本科畢業(yè)論文——膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響

1、編號(hào)本科生畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）題目： 膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響 食品 學(xué)院 食品科學(xué)及工程 專業(yè)學(xué) 號(hào) 0103080823 學(xué)生姓名 凌 驍指導(dǎo)教師 曹 棟 教授二一二年六月摘要摘 要脂質(zhì)體作為一種有效成分的載體，能夠起到靶向定位，緩釋有效成分，降低毒性的作用，在國(guó)內(nèi)已經(jīng)成功應(yīng)用于冬蟲夏草，人參皂苷等中藥制劑的生產(chǎn)，國(guó)外也使用脂質(zhì)體保持食品中某些特殊營(yíng)養(yǎng)成分的活性1。但由于其原料磷脂，化學(xué)性質(zhì)活潑，常溫下暴露在空氣中就容易被氧化變質(zhì)。人們發(fā)現(xiàn)在脂質(zhì)體中加入一定比例的膽固醇溶液能夠起到穩(wěn)定脂質(zhì)體化學(xué)性質(zhì)，改善脂質(zhì)體分子結(jié)構(gòu)，使脂質(zhì)體被氧化速率顯著降低，同時(shí)能夠改善脂質(zhì)體膜的通透性以及流動(dòng)性2

2、。在本研究中，以大豆磷脂為原料研究膽固醇-脂質(zhì)體混合體系的性質(zhì)。通過對(duì)脂質(zhì)體體系粒徑的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)此混合體系的粒徑先隨膽固醇濃度升高而升高，之后隨膽固醇濃度升高而降低。采用TBA（硫代巴比妥酸）法，測(cè)定混合體系的被氧化程度，發(fā)現(xiàn)添加了膽固醇的脂質(zhì)體溶液被氧化速率明顯降低，同時(shí)膽固醇濃度在15%以上時(shí)，被氧化速率并沒有明顯差異。利用熒光探針法對(duì)混合體系的微極性（I1/I3）進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)此混合體系的微極性隨著膽固醇濃度的增加而減少。采用差示掃描量熱法測(cè)定了脂質(zhì)體的相變溫度，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體的相變溫度隨膽固醇濃度的上升呈先減小后增大的趨勢(shì)。采用DPH為熒光探針測(cè)量此混合體系的熒光偏振度（P值），發(fā)現(xiàn)P值隨

3、著膽固醇濃度的增加而減小，證明脂質(zhì)體膜的流動(dòng)性和通透性隨之增強(qiáng)。通過一系列的實(shí)驗(yàn)確定膽固醇的最適濃度為15%-20%。關(guān)鍵詞：脂質(zhì)體；膽固醇；最適濃度；粒徑；微極性IAbstractABSTRACTLiposome as a carrier of active ingredients,can be used for can targeted positioning, sustained release of active ingredients, reduce the toxic effects.It has been successfully used in traditional Chin

4、ese medicine preparations of Cordyceps sinensis, ginsenoside production in the domestic.In foreigh liposome is used for maintain the activity of particular nutrients in the food.However, due to its raw materials - phospholipids,has an very active chemically feature,it can be easily oxidized.It is fo

5、und that adding a certain percentage of cholesterol in the liposome solution can stabileze the chemical nature of liposome and improve the molecular structure and the liposome oxidation rate was significantly lower.The mobility of the membrane is also improved.In this study,we use soybean lecithin a

6、s raw material to study the nature of the mix system of cholestrol and liposome. By determination of the liposome particle size, particle size of this mixed system first with the cholesterol concentration increased after lower cholesterol concentration. We use the method of TBA (thiobarbituric acid)

7、 to detemine the the degree of oxidation,we found that the oxidation rate is obiviously decreased with the addition of cholestrol,but when the concentration of cholestrol is higher than 15%,the further addition won't help to decrease the oxiation rate any more.The use of fluorescent probes is us

8、ed to study micropolar,it is found that the micro-polarity of the mixed system decrease with increasing cholesterol concentration.Using differential scanning calorimetry method for the determination of the lipid phase transition temperature and found that the lipid phase transition temperature showe

9、d a trend of decreases and then increases with the rise of cholesterol levels.Fluorescence polarization using DPH as a fluorescence probe measurements of this mixed system (P value), and P values with the increase of cholesterol concentration reduced to prove that the liposome membrane fluidity and

10、permeability increase as well.In the end,we determine the the optimal concentration of cholestrol is between 15% and 20%.Keywords：Liposome; cholestrol; optimal concentration; particle size; micro-polarityII目錄目 錄摘 要 . I ABSTRACT . II 目 錄 . I第1章 緒論 . 11.1 引言 . 11.2 卵磷脂 . 11.3 脂質(zhì)體及脂質(zhì)體的制備 . 21.4 膽固醇 . 3

11、1.5 膽固醇對(duì)于脂質(zhì)體的影響 . 31.6 膽固醇影響脂質(zhì)體膜性質(zhì)的原理 . 41.7 膽固醇脂質(zhì)體混合體系的研究 . 41.7.1 TBA（硫代巴比妥酸）法 . 41.7.2 DSC（差示掃描熱量?jī)x）測(cè)定相變溫度 . 41.7.3 脂質(zhì)體的粒徑與納米粒徑儀 . 51.7.4 熒光分析技術(shù) . 61.8 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展 . 71.9 本研究的主要內(nèi)容與意義 . 81.9.1 立題背景與意義 . 81.9.2 本課題研究的主要內(nèi)容 . 8第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法 . 92.1 實(shí)驗(yàn)材料與主要儀器 . 92.1.1 試劑 . 92.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備 . 92.2 實(shí)驗(yàn)方法 . 92.2.1 膽

12、固醇溶液制備 . 92.2.2 脂質(zhì)體懸浮液制備 . 92.2.3 脂質(zhì)體顆粒粒徑的測(cè)定 . 102.2.4 脂質(zhì)體溶液TBA值的測(cè)定 . 102.2.5 差示掃描熱量?jī)x（DSC）測(cè)定脂質(zhì)體相變溫度 . 102.2.6 膜微極性的測(cè)定 . 102.2.7 膜流動(dòng)性測(cè)定 . 11第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 . 123.1 超聲處理對(duì)脂質(zhì)體粒徑的影響 . 12i目錄3.2 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體粒徑的影響. 123.3 膽固醇添加量對(duì)膜相變溫度的影響. 133.4 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體氧化穩(wěn)定性的影響. 143.5 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體膜微極性的影響. 153.6 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體膜流動(dòng)性的影響.

