型是目前國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用的體外吸收模型,已迅速發(fā)展成為研究藥物吸收的必備手段,并已獲美國(guó)FDA批準(zhǔn)用作藥物篩選模型,用Caco22細(xì)胞模型來(lái)研究中藥復(fù)雜成分的吸收有助于對(duì)中藥有效成分的了解。以國(guó)內(nèi)、,對(duì)Caco22細(xì)胞模。關(guān)鍵詞:Caco22細(xì)胞模型;口服吸收;中藥中圖分類號(hào):R28515文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

2、04061604ApplicationofilabsorptionofChinesemateriamedicaanditsmechanismi2ling,FENGYi,XUDe2sheng,LINXiao,YANGYang(ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,China)Keywords:Caco22cellmodel;peroralabsorption;Chinesemateriamedica口服給藥是最方便、最常用的臨床給藥途徑,口服藥物制劑欲發(fā)揮治療作用,吸收是關(guān)鍵。目前用于藥物吸收的實(shí)驗(yàn)方法包括體內(nèi)

3、和體外兩部分。盡管體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)芨玫胤从辰o藥后藥物的吸收過(guò)程,但很難從細(xì)胞或分子水平研究藥物的吸收機(jī)制,而且由于動(dòng)物有個(gè)體差異,建立生物樣本中藥物的分析方法難度大,另外,整體動(dòng)物吸收代謝的耗藥量大,周期較長(zhǎng),不適合藥物開發(fā)早期的快速篩選過(guò)程。而體外實(shí)驗(yàn)?zāi)芴峁┹^為直觀的藥物吸收過(guò)程的證據(jù),因此被廣泛采用。目前,體外實(shí)驗(yàn)的方法主要有:在體腸灌流法、腸襻法、分離腸黏膜法、翻轉(zhuǎn)腸法等1。然而,這些方法存在著動(dòng)物組織與人組織的種屬差異及復(fù)雜的手術(shù)操作等問(wèn)題。從20世紀(jì)80年代起,國(guó)外開始應(yīng)用一種人結(jié)腸癌細(xì)胞(thehumancoloncarcinomacellline,簡(jiǎn)稱Caco22細(xì)胞)體外培養(yǎng)模型進(jìn)

4、效工具被廣泛應(yīng)用。美國(guó)FDA已批準(zhǔn)用Caco22細(xì)胞系體外模型用作藥物篩選模型。值得關(guān)注的是,用Caco22細(xì)胞來(lái)研究中藥復(fù)雜成分的吸收有助于中藥有效成分的了解。Caco22細(xì)胞模型在中藥吸收方面的研究熱點(diǎn)目前主要集中在對(duì)黃酮類化合物及生物堿吸收機(jī)制的研究,對(duì)強(qiáng)心苷、香豆素、皂苷及萜類化合物的研究也有報(bào)道2。研究報(bào)道較多的有小檗堿3、喜樹堿4、92硝基喜樹堿5、紫杉醇6、金雀異黃素7、槲皮素42葡萄糖苷8、人參皂苷Rg39、阿魏酸10、兒茶酚11等。同時(shí),Caco22細(xì)胞模型對(duì)吸收過(guò)程中藥物相互作用的預(yù)測(cè)完全可能用于中藥復(fù)方的配伍研究,從而揭示中藥復(fù)方的配伍機(jī)制。本文通過(guò)查閱大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),并

