小檗堿對糖皮質激素大鼠血脂異常的調節(jié)作用

1、小檗堿對糖皮質激素大鼠血脂異常的調節(jié)作用                      作者：徐道華，周晨慧，劉鈺瑜，許碧蓮 【摘要】   目的探討小檗堿對糖皮質激素大鼠血脂異常的調節(jié)作用。方法50只3月齡雄性SD大鼠，隨機分成5組，每組10只，分別給予潑尼松與不同劑量小檗堿12周，觀察大鼠體質量、血液中血糖、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、鈣、磷、丙二醛及超氧化物歧化酶的

2、變化。結果給予潑尼松后大鼠體質量增加減慢，小檗堿可減輕潑尼松所致大鼠體質量增長幅度下降。給予潑尼松12周后，大鼠血液中血糖、甘油三酯、總膽固醇和丙二醛顯著升高，高密度脂蛋白膽固醇降低；小檗堿可降低糖皮質激素大鼠血液中血糖、甘油三酯、總膽固醇和丙二醛含量，升高高密度脂蛋白膽固醇，對鈣、磷及超氧化物歧化酶無顯著影響。結論小檗堿可改善糖皮質激素所致大鼠血脂代謝異常。 【關鍵詞】   小檗堿； 糖皮質激素； 血脂； 大鼠Abstract：ObjectiveTo investigate the regulative effects of berberine on glucocorticoid-

3、induced dyslipidemia. MethodsFifty Sprague-Dawley male rats at age of 3 months were randomly divided into five groups (10 per group) and treated with distilled water or prednisone or different dose berberine plus prednisone for 12 weeks. The levels of body wEight， glucose， total cholesterol (TC)， tr

4、iglyeride (TG)， high density lipoprotEIn cholesterol (HDL-C)， calcium， phosphorus， malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase(SOD) in blood were detected. ResultsThe body weight of rats treated with glucocorticoid was decreased compared with vehicle control， and berberine could enhance body weig

5、ht of rats treated with glucocorticoid. Compared with vehicle control， the serum glucose， TC， TG and MDA were elevated in prednisone group， while HDL-C decreasedTreatment with berberine markedly decreased the levels of serum glucose， TC， TG and MDA and increased HDL-C in rats treated with glucocorti

6、coidThe levels of calcium， phosphorus and SOD were not significantly different between prednisone and berberine groups. ConclusionBerberine can improve glucocorticoid-induced dyslipidemia in ratsKey words： Berberine;  Glucocorticoid;  Dyslipidemia;  Rats    糖皮質激素臨床上廣泛用于

7、風濕性疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、皮膚病、腎臟病及器官移植的 治療 ，長期使用有許多不良反應，脂代謝異常是常見并發(fā)癥之一。小檗堿為毛莨科植物黃連的主要生物堿，有抗炎、抗腫瘤、抗消化性潰瘍、降血糖和調血脂等作用1，2。但其對糖皮質激素所致血脂代謝異常是否有改善作用尚未見報道。本研究觀察了小檗堿對糖皮質激素大鼠血脂異常的調節(jié)作用。 1  材料與儀器 1.1  材料小檗堿購于Sigma公司；醋酸潑尼松購于浙江仙琚制藥股份有限公司；鈣、磷、血糖、甘油三酯、總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司；丙二醛和超氧化物歧化酶測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

8、1.2  儀器ELX800型酶標儀，美國BIO-Tek公司產品；752紫外光柵分光光度計，上海第三分析儀器廠產品。 2  方法 2.1  動物分組與給藥50只3月齡雄性SD大鼠(廣東醫(yī)學院實驗動物中心提供)，SPF級，隨機分成5組，每組10只，1組為正常對照組，予蒸餾水按5 ml/kg灌胃1 h后再予蒸餾水按5 ml/kg灌胃；2組為潑尼松組，予潑尼松按3.5 mg/kg灌胃后1 h再予蒸餾水按5 ml/kg灌胃; 3組為小檗堿低劑量組，先予潑尼松按3.5 mg/kg灌胃后1 h予小檗堿按15 mg/kg灌胃；4組為小檗堿中劑量組，先予潑尼松按3.5 mg/kg灌