13、16第4章 結(jié)論與展望.174.1 結(jié)論. 174.2 不足之處及未來展望. 17參考文獻(xiàn) .18致 謝 .20ii膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響第1章 緒論1.1 引言脂質(zhì)體是一種由脂質(zhì)構(gòu)成的雙分子封閉小囊，具有類似生物膜活性，可以包入各種各樣的功能成分。脂質(zhì)體在人體內(nèi)可以起到將功能成分緩慢釋放的作用，拉長(zhǎng)功能成分在人體內(nèi)的停留時(shí)間，使功能成分得到充分完全的利用，同時(shí)降低毒副作用1。但由于脂質(zhì)體本身易被氧化變質(zhì)，本身不夠穩(wěn)定。近年來，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)在脂質(zhì)體溶液中加入一定量的膽固醇，可以明顯提高脂質(zhì)體的抗氧化能力，同時(shí)是脂質(zhì)體的分子結(jié)構(gòu)更加趨向于穩(wěn)定，延長(zhǎng)脂質(zhì)體的保質(zhì)期，但添加何種比率的膽固醇才能

14、使脂質(zhì)體獲得最穩(wěn)定的分子結(jié)構(gòu)，最大效率的延長(zhǎng)保質(zhì)期，目前仍沒有定論，因此本文將從這方面進(jìn)行進(jìn)一步的研究。磷脂脂質(zhì)體作為較常見的脂質(zhì)體之一，具有原料易于獲取，脂質(zhì)體制備操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)采用磷脂脂質(zhì)體為主要的研究對(duì)象。本文主要的研究目的制備以膽固醇為調(diào)節(jié)劑的卵磷脂脂質(zhì)體；測(cè)定不同貯藏天數(shù)的脂質(zhì)體的TBA變化，以確定膽固醇的添加量對(duì)于脂質(zhì)體氧化穩(wěn)定性的影響，使用納米粒徑儀測(cè)定脂質(zhì)體的粒徑；采用DSC（差示掃描熱量?jī)x）測(cè)定脂質(zhì)體的相變溫度；利用芘為熒光探針法進(jìn)行脂質(zhì)體的微極性研究；測(cè)定以DPH為熒光探針的不同比例膽固醇的脂質(zhì)體的熒光光譜，從而研究脂質(zhì)體的膜的流動(dòng)性。1.2 卵磷脂卵磷脂為兩性

15、化合物，磷脂的極性、電荷、飽和狀態(tài)會(huì)影響膠束的增溶作用。囊泡是一種球形或橢圓形的單室或多室封閉雙層結(jié)構(gòu)的有序組織聚集體。1967年英國(guó)學(xué)者Bangham等發(fā)現(xiàn)磷脂分散在水中可以形成多層囊泡，并且證明每層囊泡均為雙分子層脂質(zhì)膜且被水相隔開3。由天然磷脂分子定向排列形成的雙層膜包裹的閉合結(jié)構(gòu)的囊泡，也稱為脂質(zhì)體。常態(tài)下，純凈的卵磷脂為淡黃色的透明或半透明的黏稠狀物質(zhì)，具有清淡柔和的香味，其等電點(diǎn)pH值是6.7，熔點(diǎn)160。卵磷脂在水中通常呈現(xiàn)膠體狀態(tài)。不同的卵磷脂在有機(jī)溶劑中溶解度不同：卵磷脂在氯仿中的溶解性極強(qiáng)，在乙醚、乙醇等有機(jī)溶劑中也能很好的溶解，但不溶于丙酮，故可用有機(jī)溶劑來提取分離卵磷脂

16、，其結(jié)構(gòu)見圖1-1圖1-1 磷脂結(jié)構(gòu)圖1江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文1.3 脂質(zhì)體及脂質(zhì)體的制備脂質(zhì)體是一種定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑型。它可以將藥物粉末或溶液包埋在直徑為納米級(jí)的微粒中，這種微粒具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入人體內(nèi)主要 被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性45。按結(jié)構(gòu)和粒徑，脂質(zhì)體可分為單室脂質(zhì)體、多室脂質(zhì)體、含有表面活性劑的脂質(zhì)體。按性能，脂質(zhì)體可分為一般脂質(zhì)體（包括上述單室脂質(zhì)體、多室脂質(zhì)體和多 相脂質(zhì)體等）、特殊性能脂質(zhì)體、熱敏脂質(zhì)體、

17、PH敏感脂質(zhì)體、超聲波敏感脂質(zhì)體、光敏脂質(zhì)體和磁性脂質(zhì)體等。按照荷電性，脂質(zhì)體可分為中性脂質(zhì)體、負(fù)電性脂質(zhì)體、正電性脂質(zhì)體。如圖1-2圖1-2 脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)示意圖脂質(zhì)體的制備大致可以分為：手搖法、超聲法、凍干再水化法、逆向蒸發(fā)法、表面活性劑去除法、高壓均質(zhì)法。本次實(shí)驗(yàn)采用的是手搖法及超聲法6。手搖法：磷脂及一定比例的膽固醇溶于氯仿/甲醇溶液中，置于圓底燒瓶中用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干有機(jī)溶劑后，倒入水相（如磷酸緩沖液），通過適當(dāng)?shù)臄嚢?、震蕩后形成脂質(zhì)體溶液。超聲法：經(jīng)過手搖法制得的脂質(zhì)體溶液放入超聲波發(fā)生器中進(jìn)行超聲，經(jīng)過這種方法的得到的脂質(zhì)體溶液會(huì)有更小的粒徑（通常能小于100nm）。凍干再水化法：經(jīng)手

