P-97微電極拉制儀使用說(shuō)明

1、SUTTER公司P-97微電極拉制儀使用說(shuō)明  一前后面板（按鈕、開(kāi)關(guān)、旋鈕）控制的功能及作用1 前面板LCD Display： 顯示程序參數(shù)Reset： 初始化復(fù)位控制Air Pressure： 在拉制周期的有效制冷狀態(tài)期間設(shè)置空氣壓力的值Keypad： 用于設(shè)置程序參數(shù)值和執(zhí)行程序09： 用于選擇所要的程序或控制功能，當(dāng)程序設(shè)計(jì)時(shí)輸入數(shù)字值和作決定是/否（Yes/No）（1/0）CLR： 進(jìn)入某個(gè)程序后本鍵用于刪除程序或數(shù)值，也用于作坡度測(cè)試（RAMP TEST）的入口ENTER： 回車，確定新數(shù)值或程序NEXT： 編輯時(shí)移動(dòng)到程序的下一行LAST： 編輯時(shí)移動(dòng)到程序的上一行PU

2、LL： 開(kāi)始執(zhí)行程序STOP： 終止執(zhí)行程序LED Display顯示：Program(0-9)：一個(gè)程序由一行（Cycle）或多行組成（一個(gè)Cycle包括4個(gè)程序參數(shù)：HEAT、PULL、 VELOCITY、TIME，一個(gè)Cycle相當(dāng)于一行程序代碼）。當(dāng)執(zhí)行拉制一支嵌入儀器的毛細(xì)玻璃管時(shí)，一個(gè)程序能連續(xù)拉16Cycles長(zhǎng)度。HEAT：HEAT是控制一個(gè)供給加熱片的電流水平，設(shè)置加熱片的功能，使之能熔化特定的玻璃管（組成物質(zhì)及大?。?，在操作部分討論坡度測(cè)試的相對(duì)值很重要，它就是你所要的加熱（HEAT）值。PULL：Pull控制強(qiáng)加給的拉力，一般較高的pull值會(huì)產(chǎn)生較小的和較長(zhǎng)的錐形尖端。

3、VELOCITY：拉制桿移動(dòng)速度達(dá)到一定程度，拉斷電極。TIME：TIME控制有效的制冷空氣時(shí)間長(zhǎng)度。2 后面板說(shuō)明1）電壓轉(zhuǎn)換器，國(guó)內(nèi)使用220V，應(yīng)使對(duì)準(zhǔn)220V。2）電源接口及保險(xiǎn)絲（電源開(kāi)關(guān)在左側(cè)面）。二安裝及使用1 使電壓對(duì)準(zhǔn)220V，并插上電源線。2打開(kāi)左側(cè)的開(kāi)關(guān)。3 安裝玻璃管。4 運(yùn)行RAMP TEST坡度測(cè)試，這測(cè)試是讓你確定加熱值，加熱值能夠熔化玻璃但又不至于燒斷加熱片。當(dāng)你第一次使用拉制儀或更換加熱絲、更換不同型號(hào)的玻璃時(shí)，都應(yīng)該作RAMP TEST坡度測(cè)試，然后把RAMP TEST的值當(dāng)做你的新編輯的程序的HEAT值。下面是運(yùn)行RAMP TEST的步驟：* 進(jìn)入任一程序

4、（按0-9 Enter回車）。*按清除鍵<CLR>進(jìn)入控制功能。*按<0>不要清除參數(shù)數(shù)值。*按<1>即能運(yùn)行RAMP TEST 坡度測(cè)試。*安裝玻璃管和按<PULL>。* 記錄RAMP TEST值，將用于設(shè)置HEAT。運(yùn)行RAMP TEST時(shí)，將有以下現(xiàn)象發(fā)生：*HEAT值逐一增加。*當(dāng)加熱值達(dá)到一定程度開(kāi)始軟化玻璃時(shí)，拉制桿將有小的移動(dòng)；*當(dāng)移動(dòng)速度達(dá)到一定程度，加熱關(guān)閉。*RAMP TEST值也不再增加并顯示出來(lái)。做完RAMP TEST后記下它的值按RESET。5 進(jìn)入<0>顯示程序0，光標(biāo)將閃爍在HEAT，檢查參數(shù)是否符合RA

