血清堿性磷酸酶活性測定ppt課件

1、血清堿性磷酸酶活性測定磷酸苯二鈉法ALP 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理 實(shí)驗(yàn)器材與試劑 實(shí)驗(yàn)操作 計(jì)算 臨床意義 本卷須知 思索掌握酶活力測定的普通方法掌握血清中ALP活力測定方法掌握血清中ALP測定的臨床意義 如何測定酶活力的大小？如何測定酶活力的大小？ 酶活力：酶活力：常用單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來表示。 堿性磷酸酶堿性磷酸酶ALP是一組在堿性環(huán)境中水解磷酸酯是一組在堿性環(huán)境中水解磷酸酯的酶類。的酶類。 來源：廣泛分布于人體的骨、腎、肝、腸、血清、來源：廣泛分布于人體的骨、腎、肝、腸、血清、膽汁等部位，但骨骼、牙齒、腎和肝臟中含量較膽汁等部位，但骨骼、牙齒、腎和肝臟中含量較多。正常人血清

2、中多。正常人血清中ALP主要來源于肝臟。主要來源于肝臟。 是一種可以將對應(yīng)底物去磷酸化的酶，即經(jīng)過水是一種可以將對應(yīng)底物去磷酸化的酶，即經(jīng)過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去，并生解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去，并生成磷酸根離子和自在的羥基，這類底物包括核酸、成磷酸根離子和自在的羥基，這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團(tuán)的過程稱為蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團(tuán)的過程稱為去磷酸化或脫磷酸化。去磷酸化或脫磷酸化。 堿性磷酸酶在堿性環(huán)境中有最大活力。堿性磷酸酶在堿性環(huán)境中有最大活力。 在PH=10的環(huán)境中， ALP催化磷酸苯二鈉水解 苯酚和磷酸氫二鈉 苯酚與4-氨基安替比林

3、 色素原 該色素原經(jīng)鐵氰化鉀氧化生成紅色醌亞胺衍生物 測定紅色物質(zhì)的吸光度就可以計(jì)算酶活力的大小。四酚規(guī)范任務(wù)液四酚規(guī)范任務(wù)液比色皿比色皿 酚規(guī)范液開后不能久置。 底物液不能含有酚，假設(shè)含酚那么顯紅色，闡明磷酸苯二鈉已分解，不宜運(yùn)用。 參與鐵氰化鉀后必需迅速混勻(為了改動(dòng)PH來終止酶促反響，否那么有影響，偏大。 鐵氰化鉀溶液中參與硼酸有穩(wěn)定最后所顯色的作用。此液應(yīng)避光保管，如出現(xiàn)藍(lán)綠色即作廢。1. 本次實(shí)驗(yàn)是用的什么方法？終止劑是什么？為什么參與鐵氰化本次實(shí)驗(yàn)是用的什么方法？終止劑是什么？為什么參與鐵氰化鉀硼酸液后必需迅速混勻？有何影響？鉀硼酸液后必需迅速混勻？有何影響？ 答：終止法；終止劑是答：終止法；終止劑是 鐵氰化鉀硼酸液；硼酸改動(dòng)了鐵氰化鉀硼酸液；硼酸改動(dòng)了PH，使其，使其不再處于最適不再處于最適PH。 參與物ml)0 12345酚規(guī)范運(yùn)用液00.20.40.60.81.0蒸餾水1.10.90.70.50.30.1碳酸鹽緩沖液1.01.0