應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算樣本濃度

1、應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算樣本濃度整體思路：在 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，我們得到的是經(jīng)酶標(biāo)儀讀出的標(biāo)準(zhǔn)品以及樣本 的 0D 值。其中，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度已知，我們可以利用標(biāo)準(zhǔn)品的 0D 值及其相對(duì)應(yīng)的 濃度，以 ODfi為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并用公式表示出來。這樣，我們把樣本的 0D 值以 X 值代入，便可求出丫值，即樣本濃度。F 面我們就一步步來實(shí)現(xiàn)這個(gè)目標(biāo)：1.首先，將數(shù)據(jù)整理好輸入Excel，分別為經(jīng)酶標(biāo)儀讀出標(biāo)準(zhǔn)品的0D值及其對(duì)應(yīng)的濃度值。丈件 騙矩MtyMty）播入 耦貳肋TMCTTMCT）蛾3 3& 固口町 釉朋蝕AddAdd；乂豆具3sal員丨

2、陽弓*丨令瓦-汀超_國壓豊_J13J13A A標(biāo)卷品值.2 2飛2222 1.1. SESSES 1.1. 204204 0.0. T51T51 Q Q 459459 0.30?0.30? 0.0.212212 0.120.12桶 ft 品浪度10001000500500250250125125 52.52.5 5 31.2531.25 15.62515.6250 0oom. cn2.拖動(dòng)鼠標(biāo)選取完成的數(shù)據(jù)區(qū)，并點(diǎn)擊圖表向?qū)В趫D表類型中選“ XY 散點(diǎn)圖” 并選擇子 圖表類型的 散點(diǎn)圖”第一個(gè)沒有連線的）。如下圖所示。I)I)Z Z31111國百vv制懺；77菸7!7!匕鼻常嚅就-二TT d

3、 d - -. . rg,rg,I I I-II-II Ia aI I l-PHIl-PHI I I FTRIFTRI l-Fl-F- - F FT11FT11F I I FIFI I I BlBlHIHI. .一 _. . I I L.-_L.-_ . . .I I I IIIII:玄件磴）赭輯d d） mama 插入d d）格式 工數(shù)據(jù)（SJSJ閒口 幫腦0 0）就mFDFQmFDFQ二加丄AllAll liilii丨 7 迅 T 丨皇無國獰B B空?qǐng)D春向?qū)?4 4步f?Nf?N 1 1 - -JL1 111113.點(diǎn)擊 下一步”出現(xiàn)如下圖界面。如是輸入是如本例橫向列表的就不用更改,X23

4、 34 4z z6 67 7Zg1010n12131314151617標(biāo)準(zhǔn)晶（血植-1 1Z Z賽 標(biāo)準(zhǔn)品菠度uiui揀下不戲可查看示例連1取消1下_步魚小|完成迪子團(tuán)表奘型迂）:蘇點(diǎn)EL ttl較成討的徴果是縱向列表就改選 列”EBEBL =電爾i .K* d2j標(biāo)準(zhǔn)品00ft |T遠(yuǎn)Ll標(biāo)iS品濃度L JAC5 5I- -6 617-.-亠8.9 9I-12J-12JnJnJ iTiT1313- dijijI 丄巳IdIdITIT ! !IS 1WWW.10001000ewewwowoam0 0Q Q 0,50,5常舷魅叩:陽TTTTqga竺舉曲J K上二步羈I_苑囲叩I在做 ELISA

5、標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過此曲線求樣本濃度時(shí)，因樣本OD 值是已知的,因此，我們需要將 OD 值設(shè)為 X。根據(jù)上圖我們可以看到，橫坐標(biāo) X 值為 0D 值,縱坐標(biāo)丫為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這正是我們想要的。4.有時(shí)需要我們手動(dòng)選擇 X 值，這時(shí)可以點(diǎn)擊 系列”來更改，如下圖。Y Y fSd)fSd)価加如 卑構(gòu)IIK -1遠(yuǎn) 斥P OP 3五血 |如果要對(duì)橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)進(jìn)行掉換，我們可以就點(diǎn)擊X 值和丫值文本框右邊的 小圖標(biāo)，結(jié)果如下圖:HkITkHkITk I I IKIK tata r r nmVnVBnmVnVB nrnr一ITTnmITTnm-ZZKI I:戲丈件 編輯 視圉插入格式工具也數(shù)據(jù)窗口W幫助A