5、MP TEST值，否則改變它，按PULL。6 松開(kāi)夾子旋鈕拿出微玻璃管。*按RESET退出程序0；*按<1>進(jìn)入程序1再做測(cè)試。三注意事項(xiàng)1，安放加熱片要在吹氣孔的正中間，不能和微玻管有任何接觸。2，程序0、程序1是系統(tǒng)設(shè)置的程序，配合隨機(jī)器的微玻管作顯示用，用戶要根據(jù)自己的需要先通過(guò)RAMP TEST確定HEAT值，再不斷調(diào)整PULL、VELOCITY、TIME值，使之做一步二步甚至多步拉制達(dá)到自己的應(yīng)用目的。（詳細(xì)使用請(qǐng)查閱英文使用說(shuō)明書）電極拉制手冊(cè)（1）目錄(2010-10-13 21:45:40) 轉(zhuǎn)載目錄 1）玻璃微管的選擇2）拉制儀的結(jié)構(gòu)與拉制原理3）P-9

6、7電極拉制過(guò)程4）功能參數(shù)設(shè)置5）膜片鉗電極的拉制6）P-97的日常維護(hù)     a. 鉑金片的更換     b. 干燥劑的更換玻璃微管的選擇我們一般都是選用Sutter公司生產(chǎn)的硼硅酸鹽硬質(zhì)玻璃管。我們現(xiàn)在選用的是：BF120-69-15：這是產(chǎn)品貨號(hào)其中B為Borosilicate（硼硅酸鹽）的縮寫表示硬質(zhì)玻璃、F為Filament的縮寫表示為有芯的玻璃毛胚管、120為外徑、69為內(nèi)徑、15為玻璃管的長(zhǎng)度15cm。選用15cm的玻璃管是最為劃算的，這是在中科院神經(jīng)所所了解到的。Sutter的電極有三種長(zhǎng)度分別為

7、他們的價(jià)格相差不多但15cm的點(diǎn)擊可以截為兩段也就能讓其成本降低了一半。但這樣存在一個(gè)問(wèn)題！Sutter的玻璃管兩端是經(jīng)過(guò)加熱處理的，所以很光滑。我們使用砂輪在玻璃管正中磨一下然后輕輕將玻璃管掰開(kāi)，經(jīng)過(guò)聯(lián)系可以讓斷口較平整。但斷口就會(huì)非常的鋒利，在使用是會(huì)將記錄電極銀絲上的AgCl鍍層刮掉。為了解決這一問(wèn)題我們使用酒精燈適度加熱斷口斷口微微燒紅后就可以讓其變得光滑了。 在做腦片膜片鉗的實(shí)驗(yàn)時(shí)，我推薦使用外徑的玻璃管。因?yàn)槟X片膜片鉗要使用正置顯微鏡工作空間狹小選用細(xì)一些的電極可以略微的彌補(bǔ)空間狹小的問(wèn)題。在單細(xì)胞的試驗(yàn)中也可以選用BF150-86-15外徑的玻璃管，具體就要看你自己的喜

8、好了。此外我們還是用過(guò)WPI的玻璃管，其也有規(guī)格同Sutter相似的，使用起來(lái)沒(méi)有什么明顯區(qū)別。   嚴(yán)重推薦上面所提供的厚壁玻璃管，Sutter還有相應(yīng)的薄壁玻璃管十分的不好用，很難拉出理想的電極。  不推薦國(guó)產(chǎn)的玻璃管（如南京六和，北京正天易等），它們的玻璃管內(nèi)壁沒(méi)有經(jīng)過(guò)妥善的清洗會(huì)有污染致使拉出的電極封接成功率比較低。雖然它們的比較便宜但電極損耗大綜合起來(lái)成本并沒(méi)有優(yōu)勢(shì)，并會(huì)嚴(yán)重影響你的實(shí)驗(yàn)效率和心情！拉制儀的結(jié)構(gòu)與拉制原理Sutter公司的P97拉制儀是現(xiàn)今十分常用的電極拉制儀，它的電源開(kāi)關(guān)在機(jī)身的左側(cè)面的前部，使用起來(lái)還是蠻方便的。其結(jié)構(gòu)如圖： 

9、; 1,干燥罐  2,電極加熱室  3,牽拉臂  4,顯示屏  5,數(shù)字操作鍵盤  6,復(fù)位按鈕 其可大體分為四個(gè)系統(tǒng)： 1加熱系統(tǒng)，在電極加熱室（2）中有鉑金片通電后用來(lái)融化玻璃管。 2空氣冷卻系統(tǒng)，壓縮的空氣進(jìn)入干燥罐（2）然后再通過(guò)管道從鉑金片下的小孔吹出用于冷卻鉑金片。干燥    的空氣可以電極加熱室中的濕度降低以減少空氣濕度對(duì)拉制的影響。 3機(jī)械拉制系統(tǒng)，兩側(cè)牽拉臂（3）可以控制拉制時(shí)的力度和速度。 4電子控制系統(tǒng)，（4. 5