5、結(jié)合自身研究領(lǐng)域,擬對(duì)Caco22細(xì)胞模型作一介紹,并就Caco22細(xì)胞模型在中藥口服吸收及機(jī)制研究方面的應(yīng)用及其可能前景作一綜述。1Caco-2細(xì)胞模型與藥物體內(nèi)吸收的相關(guān)性行藥物的吸收研究。Caco22細(xì)胞模型具有以下優(yōu)點(diǎn):研究藥物從小腸吸收以往主要考慮的是從腸腔一側(cè)(AP側(cè),api2calside)攝入。實(shí)際上,藥物從腸道到達(dá)循環(huán)系統(tǒng),包括AP生Caco22細(xì)胞來(lái)源于人體結(jié)腸癌細(xì)胞,其結(jié)構(gòu)和生理、化作用類似人體小腸上皮細(xì)胞:具有微絨毛結(jié)構(gòu),各種體內(nèi)的代謝酶、糖類、氨基酸、P450同工酶及各種主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的載體,因此,藥物在Caco22細(xì)胞的滲透性與藥物在人體小腸黏膜上層細(xì)胞吸收具有很好的相關(guān)

6、性。Borchardt等12最早提出Ca2co22細(xì)胞模型可用于研究藥物分子經(jīng)小腸上皮吸收的過(guò)程。Rubas等13比較了一系列具有低滲透率的藥物在Caco22細(xì)側(cè)攝入和從腸壁一側(cè)(BL側(cè),basolateralside)外排兩個(gè)過(guò)程。用Caco22細(xì)胞模型可以分別研究藥物從AP側(cè)的攝入,在細(xì)胞中的滯留代謝及BL側(cè)的外排等過(guò)程,因此對(duì)闡明藥物在小腸中的吸收機(jī)制是十分有用的,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)則無(wú)法做到這些。條件容易控制,數(shù)據(jù)重復(fù)性好。與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相比,更省時(shí)和經(jīng)濟(jì)。因此其迅速發(fā)展成為研究藥物吸收的必備手段,作為藥物攝取、外排和跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)等吸收機(jī)制研究的有收稿日期:2005208231胞模型和人體小腸的吸收,

7、結(jié)果表明細(xì)胞培養(yǎng)模型能很好地作者簡(jiǎn)介:盧智玲(1977),女,江西撫州人,在讀博士生,研究方向?yàn)橹兴幮轮苿?。Tel:(021)50808649E2mail:luzhiling02123通訊作者徐德生Tel:(021)51322493中草藥ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月模擬腸道組織(r=0.998)。Artursson等14用Caco22細(xì)胞模型研究了20種藥物的吸收,發(fā)現(xiàn)這些藥物的表現(xiàn)滲透系數(shù)(Papp)與人體口服吸收分?jǐn)?shù)具有良好的相關(guān)性。吸收良好的617型,研究92NC的小腸吸收機(jī)制,闡明影響藥物口服吸收的因素,從而為制備92NC

8、的新型口服制劑92NC自微乳化給藥系統(tǒng)提供合理依據(jù),并考察影響制劑中藥物Caco22細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)的因素。結(jié)果表明,與同濃度的92NC溶液相比,3種92NC自微乳化制劑在考察的稀釋倍數(shù)內(nèi),均能顯著增加92NC的細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)。213評(píng)價(jià)前體藥物的口服吸收:很多藥物自身的口服生物藥物的Papp110-6cm s;吸收為1%100%的藥物Papp為110-7110-6cm s;而吸收差的藥物(即吸收1%)的Papp110-7理化性質(zhì)相差cm s。Yee15報(bào)道了35種結(jié)構(gòu)、很大的化合物,其體內(nèi)吸收與Papp之間的線型關(guān)系:吸收百分率=1.951n(Papp)+24.4,r=0.95,N=35。由于

9、Caco22細(xì)胞單分子層相對(duì)于小腸皺狀上皮,其解剖結(jié)構(gòu)的表面積相差很大,而從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以推測(cè),對(duì)于快速吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的藥物,小腸微絨毛只是部分參與了體內(nèi)吸收,這樣Caco22細(xì)胞單分子層與小腸的吸收表面積差別不是很大,所以它是很好的預(yù)測(cè)通過(guò)被動(dòng)吸收途徑吸收藥物的體外模型。Lennernas等16評(píng)價(jià)了3種不同類別的藥物在,僅24倍;,在細(xì)胞模型上2779倍,這可能是與吸收表面積相差較大及細(xì)胞間水性轉(zhuǎn)運(yùn)孔道的緊密性有關(guān),因此對(duì)于吸收較差的藥物采用Caco22細(xì)胞模型預(yù)測(cè)要限制在一個(gè)很窄的濃度范圍內(nèi)。有研究17表明左旋多巴(L2dopa)、中性氨基酸等是經(jīng)載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)吸收的,其在Ca2co22細(xì)胞模型中

