生物：1.2《實驗一 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定》（舊人教第一冊）

1、作品版權(quán)由張運安老師所有,授權(quán)予北京校園之星科技有限公司，任何機(jī)構(gòu)或個人均不得擅自復(fù)制、傳播。本公司熱忱歡迎廣大一線教師加入我們的作者隊伍。有意者請登錄高考資源網(wǎng)()版權(quán)所有，盜用必究！實驗一 生物組中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定一、教材分析： 1該實驗是高中階段生物課程的第一個實驗。從此以后生物化學(xué)方面的內(nèi)容增加。本實驗的操作技能的學(xué)習(xí)為以后該類型實驗打好基礎(chǔ)，一定要強(qiáng)調(diào)規(guī)范化操作方法。 2低高倍鏡的使用、徒手切片、臨時裝片等技能，學(xué)生經(jīng)初三、高一兩年的擱置，已顯生疏。實驗時教師可考慮予復(fù)習(xí)，或通過演示提醒學(xué)生，注意規(guī)范操作要領(lǐng)。 3本實驗難度并不大，但由于內(nèi)容較多、實驗時間長，必須作周

2、密安排才能完成。如實驗中教師應(yīng)做好學(xué)生的分工合作可縮短實驗時間。同時又能培養(yǎng)學(xué)生的合作精神。二、教學(xué)目標(biāo)：知識目標(biāo)：闡明實驗原理顏色反應(yīng)，識記和區(qū)分用于可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色，初步掌握鑒定上述化合物的基本方法，學(xué)會描述實驗現(xiàn)象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 能力目標(biāo)：培養(yǎng)學(xué)生主動獲取知識，應(yīng)用知識分析現(xiàn)象，歸納總結(jié)的能力，培養(yǎng)學(xué)生實際操作的能力及從現(xiàn)象出發(fā)探求事物本質(zhì)的能力。 情感與價值目標(biāo)：通過親手實驗體驗科學(xué)家嚴(yán)謹(jǐn)治學(xué)的科學(xué)態(tài)度，培養(yǎng)實事求是的世界觀。三、教學(xué)重點： 掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。四、教學(xué)難點： 實驗內(nèi)

3、容較多，實驗時間長，必須周密安排，才能按時完成。 學(xué)生要分工合作、教師指導(dǎo)演示。五、材料用具： 實驗材料：葡萄糖液、蘋果組織液，植物油滴、浸泡過的花生種子或新鮮的花生種子，雞蛋蛋白稀釋液、黃豆組織液。 儀器：徒手切片刀，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，載玻片，蓋玻片，毛筆，吸水紙，顯微鏡。 試劑：斐林試劑，蘇丹染液或蘇丹染液，雙縮脲試劑A、雙縮脲試劑B，體積分?jǐn)?shù)為50的酒精溶液，蒸餾水。六、教學(xué)過程：（一）實驗原理講解： 1可溶性還原糖鑒定原理 生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多，有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥

4、基，因此叫做還原糖；蔗糖分子內(nèi)沒有，為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑，只能鑒定生物組織中可溶性還原糖，而不能鑒定可溶性非還原糖。 斐林試劑為一定濃度的氫氧化鈉和硫酸銅配制而成的淡藍(lán)色Cu(OH)2沉淀的懸濁液，葡萄糖溶液在加入斐林試劑后，在加熱條件下還原為磚紅色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式為： CH2OH(CHOHH)4CHO + 2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH + Cu2O + 2H2O 用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液變化過程為；淺藍(lán)色棕色磚紅色沉淀 2脂肪鑒定原理 蘇丹、蘇丹為一種橙黃色脂肪染色劑。蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色，蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅

5、色。 3蛋白質(zhì)鑒定原理 將尿素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。 (尿素) (尿素) (雙縮脲) 雙縮脲在堿性環(huán)境中能和硫酸銅結(jié)合成紅紫色的絡(luò)化物。蛋白質(zhì)分子中含有的肽鍵結(jié)構(gòu)與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)：CONH（類似雙縮尿H2NOCNHCONH2結(jié)構(gòu)）酸性條件下與Cu2+作用形成紫色絡(luò)合物雙縮脲反應(yīng)（二）、操作指導(dǎo)：1.實驗成功的關(guān)鍵在于實驗材料的選擇。 “生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實驗，實際上是三個獨立的實驗。在實驗中，如注意以下問題，則效果會很好。 在做可溶性還原糖的鑒定實驗中，最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官)，而且

6、組織的顏色較淺，最好是白色或近于白色的植物組織，這樣可以避免材料自身顏色對實驗變化顏色的掩蓋。經(jīng)實驗比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。 在做脂肪的鑒定實驗中，實驗材料最好選用富含脂肪的種子，且徒手切片要成功，要求實驗技能較高，不妨改成刮取花生子葉泥制作臨時裝片，易做，效果又好。 在做糖和蛋白質(zhì)的實驗時，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋，鑒定之前需要留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色做比較，這樣可增強(qiáng)說服力。2.注意事項：(1)斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液的NaOH溶液)溶液)分別配制、儲存，使用時，再臨時配制

7、，將45滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。(2) 鑒定可溶性還原糖，加熱試管時，應(yīng)該用試管夾夾住試管上部，放入盛開水的大燒杯加熱；注意試管底部不接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向?qū)嶒炚撸悦庠嚬軆?nèi)溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰，可以提起試管夾，使試管與沸水接觸面減少，以免溶液溢出。(3) 在鑒定脂肪的實驗中，若用花生種子作實驗材料，必須提前浸泡34小時，浸泡時間短了，不容易切片，浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形，切片要盡可能的薄。(4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色，染色和洗浮色時間不宜過長（否則酒精將脂肪溶解

8、影響實驗效果），觀察時找最薄處最好只有12層細(xì)胞。(5)在蛋白質(zhì)的鑒定實驗中，若用蛋白質(zhì)作實驗材料，必須稀釋，如果稀釋不夠，與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不徹底，且試管不易洗刷干凈。 雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑A(0.1g/mL的NaOH溶液)，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，再加試劑B(0.01g/mL的CuSO溶液)。（三）、方法步驟 教師把事先配制好已知待測樣品，葡萄糖液、植物油滴、雞蛋蛋白稀釋液讓學(xué)生按要求加入相應(yīng)試劑，觀察顏色變化。磚紅色、橘黃色、紫色。然后分別鑒定生物組織中的三種物質(zhì)。1、 可溶性還原糖的鑒定取材：含糖量較高的白色或近于白色的組織（排除色素對顯色的干擾）約5

9、克。制備組織樣液：加黃砂（充分研磨）、5ml水（溶解可溶性糖），研磨、過濾 取2ml組織樣液加入試管中顯色反應(yīng) 加2ml剛配好的斐林試劑（用前混勻，加入溶液時呈藍(lán)色） 隔水加熱，煮沸2 min觀察結(jié)果：溶液中出現(xiàn)磚紅色沉淀2、脂肪的鑒定取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片選取最薄的薄片移至載玻片中央染色：滴加蘇丹 （蘇丹）染液23滴制片 洗去浮色：用吸水紙吸去花生子葉薄片周圍的染液，滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液12滴（溶解有機(jī)物）用吸水紙吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片 顯微鏡觀察：先在低倍顯微鏡下找到花生子葉的最薄處，移至視野中央，再用高倍鏡觀察，可看到已著色