9、胃后1 h予小檗堿按30 mg/kg灌胃；5組為小檗堿高劑量組，先予潑尼松按3.5 mg/kg灌胃后1 h予小檗堿按60 mg/kg灌胃。1次/d，所有動物給藥時間為12周。2.2  指標觀察與測定方法實驗過程中每天觀察大鼠進食、飲水、活動情況等變化并記錄，每周稱體重1次。在實驗結束前1 d下午開始禁食，用戊巴比妥鈉麻醉后心臟抽血處死，取血離心收集血清。采用酶比色法測定血清中甘油三酯和總膽固醇的含量。采用磷鎢酸-鎂沉淀法、葡萄糖氧化酶法測定血清中高密度脂蛋白膽固醇和葡萄糖的含量。采用鉬藍法、鄰甲酚酞絡合酮比色法測定血清中磷和鈣的含量。采用硫代巴比妥酸法、黃嘌呤氧化酶法測定血清中丙二醛

10、和超氧化物歧化酶的含量。2.3  統(tǒng)計學處理所有測定指標均采用±s表示，使用SPSS10.0 for Windows軟件中的單因素方差分析(ANOVA)進行檢驗，P<0.05表示差異有顯著性。 3  結果 3.1  小檗堿對糖皮質激素大鼠體質量的影響大鼠給予潑尼松后體質量增加減慢，實驗末期潑尼松組大鼠體質量明顯低于正常對照組(P<0.01)，體質量增長幅度亦明顯低于正常對照組(P<0.01)；小檗堿低劑量組大鼠體質量增長與潑尼松組相比，變化無統(tǒng)計學意義，但小檗堿中、高劑量組大鼠體質量增長明顯高于潑尼松組(P<0.05或P<0

11、.01)。結果見表1。表1  小檗堿對糖皮質激素大鼠體質量變化的影響（略）3.2  小檗堿對糖皮質激素大鼠血脂的影響給予潑尼松12周后，大鼠血清中甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)顯著升高(P<0.05)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低(P<0.01)。高劑量小檗堿可降低糖皮質激素大鼠血清中TG (P<0.01)，高、中劑量小檗堿均可降低糖皮質激素大鼠血清中TC (P<0.05或P<0.01)，高、中、低劑量小檗堿均可升高糖皮質激素大鼠血清中HDL-C (P<0.05或P<0.01)。結果見表2。表2  小檗堿對糖皮

12、質激素大鼠血脂的影響（略）3.3  小檗堿對糖皮質激素大鼠血糖及鈣、磷的影響給予潑尼松12周后，大鼠血糖顯著升高(P<0.01)，高、中劑量小檗堿均可降低糖皮質激素大鼠血糖水平(P<0.05或P<0.01)。給予潑尼松及不同劑量小檗堿12周后，大鼠血清中鈣、磷含量均無顯著變化。結果見表3。表3  小檗堿對糖皮質激素大鼠血糖、鈣及磷的影響（略）3.4  小檗堿對糖皮質激素大鼠血清丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影響給予潑尼松12周后，大鼠血清中MDA顯著升高(P<0.01)，高、中劑量小檗堿均可降低糖皮質激素大鼠血清中MDA水平(

13、P<0.01)。給予潑尼松及不同劑量小檗堿12周后，大鼠血清中SOD無顯著變化。結果見表4。表4  小檗堿對糖皮質激素大鼠血清中丙二醛和超氧化物歧化酶的影響（略） 4  討論      糖皮質激素臨床應用廣泛，主要用于風濕性疾病、皮膚病、腎臟病及器官移植等的 治療 ，但長期使用可引起血糖、血脂代謝異常、骨質疏松等許多不良反應。本實驗觀察發(fā)現(xiàn)，給予潑尼松12周后，大鼠血糖、甘油三酯和總膽固醇顯著升高，而高密度脂蛋白膽固醇降低，這可能是糖皮質激素抑制肝細胞攝入低密度脂蛋白（LDL），減少血漿中LDL向肝內轉移代謝有關，從而導致總膽固