18、搖法制得的脂質(zhì)體通過冷凍干燥機(jī)升華所有水分，加入水相，平衡分散體系，即得此法所得脂質(zhì)體。逆向蒸發(fā)法：用手搖法制得的脂質(zhì)體重新溶于有機(jī)溶劑中，加入包埋物質(zhì)，超聲后，減壓蒸發(fā)得水性懸浮液，利用離心、色譜、透析等方法出去未包埋的成分后，即得此法所制脂質(zhì)體。2膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響表面活性劑去除法：經(jīng)手搖法制得的脂質(zhì)體溶液中加入濃的表面活性劑，蒸干有機(jī)溶劑，再通過透析等途徑出去表面活性劑后即得此法所制的脂質(zhì)體溶液。高壓均質(zhì)法：手搖法制得的脂質(zhì)體溶液通過高壓均質(zhì)機(jī)后即得此法所制脂質(zhì)體。1.4 膽固醇膽固醇又稱膽甾醇。一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物。早在18世紀(jì)人們已從膽石中發(fā)現(xiàn)了膽固醇，1816年化學(xué)

19、家本歇爾將這種具脂類性質(zhì)的物質(zhì)命名為膽固醇。膽固醇廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi)，尤以腦及神經(jīng)組織中最為豐富，在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也高。其溶解性與脂肪類似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶劑。膽固醇是動(dòng)物組織細(xì)胞所不可缺少的重要物質(zhì)，它不僅參與形成細(xì)胞膜，而且是合成膽汁酸，維生素D以及甾體激素的原料2。 如圖1.3所示。膽固醇是從脂肪不能皂化的部分分離而得到的一種二級(jí)醇，分子式為C27H45O，分子量為386.64，其中C：83.87%，H：11.99%，O：4.14%，由一個(gè)剛性的環(huán)狀結(jié)構(gòu)、一個(gè)短的烷基鏈分支和一個(gè)羥基構(gòu)成。膽固醇中的絕大部分都是疏水結(jié)構(gòu)，但有一個(gè)極性的羥基存在，所以膽固醇也是一

20、個(gè)既親水有親油的分子。最近的研究表明，在卵磷脂脂質(zhì)體中添加一定量的膽固醇中，卵磷脂脂質(zhì)體會(huì)出現(xiàn)一系列的理化變化，使脂質(zhì)體能夠更加符合人們的需要，但是究竟添加多少膽固醇能夠使脂質(zhì)體表現(xiàn)出最符合人們需求的形態(tài)，目前尚沒有定論。圖1-3 膽固醇結(jié)構(gòu)圖1.5 膽固醇對(duì)于脂質(zhì)體的影響膽固醇具有雙親性，既親水又親油，起表面活性劑作用，不僅能提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，而且能與磷脂能良好相容，能夠調(diào)節(jié)脂質(zhì)體膜膜脂的流動(dòng)性和影響磨得通透性?；旌夏さ倪^剩面積和動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明，膽固醇和卵磷脂是相互吸引的，即膽固醇的加入使卵磷脂囊泡更不容易被表面活性劑破壞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，囊泡中的蛋白質(zhì)、膽固醇和卵磷脂分子之間是相互吸引的。

21、相對(duì)于卵磷脂囊泡，混合體系囊泡更加穩(wěn)定。膽固醇作為表面活性劑使油包水乳液能穩(wěn)定形成，膽固醇嵌入脂質(zhì)體膜使得脂質(zhì)體顆粒膨大，內(nèi)水相也將相應(yīng)增大，但當(dāng)膽固醇比例過大時(shí)，組成的脂質(zhì)體的磷脂的量太少，一方面脂質(zhì)體微囊膜形成困難，另一方面所形成的脂質(zhì)體膜也會(huì)變得不牢固，過高膽固醇使得脂質(zhì)體膜親水性太強(qiáng)，膜容易破壞，其中包含物將很容易滲漏出來2。3江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文圖1-4 脂質(zhì)體的形成1.6 膽固醇影響脂質(zhì)體膜性質(zhì)的原理膽固醇的一端是親水的羥基，另一端是甾醇環(huán)和疏水環(huán)基鏈，是一種兩親分子。其本身是構(gòu)成脂質(zhì)體的重要組成。在脂質(zhì)體中，膽固醇鑲嵌于磷脂分子之間，膽固醇的羥基端與磷脂的頭基相結(jié)合，另一端插入雙

22、分子層疏水烷基鏈中。膽固醇與磷脂雙分子層的作用分為兩種：一種為羥基與磷脂頭基間的氫鍵作用，另一種為甾醇環(huán)烷基鏈結(jié)構(gòu)在磷脂疏水鏈之間的填充作用7。適量的膽固醇可以增加磷脂脂質(zhì)體膜的剛性，增加其穩(wěn)定性，但過量的膽固醇會(huì)使雙分子層超過可容納的限度，造成雙分子層的破壞，使磷脂脂質(zhì)體失去穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，最終導(dǎo)致破裂。1.7 膽固醇脂質(zhì)體混合體系的研究目前對(duì)于膽固醇脂質(zhì)體混合體系的研究，一般采用研究其特征參數(shù)（脂質(zhì)體粒徑，脂質(zhì)體微極性，脂質(zhì)體膜流動(dòng)性等）的方法，本次研究將針對(duì)脂質(zhì)體在加入了膽固醇之后的抗氧化能力以及其他各種理化指標(biāo)的變化，以達(dá)到得出膽固醇最適添加量的目的。1.7.1 TBA（硫代巴比妥酸）法T