10、的圓形小顆粒(注意指導(dǎo)學(xué)生使用高倍顯微鏡的方法) 結(jié)果：有橘黃色（或紅色）的脂肪微粒3、蛋白質(zhì)的鑒定制備組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋白稀液）黃豆浸泡 去皮切片研磨過濾濾液 取組織樣液2ml加入試管顯色反應(yīng) 加入雙縮尿試劑LNaOH 2ml 創(chuàng)設(shè)堿性條件 搖蕩均勻 再加入雙縮尿試劑LCuSO4 34滴 提供Cu2+搖蕩均勻觀察：蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，溶液變成紫色（四）、結(jié)論與討論 1結(jié)論：上述實驗證明蘋果果肉中、花生種子中、黃豆組織中各存在什么樣物質(zhì)? 答：可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)。 2討論：為什么根據(jù)某些化學(xué)反應(yīng)能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)物產(chǎn)生固定的顏色反應(yīng)可以鑒定生物組織有糖、

11、脂肪、蛋白質(zhì)的存在? 因為某些化學(xué)試劑與生物組織中的化合物發(fā)生一定的化學(xué)反應(yīng)后，可產(chǎn)生新的化合物，而這種化合物是有固定的顏色的。因此，根據(jù)待檢測物與某些化學(xué)試劑反應(yīng)的固有顏色，如磚紅色、橘黃色、紫色等?？梢澡b定生物組織中存在有糖、脂肪、蛋白質(zhì)。3. 做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗時，需要根據(jù)實驗需要選擇不同的實驗材料。清根據(jù)下表所列各種材料回答問題： 各種可供實驗的材料 梨 黃桃 胡蘿卜 黃豆花生種子小麥種子其中適合于鑒定糖的是 ，理由是 ，你打算用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪，這是因為 ，你打算用什么試劑鑒定? 適合于鑒定蛋白質(zhì)的是 ，理由是

12、，鑒定所用的試劑是 。 答案：梨 梨的組織細(xì)胞顏色為白色，并且糖含量較高 斐林試劑或班氏試劑。小麥種子的脂肪含量不如花生種子高，也不容易做切片 用蘇試劑鑒定。黃豆和花生 蛋白質(zhì)含量高 雙縮脲試劑。（五）、實驗效果檢查與評定 銀幕顯示檢測題 1、某些單子葉植物，如韭菜、鳶尾的葉子內(nèi)含有大量的可溶性還原糖，但這些單子葉植物的葉子不宜作實驗材料，原因是：答案：這些葉子的顏色較深，對還原性糖與斐林試劑的顏色反應(yīng)起遮蔽作用2、下列哪組試劑在使用過程中，必須加熱：A.斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程中染液在鑒定動物組織中的脂肪時D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時 3、某學(xué)生在鑒定脂肪的實驗中，在顯微鏡下觀察花生子葉切

13、片，當(dāng)轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器時，有一部分細(xì)胞看的清楚，另一部分較模糊，這是由于：    B.標(biāo)本切的厚薄不均 C.細(xì)調(diào)節(jié)器未調(diào)節(jié)好D.顯微鏡物鏡損壞 4、蘇丹干粉，溶于100mL酒精的體積分?jǐn)?shù)為95溶液中，待全部溶解后再使用，為什么用酒精而不用蒸餾水？ 答案：蘇丹染液易溶解于酒精中 ，不易溶解于水。5、鑒定蛋白質(zhì)樣品時加雙縮脲試劑的正確做法是 A先加A液，混合后再加B液搖勻觀察B先加B液，混合后再加A液搖勻觀察CA、B混合后加入，搖勻觀察DA、B液同時加入樣液，搖勻后觀察 6、在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中，對實驗材料的選擇中，錯誤的是：A、甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等，都含有較多的糖且近于白色，因此可用于進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定B、花生種子含脂肪多且子葉肥厚，適用于脂肪鑒定C、大豆種子蛋白質(zhì)含量高，可用于蛋白質(zhì)的鑒定D、 雞蛋清含蛋白質(zhì)多，是蛋白質(zhì)鑒定的理想材料 （六）、布置作業(yè) 1將可溶性糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定原理及結(jié)淪填寫在實驗報告冊上。 2斐林試劑主要用來鑒定可溶性還原糖，其主要成