10、）用于控制拉制時(shí)的各種參數(shù)。四個(gè)系統(tǒng)相互配合以完成精密的拉直過(guò)程見(jiàn)下篇。P-97電極拉制過(guò)程拉制儀控制著四個(gè)物理量（如上圖）。（1）兩臂拉開(kāi)電極的速度，（2）鉑金片加熱電極（HEAT的值只是一個(gè)代表并不代表溫度，往往同是P97不同機(jī)器之間會(huì)有較大的差異所以都要以Ramp為標(biāo)準(zhǔn)）。（3）拉力表示兩臂拉開(kāi)電極用力的大小。（4）氣流用于冷卻鉑金片以使融化的電極凝固斷裂。下面將整個(gè)電極拉制的過(guò)程描述如下，編號(hào)與圖下方的數(shù)字相對(duì)應(yīng)： 1  啟動(dòng)拉制后首先你會(huì)聽(tīng)到有噴氣聲，這是P97給加熱盒噴入一定時(shí)間的氣體，干燥后的氣體由鉑金片下的  小孔吹入目的是讓拉制空間干燥（空氣的濕

11、度會(huì)影響電極拉制）。2  噴氣持續(xù)一段時(shí)間后鉑金片開(kāi)始加熱，加熱的溫度就是你所設(shè)定的HEAT值，這是你可以看到鉑金片慢慢的變紅發(fā)熱，一會(huì)之后毛配管就會(huì)開(kāi)始融化。3  由于固定電極的兩臂有一定的拉力（這個(gè)拉力并不是你所設(shè)定的PULL值，你可以認(rèn)為這是本底的拉力）所以兩臂會(huì)將電極拉開(kāi)并且有一個(gè)加速的過(guò)程，當(dāng)拉開(kāi)的速度達(dá)到你所設(shè)定的VEL.值是鉑金片就會(huì)停止加熱并開(kāi)始吹氣冷卻。4  吹氣的壓力是在功能菜單中所設(shè)定的pressure大小，也就是顯示面板上方所顯示的P值。吹氣的時(shí)程如圖也就是你所設(shè)定的TIME值。5  在加熱停止后40毫秒（如圖加熱軌跡）與吹氣的同

12、時(shí)兩臂還會(huì)給與以持續(xù)一秒力度是你所設(shè)定的PULL值的拉力拉開(kāi)電極。 經(jīng)過(guò)上述的五個(gè)步驟就完成了一步的拉制。P97中稱為一個(gè)line。一個(gè)完整的拉直過(guò)程往往包括多個(gè)line并稱之為一個(gè)Loop。當(dāng)拉直過(guò)程完成后會(huì)顯示如下的內(nèi)容：上面的顯示表示，一步拉制（第二行）一次（第一行）加熱時(shí)間6.05秒。功能參數(shù)設(shè)置 P97有多個(gè)功能參數(shù)可供設(shè)置。開(kāi)機(jī)后進(jìn)入任何一個(gè)拉制程序然后按<CLR>按鈕，屏幕顯示如下內(nèi)容： 按<0>按鈕后就進(jìn)入了P-97的功能菜單，屏幕第二行會(huì)滾動(dòng)顯示8個(gè)功能，點(diǎn)擊相應(yīng)的數(shù)字就可以進(jìn)入相應(yīng)的功能設(shè)置，各功能列表如下：功能編號(hào)功能名稱功能描

13、述1RAMP TESTRamp測(cè)試用于測(cè)量融化玻璃管的HEAT值2CHANGE AIR PRESSURE設(shè)置氣體壓強(qiáng)，也就是P值3AIR MODE設(shè)置控制噴氣的方式4AIR TIME AT START OF PULL電極拉制前噴氣時(shí)間5AIR TIME AT END OF PULL電極拉制后噴氣時(shí)間6RESET TIME AND DATE時(shí)間日期設(shè)置7WRITE-PROTECT THE PROGRAM鎖定拉制程序8MEMORY TEST內(nèi)存檢測(cè)其中第一項(xiàng)最長(zhǎng)用到，第二有時(shí)也會(huì)用到，我將分述如下，其他的都不用管保留默認(rèn)值就好了。 1RAMP TEST此功能用于測(cè)量玻璃管的熔點(diǎn)，當(dāng)啟動(dòng)之