23、BA法的原理是脂質(zhì)過氧化的降解產(chǎn)物之一一丙二醛(MDA)，可以與硫代巴比妥酸成色。在520nm處進(jìn)行比色測(cè)定，可檢測(cè)丙二醛相對(duì)含量的變化，以了 解生物膜質(zhì)過氧化的情況。 TBA法是一非常簡(jiǎn)便的方法，一般實(shí)驗(yàn)室均可進(jìn)行。此法與熒光法、化學(xué)發(fā)光法等有較好的相關(guān)性，但不足之處是靈敏度較差，某些因素應(yīng)加以控制，如線粒體污 染，樣品中的鐵離子等8。經(jīng)過TBA法處理過的磷脂脂質(zhì)體樣品一般呈粉紅色，被氧化程度越高，丙二醛的含量越高，顏色越升，于分光光度儀上所測(cè)得的吸光值也就越深。1.7.2 DSC（差示掃描熱量?jī)x）測(cè)定相變溫度1）脂質(zhì)體相變溫度的定義脂質(zhì)體膜雙分子層由排列整齊且致密的膠晶態(tài)變?yōu)槭杷苫靵y的液晶

24、態(tài)，這一轉(zhuǎn)變我們即稱之為脂質(zhì)體的相變溫度。2）DSC（差示掃描熱量?jī)x）差示掃描熱量?jī)x（differential scanning calorimetry）是一類在嚴(yán)格控制程序溫度下，測(cè)4膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響量輸入（或取出）試樣和參比物的平衡熱量差儀器。通過對(duì)樣品的變溫?zé)岱治鰻顩r，可以檢測(cè)出脂質(zhì)體的相變溫度時(shí)的熱量釋放情況。 相變溫度對(duì)于熱敏感脂質(zhì)體來說是相當(dāng)重要的一個(gè)參數(shù)，直接關(guān)系到脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。當(dāng)脂質(zhì)體處于“液晶”態(tài)時(shí)，膜的橫切面增大，雙分子層厚度減少，膜流動(dòng)性增加，從而使被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的藥物透膜速度增加，使脂質(zhì)體不穩(wěn)定，因此較高的相變溫度有利于維持脂質(zhì)體的穩(wěn)定9。而某些熱敏脂

25、質(zhì)體正是利用了其對(duì)溫度敏感的特征。這一類脂質(zhì)體的相變溫度通常略高于37攝氏度。當(dāng)處于常溫時(shí)，這一類脂質(zhì)體處于膠晶態(tài)，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定能夠很好的達(dá)到保存藥物的功能，而當(dāng)被服用了之后，到達(dá)了溫度較高的靶向部位時(shí)，由于溫度超過了脂質(zhì)體的相變溫度，脂質(zhì)體相變?yōu)橐壕B(tài)，此時(shí)就將其包埋的有效成分釋放出來，成功的作用于靶向部位。圖1.5 差示掃描熱量?jī)x工作原理圖1.7.3 脂質(zhì)體的粒徑與納米粒徑儀粒徑是脂質(zhì)體形態(tài)學(xué)中很重要得一項(xiàng)指標(biāo)，粒徑大小直接影響到了脂質(zhì)體的各方面的性質(zhì)。特別在作為抗癌藥物的載體時(shí)，脂質(zhì)體的粒徑直接影響了藥物的靶向性，釋放速率及治療效果。一般認(rèn)為，粒徑較小的脂質(zhì)體更為穩(wěn)定9。在生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)過程中，一

26、般可以采用超聲等手段減小脂質(zhì)體的粒徑。不同的包埋物對(duì)于磷脂脂質(zhì)體的粒徑要求也不同，如：當(dāng)藥物為口服藥時(shí)，粒徑較小的脂質(zhì)體更能夠促進(jìn)藥物有效成分的吸收，因此要求粒徑更小的脂質(zhì)體。通過超聲、均質(zhì)均可以減小磷脂脂質(zhì)體的粒徑。一般情況下，再添加了適量的膽固醇后磷脂脂質(zhì)體的粒徑會(huì)增大，但膽固醇濃度過大時(shí)，會(huì)造成磷脂脂質(zhì)體粒徑的急劇減小。此內(nèi)容詳見第二章。納米粒度儀是用物理的方法測(cè)試固體顆粒的大小和分布的一種儀器，采用數(shù)字相關(guān)器的納米激光粒度儀，其采用高速數(shù)字相關(guān)器和高性能光電倍增管作為核心器件，具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)試快捷、高分辨、高重復(fù)及測(cè)試準(zhǔn)確等特點(diǎn)，是納米顆粒粒度測(cè)試的首選產(chǎn)品。5江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文圖

27、1.6納米粒度儀原理圖1.7.4 熒光分析技術(shù)熒光分析是指利用某些物質(zhì)在紫外光照射下產(chǎn)生熒光的特性及其強(qiáng)度進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量的分析的方法。1852年G.G.斯托克斯(G.G.Strokes)發(fā)現(xiàn)熒光，真正的熒光光譜測(cè)量則始于本世紀(jì)60年代10。熒光定量分析常采用直接比較法，將試樣與已知物質(zhì)同時(shí)放在紫外光源下，根據(jù)它們所發(fā)熒光的性質(zhì)、顏色和強(qiáng)度，鑒定它們是否含有同一熒光物質(zhì)。某些物質(zhì)在加入某種試劑后，其產(chǎn)物會(huì)產(chǎn)生熒光，也可采用同樣方法鑒定。最常用的方法是用熒光分光光度計(jì)繪制試樣的熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜，并與已知物質(zhì)的這兩種光譜進(jìn)行比較，從而鑒定所含成分11。膜類物質(zhì)并不產(chǎn)生熒光，因此，人們