10、的吸收約為體內(nèi)吸收的1%。而其他非載體利用度不高,但與某些化學(xué)基團(tuán)結(jié)合成前體藥后可顯著改善其生物利用度。用常規(guī)體外模型去評(píng)價(jià)前體藥的相對(duì)有效性是困難的,并且耗資巨大。2細(xì)胞模型可成功地用于評(píng)。Rouquay2佳息19IV(saquinavir)、)(nelfinavir)的多種前體藥進(jìn)行了。利用Caco22細(xì)、D2葡萄糖及PEG結(jié)合的前體藥進(jìn)行篩選,結(jié)果篩選到經(jīng)L2valyl、L2leucyl及L2phenylalanyl2酯化的前體藥,顯著提高了這幾種藥的跨膜通透率及口服生物利用度。同樣,中藥有些成分,因其親水性很強(qiáng),往往吸收不佳,若能制備親脂性適當(dāng)增強(qiáng)的前體藥,并以Caco22細(xì)胞模型進(jìn)行

11、評(píng)價(jià),則有可能使其口服吸收大大提高。214確定藥物在腸腔吸收的最適pH值:腸腔pH影響藥物吸收,采用Caco22細(xì)胞模型,用不同pH的轉(zhuǎn)運(yùn)介質(zhì)進(jìn)行藥物轉(zhuǎn)運(yùn)的研究,比較不同pH值下藥物滲透系數(shù)的大小,可確定藥物吸收的最佳pH值及有效吸收部位。同時(shí)測(cè)定不同pH值下藥物溶解度,可以闡明溶解度與吸收的關(guān)系。Yamashita等20利用Caco22細(xì)胞模型研究了多種藥物在不同pH值下的表觀滲透系數(shù)之后,把這些藥物分為3種類型:吸收不受pH值影響型;在相同pH值條件下,通透率較高型;隨著pH值的梯度下降,通透率增高型。根據(jù)這些數(shù)據(jù),可得到不同藥物的最佳吸收pH值,對(duì)不同藥物制劑的設(shè)計(jì)具有參考價(jià)值。Koni

12、shi等10研究了阿魏酸(ferulicacid)的跨上皮轉(zhuǎn)運(yùn),采用的方法是直接測(cè)定它在Caco22單細(xì)胞層上的轉(zhuǎn)運(yùn)速率,并指出這種轉(zhuǎn)運(yùn)是依賴于pH的。215用于吸收過(guò)程藥物相互作用的預(yù)測(cè):通常,發(fā)生在小腸轉(zhuǎn)運(yùn)的小分子有機(jī)物在Caco22細(xì)胞模型以及小腸吸收模型中很好的相關(guān)性。所以,對(duì)于載體介導(dǎo)的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)而言,只有當(dāng)Caco22細(xì)胞上的相關(guān)載體充分表達(dá)后,藥物在Caco22細(xì)胞模型中轉(zhuǎn)運(yùn)才能與體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)狀況相關(guān),而且相關(guān)強(qiáng)度會(huì)因化合物不同而異。這也表明Caco22細(xì)胞模型是被運(yùn)轉(zhuǎn)運(yùn)途徑較好的體外模型,對(duì)其他轉(zhuǎn)運(yùn)途徑只可作為參考模型。2Caco-2細(xì)胞模型在藥物吸收及機(jī)制研究中的應(yīng)用211用于篩選