6、 L崔 T J -丨MLiyaH區(qū)1fed53_53_.A A雲(yún)）克仲叩 （EJm二丄JlJl十, ；壬-鼻1111 I I k k h h JliJli fiifii IrIrHv v J J o o j j l l HISS向曷 引步9之2 2 r rVkWkV.VkWkV.誰據(jù)S歲川景赴.I）名稱軸;棗列禹_ ja期石imiun n習(xí)7l_il_i 1 121工I1g極 t 品四值 LZ 衛(wèi)農(nóng) J 二型更丄.2 凹 QJSL4 已盤棕準(zhǔn)品濃度 I 1665 500 云 6 1 血簸& 31 缶 id 6 薦 0團(tuán)表向?qū)?4 4步KNKN 2 2 - -圖表S S報(bào)據(jù)-2 2 H:

7、H: 出現(xiàn)上圖后，拖動(dòng)鼠標(biāo)選取正確的數(shù)據(jù)區(qū)域以調(diào)整5.調(diào)好之后，然后點(diǎn)擊 下一步”出現(xiàn)圖表選項(xiàng)界面,6.點(diǎn)擊 下一步”在彈出的窗口再點(diǎn)擊“完成”現(xiàn)在一張帶標(biāo)準(zhǔn)值的完整散點(diǎn)圖 就已經(jīng)完成，如下圖。如下圖?；豔 W-匚；.二宀I I:勻丈怦電）IMIM IIII） a a ftAftA（P P f f-丄dddd 7 7色-I-Ir 6 戛胃慮式（Q Q】ZMZM C C）?（!3R3R據(jù)辺j jS S口ISIS 釉勤堪）AJob.AJob. P Prjrj 2,3222,322A 一& TTJOJ 3丁標(biāo)準(zhǔn)IP肓1標(biāo)準(zhǔn)品濃B一 -=. . Z1Z178;- -一 - t,1_.10101

8、1.12 I I I I13_.H,5 .U41MRMR向翳 涉走3 3 - - S S覆-蕨I圣掠他 剛舉 圖例I.巒耶志BQ歳磁取VI I麹購鷗矽掃尿CO mew 星涌Ik上一劈團(tuán)2 野割、11蕪感里L(fēng)IS3S3 licrosoftlicrosoft ExcelExcel - - BnokBnokI I.sis.sis7.到了這一步，散點(diǎn)圖便完成了。我們可能會(huì)問，曲線在哪里啊?其實(shí)很簡(jiǎn)單，先點(diǎn)擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點(diǎn)（記住一定要點(diǎn)選上 ），然后單擊右鍵，點(diǎn) 擊添加Ado匸m 1 I迪弊g f禾體雪立件電）騙鎬 觀園迫插入（X）榕式 a 工員 褰 窗口 裁働j J U Jl,-1 -I -趨勢(shì)線。如

9、下圖:liEEOinftliEEOinft崔11 - - BdofeL.BdofeL. xLexLeA A 桔武辺工M M爐SmSm牟i i B B爐&科a M _;丄期.蘭Jl1_ -Sy!-Sy! SL3hcctHtB13SL3hcctHtB13；tn3.Shctd/jy4tn3.Shctd/jy4：yi4,J)yi4,J)LiLi _n_n_飛rzrz f f G G r r廠廠2_ _ _?J?J標(biāo)品惋 fi2 2掘1.1.典5 5 L L歆4 4)彈1 1 Q Q勾彌 也湖伉劭a a 0 0 1S1S廠4 4 I I悸范品娥JSJS【LM6LM6 MQMQ匹0 0 1 1理5