28、通常用一些能自發(fā)進(jìn)入膜中非極性鏈區(qū)域的熒光團(tuán)去標(biāo)記它們。其中，使用最普遍的就是1，6一二苯基一1，3，5一己三烯(DPH)，由于其在水中的低溶解和低發(fā)射性質(zhì)，DPH只有存在于膜結(jié)構(gòu)中才能發(fā)出熒光。DPH及其衍生物廣泛應(yīng)用于研究膜流動(dòng)性等10。本次研究中采用了芘和DPH作為熒光探針分別測(cè)定磷脂脂質(zhì)體膜的微極性和流動(dòng)性。芘：有機(jī)化合物，淡黃色單斜晶體（純品為無色），具有芳香，可燃，不溶于水，易溶于乙醇、乙醚?？蛇M(jìn)行親電取代，如鹵化、硝化、磺化等反應(yīng)。芘主要存在于煤焦油瀝青的蒸餾物中。芘為有機(jī)合成原料，經(jīng)氧化可制取1,4,5,8-萘四甲酸，用于染料、合成樹脂、分散性染料和工程塑料；?；罂芍七€原染料

29、艷橙GR及其他多種染料。還可制殺蟲劑、增塑劑等。DPH：黃色片狀結(jié)晶。溶于熱丙酮，微溶于苯、氯仿和冷丙酮，不溶于水、乙醇和乙醚等。熔點(diǎn)200203。有刺激性。6膽固醇對(duì)磷脂脂質(zhì)體膜性質(zhì)的影響圖1-7 發(fā)光機(jī)理圖1-8 典型的熒光物質(zhì)結(jié)構(gòu)1.8 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展脂質(zhì)體最初是由英國(guó)學(xué)者Bangham和Standish將磷脂分散在水中進(jìn)行電鏡觀察時(shí)發(fā)現(xiàn)的。磷脂分散在水中自然形成多層囊泡，每層均為脂質(zhì)的雙分子層；囊泡中央和各層之間被水相隔開，雙分子層厚度約為4納米3。后來，將這種具有類似生物膜結(jié)構(gòu)的雙分子小囊稱為脂質(zhì)體。1971年英國(guó)萊門等人開始將脂質(zhì)體用于藥物載體1。D.Bach, E.Wachtel

30、, E.Borochov等人早在上世紀(jì)80年代就開始對(duì)在磷脂中添加脂質(zhì)體進(jìn)行研究，并初步確定了膽固醇通過嵌入磷脂雙分子層中以達(dá)到穩(wěn)定脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，加強(qiáng)抗氧化作用的機(jī)理。隨著電子顯微鏡技術(shù)的成熟，人們能夠更清晰的觀察到了膽固醇影響脂質(zhì)體膜性質(zhì)的機(jī)理12。由于脂質(zhì)體的主要作用是作為有效成分，如藥物，的載體，使有效成分能夠在體內(nèi)緩慢釋放，提高有效成分作用效率，能與我國(guó)的傳統(tǒng)中藥完美結(jié)合。國(guó)內(nèi)學(xué)者已于20世紀(jì)80年代陸續(xù)開始將我國(guó)中草藥中的有效成分進(jìn)行脂質(zhì)體包埋的研究，如雙參脂質(zhì)體口服液13、冬蟲夏草脂質(zhì)體口服液14、人參皂苷脂質(zhì)體1516、黃氏多糖脂質(zhì)體17、人參多糖脂質(zhì)體18、丹參酮前體脂質(zhì)體19、

31、三七總皂苷脂質(zhì)體20等已在制備方法和醫(yī)學(xué)性質(zhì)上進(jìn)行了深入的研究。目前，國(guó)外也已將脂質(zhì)體成功的應(yīng)用于食品工業(yè)，如乳鐵傳遞蛋白脂質(zhì)體用于食品的抗菌、卵黃高磷蛋白脂質(zhì)體用在乳品和干肉中放置脂質(zhì)氧化、維生素C脂質(zhì)體用于降低失活。許多用于治療癌癥、抗真菌的脂質(zhì)體藥物已經(jīng)被批準(zhǔn)用于臨床研究458。膽固醇目前作為脂質(zhì)體制備中不可缺少的一種成分，已經(jīng)越來越受到國(guó)內(nèi)外研究學(xué)者7江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文的重視。1.9 本研究的主要內(nèi)容與意義1.9.1 立題背景與意義脂質(zhì)體作為一種有效成分的載體，能夠起到靶向定位，緩釋有效成分，降低毒性的作用。在脂質(zhì)體溶液中加入膽固醇可以明顯提高脂質(zhì)體的抗氧化能力，并改變脂質(zhì)體的一些其

32、他性質(zhì)。目前所做的研究大多為如何使有效成分和脂質(zhì)體相融合，但對(duì)于添加多少膽固醇能夠在增加脂質(zhì)體的抗氧化能力的同時(shí)又不影響其包埋有效成分的能力甚至能增強(qiáng)其靶向定位，降低毒性的能力，現(xiàn)在尚無定論。本研究的目的就是通過實(shí)驗(yàn)研究不同膽固醇濃度的脂質(zhì)體溶液的性質(zhì)，以得出膽固醇的最適添加量，從而為脂質(zhì)體的制備提供依據(jù)，并為下一步植物固醇代替膽固醇，提供參考2122。1.9.2 本課題研究的主要內(nèi)容1）制備以膽固醇為調(diào)節(jié)劑的卵磷脂脂質(zhì)體；2）測(cè)定不同貯藏天數(shù)的脂質(zhì)體的TBA變化，以確定膽固醇的添加量對(duì)于脂質(zhì)體氧化穩(wěn)定性的影響；3）使用納米粒徑儀測(cè)定脂質(zhì)體的粒徑；4）采用DSC（差示掃描熱量?jī)x）測(cè)定脂質(zhì)體的相