13、吸收促進(jìn)劑:許多水溶性大分子藥物,如蛋白質(zhì)和肽類,由于其親水性及大分子結(jié)構(gòu),不能穿過(guò)腸黏膜,吸收效果不佳。提高大分子藥物腸吸收的有效方式之一就是與吸收促進(jìn)劑同時(shí)給藥。目前,報(bào)道較多的吸收促進(jìn)劑主要有癸酸鈉、膽酸鹽、一氧化氮供體等。而以Caco22細(xì)胞為模型,有可能從天然藥物中篩選到理想的吸收促進(jìn)劑。Sim等18用該模型研究了硫酸軟骨素的吸收促進(jìn)劑,從韓國(guó)傳統(tǒng)民間藥遼東木Araliaelata(Miq1)Seem1根皮中分離的皂苷(SR2BAE)在0.04%和0.08%質(zhì)量濃度下,呈劑量依賴方式降低跨膜電阻值(TEER),增加相對(duì)分子質(zhì)量分別為500、4500、18000的硫酸軟骨素的細(xì)胞旁路轉(zhuǎn)

14、運(yùn),并經(jīng)MTT試驗(yàn)及臺(tái)上皮的生化過(guò)程,即代謝、受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)、P2糖蛋白(P2glycoprotein,P2gp)對(duì)藥物分子的泵出是一個(gè)飽和過(guò)程21,此過(guò)程可顯著地影響藥物的生物利用度。當(dāng)聯(lián)合用藥時(shí),增加了藥物競(jìng)爭(zhēng)酶、載體或P2gp泵的可能性,導(dǎo)致較單獨(dú)給藥,在動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)上預(yù)期的生物利用度偏高或偏低。這種與藥物吸收有關(guān)的相互作用可以在Caco22細(xì)胞模型中進(jìn)行研究和評(píng)估。此外,與藥物吸收有關(guān)的相互作用還可來(lái)源于代謝酶、載體、P2gp泵被特定藥物重復(fù)給藥引起的誘導(dǎo)22。以Caco22細(xì)胞模型為工具,從腸吸收角度,在中醫(yī)藥配伍理論盼藍(lán)不相容試驗(yàn)證明0.04%和0.08%的SRBAE的細(xì)胞毒性可以忽

15、略不計(jì)。212研究處方劑型因素對(duì)吸收的影響:92硝基喜樹堿(92NC)是一種新型的喜樹堿水不溶性衍生物,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)指導(dǎo)下有針對(duì)性地研究一些中藥復(fù)方制劑中有效成分的吸收,并逐漸過(guò)渡到研究它們的相互作用,有助于對(duì)中藥復(fù)方配伍規(guī)律科學(xué)性的理解,從而完成從基本單元回推到復(fù)雜體系的研究過(guò)程,有可能推進(jìn)中藥復(fù)方配伍傳統(tǒng)理論與中藥復(fù)方現(xiàn)代科學(xué)基礎(chǔ)的有機(jī)結(jié)合。多種癌細(xì)胞具有強(qiáng)抑制活性。但由于92NC的水難溶性,并且在體內(nèi)生理環(huán)境下迅速水解為無(wú)藥理活性的羧酸鹽形式,其口服絕對(duì)生物利用度僅為14%。沙先誼5利用Caco22細(xì)胞模618中草藥ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37

16、卷第4期2006年4月度梯度運(yùn)至胞外,這與體內(nèi)小腸上皮的外排系統(tǒng)一致。這些外排系統(tǒng)主要引起的藥物多藥耐藥性,是造成低生物利用度的原因之一。紫杉醇和小檗堿是兩種被廣泛使用的生物堿類藥物,具有多種藥理活性,但它們的口服生物利用度都相對(duì)較低,尤其是紫杉醇。有人應(yīng)用Caco22細(xì)胞模型對(duì)這兩種藥物的研究顯示,紫杉醇6的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)可被一種新型P2gp抑制劑KP30031(維拉帕米的類似物)增強(qiáng),在加入KP30031共同給216用于闡明藥物的吸收機(jī)制:通常,藥物跨過(guò)腸上皮細(xì)胞有4種主要途徑:跨細(xì)胞轉(zhuǎn)移、胞旁轉(zhuǎn)運(yùn)、載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)、胞飲。Caco22細(xì)胞模型在藥物吸收機(jī)制研究中的應(yīng)用包括:研究口服藥物從AP到BL