14、醇升高3。此外，長期應用糖皮質激素可引起胰島素抵抗，胰島素抵抗時載脂蛋白合成減慢，導致HDL下降4。胰島素抵抗還可導致脂蛋白脂酶活性下降，甘油三酯分解代謝減弱，血液中甘油三酯升高5。     本實驗觀察發(fā)現(xiàn)，小檗堿可降低糖皮質激素大鼠血糖水平?？赡芘c小檗堿增加脂肪細胞對葡萄糖的轉運與消耗，以及促進胰島素分泌有關6，7。此外，小檗堿可降低糖皮質激素大鼠TG和TC，升高HDL-C。Kong等1研究發(fā)現(xiàn)小檗堿可促進肝細胞表達LDL受體，促進血液中LDL向肝內轉移代謝，從而導致血液中總膽固醇下降8。小檗堿可通過激活AMP激活蛋白激酶抑制肝細胞中甘油三酯合成，降低

15、血液中甘油三酯水平9。據報道10，血脂代謝異?？赡芘c抗氧化系統(tǒng)密切相關，MDA為脂質過氧化物的最終產物，MDA水平高低可反映脂質過氧化物的程度。因此，本實驗測定了大鼠血液中MDA，發(fā)現(xiàn)長期大量給予糖皮質激素可致大鼠血液中MDA增高，小檗堿可降低糖皮質激素大鼠血液中MDA含量，提示小檗堿能減輕脂質過氧化物，這可能為小檗堿改善血脂代謝異常的機制之一。SOD是體內重要的抗氧化酶，可清除氧自由基，本實驗進一步檢測了血液中SOD活性，結果顯示小檗堿并不能提高SOD活性，說明小檗堿抗脂質過氧化可能與SOD活性無關。     總之，長期大量給予潑尼松可引起大鼠血糖及血

16、脂代謝異常，小檗堿對潑尼松所致大鼠血糖及血脂代謝異常具有較好的改善作用。 【 參考 文獻 】   1Kong W， WEi J， Abidi P， et al. Berberine is a novel cholesterol-lowering drug working through a unique mechanism distinct from statinsJ. Nat Med，2004， 10(12)：1344.2房 輝，汪 暉. 小檗堿作用的研究進展J. 時珍國醫(yī)國藥，2006，17（3）：421.3Hazra A， Pyszczynski NA， DuBois DC，

17、et al. Modeling of corticosteroid effects on hepatic low-density lipoprotEIn receptors and plasma lipid dynamics in ratsJ. Pharm Res， 2008，25(4)：769.4徐沖，徐國恒. 糖皮質激素與脂肪代謝和胰島素抵抗J. 生理 科學 進展， 2009，40（1）：19.5panarotto d， remillard p， Bouffard L， et al. Insulin resistance affects the regulation of lipoprot

18、ein lipase in the postprandial period and in an adipose tissue-specific mannerJ. Eur J Clin Invest，2002，32(2):84.6歐陽禮枝，陸付耳，劉文軍，等. 小檗堿對胰島素抵抗大鼠肝臟葡萄糖激酶及其調節(jié)蛋白的影響J. 世界華人消化雜志， 2007，15(8)：885.7王增四，陸付耳，陳 廣，等.小檗堿對NIT-1細胞胰島素分泌和葡萄糖激酶活性的影響J. 藥學學報，2007，42(10)：1045.8Lee S， Lim HJ， Park JH， et al. Berberine-induced LDLR up-regulation involves JNK pathwayJ. Biochem Biophys Res Commun，2007，362(4) ：853.9Brusq JM， Ancellin N， Grondin P， et al. Inhibition of lipid synthesis thr