10、252 5 5 3L253L25 1515魏5 5工 邑& &T T31D1200WisocWWWWWW一Qa列g(shù) f3%O/TLg g打CiCiLCFC_2OSOSJTJT越杲列鞍弍孤1 1E E 5?aj5?aj Q Q=I I希MHH?MHH?鎖8.彈出趨勢(shì)線類型選擇對(duì)話框,有線性，對(duì)數(shù)，多項(xiàng)等選項(xiàng)，如下圖。!耳；： - - - -）文斡疋） 4 ftffl 世）入CDCDft 貳 aJJtmJJtm巒 E 冑口怕W W勤iWiW*也JJd上I丿A 4 A刁：. I創(chuàng)里，17商1r-r- =*=* - -I._A A9.在選擇之前，我們先對(duì)上圖做一下肉眼觀察，如果那些點(diǎn)能

11、連成一條直線，或 接近直線，我們就選擇“線性”，意思就是出來的趨勢(shì)線是一條直線，相應(yīng)的該 直線的方程就是y=ax+b 的形式。不過，一般的 ELISA 都不會(huì)是所有的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)呈 完全的線性關(guān)系的，也就是說不是一條完全的直線，這時(shí)我們可以選擇“多項(xiàng)式”，多項(xiàng)式后面還有“階數(shù)”的選項(xiàng)，也就是說求出來的方程是幾次方，我們一般選“2 階”，即出來的方程為 y=ax2+bx+c.選擇完畢后，彈出以下窗口i-匚ff亠電Tl亠亡 飛：了I I2 23 3標(biāo)準(zhǔn)品迎值_L._L.7 79 9 . .1010- 1111121213_13_4 4151511.11.17L17LISISn n I I2020 I I

12、一I I2i2i12001200lOOOlOOOSCOSCOSCOSCO2.2. 622622 1.1. SE5SE5 1.1. 204204 0.0. 7SJ7SJ0.0. 3073070.0. 212212 0.0. lESlESWitWit參口 武醴）E3E3 HeroHero softsoft EzeeEzee 1 1 BdokBdok 1 1. . zlszls10. 趨勢(shì)線也就是標(biāo)準(zhǔn)曲線在此便顯示出來了。接下來，我們需要將公式顯示出 來，以根據(jù)樣本的 OD 值計(jì)算其濃度值。在鼠標(biāo)點(diǎn)選該線（一定要選中，選中后 出現(xiàn)下圖的樣子即線由很多點(diǎn)標(biāo)識(shí)出來），單擊鼠標(biāo)右鍵，選擇趨勢(shì)線格式11 我

13、們?cè)趶棾龅拇翱谥羞x擇“選項(xiàng)”選項(xiàng)卡，出現(xiàn)下圖，我們選擇顯示公式, 顯示R 方，即相關(guān)系數(shù)，這時(shí)公式與 R 方值便都顯示出來了。2 2_ _3 3暫彳崔（SOD值Z.Z. 822822 1.1. B55B55 1.3041.304 0.0. 7517514 4.賒灌圃汰10001000500500250250125125a a 4 4蔚0.3070.3070.0. 212212 0.1520.1525ZS5ZS 3k3k 2525 15.15. 62S62S0 05-65-6 7 7 -8-812001200SOOSOO600600WWWWWW曲I跡- -0卩1項(xiàng)貳（慕列1）A AB BC CD DF FG GaE ECJlicroteftlicroteft ExcelExceliT系列1 1 M M- -Bookl.Bookl.EflO5M5M 1 1 2 2 fig-Sfig-S 31.5531.55 15.62515.625 flfl丄J 8丄M51- e e站設(shè)9U)9U)參惑(XMJi)(XMJi)O O e e蔑義1itit刪MNMNmW31W31匸 M *tt匚紆*位 MK&QMK&Q片|o叵)2)2科MsMsS SBicrcjsoftBicrcjsoft ExcelExcel