33、變溫度；5）利用芘為熒光探針法進(jìn)行脂質(zhì)體的微極性研究；6）測(cè)定以DPH為熒光探針的不同比例膽固醇的脂質(zhì)體的熒光光譜，從而研究脂質(zhì)體的膜的流動(dòng)性。8本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法2.1 實(shí)驗(yàn)材料與主要儀器2.1.1 試劑 試劑名稱大豆磷脂（Pc90）磷酸氫二鈉（AR）磷酸二氫鈉（AR）甲醇（AR）三氯甲烷（AR）無水乙醇（AR）膽固醇（AR）芘，99.0硫代巴比妥酸三氯乙酸濃鹽酸（AR） 生產(chǎn)廠家 江蘇曼氏生物科技有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司

34、Aldrich 產(chǎn)品 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備 儀器名稱旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀Mettler AL-204電子精密天平XMTE-2000 數(shù)顯恒溫水浴鍋F-7000熒光光譜儀Zetasizer nano ZS納米粒度儀KJ-300 超聲波發(fā)生器WEZ UV-2010紫外可見分光光度計(jì)SHB-IIIA 循環(huán)水式多用真空泵Pyris 1 DSC78 HW-1型恒溫磁力攪拌器 生產(chǎn)廠家 南京予凱儀器設(shè)備有限公司 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司 南京予凱儀器設(shè)備有限公司 日本Hitach公司 英國(guó)Malvern公司 無錫市科潔超聲電子

35、設(shè)備有限公司 尤尼柯（上海）儀器有限公司 南京予凱儀器設(shè)備有限公司 美國(guó)Perkin Elmer公司 江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司2.2 實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 膽固醇溶液制備稱取0.251g膽固醇至于燒杯中，加入100mL氯仿/甲醇（2：1V/V）混合液，用玻璃棒攪拌至完全溶解后，常溫貯于棕色瓶 。2.2.2 脂質(zhì)體懸浮液制備取0.2 g大豆磷脂置于50mL小燒杯中，按表2-1加入配置好的混合溶液，用玻璃棒加大豆磷脂充分溶解后，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，放入1.0g左右玻璃珠，在45、40r/min的條件下，接入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，蒸發(fā)有機(jī)溶劑，持續(xù)1h，在瓶?jī)?nèi)壁形成一層薄膜。于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上取下燒瓶后，立即

36、加入50mL磷酸鹽緩沖液（10mM，pH7.4），水化脂質(zhì)薄膜，形成50mL粗脂質(zhì)懸浮液。于燒瓶中加入攪拌子后，用磁力攪拌器于600r/min的條件下攪拌30min。攪拌完成后，叫樣品液體轉(zhuǎn)移至50mL小燒杯中，置于超聲波發(fā)生器中，將樣品超聲30min，所得濾液置于暗處放置12 h進(jìn)行下步操作。 PC:Chol(mol) (mL) 液(mL)9江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文5%15%25%50%0 2 6 10 20 30 28 24 20 102.2.3 脂質(zhì)體顆粒粒徑的測(cè)定采用動(dòng)態(tài)光散射法（DLS）測(cè)定脂質(zhì)體的粒徑，測(cè)定條件為散射角90°，（25±0.1）時(shí)平衡2min，所有的樣

37、品做三次平行，數(shù)據(jù)取自至少兩組獨(dú)立樣品的平均值。2.2.4 脂質(zhì)體溶液TBA值的測(cè)定（1）TBA溶液的配制準(zhǔn)確稱取硫代巴比妥酸0.75g，三氯乙酸30g于200mL燒杯中，加入稀鹽酸（0.1mol/L）200mL，于沸水浴中加熱使完全溶解。（2）TBA測(cè)定步驟1）于試管中準(zhǔn)確添加1mL樣品溶液，5mL上述TBA溶液，搖勻后沸水浴30min。2）沸水浴中取出后，稍冷卻，倒入離心管，配平后，于5000r/min離心機(jī)中離心10min。3）去離心后上清液于532nm波長(zhǎng)下，以TBA溶液為空白參照，測(cè)定其吸光值。4）重復(fù)上述步驟3次，作為平行參比。2.2.5 差示掃描熱量?jī)x（DSC）測(cè)定脂質(zhì)體相變溫度

38、按順序依次打開氮?dú)?、冷源、控制器、DSC主機(jī)以及軟件程序，預(yù)熱至少15min。分別在參比池和樣品池中加入適量體積的去離子水和待測(cè)樣品，稱量時(shí)保證兩端池子與樣品質(zhì)量總和相等。設(shè)置溫度范圍為20-70，溫度梯度為5/min。所有的樣品做三次平行，數(shù)據(jù)取自至少兩組獨(dú)立樣品的。2.2.6 膜微極性的測(cè)定芘對(duì)其周圍的微環(huán)境較敏感，廣泛用來檢測(cè)聚合物形成的膠束等的微環(huán)境。芘溶液的熒光發(fā)射光譜有5個(gè)特征峰，分別在372，379，384，394，480 nm附近。芘的第一發(fā)射峰與第三發(fā)射峰強(qiáng)度比值I1/I3 (在372 nm處熒光強(qiáng)度與在384 nm處的比值) 會(huì)隨著溶液極性的減小而下降。因此，I1/I3常用

39、來表征其所處環(huán)境極性的大小，該值越大表明芘探針?biāo)幬h(huán)境的極性越大；反之，若I1/I3越小則表明花探針?biāo)幬h(huán)境的極性越小22。制備10-4mol/mL的芘的甲醇溶液，取0.5mL芘溶液于三角瓶中，氮?dú)獯蹈桑尤?0mL所制備的粗脂質(zhì)體乳狀液，控制溫度40超聲1 h。圖2-1 芘的結(jié)構(gòu)10本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目2.2.7 膜流動(dòng)性測(cè)定用磷酸鹽緩沖液配制2×10-6的DPH溶液，取0.5mL DPH溶液加入到5mL稀釋5倍的脂質(zhì)體溶液中，平衡12h，用熒光光譜儀測(cè)定分別測(cè)激發(fā)與發(fā)射偏振器平行和垂直時(shí)的熒光強(qiáng)度，Ex=360nm，Em=430nm，激發(fā)電壓700v，激發(fā)和發(fā)射狹縫都為

