大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生超光譜-內(nèi)酰胺酶的檢測方法及其臨床應(yīng)用

1、大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生超光譜-內(nèi)酰胺酶的檢測方法及其臨床應(yīng)用        【摘要】     超光譜-內(nèi)酰胺酶（BSBLs）是由質(zhì)粒介導(dǎo)的能賦予細(xì)菌對頭孢菌素類（象頭孢三嗪，頭孢噻肟，頭孢他啶等）和單酰胺類抗生素安曲南以及青霉素類耐藥的一類酶。自1983年以來德國首次發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌以來，對ESBLs菌的檢測方法，國外已有較多報道。發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs菌的種類越來越多，已越來越引起臨床的關(guān)注。     【關(guān)鍵詞】

2、  肺炎克雷伯菌 大腸埃希菌 耐藥性 -內(nèi)酰胺酶        研究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生超光譜-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的耐藥性與臨床應(yīng)用。如何快速準(zhǔn)確為臨床提供產(chǎn)ESBLs菌株的依據(jù)，指導(dǎo)臨床合理選擇敏感抗生素，提高療效，監(jiān)控各種耐藥菌是當(dāng)務(wù)之急。檢測臨床分離的75株大腸埃希菌和33株肺炎克雷伯菌ESBLs產(chǎn)生情況。1  材料與方法1.1  材料2006年1月2007年12月臨床送檢各類標(biāo)本中分離的大腸埃希菌75株和肺炎克雷伯菌33株。頭孢三嗪、頭孢他啶、阿莫西林/棒酸（20 g/10

3、g）頭孢噻肟、安曲南和亞胺培南，頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟/克拉維酸均由浙江省軍區(qū)后勤防疫檢驗(yàn)所生產(chǎn)。江省軍區(qū)后勤防疫檢驗(yàn)所產(chǎn)品。1.2  方法 初步篩選試驗(yàn)按常規(guī)紙片擴(kuò)散法在MHA上涂好受試菌，先在平板中心貼上阿莫西林/棒酸（20 g/10 g）紙片，然后在其上下左右貼30 g/片頭孢三嗪、頭孢他啶、頭孢噻肟和安曲南紙片，各紙片中心距復(fù)合劑紙片中心30 mm，35 ，孵育1820小時。結(jié)果解釋，如周圍4個藥物紙片中有任何一個抑菌環(huán)在靠近復(fù)合劑紙片一側(cè)的邊緣出現(xiàn)擴(kuò)大或加強(qiáng)，說明該菌株可能產(chǎn)ESBLs。表型確正試驗(yàn)：按常規(guī)紙片擴(kuò)散法在MHA上涂好受試菌，

4、先在平板上貼上頭孢他啶、頭孢噻肟、然后再貼上頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟/克拉維酸，在頭孢他啶、頭孢噻肢這兩個藥中加克拉維酸后抑菌環(huán)直徑比不加克拉維酸大5 mm，判定為產(chǎn)ESBLs。2  結(jié)果    從2006年1月2007年12月，共分離大腸埃希菌75株和肺炎克雷伯菌33株，初篩試驗(yàn)和確證試驗(yàn)檢出23株腸埃希菌，產(chǎn)ESBLs檢出率30.6%，8株肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs檢出率24.2%。紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)結(jié)果，31株產(chǎn)ESBLs菌30 g/片頭孢三嗪、頭孢他啶、頭孢噻肟和安曲南和亞胺培南敏感性分布見表1。表1  31株產(chǎn)ESBLs菌株對4種-

5、內(nèi)酰胺抗生素敏感性分布（略）3  討論    我們從臨床送檢的標(biāo)本中檢出30.6%大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs檢出率為24.2%，低于文獻(xiàn)報道的檢出率，提示這兩種菌對超光譜-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥性已到不容忽視的程度。    在本研究中，使用30 g/片頭孢三嗪、頭孢他啶、頭孢噻肟和安曲南紙片檢測產(chǎn)ESBLs，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性時，有51.3%86.5%受試菌產(chǎn)生中介或耐藥結(jié)果。48.7%大產(chǎn)ESBLs菌株對頭孢他啶是敏感的。這個結(jié)果與有關(guān)研究報道相一致，產(chǎn)ESBLs菌對亞胺培南全部敏感。    產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分離，ESBLs提示治療該菌引起感染不能用青霉素、頭孢類及單環(huán)菌素類等藥物治療，目前首選泰能及馬斯平（四代頭孢菌素）。建議治療期間及治療后進(jìn)行耐藥監(jiān)測，避免使用或聯(lián)合使用-內(nèi)酰胺類抗生素。產(chǎn)ESBLs菌株的出現(xiàn)和在臨床標(biāo)本中檢出率上升，給臨床抗感染治療帶來很大困難，各醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室應(yīng)積極開展對ESBLs檢測工作，并將檢測結(jié)果報