17、方向或從BL到AP方向的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程,明確藥物吸收是被動(dòng)擴(kuò)散還是主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn),為給藥方案設(shè)計(jì)提供依據(jù);對(duì)于主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)藥物,明確從AP到BL是限速過(guò)程還是從BL到AP是限速過(guò)程,了解藥物是否會(huì)在細(xì)胞內(nèi)蓄積;探討配伍用藥物的相互作用及對(duì)吸收環(huán)境(如pH和競(jìng)爭(zhēng)轉(zhuǎn)運(yùn)載體及飽和機(jī)制等)的影響,改變了吸收環(huán)境對(duì)主藥吸收的影響等。21611Caco22細(xì)胞模型用于被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的研究:90%以上的藥后,其生物利用度增加了7.5倍。小檗堿3BL2AP方向的Papp值是AP2BL方向30倍,且這一雙向轉(zhuǎn)運(yùn)的差異在加入P2gp抑制劑維拉帕米后消失。,紫杉醇和小檗堿的外排作用。同樣,槲皮素482,這一藥物主要通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入體內(nèi),

18、這些藥物的脂溶性好,油水分布系數(shù)大,易分布于上皮細(xì)胞脂質(zhì)膜23。吸收緩慢且較差的藥物,如親水性藥物以及多肽等,主要經(jīng)胞旁轉(zhuǎn)運(yùn)。胞旁間隙僅占腸管表面積的0.1%0.是藥物胞旁轉(zhuǎn)運(yùn)的限速因素,貢獻(xiàn)是有限的。綠原酸24跨Caco22,將綠原酸加于AP面給藥,則幾乎所有的綠原酸都保留在AP面,而且跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)量與胞旁轉(zhuǎn)運(yùn)呈反比。以上結(jié)果表明,綠原酸主要由胞旁擴(kuò)散的方式轉(zhuǎn)運(yùn)。21612Caco22細(xì)胞模型用于載體介導(dǎo)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的研究:除2,但卻能被MRP競(jìng)爭(zhēng)性抑制,這一結(jié)果說(shuō)明槲皮素42葡萄糖Caco22細(xì)胞模型中的外排是由MRP介導(dǎo)的,同時(shí)服用MRP抑制劑對(duì)提高該化合物的口服吸收程度可能有幫助。Zhang

19、11等用Caco22細(xì)胞模型研究?jī)翰杷胤謩e在加與不加MRP抑制劑MK2571情況下AP2BL與BL2AP方向的轉(zhuǎn)運(yùn),結(jié)果也證明存在由MRP介導(dǎo)的顯著外排。3結(jié)語(yǔ)Caco22細(xì)胞模型在闡明藥物吸收機(jī)制,預(yù)測(cè)體內(nèi)吸收、代謝和藥物相互作用,設(shè)計(jì)有更好吸收和更高生物利用度的口服藥物或制劑并評(píng)價(jià)它們的安全性等方面是很有力的工具。在中醫(yī)藥理論和方法學(xué)基礎(chǔ)上,從中藥方劑中抽取出一些基本單元,即已經(jīng)肯定藥效作用的中藥成分或部位進(jìn)行腸吸收的過(guò)程、性質(zhì)和機(jī)制的研究,包括提取工藝、處方及制劑技術(shù)、劑型等因素對(duì)這些成分的作用和影響,從腸吸收的角度闡明中藥配伍的科學(xué)內(nèi)涵和合理性,有預(yù)見(jiàn)性地針對(duì)吸收性質(zhì)不良的中藥成分或其