40、5nm。按公式P= = FGF / F+ GF計(jì)算偏振度，其中代表兩個(gè)偏振器設(shè)定方向平行，代表兩個(gè)偏振器設(shè)定方向相反，G為光柵校正因子。圖2-2 DPH結(jié)構(gòu)圖11江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論3.1 超聲處理對(duì)脂質(zhì)體粒徑的影響粒徑作為脂質(zhì)體的一項(xiàng)重要物理指標(biāo)，影響著脂質(zhì)體的各方面性質(zhì)。一般認(rèn)為，粒徑較小的脂質(zhì)體化學(xué)性質(zhì)更為穩(wěn)定，粒徑較大的脂質(zhì)體可以包埋更多的有效物質(zhì)。我們將未添加膽固醇的脂質(zhì)體進(jìn)行超聲處理，將測(cè)出的粒徑與未超聲的脂質(zhì)體粒徑相比較，其結(jié)果如圖3-1。圖3-1 粒徑分布圖從圖3-1中，我們可以看出，經(jīng)過超聲的脂質(zhì)體，其粒徑不但有所減小，而且分布更為集中，未經(jīng)過超聲的脂質(zhì)

41、體，粒徑分散較廣，粒徑較大。說明超聲對(duì)于脂質(zhì)體可以起到減小粒徑，使粒徑分布更為集中的作用。圖中的脂質(zhì)體于粒徑1000nm以上時(shí)都有分布，應(yīng)為大分子物質(zhì)聚集，可采用過濾去除。3.2 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體粒徑的影響粒徑是脂質(zhì)體形態(tài)學(xué)中很重要得一項(xiàng)指標(biāo)，粒徑大小直接影響到了脂質(zhì)體的各方面的性質(zhì)。對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行超聲目的是為了調(diào)整脂質(zhì)體的粒徑，使粒徑分布在比較小的范圍內(nèi)，使其粒徑滿足我們最終的要求（注射，口服，靶相位置等）。小粒徑的脂質(zhì)體穩(wěn)定性較好，但由于體積的減小，其能包埋的有效成分也會(huì)減少，因此我們需要找到粒徑適中，既能滿足包埋有效成分的需要，同時(shí)又能有較高穩(wěn)定性的脂質(zhì)體。我們同時(shí)對(duì)不同膽固醇濃度的脂

42、質(zhì)體進(jìn)行了超聲處理，測(cè)出的粒徑與未超聲的脂質(zhì)體粒徑相比較，其結(jié)果如圖3-2。12本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目圖3-2 不同膽固醇濃度脂質(zhì)體的粒徑曲線圖如圖3-2，我們可以明顯的看出，超聲之后的脂質(zhì)體粒徑有大幅度的減小。同時(shí)，我們明顯的發(fā)現(xiàn)隨著膽固醇加入量的增加，脂質(zhì)體的粒徑呈現(xiàn)出先增大然后急劇減小的現(xiàn)象。這是由于膽固醇鑲嵌于脂質(zhì)體中，使脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。膽固醇鑲嵌在雙分子層中，增加了膜的剛性，加強(qiáng)了穩(wěn)定性同時(shí)也增大了粒徑，然而當(dāng)膽固醇的添加量超過了雙分子層的可容納限度后，會(huì)造成膜結(jié)構(gòu)的破壞，使脂質(zhì)體失去穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，破裂成許多新結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，此物質(zhì)的尺寸較原脂質(zhì)體小。因此我們可以觀察到，隨著膽固

43、醇濃度的增加，脂質(zhì)體的粒徑呈現(xiàn)出先增大然后急劇減小的過程。圖3-3 膽固醇嵌入脂質(zhì)體示意圖我們將經(jīng)過超聲處理的脂質(zhì)體于常溫下避光保存于小燒杯中，測(cè)量其粒徑與保存天數(shù)的關(guān)系，其結(jié)果如表3-1。表3-1 超聲情況下脂質(zhì)體粒徑隨膽固醇及天數(shù)的變化量膽固醇濃度 0 5% 15% 25% 50%第1天第2天第6天 107.2 103.1 99.7 118.3 114.4 138.3 162.1 149.7 175.1 187.3 215.0 256.1 63.2 66.7 78.2由表3-1我們可以看出，經(jīng)過超聲處理的脂質(zhì)體粒徑較小，大約在100到200nm之間，較小的粒徑保證了脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。脂質(zhì)

44、體的粒徑隨著保存天數(shù)的增加有增大的趨勢(shì)，這可能由兩方面原因造成，首先保存天數(shù)的增加，使膽固醇于脂質(zhì)體雙分子層有更多的時(shí)間相互反應(yīng)，使更多的膽固醇能夠進(jìn)入雙分子層中，造成了脂質(zhì)體粒徑的增大：其次，長(zhǎng)時(shí)間的靜置使溶液中的物質(zhì)聚集，這些聚集物造成了測(cè)量中平均粒徑的增大。3.3 膽固醇添加量對(duì)膜相變溫度的影響膜一般會(huì)有三種形態(tài)，膠晶相，液晶相，和液體有序相。相變溫度是脂質(zhì)體由“膠晶”態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)椤耙壕А睉B(tài)時(shí)的溫度，當(dāng)脂質(zhì)體處于“液晶”態(tài)時(shí)，膜的橫切面增大，雙分子層厚度減少，膜流動(dòng)性增加，從而使被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的藥物透膜速度增加，使脂質(zhì)體不穩(wěn)定，因此相變溫度越高，脂質(zhì)體越穩(wěn)定。因此我們采用示差掃描量熱法，測(cè)