14、后你可以看到RAMP值以1為步進(jìn)不斷的上升，同時(shí)你還可以看到鉑金片逐漸變紅發(fā)亮。當(dāng)玻璃管受熱融化在牽拉臂的作用下向兩邊拉開(kāi)這時(shí)候拉制儀就會(huì)停止加熱，這是所顯示的值就是玻璃管的熔點(diǎn)。這一RAMP值用于確定拉制參數(shù)中的HEAT值。HEAT值的測(cè)定根據(jù)你選用的鉑金片而有所不同。建議：梯形鉑金片：HEAT=RAMP+15方形鉑金片：HEAT=RAMP 但大家要注意這個(gè)值只是一個(gè)相對(duì)的值不是真實(shí)的溫度，而且不同一臺(tái)拉制儀的數(shù)值也是不相同的！當(dāng)每次更換鉑金片或者是更換了不同型號(hào)不同品牌的玻璃管時(shí)都要從新測(cè)量RAMP值。2. CHANGE AIR PRESSURE此功能用于設(shè)置噴氣的壓強(qiáng)，就是第一行中顯示的

15、P值?？稍?到999之間設(shè)置。對(duì)與不同的玻璃管推薦如下厚壁玻璃管：500薄壁玻璃管：300   處理以上的拉制模式還有另一種成為延時(shí)模式（DELAY）這種方式不常用。啟動(dòng)這種模式的標(biāo)志就是四個(gè)參數(shù)最后一個(gè)的TIME顯示為DELAY。這是你可以通過(guò)功能三 AIR MODE將其切換回TIME模式膜片鉗電極的拉制 下圖是一個(gè)理想的膜片鉗試驗(yàn)中所使用的電極尖端：使用胖一些（就是肚子比較大尖端比較?。┑狞c(diǎn)擊可以有更好的封接效果，至于其原因可以由下圖來(lái)說(shuō)明：可以看到左側(cè)是較胖的電極，其相對(duì)于右側(cè)較瘦（尖端陡峭）的電極在尖端內(nèi)有較大的體積，所以當(dāng)胞膜吸入電極尖端后胞膜與電極尖端內(nèi)壁有較大

16、的接觸面積。因此以此類電極有較好的封接效果。當(dāng)你了解了何種電極才是好電極后，下一步就是如何使用P-97制作理想的電極。首先將pressure設(shè)為500（一般默認(rèn)就是500），其次對(duì)與不同的鉑金片要使用不同的參數(shù)。我實(shí)驗(yàn)室常用的是梯形鉑金片，此外還有一種方形的鉑金片。首先使用RAMP功能測(cè)量玻璃管熔點(diǎn)（此熔點(diǎn)用RAMP表示）。兩種鉑金片對(duì)應(yīng)的參數(shù)列表如下：鉑金片類型HEATPULLVELOCITYTIME梯形RAMP+15040200方形RAMP040200先使用上述的參數(shù)設(shè)置一步。開(kāi)始拉制！往往這樣一步是不能拉斷電極的，所以P-97就會(huì)自動(dòng)循環(huán)執(zhí)行程序直到拉斷電極。比如這時(shí)拉制程序循環(huán)三次也就

17、是通過(guò)三步拉斷了電極。然后使用拋光儀（或者顯微鏡）觀察點(diǎn)擊尖端，往往三步拉斷的電極會(huì)比較瘦尖端很陡而且開(kāi)口太小，這樣的電極是不理想的電極。接下來(lái)我們只調(diào)節(jié)拉制速度，減少拉制速度可以讓點(diǎn)擊變胖。你可以以“3”步進(jìn)逐步減少拉制速度并可以做如下的記錄。例如：拉制速度40373431282522拉制步數(shù)3344445你會(huì)發(fā)現(xiàn)以同樣的步數(shù)拉斷的電極形狀是相似的，但不同步數(shù)之間差異就比較大了。一般而言四步拉斷的電極就已經(jīng)比較理想了。在上面的例子中你不要設(shè)置拉制速度為34或25以為他們處在步數(shù)變化的臨界值。由于拉制儀每次拉制多少都有一些波動(dòng)，你設(shè)置為臨界值就很有可能在拉制的過(guò)程中出現(xiàn)拉制步數(shù)的變化而使拉制失敗。你應(yīng)該設(shè)置拉直速度為31或28這樣就會(huì)比較穩(wěn)定了。