20、制劑提出新的口服劑型方案,將對(duì)中藥口服劑型的現(xiàn)代化發(fā)展和走向世界起到重要作用。由于大部分中藥的具體吸收成分和機(jī)制還未明確,因此,Caco22細(xì)胞模型在中藥口服吸收研究方向具有極為廣泛的應(yīng)用前景。References:1StenbergP,BergstromCA,LuthmanK,etal1Theoreticalpredictionsofdrugabsorptionindrugdiscoveryanddevelop2mentJ1ClinPharmacokinet,2002,41(11):877289912TakaraK,TsujimotoM,OhnishiN,etal1Effectsofcont

21、i2nuousexposuretodigoxinonMDR1functionandexpressioninCaco22cellsJ1JPharmPharmacol,2003,55(5):675268113MaengHJ,YooHJ,KimIW,etal1P2glycoprotein2me222diatedtransportofberberineacrossCacocellmonolayersJ1JPharmSci,2002,91(12):26142262114GuptaE,VyasV,AhmedF,etal1Pharmacokineticsoforallyadministeredcamptot

22、hecinsJ1AnnNYAcadSci,2000,922:195220415ShaXY1Studiesontheintestinalabsorptivemechanismandself2microemulsifyingdrugdeliverysystemof92nitrocamp2tothecinA1DissertationofDoctorDegreeofFudanUniversity(復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文)D1Shanghai:FudanUniversity,200516WooJS,LeeCH,ShinCK,etal1Enhancedoralbiovaila2bilityofpaclita

23、xelbycoadministrationoftheP2glycoproteininhibitorKP30031J1PharmRes,2003,20(1):2423017OitateM,NakakiR,KoyabuN,etal1Transcellulartrans2portofgenistein,asoybean2derivedisoflavone,acrosshumancoloncarcinomacellline(Caco22)J1Biopharm了被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn),載體介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)在藥物的吸收過(guò)程中也起重要作用。Caco22細(xì)胞有3種主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)載體6,25:二肽載體、寡肽載體。這些載體主要轉(zhuǎn)運(yùn)營(yíng)養(yǎng)

24、物質(zhì)(氨基酸、P2糖蛋白、葡萄糖、膽酸等)及與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)結(jié)構(gòu)類似的化合物。因此,Ca2co22細(xì)胞模型也可用于載體介導(dǎo)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)藥物吸收機(jī)制的研究。2內(nèi)酰胺類抗生素主要經(jīng)二肽載體轉(zhuǎn)運(yùn)25,該類藥物的口服生物利用度主要由轉(zhuǎn)運(yùn)載體對(duì)結(jié)構(gòu)相似的內(nèi)源性分子的轉(zhuǎn)運(yùn)活性決定。有報(bào)道,一種大豆來(lái)源的異黃酮金雀異黃素具抗癌活性,但其腸吸收的具體機(jī)制還不清楚。Oi2tate等7利用Caco22細(xì)胞模型研究了金雀異黃素的吸收機(jī)制,發(fā)現(xiàn)該化合物AP2BL方向轉(zhuǎn)運(yùn)的Papp值顯著高于BL2AP方向的Papp值(P0.05),且金雀異黃素的跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)呈飽和過(guò)程和溫度依賴性,并可被其他黃酮類化合物,如蘆丁、槲皮素、兒茶素及表

25、兒茶素抑制,這些結(jié)果提示金雀異黃素的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)是由位于細(xì)胞膜頂側(cè)的載體介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。Gupta等14研究發(fā)現(xiàn),喜樹堿(CPT)在Caco22細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)是呈濃度依賴性并可飽和的過(guò)程,同時(shí)也對(duì)溫度呈依賴性。以上說(shuō)明,喜樹堿是由載體介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。很明顯,對(duì)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制這些細(xì)節(jié)的研究,有助于在藥物研發(fā)的早期階段篩選有發(fā)展前途的候選藥。同時(shí),對(duì)吸收差的藥物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,使之通過(guò)載體主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn),達(dá)到優(yōu)化化合物分子轉(zhuǎn)運(yùn)特性的目的。21613Caco22細(xì)胞模型用于藥物外排機(jī)制的研究:P2糖蛋白(P2gp)和多藥耐藥蛋白(multi2drugresistanceprotein,MRP)是Caco22細(xì)胞中2