45、量了不同膽固醇濃度脂質(zhì)體的相變溫度，其結(jié)果如圖3-4，圖3-5所示。13江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文圖3-4 不同膽固醇濃度脂質(zhì)體DSC熱分析圖圖3-5 磷脂脂質(zhì)體相變溫度隨膽固醇濃度的變化從圖3-4中我們可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)膽固醇濃度在20%以下時(shí)，相變溫度隨著膽固醇濃度的提高而降低，之后相變溫度隨著膽固醇濃度的提高而有所提高。膽固醇作為磷脂脂質(zhì)體的重要組成部分，他們之間的相互作用分為膽固醇的羥基與磷脂極性頭基的作用以及膽固醇剛性環(huán)狀結(jié)構(gòu)及相接的碳?xì)湮叉溒叫写┎逶诹字奶細(xì)滏溨?。在低濃度的情況下，膽固醇會(huì)傾向于干擾磷脂極性頭基間的作用，使雙分子層更為松散，降低其相變溫度；而當(dāng)膽固醇濃度逐步增大時(shí)，膽固醇也會(huì)

46、逐漸開始傾向于穿插在磷脂碳?xì)滏溨校沽字p分子層的結(jié)構(gòu)更為緊密，干擾頭基的作用就相對(duì)的削弱了，就造成了脂質(zhì)體相變溫度的升高。同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)所制備出的磷脂脂質(zhì)體在15%膽固醇濃度左右時(shí)，其相變溫度略高于37攝氏度，此時(shí)，脂質(zhì)體可以較好的達(dá)到靶向定位，緩釋有效成分，降低毒性的目的。3.4 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體氧化穩(wěn)定性的影響TBA（硫代巴比妥酸）法的原理是脂質(zhì)過氧化的降解產(chǎn)物之一一丙二醛(MDA)，可以與硫代巴比妥酸成色。在520nm處進(jìn)行比色測(cè)定，可檢測(cè)丙二醛相對(duì)含量的變化，以了解生物膜質(zhì)過氧化的情況。磷脂脂質(zhì)體經(jīng)過TBA法處理后顯粉紅色，被氧化程度越深，丙二醛含量越高，顏色越深，用紫外分光

47、光度儀在520nm處測(cè)量出的吸光值也就越高。414本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目我們將脂質(zhì)體溶液連續(xù)避光培養(yǎng)5天，每天測(cè)量其TBA值，結(jié)果如圖3-6。圖3-6 經(jīng)TBA法處理后的磷脂脂質(zhì)體吸光值隨培養(yǎng)天數(shù)的變化脂質(zhì)體在懸浮液中會(huì)由于光、氧、金屬等因素發(fā)生脂質(zhì)的氧化和水解反應(yīng)。19卵磷脂是構(gòu)成脂質(zhì)體膜的基本物質(zhì)，它的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，易于氧化水解，氧化產(chǎn)物，破壞脂質(zhì)體膜的完整性，影響脂質(zhì)體的包封率，也會(huì)增加毒性。因此有時(shí)在制備脂質(zhì)體的過程中除了添加膽固醇來降低其被氧化速率外，還經(jīng)常添加其他的抗氧化劑。因此找出適宜的膽固醇添加量，不僅能降低脂質(zhì)體的被氧化速率，還能減少額外的抗氧化劑的使用。這樣，不僅能夠

48、降低成本，還能夠降低產(chǎn)品因抗氧化劑而帶來的毒性。我們可以看出沒有添加過膽固醇的脂質(zhì)體溶液經(jīng)過5天后被氧化程度較大，添加了5%濃度膽固醇的脂質(zhì)體溶液的被氧化程度明顯降低。進(jìn)一步增加膽固醇的添加量其被氧化程度并沒有明顯的降低。膽固醇不是抗氧化劑卻能起到抗氧化的作用，推測(cè)是由于膽固醇插入雙分子層中后，脂質(zhì)體分子的結(jié)構(gòu)更為緊密，混合膜的過剩面積和動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明，膽固醇和卵磷脂是相互吸引的，即膽固醇的加入使卵磷脂囊泡更不容易被表面活性劑破壞。由以上分析我們看出，15%濃度的膽固醇就能夠很好的達(dá)到防止脂質(zhì)體遭到氧化變質(zhì)的作用。3.5 膽固醇添加量對(duì)脂質(zhì)體膜微極性的影響芘熒光探針是一種研究介質(zhì)極性的熒光探針

49、，其熒光發(fā)射譜圖中熒光發(fā)射第一譜帶與第三譜帶的熒光強(qiáng)度之比(I1/I3)與介質(zhì)的極性有較好的相關(guān)性，被稱為“極性標(biāo)尺”，對(duì)微環(huán)境極性特別敏感，因此可以用來測(cè)量脂質(zhì)體膜的微極性。芘的熒光強(qiáng)度I1/I3值越大說明脂質(zhì)體膜的微極性越大。由于芘元素非極性大，其主要分布在磷脂分子的非極性尾中，即雙層膜之間。 I1/I3值反映芘周圍環(huán)境的變化，比值越大，微極性越強(qiáng)，探針?biāo)幍沫h(huán)境非極性越弱；比值越小則微極性越弱，探針?biāo)幍沫h(huán)境非極性越強(qiáng)16。不同膽固醇濃度脂質(zhì)體的測(cè)量結(jié)果如表3-2所示。表3-2 不同膽固醇濃度的磷脂脂質(zhì)體的熒光強(qiáng)度Chol摩爾百分比 I1 I315 I1/ I3江南大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文15%25%50%1035 1091 977.5 923 976 911.3 1.121 1.118 1.073從數(shù)據(jù)上可以看出，隨著膽固醇的濃度的上升，脂質(zhì)體溶液的I1/ I3在不斷的下降，表明脂質(zhì)體溶液的微極性在不斷地下降。這是由于膽固醇的羥基端與磷脂的極性頭基相結(jié)合，降低了脂質(zhì)體原有的極性，造成了整個(gè)體系極性的降低。極性較大的脂質(zhì)體能夠較快的被人體吸收，而極性較小的脂質(zhì)體通常能夠攜帶藥物達(dá)