26、種主要的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。兩者均為能量(ATP)依賴性膜蛋白,發(fā)揮外排泵作用,可將胞內(nèi)化合物逆濃中草藥ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月DrugDispos,2001,22(1):2322916198WalgrenRA,KarnakyKJ,LindenmayerGE,etal1Efflux2glucosideacrosshumanofdietaryflavonoidquercetin42intestinalCaco22cellmonolayersbyapicalmultidrugresis2tance2associatedprotein22J1

27、JPharmacolExpTher,2000,294(3):830283619XieHT,WangGJ,ZhaoXC,etal1StudyonuptakeandmetabolismofginsenosideRg3J1ChinJPharmacolTher(中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)),2004,9(3):2572260110KonishiY,ShimizuM1TransepithelialtransportofferulicacidbymonocarboxylicacidtransporterinCaco22cellmono2layersJ1BiosciBiotechnolBiochem,2003,

28、67(4):8562862111ZhangL,ZhengY,ChowMS,etal1InvestigationofintestinalabsorptionanddispositionofgreenteacatechinsbyCaco22monolayermodelJ1IntJPharm,2004,287(122):1212112HidalgoIJ,RaubTJ,BorchardtRT1Characterizationofthehumancoloncarcinomacellline(Caco22)asamodelsys2temforintestinalepithelialpermeability

29、J1Gastroentero2logy,1989,96(3):736113RubasW,MlomwellME,ShahrokhZ,etal1FluxmmentsacrossCaco22monolayersmayprtinhumanlargeintestinaltissueJ1JPS1996,165114ArturssonP,J1oraldrugabsorptioninhumpermeabilitycoeffi2cientsinhumanithelial(Caco22)cellsJ1BiochemBiophysRes,1991,175(3):8802885115YeeS1Invitroperme

30、abilityacrossCaco22cells(colonic)canpredictinvivo(smallintestinal)absorptioninman2factormythJ1PharmRes,1997,14(6):763116LennernasH,PalmK,FagerholmU,etal1Comparisonbetweenactiveandpassivedrugtransportinhumanintestinalepithelial(Caco22)cellsinvitroandhumanjejunuminvivoJ1IntJPharm,1996,127(1):103210711

31、7LennernasH,NilssonD1TheeffectofL2leucinontheabsorptionoflevodopastudiedbyregionaljejunalperfusioninmanJ1BrJClinPharmacol,1995,35:2432250118SimJS,ZhaoHL,LiDW,etal1EffectsofsaponinsfromtherootbarkofAraliaelataonthetransportofchondroitinsulfateinCaco22cellmonolayersandratsJ1BiolPharmBull,2005,28(6):10

32、4321048119RouquayrolM,GaucherB,RocheD,etal1TransepithelialtransportofprodrugsoftheHIVproteaseinhibitorssaquinavir,indinavir,andnelfinaviracrossCaco22cellmono2layersJ1PharmRes,2002,19(11):170421712120YamashitaS,FurubayshiT,KataokaM,etal1OptimizedconditionsforpredictionofdrugpermeabilityusingCaco22cel

33、lsJ1EurJPrmSci,2000,10(3):1952204121JezykN,LiC,B,etal1Transportofpregabalinin2layersJ1PharmRes,(4)519122LS,DR1ApplicationsoftheCaco22modelanddevelopmentoforallyactivedrugs:elucida2ofbiochemicalandphysicalbarriersposedbytheintesti2nalepitheliumJ1AdvDrugDelivRev,1997,23(123):77298123ArturssonP,PalmK,LuthmanK1Caco22monolayersinexperimentalandtheoreticalpredictionsofdrugtra